Salas Villegas Alejandra Daniela

VALIDACION DE LIMPIEZA POR BIOLUMINISCENCIA

La Bioluminiscencia se basa en la medicin del ATP (adenosin trifosfato)
presente en todas las clulas como fuente de energa. El ATP hace que las
reacciones tomen lugar causando un efecto similar al de las lucirnagas. Una
enzima, la luciferasa, se combina con el ATP para producir luz mediante la
siguiente reaccin:
Luciferina + luciferasa + ATP = LUZ
Si colocamos la luciferina + luciferasa en un hisopo y el ATP es provisto por una
muestra (hisopado) podemos medir el ATP cuantificando la LUZ producida en la
reaccin.
La validacin de limpieza por Bioluminiscencia en un mtodo instantneo que
permite a las empresas verificar los niveles de residuos orgnicos, clulas vivas
y muertas, plantas y vegetales, bacterias, levaduras y mohos, alimentos, etc.
ya que en todos ellos est presente el ATP.
El aumento de la carga microbiana, residuo de productos, etc. aumenta el nivel
de luz, por lo tanto el ATP ser un parmetro de la contaminacin.
El instrumento utilizado para medir la luz emitida se denomina Luminmetro y
la unidad de medida para la luz emitida es RLU (unidades relativas de luz).
LIMPIEZA Y SANITIZACIN:
La bioluminiscencia permite obtener resultados en apenas 15 segundos lo que
representa una ventaja respecto a los mtodos tradicionales en microbiologa
que ofrecen resultados a las 24-48 hs. Permite controlar los puntos de control
antes de comenzar la produccin asegurando los niveles mas bajos de
microorganismos en el producto terminado.
METODOLOGIA:
Se toma la muestra con el hisopo Cleantrace/Aquatrace. El hisopo contiene un
lizante celular que liberar el ATP presente y entrar en contacto con la
muestra una vez que se presiona el hisopo hasta el fondo del tubo. Al liberarse
el ATP de la clula, entra en contacto con la luciferina + luciferasa,
posteriormente se coloca el hisopo en el instrumento para leer los resultados a
los 15 segundos.
El hisopo puede estar hasta 4 horas antes de hacer su medicin siempre que la
muestra no haya tenido contacto con el lizante ( sin presionar hasta el fondo)
lo que permite tambin llevar los hisopos al laboratorio y hacer las mediciones
all, por lo tanto las mediciones se pueden hacer tanto en planta como
laboratorio.
Existen 2 tipos de hisopos:
CLEANTRACE: para toma de muestra en superficie.

Salas Villegas Alejandra Daniela

AQUATRACE: para toma de muestra de aguas de enjuague, CIP, agua de
tanques, torres de enfriamiento, etc.
HACCP:
La identificacin de puntos crticos en el proceso de produccin es clave y
CLEAN-trace es una herramienta que permitir medir y controlar esos puntos.
Se puede llevar un registro de cada punto mediante el software incorporado al
luminmetro que adems permitir analizar los datos mediante clculos
estadsticos, grficos, etc.
Las industrias de alimentos, farmacuticas, de tratamientos de aguas,
cosmticos, etc. Pueden utilizar este sistema de medicin para detectar
instantneamente la eficacia de su sistema de limpieza.