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MTODOS DE DETECCIN DE CONTAMINACIN MICROBIANA

La eleccin de los mtodos de laboratorio a utilizar para la deteccin de


contaminacin
microbiana debe privilegiar a aquellos mtodos estandarizados y de alta
sensibilidad que
hayan sido validados por organismos internacionales o nacionales de
referencia.
Primeramente, para implementar cualquier mtodo de deteccin, se
requiere preparar las
muestras del alimento, lo que generalmente consiste en la elaboracin de
diluciones que
permitan disminuir la concentracin del microorganismo en la muestra y
poder observar
mejor.
Una vez que se han elaborado las diluciones se procede a la utilizacin de
cualquiera que
sea el mtodo seleccionado, por esta razn, abordaremos primeramente
cmo preparar
estas diluciones y cmo trabajar las muestras de los microorganismos.

Diluciones de la muestra de alimento para deteccin de contaminacin


Generalmente en el alimento o producto a analizar la bacteria que se quiere
identificar est presente en cantidades mucho mayores que otras con las
que se encuentra mezclada. De tal manera que, se procede a elaborar una
solucin madre que consiste en colocar el material cubierto con el
microorganismo en un recipiente que contiene 10 ml de agua destilada
estril con 0.01 % de Tween 80, cuya suspensin resultante se debe agitar
por 1 minuto, para obtener la suspensin concentrada del inculo ms otras
partculas y es a esta suspensin a la que llamamos solucin madre.
Tambin hay otras sustancias que se pueden utilizar para la dilucin, lo que
depender del alimento con el que se trabaja. A partir de la solucin madre,
se preparan diluciones en serie (10-1 , 10-2 , 10-3 , 10-4 ,10-5 , 10-6 ) tal
como se muestra en la figura siguiente. La primera dilucin (10-1 ) se
obtiene transfiriendo con una pipeta estril un ml de la solucin madre a un
tubo que contiene 9 ml de agua destilada estril con 0.01 % de Tween 80,
ste se agita fuertemente durante 1 minuto. Luego tomamos un ml de esta
suspensin y lo colocamos en otro tubo de ensayo que contiene 9 ml de
agua destilada estril con 0.01 % de Tween 80, obteniendo as la segunda

dilucin. Este operacin se repite varias veces hasta lograr obtener una
serie de diluciones (10-1 hasta 10-6 ).

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