La eleccin de los mtodos de laboratorio a utilizar para la deteccin de
contaminacin microbiana debe privilegiar a aquellos mtodos estandarizados y de alta sensibilidad que hayan sido validados por organismos internacionales o nacionales de referencia. Primeramente, para implementar cualquier mtodo de deteccin, se requiere preparar las muestras del alimento, lo que generalmente consiste en la elaboracin de diluciones que permitan disminuir la concentracin del microorganismo en la muestra y poder observar mejor. Una vez que se han elaborado las diluciones se procede a la utilizacin de cualquiera que sea el mtodo seleccionado, por esta razn, abordaremos primeramente cmo preparar estas diluciones y cmo trabajar las muestras de los microorganismos.
Diluciones de la muestra de alimento para deteccin de contaminacin
Generalmente en el alimento o producto a analizar la bacteria que se quiere identificar est presente en cantidades mucho mayores que otras con las que se encuentra mezclada. De tal manera que, se procede a elaborar una solucin madre que consiste en colocar el material cubierto con el microorganismo en un recipiente que contiene 10 ml de agua destilada estril con 0.01 % de Tween 80, cuya suspensin resultante se debe agitar por 1 minuto, para obtener la suspensin concentrada del inculo ms otras partculas y es a esta suspensin a la que llamamos solucin madre. Tambin hay otras sustancias que se pueden utilizar para la dilucin, lo que depender del alimento con el que se trabaja. A partir de la solucin madre, se preparan diluciones en serie (10-1 , 10-2 , 10-3 , 10-4 ,10-5 , 10-6 ) tal como se muestra en la figura siguiente. La primera dilucin (10-1 ) se obtiene transfiriendo con una pipeta estril un ml de la solucin madre a un tubo que contiene 9 ml de agua destilada estril con 0.01 % de Tween 80, ste se agita fuertemente durante 1 minuto. Luego tomamos un ml de esta suspensin y lo colocamos en otro tubo de ensayo que contiene 9 ml de agua destilada estril con 0.01 % de Tween 80, obteniendo as la segunda
dilucin. Este operacin se repite varias veces hasta lograr obtener una serie de diluciones (10-1 hasta 10-6 ).