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GUA N 9: INVESTIGACIN DE SALMONELLA EN ALIMENTOS

1. INTRODUCCIN
Todas las Salmonellas deberan ser consideradas como potencialmente
patgenas para el ser humano y los animales. La nica forma de transmisin
es la oral, por lo que es de suma importancia el anlisis de los alimentos para
detectar su presencia en ellos (Escobar, 1994, p 79).
Los alimentos ms contaminados son los de origen animal, incluye huevos
crudos, ovoproductos, leche cruda y productos lcteos, carnes y derivados,
aves. La infeccin se disemina en los animales por los alimentos concentrados
para animales como por ejemplo harinas de pescado y de sangre (Escobar,
1994, p 79).
El hombre, los animales domsticos y salvajes, incluidos las aves de corral,
porcinos, bovinos, roedores y animales caseros como tortugas, polluelos,
perros y gatos son reservorios importantes de Salmonellas (Escobar, 1994, p
79).
2. OBJETIVOS
1.

Investigar la presencia de Salmonella en alimentos de origen animal y


en derivados vegetales (harinas de cereales)

3. MATERIALES
Medios de cultivo
Agua peptona tamponada
Agar Hecktoen
Agar BPLS
Caldo tetrationato de sodio
Caldo selenite- cistina
Caldo nitrato
Caldo MR-VP

Reactivos
Coloracin de gram
Reactivo de Kovacs
Griess
Alfa naftol
KOH 40%
Rojo de metilo
Peroxido hidrogeno 3%

Agar citrato
Agar urea
Agar kligler
Agar Lia
Agar SIM
Agar XLD
* Algodn y alcohol al 70%
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4. PROCEDIMIENTO
4.1. DETERMINACIN DE SALMONELLAS

Materiales*
Homogenizador
Balanza
Cuchillos-cucharas
Incubadora
Pipetas 1 y 10mL
Asa bacteriolgica
Bolsas
de
polipropileno
Gradilla
Tubos de ensayo
Cajas de petri

4.1.1. Enriquecimiento no selectivo


a. Pesar 25g del producto y disolverlo en 225 ml de caldo lactosado o
agua peptonada tamponada.
b. Mezclar e incubar a 37C por 18-24 horas.
4.1.2. Enriquecimiento selectivo
1. Pipetear 1ml del anterior cultivo en 10 ml de Caldo Selenite-Cistina e
incubar en bao serolgico a 43C por 24 horas.
2. Pipetar otro mililitro y adicionarlo en un tubo que contenga 10 ml de
caldo tetrationato verde brillante e incubar en bao sexolgico a 43C
por 24 horas.
4.1.3. Siembra en agar selectivo
1. Repicar en dos de los siguientes medios selectivo: agar Hecktoen /
XLD / BPLS,a partir de los caldos de enriquecimiento selectivo
2. Incubar de 35 a 37C por 24-48 horas.
4.1.4. Identificacin bioqumica
1. Observar las colonias tpicas: en agar Hecktoen vedes con o sin
centro negro oscuro, en BPLS rojas o rosadas con halos rosados.
2. Sembrar las colonias tpicas de Salmonellas de cada uno de los
agares en medio SIM, Kligler o TSI, LIA, Citrato, Caldo MR-VP, Urea,
Nitrato y realizar la prueba de oxidasa.
3. Incubar las pruebas y buscar en las tablas de identificacin
bioqumica.

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