Istopos Estveis.

Espectrometria de Massas para Determinao de Razo

Isotpica de Elementos de Baixo Nmero Atmico (IRMS).
A Tcnica de Traador e a Diluio Isotpica

Paulo Cesar Ocheuze Trivelin

Prof. Associado - CENA/USP

1. INTRODUO

Na natureza, a matria constituda de tomos dos elementos qumicos,

que podem estar arranjados de diferentes maneiras e propores, formando os
compostos ou substncias, podendo ser estas simples ou complexas. O tomo
tem uma estrutura muito semelhante ao sistema solar onde, no centro, localiza-se
o ncleo, carregado positivamente e, em torno dele, giram partculas de carga
negativa (eltrons), como os planetas giram em rbitas ao redor do sol. O prton
partcula constituinte do ncleo de todos os tomos, possuindo carga positiva de
mesma grandeza e massa 1.850 vezes maior que a do eltron. O nmero de
eltrons nos tomos , portanto, igual ao nmero de prtons do ncleo. Fazem
parte ainda do ncleo, partculas sem carga eltrica e com massa pouco maior
que a do prton, que so os nutrons. O nmero de prtons e nutrons no ncleo
define a massa dos tomos.
O nmero de eltrons e a distribuio destes nos orbitais dos tomos
determinam as propriedades qumicas dos diferentes elementos. O nmero de
prtons no ncleo que define o nmero de eltrons do tomo caracterstico de
cada elemento qumico, embora tomos de um mesmo elemento no
obrigatoriamente devam ter o mesmo nmero de neutros no ncleo.
Os tomos dos elementos so caracterizados pela constituio de seu
ncleo, ou seja, pelo nmero de prtons e nutrons. tomos que possuem
diferentes nmeros e nutrons no ncleo, mas contm mesmo nmero de
prtons, tratam-se do mesmo elemento e so chamados de istopos. A forma
genrica de se representar os istopos dado por :

A X
Z

, significando X o smbolo

do elemento (ex.: N - nitrognio, P - fsforo, K - potssio, etc.); A o nmero de

prtons e de neutros do ncleo (ex.:

14

N,

31

P, 39K, etc.); Z o nmero de prtons

(ex.: 147N, 3115P, 3919K, etc.).

Os istopos podem ser estveis (exemplo para o elemento potssio que
possui 19 prtons no ncleo:

39

K e

41

K), e como tais no emitem radiaes,

ocorrendo na natureza em proporo quase constante ( 39K = 93,1% e

41

K =

6,89%). Naturalmente, tambm podem ocorrer radioistopos em quantidades

muito pequenas, como o caso do 40K (0,01% de ocorrncia), que assim existem
40

por possurem meia-vida muito longa (meia-vida de

K = 1,3.109 anos), ou por

serem produtos de cadeias radioativas naturais, com meia-vida de mdia a curta

(ex.:

288

Ra), ou ainda por serem produzidos na atmosfera por ao dos raios

csmicos (ex.: 14C). A meia-vida (smbolo T) de uma espcie radioativa definida

como o tempo para que metade dos tomos radioativos se desintegre, ou seja,
emitam radiaes.
Alm dos istopos estveis e radioativos naturais podem ser obtidos os
radioistopos artificiais, que so assim chamados por serem produzidos pelo
homem em aparelhos especiais (ciclotron, sncroton, reatores nucleares, etc.),
onde a constituio dos ncleos dos tomos modificada, tornado-os instveis.
Os radioistopos sofrem desintegraes emitindo partculas : Alfa ( ) e Beta (
ou ), caractersticas a cada radioistopo, podendo ou no ocorrer aps essas
desintegraes emisso de radiao gama, radiao essa semelhante ao raio X.
Estas formas de radiaes so detectadas em aparelhos chamados de
detectores/contadores.
Os istopos estveis de elementos de baixo nmero atmico ocorrem na
natureza em propores quase constantes, como exemplo: hidrognio:
(99,985%) e 2H (0,015%); boro:

10

11

B (19,78%) e

B (80,22%); carbono:

12

(98,893%) e 13C (1,107%); nitrognio: 14N (99,634%) e 15N (0,366%); oxignio: 16O
(99,759%),
(4,21%) e

17

36

O (0,204%); enxofre:

32

S ( 0,02%). Os istopos 2H (deutrio),

13

O (0,037%) e

18

33

S (95,02%),
C,

concentraes mais baixas que seus homlogos ( 1H ,

15
12

N,

C,

18O
14

N,

S (0,75%),

34

16

34

S apresentam

Oe

34

S) e, por

possurem maior massa (maior nmero de neutros no ncleo), so denominados

de istopos pesados. No caso do boro o istopo pesado ( 11B) o mais abundante
na natureza. Por abundncia ou concentrao isotpica (% de tomos de istopo

estvel considerado) entende-se a porcentagem de um istopo em relao a

todos do mesmo elemento que ocorrem naturalmente, sendo esta determinao
feita em aparelhos denominados Espectrmetros de Massas. Os istopos
pesados so usados como traadores em pesquisas, tanto com o uso de
compostos contendo o elemento de interesse, com proporo de istopos
diferente daquela de ocorrncia natural (compostos marcados normalmente no
istopo pesado), como por meio das variaes na abundncia isotpica natural.
No CENA/USP, Piracicaba-SP, so desenvolvidos estudos de hidrologia,
hidrogeoqumica e

biogeoqumica de carbono, nitrognio e enxofre tanto em

ecossistemas naturais como nos modificados pelo homem (agrossistemas).

Nesses estudos so feitos usos das tcnicas de traador com as variaes
naturais dos istopos estveis, e de traador com compostos marcados com
istopos estveis de B (10B), N (15N) e S (34S). Dentre os estudos com uso de
compostos marcados, destacam-se aqueles voltados ciclagem do nitrognio em
agrossistemas, que so desenvolvidos h mais de 30 anos, citando-se como
exemplos queles voltados ao aproveitamento por culturas do N de fertilizantes e
de outras fontes nitrogenadas; quantificao da fixao biolgica do nitrognio;
estudos das transformaes do

no

solo: mineralizao,

nitrificao,

imobilizao, lixiviao, volatilizao de amnia e desnitrificao, em diversas

condies de manejo etc.
O CENA/USP alm de estar equipado com espectrmetros de massas para
determinaes de razo isotpica

de elementos leves (IRMS) possui um

laboratrio de enriquecimento e sntese de compostos marcados nos istopos

estveis

15

Ne

34

S (amnia

-15

N, sulfato de amnio

-15

N/34S, uria

-15

N, nitrato-15N,

glicina-15N, gesso agrcola-34S etc.) que nico no pas e Amrica do Sul.

2. ESPECTROMETRIA DE MASSAS

O espectrmetro de massas, por definio, trata-se de um instrumento que

separa ons, positivos ou negativos, produzidos a partir de tomos ou molculas,
quer sejam das mais simples s mais complexas, de acordo com a razo
massa/carga (m/q). A espectrometria de massas uma poderosa ferramenta que

foi usada, no princpio, na determinao de massas atmicas e, vem sendo

empregada, na atualidade, na busca de informaes sobre a estrutura de
compostos orgnicos, na anlise de misturas orgnicas complexas, na anlise
elementar e na determinao da composio isotpica dos elementos. Trata-se
do mtodo mais usado para essa ltima finalidade. Sero abordados, neste texto,
somente os espectrmetros de massas destinados para determinao da razo
dos istopos estveis de elementos leves, chamados de baixa resoluo e
destinados para amostras gasosas temperatura ambiente.
Um espectrmetro de massas (MS ou IRMS: mass espectrometer" ou
isotope ratio mass spectrometer respectivamente) constitui-se, basicamente, das
seguintes partes: (i) unidade de admisso ou de entrada para amostras gasosas;
(ii) fonte de ionizao; (iii) unidade aceleradora de ons, (iv) analisador magntico
de ons e (v) detector. No interior do aparelho dever haver a manuteno de alto
vcuo, da unidade (i) at os coletores na entrada de (v). Um requerimento
fundamental de um espectrmetro de massas um sistema de vcuo capaz de
manter uma presso muito baixa no analisador, normalmente <100 Pa ( <10-5
mm Hg ou torr), no setor magntico e na regio do coletor. Sistemas acessrios,
como cromatgrafos a gs ou analisadores de CNS, ligados entrada dos
espectrmetros, so disponveis atualmente, o que reduz o trabalho com o
preparo de amostras (transformao do elemento de interesse da forma
combinada a uma forma gasosa desejvel), que normalmente seria realizado em
linhas de vcuo, fora do aparelho. Em espectrmetros de massas acoplados com
cromatgrafos ou analisadores de CNS (GC-MS, gas chromatographic mass
spectrometer; GC-IRMS, gas chromatographic isotope ratio mass spectrometer;
e ANCA-IRMS, automated nitrogen e carbon analyzer isotope ratio mass
spectrometer) so feitas determinaes de teores de C, N e S em amostras
minerais e orgnicas, alm da razo istopica do elemento. Atualmente os MS
acoplados a cromatgrafos ou analisadores de CNS so tambm denominados
de CF-IRMS (continuos flow isotope ratio mass spectrometer), ou seja,
espectrmetros de massas com fluxo contnuo, pois existe um fluxo contnuo de
gs de arraste (normalmente He de alta pureza - 99,9999%) que carrega o gs
produzido no cromatgrafo ou analisador de CNS at a entrada do IRMS.

3. O MTODO DO TRAADOR ISOTPICO: A DILUIO ISOTPICA

As propriedades qumicas dos elementos so determinadas quase que

exclusivamente pelo nmero e arranjo dos eltrons atmicos. Este nmero e
arranjo so, por sua vez, determinados pela carga nuclear. Portanto, os istopos
de um mesmo elemento tero, praticamente, propriedades qumicas idnticas.
Existem pequenas diferenas nas propriedades qumicas devidas s pequenas
variaes no tamanho nuclear e s pequenas diferenas de massas entre
diferentes istopos, sendo essas diferenas suficientes para permitir a separao
de istopos de um mesmo elemento. Entretanto para a maioria das finalidades as
propriedades qumicas dos istopos podem ser tomadas como iguais.
A grande importncia do mtodo do traador que os istopos de um dado
elemento, quer seja radioativo ou estvel, podem ser identificados numa mistura
normal dos istopos deste elemento, conforme o mesmo encontrado na
natureza, possibilitando o acompanhamento do elemento nos diferentes
compartimentos do sistema em estudo (qualitativa e quantitativa).
3.1 O Mtodo do Traador Isotpico
O mtodo do traador isotpico, segundo Wolf (1969), usado de trs
maneiras: (i) para obter evidncias da sntese (incorporao) e relaes precursor
- produto entre compostos conhecidos; (ii) no isolamento, purificao e
identificao de intermedirios desconhecidos numa cadeia de reaes; (iii) como
uma ferramenta analtica no acompanhamento do curso de uma reao, de
compostos conhecidos. Nessa classificao tem-se que (i) e (ii) referem-se ao uso
da tcnica, mais sob o aspecto qualitativo e (iii) refere-se a tcnica analtica por
diluio isotpica p.d., ou seja, de carter quantitativo.
Um exemplo clssico que bem demonstra a utilidade do mtodo com
traador isotpico, sobre a evidncia de relaes precursor - produto, foi o estudo
da origem do oxignio molecular na reao fotossinttica:
luz

nCO2 + nH2O

O2 + (CH2O)n

Em 1941, a seguinte pergunta era feita: o oxignio evoludo na reao

fotossinttica originrio do dixido de carbono, da gua ou de ambos? O
problema foi elucidado por Rubin e colaboradores (Devlin & Barker 1971) fazendo
crescer algas (Chlorella pyrenoidosa) em soluo contendo KHCO3 com pH10.
Quando as algas cresceram em meio contendo H 218O, a razo

18

O/16O do O2

evoludo (determinado por espectrometria de massas) foi igual a da gua

marcada com

18

O. Fazendo as algas crescerem em meio com gua comum

contendo KHC18O2, o O2 evoludo no estava enriquecido em

18

O. Aps este

estudo ficou esclarecido que o oxignio da fotossntese tinha como origem a

gua.
Outro exemplo clssico do uso da tcnica de traador na identificao de
intermedirios desconhecidos em cadeias de reaes, trata-se dos trabalhos de
Calvin e colaboradores em estudos da fixao do dixido de carbono no processo
da fotossntese (Devlin & Barker, 1971). O emprego do gs carbnico marcado
com

14

C em experimentos com plantas (algas) expostas luz, permitiu a

identificao dos compostos estveis derivados da assimilao do

14

CO2,

elucidando o ciclo da reduo do carbono, que chamado ciclo de CalvinBenson, sendo um dos mais bem estudados aspectos do processo fotossinttico.
O mtodo do traador isotpico tem sido empregado associado tcnicas
qumicas e bioqumicas: como a fotografia (autoradiografia) e cromatografia, entre
outras. Em estudos em que quantificaes so necessrias, o princpio da
diluio isotpica torna-se importante.
3.2 O Mtodo do Traador Isotpico para Nitrognio
As aplicaes do mtodo de traador com o istopo estvel

15

N permitem

avaliar as transformaes individuais do N no solo, mesmo quando mltiplas

transformaes ocorrem simultaneamente no meio. O mtodo marca o caminho
dos dois istopos de N ( 15N e

14

N) simultaneamente, fornecendo informaes

acerca do sistema e estimando as taxas de transformao do N.

As tcnicas de traador com

15

N, que tm sido usadas em estudos dos

processos de transformao do N no solo, podem ser classificadas, de acordo

com Hart & Myrold (1996), como: (i) tcnica do traador 15N - quando um substrato
ou fonte marcado com

15

N, e o movimento do istopo no sistema monitorado

no tempo, de forma qualitativa e/ou quantitativa; (ii) tcnica da diluio do istopo

15

N - quando um pool de N do solo marcado com

seu contedo e o seu enriquecimento de

15

15

N e a taxa na qual muda

N (porcentagem de tomos)

monitorado, em vista da diluio pelo influxo de

natural de

15

14

N; (iii) tcnica da abundncia

N - quando leves diferenas no enriquecimento de

15

N, como

resultado da discriminao biolgica durante longo perodo, so usadas para

avaliar as relaes substrato-produto a longo prazo; (iv) tcnica da distribuio
dos istopos de N - uma nova variante da tcnica de traador para nitrognio e
aplica-se exclusivamente para a reao de desnitrificao quando o N do

15

NO3-

da origem ao 15N2O e 15N2.

O mtodo do

traador

15

N, de mais amplo uso em estudo das

transformaes de N no solo, envolve a adio de um substrato- 15N de um

processo de interesse e observa-se a acumulao do istopo no produto. Os
primeiros estudos das transformaes no N no sistema solo-planta com o traador
15

N foram realizados usando essa tcnica.

Muitos trabalhos pioneiros empregaram esse traador na avaliao

qualitativa da transformao do N. Alguns exemplos de descobertas que seriam

difceis de serem feitas sem o uso do

15

N so: o uso preferencial de NH 4+

comparado com o NO3- por microrganismos heterotrficos (quimiorganotrficos)

do

solo;

competio

dos

microrganismos

nitrificadores

autotrficos

(quimiolitotrficos) com os quimiorganotrficos pelo NH 4+ do solo, mesmo em

condies de elevada disponibilidade de matria orgnica.
Nos ltimos 35 anos, a tcnica de traador com o istopo

15

N contribuiu

decisivamente para aumentar o entendimento sobre as transformaes

do

nitrognio no sistema solo-planta. O nitrognio na planta derivado ou proveniente

do fertilizante (Ndff, Nppf ou Npdf), obtido por princpios de diluio isotpica,
permite identificar num produto (na planta, por exemplo), a contribuio da fonte
de interesse aplicada ao solo, e que nesse tipo de estudo marcada com o
istopo estvel 15N.

3.3

Aplicaes do Mtodo do Traador com Istopos Estveis de

Elementos Leves

As aplicaes do mtodo de traador com istopo estvel de boro, carbono

e enxofre, como exemplos, podem ser feitas com compostos enriquecidos nos
istopos naturalmente menos abundantes dos elementos:

10

B,

13

C e

34

S,

respectivamente, ou, mesmo, com uso das variaes na razo isotpica natural
(%o) no caso de carbono e enxofre.
Em nutrio animal a tcnica do traador til em estudos de seletividade
de pastagens por animais domsticos por meio de medidas de %o 13C nas fezes.
Como exemplo, tem-se a determinao da proporo de leguminosa (planta C3) e
gramnea (C4) na dieta de bovinos como realizada por Loureno & Matsui (1981) .
Na Cincia do Solo, valores %o

13

C tem sido usados na avaliao do

turnover da matria orgnica do solo (Boutton, 1996). No sistema solo-planta a

razo natural dos istopos de carbono ( 13C/12C), no carbono orgnico do solo,
contm informaes relativas presena ou ausncia de plantas do ciclo
fotossinttico C3 (baixa razo

13

C/12C) e C4 (alta razo 13C/12C) na comunidade de

plantas do passado e a contribuio relativa da comunidade na produtividade

primria lquida, no tempo. Mudanas e alteraes na produtividade relativa de
plantas C3 e C4 em um ecossistema, no tempo, freqentemente atribuda s
mudanas ou distrbios no regime ou clima. Medidas isotpicas do carbono da
matria orgnica do solo tambm so usadas: para documentar os efeitos das
prticas de uso da terra e na estrutura do ecossistema. Como exemplo tem-se
determinao da proporo do carbono da matria orgnica do solo (MOS)
originrio de um cultura recente de ciclo fotossinttico C4 (cana-de-acar),
implantada aps predominncia de cobertura vegetal de plantas C3 (floresta)
(Vitorello et al, 1989).
A tcnica do traador com medidas de %o 13C tambm tem sido de grande
utilidade em avaliaes de adulteraes de alimentos (mel) e bebidas (vinho,
conhaque, vinagre etc.).
Em hidrologia o mtodo da diluio isotpica de valores de %o 2H e %o
18

O da gua de rios tem sido de utilidade em avaliaes das vazes relativas de

tributrios de um rio principal (Matsui et al., 1972).

3.4

O Principio da Diluio Isotpica em Quantificaes com o Uso

de Radionucldeos Artificiais (ex.: 32P, 35S, 45Ca etc.)

Considerando que o produto final (P) contendo um elemento ou nutriente

objeto de estudo, ser formado a partir de um substrato A (sA), em que o istopo
do elemento no est presente, e tambm de outro, substrato B (sB), no qual
adiciona-se o istopo do elemento em questo (ex.: fsforo na planta absorvido
do solo - substrato A, e do fertilizante - substrato B), como representado na Figura
1, a condio bsica que deve ser satisfeita representada pela equao 1.

QIP = (QIP)sB ..............................................................................

(1)

onde: QIP significa a quantidade do istopo no produto e (QIP)sB a quantidade do

istopo no produto derivado do substrato B.

Figura 1. Diluio isotpica de radionucldeos artificiais, num sistema substrato produto, sem marcao no substrato A e com marcao artificial no
substrato B.

Por definio, a atividade especfica de uma amostra devido s

desintegraes radioativas dada na expresso 2.
AE = [ (QI) / (QN) ] ......................................................................... (2)
significando: AE - atividade especfica; QI - quantidade do istopo artificial do
nutriente na amostra; QN - quantidade total do elemento na amostra.
Portanto, as atividades especificas para amostras do substrato e do
produto, determinadas no mesmo aparelho detector de radioatividade, so
expressas por:
(AE)P = [ (QIP) / (QNP)] ...........................................................

(3)

(AE)sB = [ (QI)sB / (QN)sB] = [ (QIP)sB / (QNP)sB ] ......................

(4)

significando: QIP - quantidade do istopo no produto; QNP - quantidade do

elemento (nutriente) no produto; (Ql)sB - quantidade do istopo no substrato B;
(QN)sB - quantidade do elemento no substrato B; (QNP)sB- quantidade do
nutriente no produto derivado do substrato B; (QIP)sB - quantidade de istopo no
produto derivado do substrato B
A igualdade prevista na equao (4) vlida, considerado nulo o
fracionamento entre I e N. De (4) tem-se que a razo entre a quantidade do
istopo (I) e do elemento (N) no substrato (sB) e a mesma daquela que ir fazer
parte do produto, devendo ser iguais.
(QI)sB / (QN)sB = (QIP)sB / (QNP)sB

......................................... (5)

Das equaes (3), (4) e (1), chega-se que:

(AE)P . QNP = (AE)sB . (QNP)sB ......................................... (6)
ou,
(QNP)sB = [(AE)P / (AE)sB] . QNP

.......................................... (7)

A equao (7), tambm chamada de equao de diluio isotpica direta,

d a quantidade do elemento no produto derivado ou proveniente do substrato B.
O valor de (QNP)sA obtido de (8) que chamada de equao de diluio
isotpica indireta.
(QNP)sA = QNP - (QNP)sB = QNP . { 1 [(AE)P / (AE)sB] }

.......... (8)

3.5 Princpio da Diluio Isotpica em Quantificaes com Uso de

Istopos Estveis ( 10B, 15N e 34S )
Quando um produto que contm o nutriente formado do substrato A (sA),
em que os istopos do elemento ocorrem naturalmente (abundncia natural), e do
substrato B (sB), que contm os istopos do nuriente em estudo ( 10B e 11B;15N e
14

N;

32

S e

34

S) em proporo diferente da natural (material marcado ou

enriquecido), como ilustrado na Figura 2, o balano de massa e o balano

isotpico que devem ser satisfeitos esto representados pelas equaes (9) e
(10).

Figura 2. Diluio isotpica em um sistema substrato - produto com marcao

natural no substrato A e artificial (marcado) no substrato B.

QNP = (QNP)sA + (QNP)Sb

...........................................................

(9)

QIP = (QIP)sA + (QIP)sB ............................................................... (10)

significando QNP e QIP, respectivamente, o contedo, no produto, do elemento
(B, N ou S) e o do istopo ( 10B,

15

N ou

34

S). Os subscritos sA e sB denotam o

nutriente e o respectivo istopo derivado do substrato A e B respectivamente.

A abundncia (Ab), expressa em % de tomos do istopo pesado (ou o
menos abundante) em relao ao nmero total de tomos do elemento (ex.: % de
tomos de

10

B,

15

N ou

34

S), obtida da determinao da razo isotpica por

espectrometria de massas. Assim, para os trs compartimentos da Figura 2, tmse as abundncias (Ab), expressas em termos de frao:
(Ab)P = (QIP) / (QNP) .............................................................. (11)
(Ab)sA = (QI)sA / (QN)sA = (QIP)sA / (QNP)sA ........................
(Ab)sB = (QI)sB / (QN)sB = (QIP)sB / (QNP)sB

(12)

................. (13)

significando, (QI)sA ou (QI)sB e (QN)sA ou (QN)sB, respectivamente, a

quantidade do istopo e do elemento no substrato A ou B (sA ou sB). (QIP)sA ou
(QIP)sB e (QNP)sA ou (QNP)sB , respectivamente, a quantidade do istopo e a
do elemento no produto derivado do substrato A ou B (sA ou sB). As

igualdades

previstas nas equaes (12) e (13) so vlidas, considerado desprezvel o

fracionamento nos istopos do elemento. Assim, das equaes (10), (11), (12) e
(13), chega-se (14) denominada de equao de diluio isotpica:
(Ab)P . QNP = (Ab)sA (QNP)sA + (Ab)sB . (QNP)sB

.................... (14)

Da (9) e da (14), chega-se (15):

(QNP)sB = Nppf = { [(Ab)P - (Ab)as] / [(Ab)sB - (Ab)sA)] } . QNP ....

(15)

significando Nppf o nutriente (B, N ou S) no produto derivado do substrato

marcado (sB)
Como (Ab)sA representa a abundncia natural de 10B, 15N ou 34S (19,78% de
tomo de

10

B; 0,366% de tomos de

15

N ou 4,21% de tomos de

34

S), muitas

vezes a (15) vem expressa em termos de porcentagem de tomos em excesso,

como indicado em (16).
(QNP)sB = Nppf = [(Ab excesso)p /(Ab excesso)sB ] . QNP

......... (16)

.
onde:
(Ab excesso)p = (Ab)P - (Ab)sA

................................................... (17)

(Ab excesso)sB = (Ab)P - (Ab)sB

................................................... (18)

Pode-se ainda calcular o teor (porcentagem) do nutriente no produto

proveniente dos substratos: %(NPP) sB e %(NPP)sA, independentemente das
determinaes de (QN)sA, (QN)sB e QNP, por (19) e (20).
%(NPP)sB = [(Ab excesso)p / (Ab excesso )sB] . 100 ..................

(19)

%(NPP)sA = 100 - %(NPP)sB

(20)

..................................................

A equao (15) expressa a recuperao quantitativa do nutriente do

substrato B (exemplos: B/N/S-fertilizante, B/N/S da matria orgnica) no produto
(exemplos: B/N/S-planta, B/N/S-solo, B/N/S-lixiviado).
O clculo da recuperao porcentual no produto do nutriente do substrato B
realizdo pela equao (21).
%R = [(QNP)sB / (QN)sB] . 100 = [ Nppf / (QN)sB] . 100

............. (21)

onde (QNP)sB a quantidade do nutriente no produto derivado do substrato B (por

exemplo: B/N/S na planta) e (QN)sB ou Nppf e a quantidade do nutriente no
substrato B ou o nutriente no produto derivado do substrato marcado (por
exemplo a dose de B/N/S aplicado ao solo como fertilizante).

As equaes (7) e (15) so idnticas, em ltima anlise, diferindo somente

quando a ocorrncia ou no do istopo naturalmente. Essas equaes so
apresentadas correntemente na literatura na rea de Cincia do Solo com
diferentes notaes e como exemplo pode-se citar: Pdff ou Ppdf ("phosphorus in
the plant derived from fertilizer" ou fsforo na planta derivado do fertilizante,
respectivamente); Sdff (sulfur in the plant derived from fertilizer) avaliado tanto
com o radioistopo

35

S como com o istopo estvel

34

S; Ndff ou Nppf/Npdf

("nitrogen in the plant derived from fertilizer" ou nitrognio na planta

proveniente/derivado do fertilizante, respectivamente); Bdff (boron in the plant
derived from fertilizer).

4. REFERNCIAS

BOUTTON, T.W. Stable carbon isotopes ratios of soil organic matter and their use
as

indicators

of

vegetation

and

climate

change.

In:

BOUTTON,

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