Flagelados

(Superclase Mastigophora)

Flagelados con kinetoplasto

(orden Kinetoplastida)

Familia Trypanosomatidae

Trypanosoma cruzi
Causante de la Enfermedad de chagas mazza (tripanosomiasis americana)
La enfermedad de Chagas o Tripanosomiasis Americana es una enfermedad parasitaria zoontica
causada por el protozoo flagelado Trypanosoma cruzi.
Esta enfermedad fue descripta por Carlos Chagas.

El Trypanosoma cruzi pertenece a la familia Trypanosomatidae, orden Kinetoplastida.

Presenta varias fases morfologicas:

Epimastigote: forma flagelar.

Amastigote: forma intracelular ovalada sin flagelo.
Tripomastigote: presenta un unico flagelo que se origina de la proximidad del kinetoplasto
(estructura de ADN localizada en la unica mitocondria del parasito). El flagelo discurre a lo
largo del parasito y esta rodeado por una membrana ondulada. Estas estructuras le
proporcionan al parasito una movilidad considerable.

Esta enfermedad es endmica en America Latina y se extiende desde el sur de los Estados
Unidos hasta el centro de Argentina y Chile. Es exclusiva de America.
Segn datos de la OMS existen en la actualidad a 16-18 millones de personas infectadas, se
producen 300.000 nuevos casos por ao y es responsable de mas de 50.000 muertes por ao.
En la Argentina se calculan que viven 2,5 millones de personas infectadas.
En las zonas endmicas la enfermedad se transmite por insectos vectores triatomineos. Existen
mas de 100 especies conocidas pero solo 6-7 de ellas transmiten la enfermedad.

Triatoma infestans
El vector mas importante es el Triatoma infestans (conocido como "vinchuca" o chinche).

Otro vector del mal de Chagas

Otros Vectores reconocidos:

Panstrongylus megistus.
Panstrongylus geniculatus.
Rhodnius prolixus.
Rhodnius neglectus.
Triatoma brasilensis.
Triatoma sordida.
Triatoma pallidipennis.

En la actualidad, la enfermedad de Chagas es un problema de salud pblica en pases como

Espaa y los Estados Unidos debido a la intensa migracin de personas desde zonas endmicas.

CICLO DE VIDA

El insecto triatoma infestans se infecta al ingerir sangre de los animales o seres humanos
con tripomastigotes circulantes.
Esta forma del parasito se transforma en el intestino medio de la "vinchuca"
en epimastigote.
Los epimastigotes se multiplican y migran al intestino posterior donde se tornan
infectivos: tripomastigotes metaciclicos.

TRANSMISION VECTORIAL

Durante su alimentacin o posterior a la misma, el Triatoma infestans defeca descargando

el parasito sobre la piel (que en el ser humano suele ser la piel de la cara).
La inoculacion del parasito ocurre generalmente debido al rascado, al arrastrar el parasito
a la region lesionada o a una mucosa o conjuntiva sana.
En el hospedero el parasito se transforma en amastigote (estadio de forma ovalada, de 3
micras de diametro y localizado en el citoplasma de la celula).
Al multiplicarse, ocupa la celula del huesped y se diferencia en tripomastigotes, y luego
rompe la celula. Asi invaden los tejidos locales o se diseminan por via hematica a zonas
distantes.
El parasito tiene predileccion por el musculo estriado, las celulas nerviosas y de la glia pero
puede encontrarse en cualquier organo o tejido.
El parasito mantiene una parasitemia de caracter infeccioso para los vectores.

Este ciclo vital se puede divider en:

Ciclo domestico: el vector se encuentra en viviendas precarias conocidas como "ranchos"

e la infeccion del ser humano se produce en la vivienda.
Ciclo selvatico: el vector se encuentra en los arboles y afecta a mamiferos como los
armadillos. Los mamiferos inferiores pueden adquirir la infeccion al ingerir los insectos
infectados.
Ciclo peridomestico: el parasito afecta a roedores, perros y gatos que conviven con el
hombre.

OTRAS POSIBLES FORMAS DE TRANSMISION

Transfusional.
Transmisin congnita o transplacentaria.
o Tasa de transmisin: 0,7-10 % segn el rea geogrfica.
Brasil: 1 %.
Argentina: 4 %.
Trasplante de organos: rin, corazn, mdula sea, etc.
Contaminacin accidental en el laboratorio.
En menor medida:
o Transmisin oral por jugos (de azucar de caa o de frutas) contaminadas con
triatominos o sus deyecciones.

CUADRO CLINICO

El perodo de incubacin estimado es de 1 semana (al menos).

El 70-90 % de las infecciones son asintomticas.
El resto se manifiesta con el cuadro de "Chagas Agudo".

CHAGAS EN FASE AGUDO

Duracin: 2-4 meses.

En el sitio de inoculacin del parasito aparece una lesin conocida como "chagoma".
Si la piel es el sitio de ingreso (del parasito) sta presenta eritema e induracion.
Si es la conjuntiva, el paciente presenta edema periorbital indoloro: signo de Romaa.
Cercano al sitio de inoculacion aparecen adenopatias regionales.
Adems puede presentar un sindrome mononuclesico:
o Fiebre, adenopatas generalizadas, hepatoesplenomegalia y rash transitorio.
Otras formas agudas de presentacion descriptas son:
o Miocarditis.
o Meningoencefalitis.

CHAGAS EN FASE CRONICO

Luego de la infeccin el paciente infectado puede ingresar en un perodo conocido

como Forma Indeterminada:
o Solo manifestado por la presencia de anticuerpos frente a antigenos de T. cruzi y/o
parasitemia asintomatica.
o Por lo tanto debe tener: ECG en reposo y estudios radiologicos de Torax, Esofago
y Colon normales.

Luego de aos (a los 40-50 aos de edad si la infeccion se produjo en la infancia) pueden
aparecer manifestaciones clinicas como:
o

Forma Cardiaca (Cardiopatia Chagasica)

Se destaca por su caracter fibrosante.
Se manifiesta con arritmias, insuficiencia cardiaca de predominio derecho,
fenomenos tromboembolicos, aneurismas ventriculares.
La primera manifestacion puede ser una muerte subita.
Las arritmias mas frecuentes son el bloqueo completo de rama derecha y
el hemibloqueo anterior izquierdo.

Forma Digestiva:
Los llamados "Megas":
Megaesofago y Megacolon que se manifiestan por disfagia y constipacion,
respectivamente, entre otros sintomas.

Forma Reactivada:
Ocurre en situaciones de inmunodepresion.
Reaparece el parasito en sangre periferica, liquido cefalorraquideo u otro
fluido o tejido (Ej: liquido pericardico).
En pacientes con HIV el mayor riesgo se presenta en aquellos individuos
con recuento de linfocitos T CD4 menores a 100-200 por microlitro. Se
manifiesta como una lesion ocupante de espacio cerebral o una
meningoencefalitis difusa aguda.

DIAGNOSTICO
En la Fase Aguda de la enfermedad son de utilidad:

Examen microscpico de sangre perifrica:

o Gota fresca: nos demuestra la movilidad del parasito.
o Gota gruesa: teida con Giemsa.
o Microhematocrito (procedimiento de concentracin):
Utiliza 6 capilares hematocrto.
Sensibilidad: 97,4 %.
Para diagnostico de infeccion congenita se utiliza en nios menores de 6
meses.
Hemocultivos en medios especiales:
o Como el medio NNN.
Xenodiagnstico.
Pruebas serolgicas:
o IgM para Chagas es positiva a los 20-40 dias de iniciado los sintomas.
o Se puede demostrar seroconversion al comparar muestras pareadas.
Hemograma: linfocitosis.
Hepatograma: ligera elevacion de las transaminasas.
Reaccin en cadena de la polimerasa:
o Nested PCR.
o Puede ser usado como mtodo diagnostico de transmisin congenita.
o Tambin es til para monitorear la respuesta al tratamiento en los nios.

En la Fase Crnica, el diagnstico se realiza mediante la deteccin deanticuerpos IgG que se

unen especificamente a antgenos del parasito:

Debido a la existencia de falsos positivos (con leishmaniasis, sifilis y malaria por ejemplo)
para todas las pruebas bioquimicas existentes se deben realizar al menos 3 pruebas
diferentes.

Las pruebas utilizadas son:

o Hemaglutinacion indirecta (HAI),
o ELISA
o Inmunofluorescencia indirecta (IFI).
o Western blot:
En los casos de chagas congnito permitira comparar las diferentes
bandas presentes en la madre y en el recin nacido y as diferenciara los
anticuerpos transmitidos de forma pasiva por la madre de aquellos
sintetizados por el neonato.
Tambin permitira observar la variacin de las bandas durante el
tratamiento del neonato.

La presencia de 2 pruebas positivas confirma el diagnstico.

En estudios de investigacin tambin se utiliza la "nested PCR" en enfermos crnicos.

TRATAMIENTOS
FARMACOS EXISTENTES

Benznidazol (comprimidos de 100 mg):

o Dosis: 5-10 mg/kg/dia VO divididas en 2 o 3 tomas por 60 das.
o Efectos adversos: polineuropata perifrica, erupcin cutnea y granulocitopenia,
sintomas gastrointestinales.

Nifurtimox (comprimidos de 30 mg y 120 mg):

o Dosis: 8-15 mg/kg/dia VO dividas en 4 tomas por 90 a 120 dias.
o Permite la curacion del 70 % de los pacientes tratados.
o Efectos adversos:
Gastrointestinales.
Neurologicos.
En el chagas congnito la respuesta teraputica se suele evaluar con el microhematocrito
que se negativiza en el 100 % a las 3 semanas.

FARMACOS EN ESTUDIOS

Posaconazol.
Profarmaco del Ravuconazol: Molecula E-1442
o Los Ensayos Clinicos se realizaran durante el 2010.
Interferon gamma recombinante.

SEGUIMIENTO LUEGO DE LA INFECCION AGUDA

Electrocardiograma cada 6 meses para evaluar la necesidad de marcapasos.

Tripanosomas brucei

Trypanosoma brucei brucei

TREU667
(forma sangunea, imagen por contraste de fase), la barra mide 10 m.
CLASIFICACIN CIENTFICA
Reino:

Protista

Filo:

Euglenozoa

Clase:

Kinetoplastea

Orden:

Trypanosomatida

Familia:

Trypanosomatidae

Gnero:

Trypanosoma

Especie:

T. brucei

Es un protista parsito que causa la tripanosomiasis africana (o enfermedad del sueo) en

humanos y animales enfrica. Hay tres subespecies de este parsito:

T. b. gambiense, que causa la tripanosomiasis crnica de inicio lento.

T. b. rhodesiense, que causa la tripanosomiasis aguda de inicio rpido.

T. b. brucei, que causa la tripanosomiasis animal africana (o nagana), al igual que otras
especies de tripanosomas.

La especie parasita dos huspedes, un vector insecto (la mosca tse-tse) y un husped mamfero.
Debido a la gran diferencia entre estos dos huspedes, la clula experimenta cambios complejos
para facilitar su supervivencia en el intestino de los insectos y en la sangre de los mamferos.
Asimismo, cuenta con una nica y notable cubierta de glicoprotena variante de superficie (VSG)
con el fin de evitar alsistema inmunitario del husped.
Mucha de la investigacin sobre Trypanosoma brucei se realiza primero sobre Crithidia fasciculata,
un organismo similar pero que no es peligroso para los seres humanos.

ESTRUCTURA DE LA CELULA
La
estructura
de
la clula es
la
tpica eucariota con
todos
los orgnulos.
incluyendo ncleo, mitocondrias, retculo endoplasmtico, aparato de Golgi etc. Entre las
principales caractersticas inusuales se incluye una nica gran mitocondria con una estructura
de ADN mitocondrial condensada, en asociacin con el cuerpo basal del flagelo, que inusualmente
constituye el mecanismo de organizacin delcitoesqueleto de la clula. La clula tambin presenta
una densa cubierta de glicoprotena variante de superficie (VSG).

Formas celulares de los Trypanosomatida.

Las formas en las que se presenta T. brucei son las siguientes:

Epimastigote. El cuerpo basal se encuentra en posicin anterior al ncleo, con un flagelo

largo conectado a lo largo del cuerpo celular.

Tripomastigote. El cuerpo basal es posterior al ncleo, con un flagelo largo conectado a lo

largo del cuerpo celular.

T. brucei se presenta usualmente en la forma tripomastigote y se diferencia en epimastigote

proliferativa en las glndulas salivares de los insectos. A diferencia de Leishmania, las
formas promastigote y amastigote no forman parte del ciclo vital de T.brucei.
La forma tripomastigote, a su vez, se diferencia en cuatro subtipos:

Procclico, presente en el intestino de la mosca, proliferativo.

Metacclico, en las glndulas salivares de la mosca, no proliferativo.

Esbelto (slender), en el flujo sanguneo del hombre, proliferativo.

Corto (stumpy), en el flujo sanguneo del hombre, preadaptado a la mosca tse-tse, no

proliferativo.

EL CICLO VITAL COMPRENDE LAS SIGUIENTES ETAPAS

Ciclo vital de Trypanosoma brucei.

Etapas en el ser humano. La mosca tse-tse inyecta tripomastigotes metacclicos en el flujo

sanguneo del husped al realizar una picadura (1 en la figura). Estos se transforman
en tripomastigotes sanguneos esbeltos y se multiplican por fisin binaria en varios fluidos del
cuerpo: sangre, linfa, lquido cefalorraqudeo, etc (2, 3). Algunos se transforman
entripomastigotes sanguneos cortos preadaptados a la mosca tse-tse (4).

Etapas en la mosca tse-tse. Cuando una mosca pica a un husped infectado, los
tripomastigotes cortos pasan al sistema digestivo de la mosca (5). En el intestino de la mosca
se transforman en tripomastigotes procclicos y se multiplican por fisin binaria (6). A
continuacin, abandonan el intestino y se convierten en epimastigotes (7). Estos se multiplican
en las glndulas salivares y se transforman en tripomatigotes metacclicos. Si la mosca pica al
hombre, se inyectan los tripomatigotes metacclicos y el ciclo se completa (1).

El genoma de T. brucei consta de:

11 cromosomas largos con una longitud de 1 a 6 millones de pares de bases.

6 cromosomas intermedios con de 300 a 600 millares de pares de bases.

Alrededor de 100 mini-cromosomas con aproximadamente 50 a 100 millares de pares de

bases que pueden presentarse en mltiples copias por genoma haploide.

Los cromosomas largos contienen genes, mientras que los pequeos tienden a llevar genes
implicados en la variacin antignica, incluidos los genes de VSG. El genoma ha sido secuenciado
y est disponible enwww.genedb.org.
El genoma mitocondrial se encuentra condensado en el cinetoplasto, una inusual caracterstica
nica de la clase Kinetoplastea. El cinetoplasto y el cuerpo basal del flagelo estn fuertemente
asociados a travs de la estructura del citoesqueleto.

La cubierta VSG
La superficie de la clula de los tripanosomas se compone de una capa uniforme de glicoprotena
variante de superficie (VSG). Esta capa tiene dos funciones:

Una barrera fsica que bloquea el reconocimiento de la clula por el sistema

inmune especfico del mamfero husped y oculta las protenas invariantes de la superficie
(como los canales inicos, receptores, etc) al reconocimiento del sistema inmunitario.

Una superficie variable para la clula, lo que permite la variacin y adaptacin especfica
para evitar al sistema inmunitario.

Se cree que esta capa, altamente variable, es codificada por varios cientos de copias alternativas
de un gen en el genoma. En cada clula, y en toda una poblacin de clulas en el husped, se
expresa la misma capa de protenas, pero esta expresin es inestable y es probable que cambie

con la prxima generacin. Se han apreciado tasas de conmutacin de hasta 1 por cada 50 clulas
en una generacin.
La protena se compone de un dominio terminal N muy variable de alrededor de 300 a 350
aminocidos, y un dominio terminal C ms conservativo de unos 100 aminocidos. El dominio
terminal C forma un paquete estructural de 4 hlices alfa, mientras que el dominio terminal N de
dominio forma un 'halo' alrededor de las hlices. La estructura terciaria de este halo es bastante
constante (sorprendente, dado que las secuencias de aminocidos varan mucho), lo que permite
el empaquetamiento prximo que se requiere para la formacin de la barrera fsica VSG. La VSG
se ancla a la membrana celular por medio de un ancla GPI, un enlace covalente del terminal C, a
travs de alrededor de 4 azcares, al cido fosfatidilcolina-inositol fosfolpido de la membrana
celular.
El genoma contiene mltiples copias del gen que codifica las VSG. Alrededor de 20 se encuentran
en los cromosomas largos e intermedios que estn activos y potencialmente transcritos (aunque
slo uno por clula). Alrededor de 100 se encuentran cerca de los telmeros de los minicromosomas. Estos no estn activos, pero si a travs de una recombinacin se traslada a un lugar
de transcripcin activa, producir una protena VSG funcional. Por ltimo, alrededor de 1000 se
encuentran en secciones repetidas en el interior de los cromosomas. Estos estn generalmente
inactivos, debido a secciones omitidas o codones de parada prematura, pero son importantes en la
evolucin de nuevos genes VSG. Se calcula que hasta un 10% del genoma T. brucei podra estar
compuesto por genes o pseudogenes VSG.
Tras la infeccin, el tripanosoma expresa una VSG en particular. Como el sistema inmunitario del
husped genera una respuesta concreta a esta capa de protenas, se producir una disminucin de
la poblacin de tripanosomas. En este punto, una clula que exprese una VSG alternativa ser
fuertemente seleccionada y repoblar la infeccin. El efecto general de este ciclo de proliferacin y
decaimiento de la poblacin debido al ciclo de la relacin predador/presa con el sistema inmunitario
del husped da lugar a una sucesin de episodios de infeccin, cada uno debido a una poblacin
con diferentes expresiones de cubiertas VSG.

Tripanosoma rangeli

Trypanosoma rangeli

(2) Leishmanias

Flagelados sin kinetoplasto

o Trichomonas tenax
o Trichomonas hominis
o Trichomonas vaginalis
o Giardia Liamblia
o Dientamoeba fragilis
o Chilomastix mesnii
o Enteromonas hominis
o Retortamonas intestinalis