QUIMICA ANALITICA CUANTITATIVA

CUARTO SEMESTRE

CROMATOGRAFA
I.

INTRODUCCIN.

La cromatografa es una tcnica que permite la separacin de los

componentes de una mezcla debido a la influencia de dos efectos
contrapuestos:
a) Retencin: Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por
una fase estacionaria, que puede ser un slido o un lquido anclado a un
soporte slido.
b) Desplazamiento: Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla
por una fase mvil, que puede ser un lquido o un gas.
El fenmeno de migracin de los componentes de una mezcla a lo largo de la
fase estacionaria, impulsados por la fase mvil, recibe el nombre de elucin.
La mezcla a separar se deposita sobre la fase estacionara, mientras que la
mvil atraviesa el sistema desplazando a los componentes de la mezcla a
distinta velocidad, dependiendo de la magnitud de sus interacciones relativas
con ambas fases. Las dos fases se eligen de forma que los componentes de la
muestra se distribuyan de modo distinto entre la fase mvil y la fase
estacionaria. Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase
estacionaria se mueven lentamente con el flujo de la fase mvil; por el
contrario los componentes que se unen
dbilmente a la fase estacionaria, se
mueven

con

rapidez.

Como

consecuencia de la distinta movilidad,

los componentes de la muestra se
separan en bandas o zonas discretas
que pueden analizarse cualitativa y/o
cuantitativamente.
CROMATOGRAFA

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II.

OBJETIVOS.
II.1.

Objetivo General:
Investigar y presentar una sntesis acerca de lo que es la
CROMATOGRAFIA.

II.2.

Objetivos Especficos:
Averiguar cules son los diferentes parmetros a partir de los
cuales se dividen los diferentes tipos de cromatografa que
existen.
Describir cada tipo de cromatografa.
Mencionar los usos que tiene la cromatografa en el mbito de la
Ingeniera Petrolera.

III.

HISTORIA DE LA CROMATOGRAFA.

1848 Way y Thompson: Reconocieron el fenmeno de intercambio inico en

slidos.
1850 Runge, Schoenbein, y Goeppelsroeder: Estudiaron el anlisis por
capilaridad en papel.
1876 Lemberg: Ilustr la reversibilidad y estequiometra del intercambio
inico en minerales como el silicato de aluminio.
1892 Reed: Separacin en columna en tubos de caoln usados para la
separacin de FeCI3 y el CuSO4.
1906 Tswett: Invent la cromatografa en columna con el uso de solventes
puros para desarrollar un cromatograma, us adsorbentes suaves para
resolver una mezcla de pigmentos.
1930 Karrer, Kuhn, y Strain: Us adsorbentes como hidrxido de calcio
activado, aluminio y magnesio
1935 Holmes y Adams: Sintetiz resinas orgnicas para intercambio inico.
1938 Reichstein: Introdujo la cromatografa lquida o fluida, as extendi las
aplicaciones de la cromatografa a sustancias sin color.
1938 Izmailov y Schraiber: Describieron el uso de la capa fina de alumina
extendida sobre un vidrio.
1939 Brown: Primero que us la cromatografa circular en papel.

CROMATOGRAFA

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1941 Martin y Synge: Introdujo la cromatografa por particin en columna.

1944 Consden, Gordon, y Martin: Primeros
cromatografa de particin en papel.

que

describieron

la

1947 Boyd, Tompkins, Spedding, Rieman: Cromatografa de intercambio

inico aplicada a varios problemas analticos.
1948 M. Lederer y Linstead: Cromatografa en papel aplicada a compuestos
inorgnicos.
1951 Kirchner: Introdujo la cromatografa de capa fina como es practicada
ahora.
1952 James y Martin: Desarrollaron de la cromatografa de gas.
1956 Sober y Peterson: Prepararon las primeras celulosas para intercambio
inico.
1956 Lathe y Ruthvan: Usaron almidn natural y modificado como tamiz
para la estimacin del peso molecular.
1959 Porath y Flodin: Introdujeron al dextrn entrecruzado como tamiz
molecular.
1964 J. C. Moore: Desarroll la cromatografa de permeacin en gel.
En 1906, el botnico ruso Mikhail Tswett (1872-1919) formaliz el uso de la
cromatografa en estudios cientficos, aplicndola a la separacin de los
pigmentos naturales que se encuentran en las plantas (conocidos como
carotenoides y clorofilas). Adems le dio ese nombre a la tcnica.
Tswett empac una columna de vidrio vertical (de unos cuantos centmetros de
dimetro) con material adsorbente. Luego, por la columna vertical virti una
solucin que contena la mezcla de pigmentos provenientes de las hojas
molidas de una planta. Haba logrado la separacin de los pigmentos
naturales de la planta. En cada segmento de color definido haba un pigmento
diferente.
IV.

TIPOS DE CROMATOGRAFA.

CROMATOGRAFA

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Dependiendo de la naturaleza de la fase estacionaria y de la fase mvil se

pueden distinguir distintos tipos de cromatografa
a) Cromatografa slido-lquido: La fase estacionaria es un slido y la
mvil un lquido.
b) Cromatografa lquido-lquido: La fase estacionaria es un lquido
anclado a un soporte slido.
c) Cromatografa lquido-gas: La fase estacionaria es un lquido no
voltil impregnado en un slido y la fase mvil es un gas.
d) Cromatografa slido-gas: La fase estacionaria es un slido y la mvil
un gas.
Segn el tipo de interaccin que se establece entre los componentes de la
mezcla y la fase mvil y estacionaria podemos distinguir entre.
a) Cromatografa de adsorcin: La fase estacionaria es un slido polar
capaz de adsorber a los componentes de la mezcla mediante
interacciones de tipo polar.
b) Cromatografa de particin: La separacin se basa en las diferencias
de solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases
estacionaria y mvil, que son ambas lquidas.
c) Cromatografa de intercambio inico: La fase estacionaria es un
slido que lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se
puede intercambiar por aquellos iones presentes en la fase mvil.
IV.1. CROMATOGRAFA DE ADSORCIN
La adsorcin es la propiedad que tienen ciertos slidos de aumentar la
concentracin en su superficie de otras sustancias. La separacin se debe a
las diferencias de adsorcin de los componentes de una mezcla sobre la fase
estacionaria. La fase estacionaria ha de ser un slido polar de gran superficie
(adsorbente). La fase mvil puede ser un gas o un lquido dando lugar a la
cromatografa gas-slido (CGS) o lquido-slido (CLS).
El grado de adsorcin vara segn la naturaleza y superficie especfica de los
adsorbentes y naturaleza de los solutos. Los enlaces entre molculas
adsorbidas y el adsorbente han de ser dbiles para que su fijacin sea
CROMATOGRAFA

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reversible, las uniones son debidas a fuerzas intermoleculares (interacciones

dipolo-dipolo o puentes de hidrgeno). Como regla general, las polaridades del
adsorbente y de los solutos han de ser opuestas.
Cromatografa lquido-slido (CLS)
La fase estacionaria est constituida por un slido polar poroso y que esta
finamente granulado. La superficie especfica contiene centros polares aptos
para la adsorcin de las molculas polares presentes en la fase mvil. Al
disminuir el tamao de las partculas, el nmero de centros activos por unida
es mayor, y la capacidad de adsorcin se incrementa. El adsorbente ms
utilizado es gel de slice aunque tambin se emplea almina activada. En el
caso del gel de slice la interaccin se establece entre los grupos Si-OH y SiO-Si, y los grupos funcionales polares de los compuestos orgnicos.
La fase mvil est constituida por un disolvente en el que los componentes de
la mezcla deben ser al menos parcialmente solubles. La velocidad de elucin
de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase mvil y se
puede utilizar un gradiente de polaridad aumentando con el tiempo la
proporcin del disolvente ms polar.
La retencin se realiza en base a la competencia que se establece entre el
soluto a separar (S) y las molculas de la fase mvil (M) por adsorberse a los
centros activos polares (X) de la fase estacionaria. As las molculas de soluto
se adsorben a los centros activos de la fase estacionaria y van siendo
desplazados por las molculas polares presentes en la fase mvil.
Los tiempos de retencin y la selectividad en la separacin dependern de la
polaridad de los compuestos a separar (S), la naturaleza del adsorbente (X) y
la naturaleza de los disolventes que componen la fase mvil (M).
Cromatografa en capa fina.
La cromatografa en capa fina se basa en la preparacin de una capa,
uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de
CROMATOGRAFA

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vidrio, aluminio u otro soporte. La fase mvil es lquida y la fase estacionaria

consiste en un slido. La fase estacionaria ser un componente polar y el
eluyente ser por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma
que los componentes que se desplacen con mayor velocidad sern los menos
polares.
La mezcla a analizar se deposita a una pequea distancia del borde inferior de
la placa y se introduce en una cubeta que contiene la fase mvil, que asciende
a lo largo de la placa por capilaridad, desplazando a los componentes de la
mezcla a diferentes velocidades, lo que provoca su separacin. Cuando el
frente del disolvente se encuentra prximo al extremo superior de la placa esta
se saca y se visualiza.
La relacin entre la distancia recorrida por un compuesto y por el disolvente
desde el origen se conoce como Rf (rate factor).
Rf =

Distancia recorrida por el compuesto

Distancia recorrida por el disolvente

La

bsqueda

del eluyente requiere probar con varios disolventes de diferente polaridad o

con mezclas. Para compuestos poco polares, que se desplazan con mucha
facilidad, se debe utilizar un disolvente apolar como el hexano y en el caso de
compuestos de polaridad media, mezclas de hexano y acetato de etilo.
La mayora de las placas de cromatografa llevan un indicador fluorescente
que permite la visualizacin de los componentes activos a la luz ultravioleta
CROMATOGRAFA

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(254 nm). En el caso de componentes que no absorban a la luz ultravioleta, la

visualizacin requiere utilizar un agente revelador. El revelador reacciona con
los productos proporcionando productos coloreados.
Cromatografa preparativa en placa.
La cromatografa preparativa se lleva a cabo en placas de gel de slice de 1-2
mm

de

espesor

sobre

un

soporte de vidrio. Se utiliza para

la separacin y aislamiento de
los componentes de una mezcla
en

cantidades

comprendidas

entre 100-200 mg.

En la superficie del adsorbente
(gel de slice), mediante una
pipeta Pasteur, se traza una
lnea continua con la muestra
disuelta y se introduce la placa
en posicin vertical en una
cubeta. Durante la elucin debe

Chromatotron

permanecer tapada para evitar

la evaporacin del disolvente. Una vez se han separado los productos que
componen la muestra, se marca con una cuchilla el contorno del compuesto a
aislar y con ayuda de una esptula se desprende del soporte de vidrio el gel
de slice con el compuesto adsorbido. Una vez transferido a un erlenmeyer se
aade un disolvente en el cual sea soluble el producto, se filtra el gel de slice
y una vez eliminado el disolvente tenemos el producto puro.
Cromatografa en columna.
Es el mtodo ms utilizado para la separacin de compuestos orgnico a
escala preparativa. La fase estacionaria se deposita en el interior de una
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columna de vidrio que termina con

una placa porosa que impide su
paso y en un estrechamiento con
una llave. La mezcla se deposita
sobre la parte superior de la fase
estacionaria mientras que la fase
mvil atraviesa el sistema. Los
compuestos

van

saliendo

por

separado de la columna y se
recogen en fracciones, los ms
polares quedan ms retenidos y
para que salgan generalmente
hace falta aumentar la polaridad
del disolvente. El tiempo necesario para eluir un compuesto de la columna se
llama tiempo de retencin.
El adsorbente ms utilizado para cromatografa de columna es gel de slice,
aunque tambin se puede emplear almina y florisil. La elucin de
lacromatografa puede realizarse por gravedad o mediante presin (Flash
chromatography), la diferencia en ambos casos est en el tamao de las
partculas de gel de slice (0,063-0,200 nm, slice de columna, 0,040-0,063 nm,
slice flash). Debido a que la disminucin del tamao de las partculas de
adsorbente conduce a una separacin ms eficaz, la cromatografa a media
presin (flash) proporciona mejores resultados, adems de ser ms rpida.
Las variables que ms influyen en la eficacia de la separacin en
cromatografa de columna y utilizando gel de slice como adsorbente son las
siguientes:
a) Dimetro de la columna y cantidad de gel de slice: La altura del
adsorbente est relacionada con la diferencia de Rf de los componentes de
la mezcla. El dimetro de la columna con la cantidad de producto a separar.

CROMATOGRAFA

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b) Eleccin del disolvente: El disolvente tienen que conducir a una buena

separacin de los componentes de la mezcla en capa fina, utilizndose en
muchos casos mezclas de disolventes y se realiza una elucin en gradiente.
Una de las mezclas ms utilizadas es hexano/acetato de etilo.
Cromatografa en papel.
Es la ms sencilla de las tcnicas, pero slo nos dar resultados cualitativos.
Est casi en desuso. El mtodo se basa en un mecanismo de reparto, y
consiste en depositar una pequea cantidad de muestra en el extremo de una
tira de papel de filtro, que se deja evaporar. Luego se introduce la tira en una
cubeta que contenga el disolvente, de manera que ste fluya por la tira por
capilaridad.
Cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al extremo, se retira el
papel y seca. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen
color propio se vern las manchas de distinto color separadas. Cuando los
componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de
revelado. Hay varios factores de los cuales depende una cromatografa eficaz:
la eleccin del disolvente y la del papel de filtro.
IV.2.

CROMATOGRAFA DE PARTICIN.

CROMATOGRAFA

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La cromatografa lquido-lquido, tambin llamada de particin se caracteriza

por emplear una fase estacionaria lquida, anclada a un soporte slido, y una
fase mvil tambin lquida. El soporte slido por lo general es gel de slice,
sobre cuya superficie se ha anclado una fase lquida con la incorporacin de
una cadena hidrocarbonada larga, mediante la transformacin de los grupos
silanol (Si-OH) de la gel de slice en grupos siloxano (Si-O-Si-R), lo que
proporciona una fase lquida estacionaria trmicamente estable y difcil de
hidrolizar en condiciones normales.
La polaridad de la fase estacionaria puede modificarse en funcin de la
naturaleza de las cadenas hidrocarbonadas introducidas en la gel de slice, lo
que permite disponer de fases estacionarias con selectividad diferente. La
separacin en la cromatografa lquido-lquido se basa en la diferencia de
solubilidad de los componentes de la mezcla entre las dos fases lquida o en
las diferentes interacciones de los componentes de la mezcla con los grupos
funcionales presentes en la cadena enlazada al gel de slice. En funcin de la
polaridad de la fase lquida estacionaria, se distingue entre:

a) Cromatografa en fase normal: La fase estacionaria est constituida por

un lquido de carcter polar. Como fase mvil se emplean mezclas de
CROMATOGRAFA

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disolventes apolares (hexano, pentano), con disolventes polares

(cloroformo, diclorometano, T.H.F., etanol, metanol o acetonitrilo). Se utiliza
para la separacin de compuestos muy polares que quedaran demasiado
retenidos en una cromatografa slido-lquido. En este tipo de cromatografa
el orden de elucin est gobernado por interacciones de tipo polar: los
solutos ms polares quedan ms retenidos, igual que en la cromatografa
de adsorcin.
b) Cromatografa en fase reversa: La fase estacionaria est constituida
por un lquido de carcter apolar. Como fase mvil se emplean mezclas de
agua con disolventes polares miscibles, como metanol o acetonitrilo siendo
la fase mvil ms polar que la fase estacionaria. Se emplea para la
separacin de mezclas de compuestos de polaridad baja, que se retienen
muy poco en una cromatografa slido-lquido, y para la separacin de
compuestos de una misma serie homloga. La retencin se explica en base
a una adsorcin preferencial del disolvente menos polar de la fase mvil a
la superficie de las cadenas apolares que constituyen la fase estacionaria,
de manera que se establece un mecanismo complejo que supone una
combinacin de equilibrios de solubilidad (particin) de la mezcla que se
cromatografa entre la fase lquida adsorbida a la fase estacionaria y la fase
mvil.
La separacin ocurre como consecuencia de las diferencias en la superficie
apolar de los componentes de la muestra, los compuestos menos polares
sern ms solubles en la fase estacionaria que los ms polares. Por tanto,
al contrario que en la fase normal, los compuestos ms polares estarn
menos retenidos que los menos polares. Los tiempos de retencin
disminuyen cuando menor sea la proporcin de agua, cuando menos polar
sea el disolvente empleado.
IV.3.

CROMATOGRAFA DE INTERCAMBIO INICO.

CROMATOGRAFA

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La cromatografa de intercambio inico (cromatografa inica) es un proceso

que permite la separacin de iones y molculas polares, basado en las
propiedades de carga de las molculas. Puede ser usada en casi cualquier
tipo

de

molcula

cargada,

incluyendo

grandes

protenas,

pequeos

nucletidos y aminocidos. La solucin que se inyecta es usualmente llamada

muestra y los componentes separados individualmente son llamados analitos.
Es usada a menudo en purificacin de protenas, anlisis de agua o control de
calidad.
La fase estacionaria (resina de intercambio) muestra en la superficie grupos
funcionales inicos que interactan con iones de carga opuesta. Este tipo de
cromatografa se subdivide a su vez en la cromatografa de intercambio
catinico y cromatografa de intercambio aninico:
La cromatografa de intercambio catinico retiene cationes cargados
positivamente debido a que la fase estacionaria muestra un grupo funcional
cargado negativamente (SO3-, CO2-). Las resinas cuyo grupo funcional activo
es un sulfonato (SO3-) se consideran resinas intercambiadoras cidas fuertes,
mientras que aqullas cuyo grupo funcional activo es un in carboxilato (CO2-)
se consideran resinas cidas dbiles.
R-A-H++M++B-

R-A-M++H++B-

La cromatografa de intercambio de aniones retiene aniones usando grupos

funcionales cargados positivamente, como un catin de amonio cuaternario
(R4N+).
R4-N+L- + M+ + B-

R4-N+B- + L- + M+

Este tipo de cromatografa se basa en el equilibrio de intercambio inico entre

una fase slida que contiene grupos sulfnicos o carboxlicos (para la
separacin de cationes) o grupos amino cuaternarios, ternarios o secundarios
(para la separacin de aniones) y los iones presentes en la fase mvil. Por

CROMATOGRAFA

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ejemplo, para la separacin de cationes se puede utilizar una resina de cido

dbil donde se producir el siguiente equilibrio:
R-CO2H + M+

R-CO2M + H+

En este caso, el catin M + puede ser eluido de la columna por un cido fuerte
en una concentracin capaz de desplazar el equilibrio representado en la
ecuacin anterior hacia la izquierda. El desarrollo de esta tcnica al estado de
cromatografa de alta resolucin, llamada cromatografa inica, fue posible a
partir de la dcada del 70 cuando se desarrollaron recubrimientos que
contienen los materiales tpicos para el intercambio (grupos sulfnicos para
cromatografa catinica y grupos aminos cuaternario para cromatografa
aninica). Estos recubrimientos se depositan sobre pequeas esferas de
slice, vidrio o de algn polmero que son capaces de soportar las altas
presiones comnmente utilizadas en cromatografa lquida de alta resolucin.

CROMATOGRAFA

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V.

PRCTICA DE CROMATOGRAFA EN COLUMNA.

En todo procedimiento en qumica orgnica reconocemos las etapas que se

muestran en el siguiente esquema para el aislamiento y caracterizacin de los
productos orgnicos.
Esquema: Esquema general de las etapas de aislamiento y purificacin de los
productos preparados en un proceso sinttico en qumica orgnica.
A+ B

Reactivos

Mezcla De

C+D

Otros

Reaccin
Productos De
Reaccion

Extraccin

Separacin
cromatografica

Purificacin

Cristalizacin

Pf

Destilacin

Peb

Caracterizacin

RMN

Una vez que ha concluido la reaccin, la mezcla resultante se extrae para

separar los sustratos que nos interesan. A continuacin la mezcla obtenida,
que generalmente es el producto de reaccin, productos secundarios,
reactivos y/o algo del producto de partida, se separa por cromatografa de
columna. Finalmente los productos, para caracterizarlos correctamente, y por
regla general, requieren de una purificacin adicional que se lleva a cabo
mediante otra cromatografa ms cuidadosa y/o cristalizaciones-destilaciones,
segn el caso.

CROMATOGRAFA

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Procedimiento general
Para el proceso de separacin-purificacin por cromatografa de columna se
siguen los siguientes pasos:
1.

Se sujeta la columna a un soporte y se rellena con la fase

2.

estacionaria en forma de papilla o en seco segn se nos indique.

Opcionalmente se puede aadir arena hasta obtener una franja de
unos 2-5 mm de espesor, para proteger el frente de la fase

3.

estacionaria.
Se deposita la muestra en disolucin o adherida a una pequea
cantidad de adsorbente sobre la arena, procurando tener una franja

4.

horizontal.
Opcionalmente se puede poner otra franja de arena como la primera

5.

o un poco de lana de vidrio.

Aadir la fase mvil con cuidado por la pared de la columna hasta

6.

llenarla.
Los componentes de la mezcla deben eluirse manteniendo un flujo

7.

continuo de disolvente.
Las fracciones recogidas debern analizarse mediante una tcnica
cromatogrfica analtica: cromatografa de capa fina para comprobar
su contenido y pureza. Las fracciones que tengan semejante
contenido se juntan en el mismo matraz, previamente pesado y el
disolvente se elimina en el rotavapor.

CROMATOGRAFA

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VI.

APLICACIN EN INGENIERA PETROLERA.

En la industria petrolera es muy importante conocer la composicin de

los crudos, ya que esta vara dependiendo de su origen. Resulta factible
y provechosa su separacin industrial por destilacin en fracciones de
diferentes intervalos de ebullicin para sus diferentes aplicaciones.
Antes de llevar a cabo el proceso industrial es preciso determinar en el
laboratorio la composicin de cada fraccin para su adecuacin.
Usualmente esto se realiza por destilacin a presin atmosfrica y
reducida de la muestra de crudo, pero es posible realizarlo por
destilacin simulada mediante cromatografa gaseosa. Se emplea la
cromatografa gaseosa capilar con detector de ionizacin de llama. Las
muestras se analizan utilizando una mezcla de n-parafinas como
estndar interno (n-hexadecano, n-heptadecano, n-octadecano y nnonadecano).
Identificacin de hidrocarburos por cromatografa de gasesespectrometra de masas (CG / EM): cuando se requiere un anlisis a
detalle del tipo de compuestos presentes en una muestra de suelo
CROMATOGRAFA

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contaminado, se recomienda utilizar cromatografa de gases acoplada a

espectrometra de masas para identificar dichos compuestos. La
cromatografa de gases acoplada a la espectrometra de masas
(CG/EM) es una tcnica analtica instrumental de alta sensibilidad
capaz de identificar cualitativa y cuantitativamente cualquier tipo de
mezclas de sustancias, mediante el anlisis de su patrn de
fragmentacin. Asimismo, esta tcnica permite tambin determinar la
masa molecular de un compuesto. El sistema de CG/EM es usado para
medir concentraciones de constituyentes voltiles y semivoltiles del
petrleo, pero no es tpicamente usado para medir HTPs. La ventaja de
la CG/EM es su alta selectividad o habilidad para confirmar la
identificacin de compuestos a travs del tiempo de retencin y la va
espectral nica. Debido a la complejidad de su operacin y a la
interpretacin de sus resultados, las tcnicas de CG/EM tienden a ser
ms costosas que otras tcnicas de cromatografa de gases, por
ejemplo CG/FID.
Para analitos voltiles los lmites de deteccin estn por debajo de 1-5
g/L para agua y 20 g/kg para suelo. Para analitos semivoltiles los
lmites de deteccin estn por debajo de 5 g /L para agua y 50 g /kg
para suelo.

Otra aplicacin interesante, aunque aplicada al campo de la

Ingeniera Ambiental, es el uso de la cromatografa de gases (CG) para

observar el perfil de contaminacin de una muestra, y es capaz de
diferenciar aquellos compuestos que provienen de la materia orgnica
del suelo o bien productos metablicos generados durante un
tratamiento. La principal ventaja de este tipo de mtodo es que provee
informacin acerca del tipo de petrleo en la muestra, adems de su
cuantificacin, aunque la identificacin del tipo de producto no es
siempre sencilla.
VII.

CONCLUSIONES.

CROMATOGRAFA

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Realizando el presente trabajo se concluy que la cromatografa es

una tcnica eficiente que se utiliza para poder determinar los
componentes de un compuesto, es decir, es una tcnica de
separacin.
Los tipos de cromatografa pueden clasificarse obedeciendo a 2
tipos de parmetros, que son los siguientes:

Dependiendo de la naturaleza de la fase estacionaria y de la

fase

mvil

se

pueden

distinguir

distintos

tipos

de

cromatografa:
-

Cromatografa slido-lquido
Cromatografa lquido-lquido
Cromatografa lquido-gas
Cromatografa slido-gas

Segn el tipo de interaccin que se establece entre los

componentes de la mezcla y la fase mvil y estacionaria
podemos distinguir entre:
-

Cromatografa de adsorcin
Cromatografa de particin
Cromatografa de intercambio inico

Dentro del mbito petrolero, sta tcnica se utiliza para conocer la

composicin de los crudo que se van a extraer de alguna regin, ya
que dicha composicin puede variar dependiendo el origen de
crudo propiamente dicho.

sta tcnica es tambin utilizada para poder establecer el perfil de

contaminacin de una muestra, y es capaz de diferenciar aquellos
compuestos que provienen de la materia orgnica del suelo o bien
productos metablicos generados durante un tratamiento.
VIII.

BIBLIOGRAFA.
es.wikipedia.org/wiki/Cromatografa
www.slideshare.net/luisdracons/cromatografia-5540749
umm.edu/health/medical/spanishency/articles/cromatografia
www.scribd.com/doc/82549934/Cromatografia

CROMATOGRAFA

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CROMATOGRAFA

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RESUMEN DEL TRABAJO

CROMATOGRAFIA
La cromatografa es una tcnica que permite la separacin de los
componentes de una mezcla debido a la influencia de dos efectos
contrapuestos:
a) Retencin: Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por
una fase estacionaria.
b) Desplazamiento: Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla
por una fase mvil.
El fenmeno de migracin de los componentes de una mezcla a lo largo de la
fase estacionaria, impulsados por la fase mvil, recibe el nombre de elucin.
La mezcla a separar se deposita sobre la fase estacionara, mientras que la
mvil atraviesa el sistema desplazando a los componentes de la mezcla a
distinta velocidad. Las dos fases se eligen de forma que los componentes de
la muestra se distribuyan de modo distinto entre la fase mvil y la fase
estacionaria.
En cromatografa en la mayora de los casos se usa gel de slice como
adsorbente.
CROMATOGRAFA DE ADSORCIN
La adsorcin es la propiedad que tienen ciertos slidos de aumentar la
concentracin en su superficie de otras sustancias. La separacin se debe a
las diferencias de adsorcin de los componentes de una mezcla sobre la fase
estacionaria.
Cromatografa lquido-slido (CLS). La fase estacionaria est constituida
por un slido polar poroso y que esta finamente granulado.
Cromatografa en capa fina. La fase mvil es lquida y la fase estacionaria
consiste en un slido. La mezcla a analizar se deposita a una pequea
CROMATOGRAFA

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QUIMICA ANALITICA CUANTITATIVA

CUARTO SEMESTRE

distancia del borde inferior de la placa y se introduce en una cubeta que

contiene la fase mvil, que asciende a lo largo de la placa por capilaridad.
La relacin entre la distancia recorrida por un compuesto y por el disolvente
desde el origen se conoce como Rf (rate factor).
Rf =

Distancia recorrida por el compuesto

Distancia recorrida por el disolvente

Cromatografa preparativa en placa. Se utiliza para la separacin y

aislamiento de los componentes de una mezcla en cantidades comprendidas
entre 100-200 mg.
Cromatografa en columna. La fase estacionaria se deposita en el interior de
una columna de vidrio que termina con una placa. La mezcla se deposita
sobre la parte superior de la fase estacionaria mientras que la fase mvil
atraviesa el sistema. Los compuestos van saliendo por separado de la
columna y se recogen en fracciones, los ms polares quedan ms retenidos y
para que salgan generalmente hace falta aumentar la polaridad del disolvente.
Cromatografa en papel. Consiste en depositar una pequea cantidad de
muestra en el extremo de una tira de papel de filtro, que se deja evaporar.
Luego se introduce la tira en una cubeta que contenga el disolvente, de
manera que ste fluya por la tira por capilaridad.
CROMATOGRAFA DE PARTICIN.
Tambin llamada lquido-lquido. Se basa en la diferencia de solubilidad de los
componentes de la mezcla o en las diferentes interacciones de los
componentes de la mezcla con los grupos funcionales presentes en la cadena
enlazada al gel de slice. En funcin de la polaridad de la fase lquida
estacionaria, se distingue entre:
Cromatografa en fase normal: La fase estacionaria est constituida por un

CROMATOGRAFA

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QUIMICA ANALITICA CUANTITATIVA

CUARTO SEMESTRE

lquido de carcter polar. Como fase mvil se emplean mezclas de disolventes

apolares (hexano, pentano).
Cromatografa en fase reversa: La fase estacionaria est constituida por un
lquido de carcter apolar. Como fase mvil se emplean mezclas de agua con
disolventes polares miscibles, como metanol o acetonitrilo.
CROMATOGRAFA DE INTERCAMBIO INICO.
Es un proceso que permite la separacin de iones y molculas polares,
basado en las propiedades de carga de las molculas.
PRCTICA DE CROMATOGRAFA EN COLUMNA
Esquema: Esquema general de las etapas de aislamiento y purificacin de los
productos preparados en un proceso sinttico en qumica orgnica.
A+ B

Reactivos

Mezcla De

C+D
Otros

Reaccin
Productos De
Reaccion

Extraccin

IX.

Separacin
cromatografica

Purificacin

Cristalizacin

Pf

Destilacin

Peb

Caracterizacin

RMN

APLICACIN EN INGENIERA PETROLERA.

En la industria petrolera es muy importante conocer la composicin de
los crudos, ya que esta vara dependiendo de su origen. Resulta factible
y provechosa su destilacin simulada mediante cromatografa gaseosa.
Se emplea la cromatografa gaseosa capilar con detector de ionizacin
de llama.
Tambin se la utiliza para la identificacin de hidrocarburos por

cromatografa de gases-espectrometra de masas (CG / EM) .

CROMATOGRAFA

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