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Indicaciones al paciente
3.
4.
8.
Obtencin de la muestra
9.
Transporte y almacenamiento
a la hora de obtener el
1.2.- La Descontaminacin:
Una vez que se ha decidido por la vena a puncionar, debe
proceder a descontaminar el rea con alcohol etlico o
isoproplico al 70% utilizando algodn y con movimientos
4.- Puncin venosa con Vacutainer o Venojet.Vacutainer es una marca comercial de Becton Dickins and company
para un tubo de ensayo especficamente diseado para la
venopuncin. Fue descubierto en 1.947 por Joseph Kleiner.
El sistema consiste en extraer sangre intravenosa al vaco
especficamente de la regin cubital del brazo.
Se utilizan tubos comerciales, camisa y aguja Vacutainer.
Se trata de un tubo de vidrio y plstico al vacio con un tapon de
plstico blando, que permite que lo atraviese una aguja mediante una
leve presin. Existen varios tipos de vacutainer que se diferencian
por el color de su tapon.
Procedimiento:
1. La aguja se enrosca en la camisa.
2. Se introduce la aguja en vena.
3. Introducir el tubo dentro de la camisa y empuje con el
dedo pulgar para que atraviese la goma de la aguja,
perdiendo el vacio y entre la sangre dentro del tubo.
4. Introducir la cantidad de tubos que necesita.
5. Saque primero el tubo y luego la aguja con la camisa.
6. Colocar nuevamente la tapa de las agujas y descartar.
Sistema de Vacutainer MR
El orden de los tubos es importante para prevenir la contaminacin de
las muestras por anticoagulantes no deseados. El orden de extraccin
de los tubos se ha de realizar de la siguiente manera
6.- Descarte la jeringa y aguja en un contenedor apropiadoRecipiente plstico con tapa que contenga una solucin de hipoclorito
de sodio.
Descarte de agujas
b.
e. Formacin de hematoma:
f. Sangre arterial:
)
)
Proporcin
Anticoagula
nte/Muestra
EDTA
(cido EtilenDiamino
Tetraactico)
Puede ser sal
disdica,
dipotsica o
tripotsica
2 gotas con 2
a 4cc de
sangre.
1,5 a 2,2
mg/mL de
sangre total
Color del
Tapn
Morado o
Violeta
Como
acta
Uso en el
Laboratorio
Acta
como
agente
quelante.
Fija el
calcio de la
sangre
Hematolgica:
recuentos
celulares
Hemoglobina
Hematocrito
Frotis sanguneos,
etc.
Citrato de
Sodio
U
Oxalato de
Sodio
Heparina
1:9, es decir 1
de
anticoagulant
e por 9 de
sangre
Impide que
el calcio se
ionice
El plasma se usa
para realizar
pruebas de
coagulacin.
Impide
que la
protombi
na se
transform
e
Trombina
Qumica Clnica
y Determinacin
de Gases
Arteriales.
Azul
(celeste)
0,1-0,2 mg
de heparina
por mL de
sangre.
Verde
Suero:
Tubo
Sin
anticoagula
nte
Rojo
Volumen
de Muestra
Uso en el Laboratorio
4-6 mL
Dilucin de la sangre
Causas de disminucin:
Reduccin del dimetro del tubo de Wintrobe
Utilizacin tarda de la sangre (espcimen envejecido)
Uso de anticoagulantes inadecuados.
Determinacin de la VSG
Mtodo Westergreen
Mtodo de Wintrobe
Mtodo de Westergren
Pipetas de Westergren en un analizador automtico
1. Extraer sangre venosa (aprox. 1-2 mL) y homogeneizar con el
anticoagulante (citrato sdico 3.8 % en proporcin 1/4). Se
recomienda realizar la determinacin dentro de las 2 horas
posteriores a la extraccin de la muestra.
2. Cargar una pipeta de Westergreen y, en el momento de llegar a
la marca 0, poner en marcha el cronmetro. Asegurarse de que
la pipeta est en una posicin de 90 respecto la superficie,
exenta de vibraciones o de cualquier factor que modifique la
VSG.
3. Transcurridos 60 minutos exactos, leer la sedimentacin
eritrocitaria, que se expresa en mm/hora, y comparar los
resultados obtenidos con los resultados normales.
Metodo de Wintrobe
Materiales.- Muestra de sangre total, jeringa, cnula, tubo de
wintrobe, reloj, soporte de wintrobe
Tecnica.
Valores de referencia
Los valores normales de referencia son:
2.- Globulos blancos.Son clulas sanguneas que se encuentran en la medula sea y tejido
linftico, son parte del sistema inmunitario del cuerpo, su funcin es
la defensa del organismo contra agentes infecciosos.
Contaje de globulos blancos.Para la cuenta manual de glbulos blancos se han empleado
diferentes procedimientos. El ms conocido es el que utiliza la
cmara de Neubauer, que es una microcmara de cristal excavada
en un portaobjeto especial que se cierra mediante un cubre
objeto. A esta cmara se le coloca una dilucin de las clulas
sanguneas que posteriormente se visualiza al microscopio. Para la
cuenta de leucocitos el liquido ms usado es el de Turck el cual
hemoliza los glbulos rojos y tie ligeramente el ncleo de los
leucocitos.
Cmara de Neubauer
Procedimiento:
1.- La muestra debe ser mezclada por lo menos 20 veces por
inversin.
2.- Aspirar sangre hasta la marca 0,5 con una pipeta de dilucin de
glbulos rojos, enrasando exactamente.
3.- Limpie cuidadosamente el exterior de la pipeta con gasa.
4.- Colocar la pipeta en forma vertical y aspirar lquido de Gowers,
hasta la marca 101.
5.- Ocluya la punta de la pipeta con el dedo pulgar, retirar la goma de
succin y ocluya la punta superior con el dedo medio.
6.- Agitar la pipeta a mano durante 3min, en un agitador mecnico
durante 1min.
7.- Descartar 2-3 gotas, cargar las dos cmaras del hematmetro.
8.- Esperar por 2min.
9.- Montar el hematmetro en el microscopio, enfocar con objetivo 10x
de menor aumento, contar con objetivo de 40.x
Se cuentan los glbulos Rojos del cuadrado mediano, de las esquinas
y el central del hematmetro de Neubauer mejorado, como se indica
en la figura.
Valores de referencia
Hombres: 4,5x106-5,5 x106
Mujeres: 4,0 x106- 5,0 x106
Nios: 4,2 x106-5,2 x106
Lactantes (1-6 meses): 3,8 x106- 5,2 x106
Recin nacidos: 5,0 x106-6,0 x106
Diferencia entre Lquido
Turck
Es un una solucin ligeramente
cida que hace los glbulos blancos
ms visibles y destruye a los
eritrocitos.
de Turck y Gowers:
Gowers
Es un lquido isotnico que
previene la hemlisis y crenacin
de los glbulos rojos. Los glbulos
blancos no son destruidos por este
lquido,
pero
como
son
numricamente
escasos,
morfolgicamente diferentes (en
cuanto a tamao y ncleo)
y la
dilucin es tan alta que
los
glbulos blancos no interfieren en
la cuenta.
4.- Hemoglobina.Es una protena que contiene hierro que est dentro de los glbulos
rojos y es el que le otorga el color rojo a la sangre . Su funcin
principal es de transferir oxigeno desde los pulmones a todo el
cuerpo.
8.- Una vez que se ha extendido la sangre, separar las laminillas con un
movimiento rpido y seguro en forma lateral y horizontal
COLORACIONES
La tincin de los frotis sanguneos con colorantes policromticos,
permite la identificacin de los diversos tipos celulares en la sangre
perifrica.
Coloracin de Wright
Coloracin de Wright es utilizada para teir clulas de frotis de sangre
o de mdula sea.La coloracin de Wright es una modificacin de la
tincin de Romanowsky que se utiliza en la tincin diferencial de
elementos celulares de la sangre. Cuando los frotis de sangre se tien
mediante estas tcnicas, el ncleo de leucocitos y el citoplasma
adoptan la coloracin caracterstica azul o rosa.
Procedimiento:
1.- Coloque las lminas o laminillas sobre un soporte o sobre tapones
de goma invertidos en caso de usar laminillas. Con el frotis hacia
arriba, sobre tapones de goma invertidos, sobre una bandeja de
coloracin.
2.- Cubra las laminillas con solucin colorante de Wright y dejarlo
actuar por 1 2 min.
3.- Aadir una cantidad igual de solucin amortiguadora, evitando
que la mezcla se derrame, soplando suavemente se deja por 2
3min. Un brillo metlico debe aparecer sobre la superficie de la
mezcla colorante.
4.- Lavar con agua e inclinar la laminilla para escurrir, secar al aire y
limpiar el dorso de restos de colorante.
5.- En el caso de frotis en laminillas debe colocarse el extendido
coloreado sobre una lmina con una gota de aceite de inmersin, de
tal manera que el extendido quede entre lmina y laminilla. Observar
al microscopio.
Coloracin de Giemsa:
Se emplea en Hematologa para observar los elementos sanguneos
normales y en Microbiologa para identificar parsitos, espiroquetas,
levaduras, hongos.
Procedimiento:
1.- Coloque las laminas o laminillas, con el frotis hacia arriba, sobre un
soporte. En el caso de frotis en laminillas, colocarlas sobre tapones
de goma invertidos, sobre una bandeja de coloracin.
2.- Cubra los extendidos con metanol durante 3 min, no dejar que se
evapore.
3.- Incline el extendido y descarte el metanol.
4.- Cubrirlo con solucin De Giemsa diluida 1:10. Durante 1 min.
5.- Lavar con agua y secar al aire libre.
6.- Limpiar el dorso del extendido del resto de colorante.
7.- Montar la preparacin sobre una lmina con una gota de aceite de
inmersin de manera que quede el extendido entre lmina y laminilla.
8.- Observar al microscopio
GRUPO SANGUINEO
Es un mtodo para determinar cul es el tipo especfico de sangre
que tenemos. El tipo de sangre que tenemos depende de si hay o no
ciertas protenas, llamadas antgenos, en nuestros glbulos rojos.
La sangre a menudo se clasifica de acuerdo con el sistema de
tipificacin ABO. Este mtodo separa los tipos de sangre en cuatro
tipos:
Tipo A
Tipo B
Tipo AB
Tipo O