Informe de laboratorio de Anlisis Instrumental I. Escuela de Qumica. Universidad Tecnolgica de Pereira.

Presentado a: Prof. Aristofeles Ortiz

Fotometra (Primera y segunda sesin)

Autor 1: Anglica Mara Hernndez Largo, Autor 2: Johanna Bedoya Batero, Escuela de Qumica,
Universidad Tecnolgica de Pereira, Pereira, Colombia.

Resumen Se observaron los diferentes

espectrofotmetros con los que cuenta la escuela de
qumica de la universidad Tecnolgica de Pereira,
identificando cada una de sus partes y
especificaciones con el fin de determinar las
ventajas y desventajas que presentan estos entre s.
Posteriormente para la solucin problema N7 se
realiz un barrido espectral en el espectrofotmetro
Genesys 20, identificando la longitud de mxima
absorbancia, longitud a la cual se determin el valor
de absorbancia y transmitancia en los dems
espectrofotmetros, adems se pudo identificar la
solucin problema N7 como una disolucin de
rojo alimento.
Tambin se
equivalentes.

efectu

el

estudio

de

celdas

Para una solucin problema N4, se realiz un

anlisis cualitativo por medio de la tcnica
espectrofotometra logrando identificar esta como
una disolucin de sulfato de cobre (CuSO4) acuoso
y por medio de un anlisis cuantitativo, se
determin que esta tena una concentracin igual a
0,043M con un porcentaje de error igual a:..
Este ltimo anlisis se hizo por medio de una curva
calibracin que se construy por medio de seis
disoluciones patrn de CuSO4.

Palabras clave Espectrofotmetro, absorbancia,

ley de Beer -Lambert, celdas equivalentes,
transmitancia, curva de calibracin.

I.

INTRODUCCIN

La espectrofotometra es una tcnica analtica

que permite medir la interaccin entre la
radiacin con la materia, por medio de esta se
pueden realizar analices cualitativos como el
espectro de absorcin de una sustancia, ya que
cada sustancia presenta uno o varios mximos de
absorcin caractersticos y analices cuantitativos
como la determinacin de la concentracin de un
analito, cuando la sustancia en estudio cumple la
ley de Beer.
El espectrofotmetro es el instrumento diseado
para medir el % de transmitancia, la absorbancia
o directamente la concentracin, algunos equipos
tambin permiten trazar la curva espectral y de
calibracin.

La ley de Beer establece que si a travs de una

solucin con concentracin C, contenida en una
celda de espesor b, pasa una radiacin
monocromtica que es absorbida por la especie,
se cumple la siguiente relacin:

Ecuacin N1

Donde A es la absorbancia, C es concentracin,

b es el espesor del recipiente y
es la
absortividad molar de la especie.

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Absorcin: cuando un haz pasa a travs de una

solucin que absorbe radiacin, parte del haz es
absorbido. As por ejemplo, si I0 es la intensidad
de un haz de radiacin monocromtica que
incide sobre una solucin, e I es la intensidad de
la radiacin emergente, la relacin entre I0 e I
recibe el nombre de transmitancia, es decir, la
fraccin de luz transmitida por la disolucin.

A partir de la curva de calibracin (conjunto

de concentraciones que describen el intervalo
en el cual se deber cuantificar el compuesto
por analizar) y a fin de asegurar que la recta
encontrada con los puntos experimentales se
ajuste correctamente al modelo matemtico de
la ecuacin se calculan los valores de la
ordenada al origen, la pendiente y el
coeficiente de correlacin (r2)

CONTENIDO

1. Calibracin de instrumentos.
En el desarrollo de la prctica se utiliz el
espectrofotmetro Genesys 20, el cual se ilustra
en la siguiente figura.
Figura N1 Relacin de intensidades en una sustancia
absorbente

Una curva de calibracin es la representacin

grfica de una seal que se mide en funcin de
la concentracin de un analito. Es un
procedimiento analtico muy utilizado para
apreciar los parmetros que permiten
determinar la linealidad de la curva. Y, en
consecuencia, la capacidad de un analito para
obtener resultados que sean directamente
proporcionales a la concentracin de un
compuesto en la muestra, dentro de un
determinado intervalo de trabajo.
Se realiza mediante un modelo de lnea recta
que consiste en encontrar la recta de calibrado
que mejor se ajuste a los datos experimentales
que se encuentran definidos por una variable X
(variable
independiente
generalmente
concentracin del analito) y una variable Y
(variable dependiente, generalmente respuesta
instrumental) la recta de calibrado se encuentra
definida por una ordenada al origen (b) y una
pendiente (m), mediante la ecuacin:

Figura N2 Espectrofotmetro Genesys 20

Para la calibracin del instrumento que se

muestra en la figura N2, usando un blanco
fotomtrico, se ajusta el 100% de transmitancia
o cero de absorbancia, estableciendo la
longitud de onda a la cual se desea realizar la
medicin de absorbancia de la sustancia en
estudio.
El blanco fotomtrico debe de dar 100% de
transmitancia como resultado, ya que este no
presenta ningn tipo de absorcin de la
radiacin electromagntica, es decir que I0=I.

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2. Barrido espectral para la solucin problema

N7.
El espectro de absorcin es caracterstico de
cada sustancia, por lo cual se hace un barrido
espectral para la solucin problema N7 en un
rango de longitud de onda de 360 -740 nm
(cada 20 nm).
Para este procedimiento se emple el
espectrofotmetro Genesys 20, en el cual se
debe realizar la calibracin cada vez que se
cambie la longitud de onda a la cual se va a
realizar la medicin de absorbancia.

Tabla N1 Barrido espectral solucin problema N7

360
380
400
420
440
460
480
500
520
540
560
580
600
620
640
660
680
700
720
740

A
0,730
0,682
0,353
0,230
0,235
0,282
0,348
0,367
0,310
0,199
0,080
-0,008
-0,045
-0,056
-0,031
-0,029
-0,022
-0,030
-0,026
-0,025

%T
18,6
20,8
44,4
58,9
58,2
52,2
44,9
43,0
49,0
63,2
83,2
101,8
111,0
113,7
107,5
106,9
105,1
107,1
106,1
106,0

En la tabla N1 se puede observar que para

las longitudes de 375 y 500 nm se presentan
mximos de absorcin, por lo cual se tom
la decisin de realizar un barrido espectral
alrededor de estas longitudes.

Tabla N2 Barrido espectral en mximos, solucin

problema N7.

%T

360

18,6

0,730

365

21,1

0,676

370

19,8

0,703

375

20,7

0,684

380

22,7

0,644

385

25,7

0,590

390

29,8

0,526

470

44,1

0,356

475

42,6

0,371

480

41,1

0,386

485

39,9

0,399

490

38,8

0,411

495

39,1

0,408

500

36,8

0,434

505

37,2

0,429

510

38,2

0,418

515

39,6

0,402

520

41,6

0,381

525

43,9

0,358

Con los datos de longitud y absorbancia que se

presentan en las tablas N1 y 2, se construye el
espectro de absorcin para la solucin
problema N7.
Los datos negativos de absorbancia ilustrados
en la tabla N1 no fueron utilizados debido a
que una absorbancia negativa no proporcionara
una lnea recta.
Por otro lado si nos fijamos en los datos de
absorbancia y transmitancia tabulados en la
longitud de onda de 580 nm; observamos que
la absorbancia es de -0,008 y el %
transmitancia 101,8 lo que genera una
desviacin negativa, debido a que el valor
mnimo de la absorbancia es cero y el % de
transmitancia 100 que indica que la radiacin
incidente es igual a la transmitida. Y los datos
de absorbancia y transmitancia no cumplen con
esta condicin.

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de absorbancia si presentan una gran

diferencia, pero este valor es aceptable ya que
de acuerdo a la ley de Beer, la absorbancia
depende de la concentracin, adems tambin
depende del tipo de espectrofotmetro que se
use.
3. Celdas equivalentes.

Figura N3, Espectro de absorcin de la solucin

problema N7.

En la figura N3 se observan dos mximos de

absorbancia, el de 0,730 se descarta ya que la
longitud de onda correspondiente a este valor
es de 360, esta sobre el lmite del rango
espectral que maneja el espectrofotmetro
Genesys 20, por lo cual se desconoce el
comportamiento de la sustancia en longitudes
de onda menores a esta.
Se realiz una bsqueda bibliografa de
espectros de absorcin que presente un mximo
de absorbancia cercano a 505nm (A=0,429),
con el fin de identificar la sustancia en estudio.
Se obtuvo como resultado que la solucin
problema N7 era una disolucin de Rojo
alimento.

Para hallar las celdas y tubos de ensayo

equivalentes, se realiz la medicin de
absorbancia y transmitancia para la solucin
problema N7 a una longitud de onda igual a
500nm, en 3 celdas y 3 tubos de ensayo;
empleando el espectrofotmetro Genesys 20
para las celdas y el espectrofotmetro
Spectronic para los tubos de ensayo.
Tabla N3.Absorbancia y transmitancia para las celdas y
tubos de ensayo equivalentes.
Celdas

Referencia

1,00

1,00

1,00

37,62

37,15

37,38

0,4328

0,4301

0,4274

Tubos de
ensayo

Referencia

1,10

1,10

1,10

35,60
0,448

35,40
0,450

36,20
0,442

Espesor de la
celda (cm)
%T

Espesor del
tubo (cm)
%T
A

Cuando se usan varias celdas en una medicin

todas deben ser estrictamente equivalentes, es
decir, tener igual espesor, la misma
transparencia, o se debe tener un factor de
correccin.

Figura N4, Espectro de absorcin del rojo alimento

Si comparamos las longitudes de mxima

absorcin en la figura N3 y 4, estas solo
difieren en un valor de 3 nm, pero los valores

En la tabla N3, se puede observar que las tres

celdas seleccionadas son equivalentes debido a
que la diferencia que existe entre los valores
de absorbancia de cada una es relativamente
pequea, pues solo difieren en la ltima cifra
significativa aportada por el Genesys 20 figura
N2 el cual cuenta con una precisin de
0,001. Lo que quiere decir que el ltimo
digito de los datos es incierto del valor exacto,
pero se presenta confianza en los dos primeros

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decimales, de manera que se confirma que son

celdas equivalentes.
Tubos de ensayo

equipos. Tiene como desventaja que el

recipiente de las sustancias es un tubo de
ensayo, lo cual genera una incertidumbre en la
medicin de la absorbancia.

Segn la tabla N 3, se observa que uno de los

tubos de ensayo presento una diferencia
significativamente en su valor de absorbancia y
transmitancia, lo que significa que los tubos no
son equivalentes y se procede a realizar el
factor de correccin de la siguiente manera:

Donde
Figura N4. Espectrofotmetro Spectronic 20

Ar = absorbancia de referencia
Ac1 = absorbancia para el tubo de ensayo 1

Remplazando en la ecuacin se tiene que

Por lo tanto el factor de correccin para el tubo

de ensayo 1, tiene un valor de 0.995, el hecho
de que los tubos de ensayos pueden diferir ms
ampliamente respecto a las celdas se debe a
que su forma cilndrica difiere ampliamente
debido a que presentan diferentes valores de
dimetro, as como tambin puede diferir el
grado en que la luz es dispersada por el tubo
4. Tipos de espectrofotmetros
caractersticas.

Este espectrofotmetro brinda una precisin de

0,001, tiene una exactitud fotomtrica de
0,004 a 1,0 de absorbancia, 0,002 a 0,5 de
absorbancia.
Proporciona una reproducibilidad de la
longitud de onda: 0,1nm adems facilita
seleccionar automticamente un rango de
longitudes de onda cada 2; 1; 0,5; 0,2; 0,1.

sus

Genesys 20
El espectrofotmetro Genesys 20 se muestra en
la figura N2. Este cuenta con las siguientes
caractersticas:
-Precisin de 0,001
-Exactitud fotomtrica, entre 0,301 y 2,5
unidades de absorbancia 1,0% A y entre 0,0 y
0,3 unidades de absorbancia 0,003 A.

Shimadzu UV-1700

Spectronic 20

Su caracterstica principal es ser un equipo de

haz sencillo lo cual lo diferencia de los dems

Figura N5. Espectrofotmetro Schimadzu UV-1700

Evolution 60
Es un equipo que posee una velocidad de
barrido de 10 a 2800 nm/minuto, una exactitud

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en la seleccin de longitud de onda de 0,8nm a

529,9nm.

Figura N6. Espectrofotmetro Evolution 60

Se observ que en su mayora se cuenta con

fotmetros del tipo Genesys 20, los cuales
resultan ser bastante bsicos debido a que
cuentan con un nico portador de muestra y
adems no arrojan el espectro, lo que si hace el
Shimadzu por lo que este equipo aparte de
anlisis cuantitativo permite con ms eficacia
un anlisis cualitativo, otro beneficio de este
instrumento en especfico es que es el nico
que permite hacer anlisis en el espectro visible
y el ultravioleta, dando una aplicacin ms
amplia y compleja, as mismo el equipo
tambin permite un trabajo ms rpido y eficaz
puesto que en l se puede introducir la muestra
y el blanco a la vez.
Se realiz una comparacin de los equipos que
se utilizaron con el fin de saber que equipos del
laboratorio son ms apropiados a la hora de
realizar una prctica de espectrofotometra:
Se confirma que el Shimadzu uv-1700 es el
equipo ms adecuado para ambos usos en
comparacin con el spectronic y el genesys 20,
ya que integra precisin, simplicidad y
resistencia adecuada entre sus caractersticas,
adems su resolucin de 2nm de ancho de
banda espectral factiblemente puede ser el
principal activo del espectrofotmetro, tambin
el amplio rango de longitudes de onda (190 nm
- 1100 nm) hacen de este espectrofotmetro
bueno para diferentes tipos de ensayo que
requieren UV/VIS; otra caracterstica de

especial relevancia del equipo es que integra

dos fuentes: la de Deuterio y la de tungsteno
halogenado, mientras que el genesys 20 y el
spectronic cuentan solamente con lmpara de
tungsteno.
La lmpara de deuterio emite fuertemente en la
regin UV y la de tungsteno halogenado en el
visible y cerca de la regin espectral
ultravioleta, ambas lmparas presenta una
emisin de radiacin continua para varios
segmentos del espectro de modo que cuanto se
trata de medidas de absorcin molecular es
necesario disponer de una fuente continua cuya
potencia no cambie bruscamente en un
intervalo considerable de longitudes de onda.

Figura N7. Ilustracin del espectro de emisin contino

para deuterio y tungsteno

Con la figura N7. Se observa que el Shimadzu

es el equipo ms confiable a la hora de realizar
estudios fotomtricos ya que el cambio de una
lmpara de una regin a otra causa que los
espectros de absorcin sean ms definidos, as
mismo como se ha mencionado anteriormente
este equipo permite realizar un anlisis
cuantitativo en un intervalo ms grande de
trabajo, hecho que se refleja en el rango de
longitud de onda del equipo. Por otro lado el
Genesys 20 al solo tener como fuente de
radiacin el tungsteno, el espectro de absorcin
es ms limitado.
Comparando la presin de cada equipo se
concret que los cuatro equipos presentan el
mismo grado de incertidumbre en los datos
experimentales, expresando datos hasta con dos

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decimales de confianza, los datos van a diferir

en la reproductibilidad, de modo que por dicho
cambio el Shimadzu UV-Visible es el equipo
que mejor repetitividad tiene de los datos,
debido a que es el equipo que presenta menor
valor de variacin en la longitud de onda
(0.1nm) y los dems equipos con una variacin
en la longitud de onda de (0.5 nm).
Consecutivamente
si
examinamos
y
comparamos la exactitud de los equipos
establecemos que el evolution 60 es el que
presenta mejor exactitud, con un ancho de
banda menor que el de todos los equipos el cual
es de (1nm) seguido de Shimadzu el cual posee
un valor de (2nm); el ancho de banda es un
valor de gran importancia ya que entre ms
angosta sea la banda menor resultara la medida
del error ya que produce una desviacin menor
de la ley de Beer, lo que indica que la radiacin
que se est incidiendo es ms monocromtica.
Por tal motivo es que se desprecia al genesys
20 y al spectronic los cuales cuentan con un
ancho de banda de (20nm).
En cuanto a los detectores existen
principalmente 4 tipos de detectores para la
regin UV-vis, que difieren en el rango de
longitudes de onda de trabajo, velocidad de
respuesta, sensibilidad y tiempo de respuesta.
Los detectores ms utilizados son celdas
fotovoltaicas, fototubos, fotomultiplicadores y
fotodiodos en el reconocimiento de los equipos
podemos ver que el Shimadzu tiene fotodiodos
de slice, el genesys 20 y el evolution 60
poseen diodos de slice
y el spectronic
fototubos, por tanto cabe resaltar que los
fotodiodos tienen intervalos espectrales de
alrededor de 190 a 1100 nm y que el equipo
que los posee es el Shimadzu, seguido del
Genesys 20 y el Evolution 60 que presentan
diodos de slice que son ms sensibles que un
fototubo de vaco, presentan un intervalo
espectral de 190 a 1100 nm aproximadamente,
los fototubos se usan para el visible y
ultravioleta en un intervalo de longitud de onda
de 180 a 1000.
Comparando el tipo de haz de los instrumentos,
observamos que el evolution 60 y el Shimadzu
UV-1700 son equipos de doble haz El rayo que

sale del monocromador se parte en dos, una

parte es dirigida hacia el blanco o solucin de
referencia y la otra hacia la muestra a analizar.
Una ventaja que tiene respecto al
espectrofotmetro de haz sencillo es que en la
unidad de amplificacin se comparan
permanentemente las dos seales, y la seal de
salida es la correspondiente diferencia o
relacin entre ellas. En los equipos de doble
haz, cualquier variacin se compensa, ya que la
comparacin se hace permanentemente.

Figura 7.1.1.Diagrama de un espectrofotmetro de doble

haz.

En los equipos de un solo haz o haz sencillo, se

encuentra el spectronic, el rayo procedente de
la fuente es dispersado en el monocromador; al
girar el dispositivo dispersor se enfoca hacia la
rendija de salida la longitud de onda deseada;
la radiacin atraviesa la cubeta con el blanco
fotomtrico o solucin de referencia y luego
con la muestra y llega al detector. Estos
equipos requieren de voltajes, fuente, detector
y dems componentes electrnicos estables
para minimizar los errores en el momento de
calibrar el equipo y la toda de datos, al ser el
spectronic un equipo que no cuenta con las
especificaciones mencionadas debido a que su
modelo es muy antiguo.

Figura 7.1.2. Espectrofotmetro de un solo haz.

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Tabla N4 Caractersticas de los espectrofotmetros.

Espectrofotmetro
Marca

Schimadzu UV-1700

Genesys 20

Spectronic

Evolution 60

Schimadzu
1700

Genesys 20

Spectronic

Evolution 60

UV-

Tipo de haz

Doble haz

Haz dividido

Haz sencillo

Doble haz

Regiones

UV, VISIBLE, IR cercano

visible (325 a
800nm), IR cercano

VISIBLE

UV, VISIBLE,IR

Ancho de banda (nm)

2 nm

20 nm

20 nm

1 nm

Rango espectral de (nm)

190 a 1100 nm

325 a 1100 nm

350 A 900 nm

190 a 1100 nm

Fuente

Monocromador

UV (lmpara deuterio),
Lmpara de
VIS-IR ( lmpara
Lmpara de tungsteno
tungsteno halgeno
halgeno)

Lmpara de Xenn

de rejilla de
difraccin 1200
lineas (nm)

de red

de rejilla de difraccin
1200 lineas (nm)

tubos de ensayo,
capacidad 10mL,
espesor 1 cm

VIS ( vidrio
metacrilato), UV
(cuarzo, silice), espesor
1cm, capacidad 3mL

Tipo Ebert con red

cncava hologrfica

VIS ( vidrio
VIS ( vidrio
Material y espesor de las
metacrilato), UV
metacrilato),espesor
(cuarzo, silice) espesor
celdas
1cm, capacidad 3mL
1cm, capacidad 3mL

Detector

Fotodiodos de silicio

Diodos de silicio

Fototubos

Diodos de silicio

Amplificacin

Electrnico

Electrnico

Por intensidad de luz

Electrnico

Instrumento de lectura

Digital

Digital

Anlogo o digital

Digital

Partes delicadas

Porta muestras y el
lente por el cual pasa la
radiacin
electromagntica

Porta muestras y el
lente por el cual
pasa la radiacin
electromagntica

Porta muestra

Cable de conexin a la
electricidad, porta
muestras, parte ptica

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5. Medicin de absorbancia y transmitancia en

diferentes equipos.
Se efectu la medicin de absorbancia y
transmitancia para la solucin problema N7
con las longitudes de onda iguales a 500 y 375
nm, longitudes a las cuales se esperaba
encontrar un mximo de absorbancia.
Lo anterior se hace con el fin de observar las
diferencias que existen entre los equipos.
Tabla N5. %de transmitancia y absorbancia en
diferentes espectrofotmetros.

= 500 nm
Espectrofotmetro

Schimadzu
Genesys 20 Spectronic
UV-1700

%T

43,16

36,80

48,60

0,3638

0,4341

0,313

= 375 nm
%T

21,50

20,70

37,41

0,6622

0,6840

0,428

De los resultados obtenidos en la tabla N5 se

puede identificar una gran variacin en los
datos para los tres equipos para la =500nm,
mientras que para la =375nm el Spectronic es
el que presenta mayor variacin o diferencia en
comparacin
con
los
otros
dos
espectrofotmetros, lo cual se debe a que este
es un instrumento anlogo lo que genera una
menor precisin adems el hecho de que el
recipiente donde se estudia la muestra sea un
tubo de ensayo, ya que su forma cilndrica
ocasiona una dispersin de la radiacin, es
decir, evita que la radiacin pase a travs de la
muestra en una sola direccin.
La diferencia de los datos de absorbancia en los
diferentes equipos puede ser por causa en
general del mal mantenimiento o uso que le
damos, por otro lado cabe resaltar que el
modelo del equipo tambin juega un factor
determinante en dicho cambio ya que:
-El tipo de haz en cada equipo es diferente
(sencillo- doble) siendo ms conveniente los
equipos de doble haz.

- La respuesta de detector, ya que este debe

presentar una seal proporcional a la radiacin
que sale de la celda.
-la intensidad de la radiacin con la cual es
emitida.
- la diferencia de lmparas es otro facto
influyente debido a que ambas tienen
caractersticas
diferentes,
el
tipo
de
monocromador el cual indica el grado en que la
radiacin esta monocromada.
1. Barrido espectral para la solucin problema
N4
Se ejecut un barrido espectral utilizando el
espectrofotmetro Genesys 20, en una rango de
360 a 1095nm, inicialmente las mediciones se
realizaron cada 10nm pero como no se notaron
cambios significativos en el valor de
absorbancia, las mediciones se pasaron a hacer
cada 20nm.
Tabla N6. Barrido espectral solucin problema N4

360
370
380
390
400
410
420
430
440
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540
550
560
570
580
590
600
610
620
630
640
650

0,013
0,013
0,01
0,01
0,01
0,008
0,008
0,007
0,005
0,007
0,005
0,005
0,005
0,006
0,005
0,006
0,007
0,009
0,01
0,012
0,015
0,019
0,024
0,032
0,041
0,053
0,069
0,087
0,109
0,134

660
670
680
690
700
710
720
730
740
750
760
770
780
790
800
830
850
870
890
910
930
950
970
990
1010
1030
1050
1070
1090
1095

0,163
0,195
0,231
0,266
0,306
0,343
0,382
0,418
0,45
0,478
0,504
0,524
0,539
0,55
0,56
0,554
0,534
0,511
0,483
0,456
0,429
0,407
0,382
0,355
0,333
0,321
0,222
0,289
0,259
0,246

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Informe de laboratorio de Anlisis Instrumental I. Escuela de Qumica. Universidad Tecnolgica de Pereira.

A partir de los datos de la tabla N6 se

construy el espectro de absorcin que se
muestra en la figura N7.

Tambin arroj una longitud de mxima

absorbancia igual a 810nm, con A=1,2008.
Por lo anterior se procede a medir la
absorbancia de la muestra a 810nm, utilizando
el espectrofotmetro Genesys 20; obteniendo
como resultado A=0,535.

Figura N7,1.Espectro de absorcin solucin problema

N4 (Genesys 20)

Se procede a comparar el espectro de absorcin

que se muestra en la figura anterior con los
espectros reportados por la bibliografa,
teniendo en cuenta que la longitud de mxima
absorcin es cercano a 800nm. Identificando a
la solucin problema N4 como sulfato de
cobre en medio acuoso.

Figura N9 Espectro de absorcin solucin de sulfato de

cobre acuoso (Shimadzu 1700-UV)

Si comparamos los espectros de absorcin

ilustrados en las figuras N 7.1 y 9, podemos
observar que el espectro y la longitud de
mxima absorbancia arrojados por el equipo
Schimadzu es ms parecido o cercano a lo
terico que el espectro y longitud mxima
obtenidos a travs del equipo Genesys 20.
Porcentaje de error para las absorbancias a 810
nm.
Genesys 20

Figura N8 Espectro de absorcin terico para el sulfato

de cobre en medio acuoso

Despus de identificada la muestra, se realiza

un barrido espectral en el espectrofotmetro
Shimadzu 1700-UV, el cual nos permiti
observar el espectro de absorcin mucho ms
definido y de una manera directa, ya que este
hace una lectura de absorbancia cada 2nm.

La absortividad vara debido a que depende de

la concentracin, y adems las caractersticas
de los equipos tambin difieren.

Informe de laboratorio de Anlisis Instrumental I. Escuela de Qumica. Universidad Tecnolgica de Pereira.

2. Curva de calibracin.
Para realizar la curva de calibracin, en primer
lugar se necesit conocer la naturaleza de la
solucin problema N4 la cual es una
disolucin de sulfato de cobre (CuSO4) en
medio acuoso, posteriormente a partir de una
solucin de CuSO4 (solucin madre) con
concentracin 0,1M se prepararon 6
disoluciones
patrn
a
diferentes
concentraciones, y se midi la absorbancia para
cada una de estas a la longitud de mxima
absorbancia.
Para saber el rango de concentraciones que
deben tener las soluciones patrn, se necesit
una referencia de la concentracin a la cual se
encuentra la solucin de CuSO4 que se est
estudiando, por lo cual se midi la absorbancia
de la solucin madre a la max = 810nm
(A=1,211) y se aplica la siguiente relacin:
Ecuacin N2

Dnde: Cx es la concentracin de la solucin

en estudio. Cp es la concentracin de la
solucin madre. Ax es la absorbancia de la
solucin en estudio y Ap es la absorbancia de la
solucin madre.
Despejando Cx de la ecuacin N2 tenemos:

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Tambin se puede tener una referencia de la

concentracin de la solucin problema a partir
de la ecuacin que describe la ley de Beer,
teniendo en cuenta que la literatura reporta
para el CuSO4 acuoso un valor de la
absortividad molar ( ) igual a 12,9 cm-1 M-1.
Despejando C, de la ecuacin N1 tenemos:
Ecuacin N4

Si comparamos los resultados de concentracin

que se obtienen tericamente estos son muy
cercanos.
Tabla N7 Absorbancia soluciones patrn
Volumen de
Concentracin
sln madre
# Patrn
Absorbancia % T
(M)
CuSO4 0,1M
(mL)
1
0,015
0,238
57,8
3,8
2
0,025
0,308
49,2
6,3
3
0,035
0,427
37,4
8,8
4
0,045
0,545
28,5
11,3
5
0,055
0,659
21,9
13,8
6
0,065
0,798
15,9
16,3

Con los datos de concentracin y absorbancia

de las disoluciones patrn que se muestran en
la tabla N7, se construy la curva de
calibracin.

Ecuacin N3

Haciendo uso de la ecuacin N3, se espera

que la concentracin de la solucin de CuSO4
en estudio sea cercana a 0,04 M, las
disoluciones patrn se prepararon en el rango
que se muestra en la tabla N7.
Figura N10 Curva de calibracin del CuSO4

Informe de laboratorio de Anlisis Instrumental I. Escuela de Qumica. Universidad Tecnolgica de Pereira.

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Por medio de la ecuacin de la curva de

calibracin se halla experimentalmente la
concentracin a la que se encuentra la solucin
problema N4 (CuSO4 acuoso).
Ecuacin N5

Despejando C de la ecuacin N5 tenemos que:

100

Con este porcentaje de error se puede

observar que la tcnica instrumental de
fotometra para el anlisis cualitativo es
realmente eficaz, ya que la concentracin
obtenida fue muy cercana a la real, aunque se
debe tener en cuenta algunos errores
instrumentales.

II.

CONCLUSIONES

Para llevar a cabo la tcnica fotomtrica

hay gran variedad de fotmetros que son
necesarios conocer al menos de manera
bsica para saber cul de estos se acomoda
ms a lo que se busca y el tipo de anlisis
que se desea hacer, adems conocer las

partes y cada equipo como tal garantiza que

la prctica a realizar se haga de manera
eficiente disminuyendo el error en las
medidas.
Los equipos de doble haz como el
Shimadzu, son equipos muchos ms
exactos para la medicin de absorbancias y
transmitancias, ya que estos dividen su haz
de radiaciones en dos; Un haz pasa por el
blanco fotomtrico y el otro por la muestra,
de modo que hacen los ajustes
automticamente,
reduciendo as los
errores humanos.
La preparacin del blanco es indispensable
para un ptimo resultado en las mediciones.
Para obtener un menor error fotomtrico se
debe trabajar en un rango que cubra en 0.8
y 0.15 de absorbancia.
La absorbancia para una sustancia depende
directamente de la longitud de onda en la
cual se trabaje, de la concentracin, del
espesor de la celda y de la naturaleza
misma de la sustancia.
La curva de calibracin es una herramienta
excelente para obtener cuantitativamente
datos en determinadas muestras.

III.

REFERENCIAS

[1]. Castro Eusse, Anlisis Instrumental,

Pereira: Universidad Tecnolgica de Pereira,
2014, unidad 5 fotometra de absorcin.
[2]. Osorio Vargas, Anlisis instrumental,
Pereira: Universidad Tecnolgica de Pereira,
espectrofotometra.
[3].
Spectrophotometry,
University
of
California,
[online]
http://chem.libretexts.org/Core/Physical_Chemi
stry/Kinetics/Reaction_Rates/Experimental_Det
ermination_of_Kinetcs/Spectrophotometry
[4]. Antonia Dosal, Marcos Villanueva, curvas
de calibracin en los mtodos analticos, 2008,

Informe de laboratorio de Anlisis Instrumental I. Escuela de Qumica. Universidad Tecnolgica de Pereira.

[online]
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Cur
vasdecalibracion_32644.pdf
[5]. Fernanda Echeverri, ngela Henao, Franci
Ramrez, Elaboracin de nueve guas
complementarias de laboratorio para la
ejecucin de prcticas de aplicacin analtica
en la asignatura laboratorio de instrumental I,
Universidad Tecnolgica de Pereira.
[6]. Medicin radiomtrica y fotomtrica,
[online] http://www.herterinstruments.es/

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