TECNOLGICO NACIONAL DE MXICO

Instituto Tecnolgico de Oaxaca

Identificacin y aislamiento de
lectina de hongos comestibles
de la sierra de Oaxaca

INDICE
MARCO TERICO...........................................................................................4
LECTINAS....................................................................................................................... 4
ESTRUCTURA................................................................................................................... 4
CLASIFICACIN................................................................................................................ 5
HONGOS........................................................................................................................ 6
Basidiomycota............................................................................................................ 7
Zygomycota............................................................................................................... 7
Ascomicetos............................................................................................................... 8

TECNOLGICO NACIONAL E MXICO

HONGOS COMESTIBLES DE OAXACA......................................................................................8
LECTINAS FNGICAS........................................................................................................ 10
Instituto Tecnolgico de Oaxaca
MASA MOLECULAR Y LA ESTRUCTURA DE LA SUBUNIDAD..........................................................12
ESTRUCTURA................................................................................................................. 13
ALEURIAAURANTIA FUE LA
PRIMERA
LECTINA
DE
HONGOS PARA RESOLVER

LA

CRISTALINA.

ESTRUCTURA

EN

LA

ESTRUCTURA
CRISTALINA

B-HLICE Y UNA PEQUEA

B-SEET DOS HEBRAS QUE JUEGA UN PAPEL EN LA DIMERIZACIN............................13
UBICACIN.................................................................................................................... 14
APLICACIONES........................................................................................................... 15
TCNICAS DE IDENTIFICACIN Y AISLAMIENTO DE LECTINAS EN HONGOS......................................16
Mtodo de Elisa........................................................................................................ 16
Desarrollo de los mtodos inmunoqumicos..................................................................16
Dispositivos empleados de ELISA...............................................................................18
Fases de un ensayo de ELISA....................................................................................18
Tipos de ensayos ELISA............................................................................................ 20
Marcadores enzimticos ms comnmente utilizados.....................................................22
Caractersticas que deben reunir las enzimas para ELISA...............................................24
MTODO DE AGLUTINACIN DE PARTCULAS DE LTEX.............................................................24
AGLUTINACIN EN LATEX.......................................................................................24
Tipos de reactivo de ltex......................................................................................25
DE LA LECTINA CADA MONMERO CONSISTE UN SEIS PALAS DE PLEGADO
ANTIPARALELA

PROCEDIMIENTO.............................................................................................................. 25
INTERPRETACIN Y LECTURA............................................................................................ 26

ANTECEDENTES........................................................................................... 27
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA....................................................................31
HIPTESIS.................................................................................................. 31
JUSTIFICACIN............................................................................................ 31
OBJETIVO GENERAL.....................................................................................32
OBJETIVOS ESPECIFICOS...............................................................................33
DIAGRAMA DE ACTIVIDADES...........................................................................34
METIDOLIGA............................................................................................... 35
CRONOLOGA DE ACTIVIDADES.......................................................................37
BIBLIOGRAFIA............................................................................................. 38

Marco Terico
Lectinas
Las lectinas son un grupo heterogneo de protenas o glicoprotenas
agrupadas por su habilidad de reconocer y unirse a carbohidratos o
glicoconjugados con una alta especificidad. Estn ampliamente distribuidas en la
naturaleza y no tienen origen inmunolgico. 1
Son aglutinadoras de clulas y eritrocitos por excelencia y juegan un papel
importante en los mecanismos de reconocimiento e interaccin celular, as como
de precipitar glicoconjugados. 2
Las lectinas constituyen un interesante grupo de protenas de origen no inmune
que comparten en comn la propiedad de enlazarse de forma especfica y
reversible a carbohidratos, ya sean libres o que formen parte de estructuras ms
complejas. Contienen al menos 2 sitios de unin, de ah que puedan enlazarse en
primer lugar a un azcar especfico y en forma secundaria a una molcula
glicosilada

Estructura
Las lectinas estn compuestas por una cadena polipeptdica en la cual
pueden estar unidos o no uno o ms residuos de carbohidratos, normalmente de 2
a 15 monosacridos residuales, que pueden estar constituidos principalmente por
dos o ms azcares como: D-Manosa, D-galactosa, D.Glucosa, L-fucosa, N-acetilD-glucosamina, N-acetil-D-galactosamina, cido saliclico, glucosamina.

Clasificacin
Se han encontrado lectinas en una gran diversidad de seres vivos y as
tenemos
que
hay
varios
tipos:

Lectinas vegetales, se han encontrado en los cotiledones y endospermos de

las semillas de algunos vegetales como el trigo, frijol, soya.
Lectinas animales, que se han encontrado tanto en invertebrados como:
caracoles, cangrejos, camarones, moluscos, peces y lombrices, como en
vertebrados como el cerdo principalmente, que estn contenidas en rganos
sexuales.
Lectinas microbianasse localizan en la superficie de microorganismos tales
como bacterias, virus, hongos y parsitos.3,

Tipos de lectinas
Merolectinas: son protenas constituidas por un nico dominio estructural que
alberga un solo sitio de unin a carbohidratos.
Hololectinas: Contienen dos o ms dominios del mismo tipo estructural y funcional.
Quimerolectinas: Adems de poseer un dominio de unin de carbohidratos,
presenta otro dominio con actividad biolgica distinta al reconocimiento de
carbohidratos.

APLICACIONES
Las lectinas se consideran armas valiosas en el campo de la Gentica, la
Biomedicina y la Inmunologa. Su utilidad est basada en la propiedad que tienen
de combinarse con varios tipos de glicoconjugados presentes en las superficies
celulares y fluidos corporales.
Sus propiedades mitognicas permiten que se utilicen en estudios que
tienen como base la proliferacin de linfocitos en cultivos, como son:

La evaluacin de la produccin de citoquinas (interfern e interleuquinas) y

la expresin de sus receptores en sobrenadantes de cultivos de linfocitos
provenientes de pacientes con enfermedades de alto impacto social como
el sndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), la tuberculosis y la
leishmaniosis, entre otras.

La caracterizacin de algunos aspectos relacionados con la respuesta

inmune y fenmenos asociados con ellas como la inmunosupresin.

La interaccin entre virus, como por ejemplo entre el virus de

inmunodeficiencia humana (VIH) y el virus de la hepatitis B, as como la
susceptibilidad y resistencia a stos18-20

Evaluacin de la efectividad de terapias antirretrovirales de acuerdo con la

respuesta de los linfocitos a la estimulacin con las lectinas antes y
despus de la terapia, como por ejemplo en terapias contra el VHI.

Anlisis de funciones linfoproliferativas y

mononucleares causadas por algunas drogas.

Estudios acerca de la influencia nutricional en la proliferacin de linfocitos y

su cintica de proliferacin.

La induccin de genes en linfocitos.

La deteccin de anormalidades cromosmicas.

citotxicas

en

clulas

Se enlazan a sacridos de la superficie celular, lo que ha provisto a los

cientficos de tiles marcadores para emplearlos en tcnicas histoqumicas y en la

microscopia electrnica para estudiar la estructura y funcin de la membrana

plasmtica 15

Hongos
Basidiomycota
Deben su nombre a que las esporas sexuales se reproducen en basidios o clulas
en forma de mazo en cuyo extremo se desarrollan cuatro basiodiosporas. Algunos
como el champin son comestibles y otros como los gneros amanita El 25% de
las especies de hongo conocidas, existen unas 25000 especies, son hongos ms
evolucionados, terrestres, Saprfitos y parsitos, muchos son tropicales, Viven
asociados simbiticamente con las races de los rboles. Algunos son venenosos
y alucingenos.

Estructura

Hongos comestibles de Oaxaca

Oaxaca es considerado el estado con mayor biodiversidad en Mxico,
donde se conserva una gran tradicin etnomicolgica, sobre todo, en lo que se
refiere a los hongos enteognicos; con respecto a los hongos silvestres
comestibles

La siguiente tabla se encuentran algunos hongos del estado de Oaxaca.

Len Avendao, Hugo, Rosalva Martnez y Marco Vsquez Dvila, Instituto

Tecnolgico Agropecuario de Oaxaca, NOMENCLATURA ZAPOTECA DE HONGOS
COMESTIBLES DE DOS LOCALIDADES DE OAXACA

Lectinas fngicas

Lectinas fngicas se han aislado de micelio, conidios, esporas y

basidiomicetos cuerpos fructferos, un ejemplo es la lectina de hongo patgeno
Macrophominaphaseolina es extracelular en la naturaleza.
Algunas especies de hongos presentan varias lectinas que pueden estar
estrechamente relacionadas, difiriendo por ejemplo en su punto isoelctrico o
pequeas variaciones en el peso molecular, o ser muy diferentes llegando a tener
especificidades diferentes (aun presentando estructuras relacionadas) 4. Si bien
mucho se sabe sobre lectinas aisladas a partir de cuerpos de fructificacin, recin
en los ltimos aos se han publicado algunos trabajos sobre la obtencin de
lectinas a partir de micelio y en algunos casos a partir del extracto extracelular 5
Tambin han sido detectadas en distintas etapas del crecimiento fngico,
involucradas en dormancia, as como en morfognesis 6. La mayora de estas
lectinas estn constituidas por dos o cuatro subunidades que pueden ser o no
idnticas, unidas en general por enlaces no covalentes. Sin embargo existen
algunas excepciones como las lectinas monomricas de los hongos Lentinula
edodes6 y de Cordyceps militaris7 con pesos moleculares de 45 y 31 kDa,
respectivamente. El rango de peso molecular est entre 16 y 100 kDa para la
mayor parte de las lectinas fngicas reportadas, aunque la mayora corresponden
a valores entre 26 y 36 kDa 8. Muchas lectinas fngicas son glicosiladas y la
mayora presenta un contenido de carbohidratos entre 2 y 16 % A su vez, la
mayora de las lectinas fngicas presentan puntos isoelctricos en el rango de 5-8,
aunque se han reportado algunas con pI de 3.75 o 10.6 8.
A la fecha se han reportado muy pocas estructuras cristalinas de lectinas
fngicas. La lectina de unin a fucosa de Aleuria aurantia presenta una estructura
diferente a la dems lectinas conocidas. La lectina de Flammulina velutipes
presenta similitud estructural a la fibronectina humana. Las lectinas de Xerocomus
chrysenteron (XCL) y Agaricus bisporus (ABL) se asemejan a las actinoporinas,
una familia de toxinas formadoras de poros; ambas reconocen Gal-NAc y Gal,
mientras que ABL tambin reconoce al antgeno TF (transfer factor), un disacrido
sobreexpresado en glicoprotenas de la superficie celular en carcinomas humanos.
Tanto ABL como XCL presentan actividad antiproliferativa sobre diferentes lneas
celulares. La lectina de Sclerotium rolfsii tambin pertenece a la familia de lectinas
fngicas especficas del antgeno TF. Las lectinas de Coprinopsis cinerea (CGL2)
y Agrocybe cylindrae (ACG) comparten un dominio de reconocimiento de
carbohidratos con galectinas, una gran familia de lectinas animales de unin a -

galactsidos con un dominio de reconocimiento a carbohidratos altamente

conservado. Mientras CGL2 tiene especificidad nica y se une al tetrasacrido de
grupo sanguneo A, ACG reconoce sialoconjugados. La lectina de Laetiporus
sulphureus presenta un dominio N- terminal diferente y un Cterminal similar al
encontrado en algunas toxinas. La lectina de Psathyrella velutina, a diferencia de
otras lectinas fngicas conocidas, se une a Ca2+ de una manera similar que las
integrinas9
Se ha determinado la constante de afinidad para algunas lectinas fngicas.
La lectina de Fusarium solani present muy bajas constantes de afinidad para
mono y oligasacridos pero muy altas para glicoprotenas 8. En el caso de la lectina
de Ganoderma lucidum se observ dos veces mayor afinidad por N-glicanos que
por O-glicanos10. La lectina dimrica del hongo Aleuria aurantia presenta cinco
sitios de unin por subunidad, uno de los cuales tiene alta afinidad por fucosa y
oligosacridos que contienen fucosa11. Estudios comparativos de unin de las
lectinas de Aleuria aurantia (AAL) y Aspergillus oryzae (AOL) revelaron que AOL
presentaba constantes de afinidad 3 a 6 veces superiores para oligosacridos 1,6 fucosilados que AAL; a su vez slo AAL reconoca oligosacridos - 1,3
fucosilados12.
Dentro de las posibles aplicaciones de las lectinas fngicas se ha
demostrado que muchas de ellas tienen actividad antiproliferativa contra lneas
celulares
tumorales
humanas13
as
como
diversas
actividades
inmunomodulatorias. Adems, varias lectinas aisladas de cuerpo de fructificacin
de hongos basidiomicetes poseen especificidades hacia determinados
oligosacridos presentes en glicoprotenas de origen animal y son as, importantes
herramientas para la separacin de glicoconjugados y para la deteccin
histoqumica de oligosacridos especficos 14. Existe a nivel comercial, una
carencia de herramientas de afinidad altamente especficas, como pueden ser las
lectinas fngicas, que puedan aplicarse a la purificacin eficiente de una
glicoprotena dada, en forma rpida, a bajo costo y con probabilidad de ser
utilizadas a nivel deprocesos de produccin. Si bien se ha reportado la presencia
de ms de cincuenta lectinas en hongos, nicamente una, la proveniente de
Agaricus bisporus, est disponible comercialmente.

Masa molecular
subunidad

la

estructura

de

la

Masas moleculares de las lectinas fngicas van desde 15 hasta 90 kDa,

pero la mayora de ellos son entre 23-36 kDa, En general, la mayora de ellos son
protenas dimricas y subunidades se mantienen unidas por interacciones no
covalentes, con algunas excepciones, como impudicus Falo15 y Lactariuslignyotus,
en donde las subunidades estn unidas entre s por enlaces disulfuro, lectina L1
de Lentinusedodes es monomrico que tiene masa molecular 45 kDa. Una lectina,
LMC de Cordycepsmilitaris es tambin conmonomrica una masa molecular de 31
kDa. Algunos de ellas son las siguientes:

Las
lectinas
de
homotetrameric, ,
hexamericos.

La lectina de Hericiumerinaceum es un heterotetrmero con masa

molecular de 54 kDa y tiene dos subunidades diferentes, con masa
molecular de 15 y 16 kDa

Pleurocybellaporrigensy
Lactariusrufuslectina y

Agaricusblazei
son
Rhizopusstoloniferson

Int. Journal of Biological Chemistry 5: 1-20, 2011 ISSN 1819-155X / DOI: 10.3923/ijbc.2011.1.20

Estructura
La estructura B-hlice de seis palas tambin tiene tres residuos de fucosa unidos,
lo que sugiere que los sitios de unin, aunque muy similares en la geometra, no
tienen la misma afinidad por ligandos.
LectinaFlammulinavelutipes mostr pliegues nicos nunca antes observados
en lectinasans mostraron similitud Estructural a la fibronectina humana
lectina de Xerocomuschrysenterony Agaricusbisporus, actinoporins se
asemejan, una familia de toxinas formadoras de poros de las anmonas de
mar.

 Coprinuscinerea mostr pliegue similar a las galectinas, una gran familia de

lectinas de todas las clases de vertebrados.

Ubicacin
La pared celular de los hongos tiene una composicin distinta de la vegetal.
En ella se encuentran polisacridos y diversas protenas. Los polisacridos ms
abundantes son la quitina, el glucano y el manano, formada por un esqueleto
rgido de fibrillas de polisacridos y un material cementante de compuesto
amorfos,que permiten la organizacin de la pared celular y forma un gel viscoso.
Es muy complejo qumicamente y est asociado con los grupos de hongos2.

Figura 1: Diagrama esquemtico de la pared celular de C. Albicans

Tcnica de identificacin y aislamiento de

lectinas en hongos
Aglutinacion

Es la interaccin entre un anticuerpo y una partcula antignica que se visualiza por la

formacin de agregados o grumos macroscpicos. En este proceso, el anticuerpo es
conocido como aglutinina y el antgeno como el aglutingeno.

Aglutinacion en latex Es un mtodo de laboratorio para examinar ciertos anticuerpos o

antgenos Los anticuerpos o antgenos conocidos son unidos a partculas de ltex, con el
objeto de facilitar la visualizacin de la prueba.
Se pueden emplear otras partculas insolubles como el poliestireno o la bentonita
Aglutinacin en ltex DE FCIL USO PRESUNTIVO Muy cmodoMUY RPIDO CUALITATIVO
Y SEMICUANTITATIVOSENSIBLE Y ESPECIFICO

Reacciones de aglutinacin
La reaccin entre un antgeno particulado y un resultados de anticuerpos en la aglutinacin
visible llama aglutinacin.

Prueba de aglutinacin cualitativa

Las pruebas de aglutinacin se pueden usar de una manera cualitativa para ensayar la presencia
de un antgeno o un anticuerpo. El anticuerpo se mezcla con el antgeno en partculas y una
prueba positiva est indicada por la aglutinacin del antgeno particulado.

Las partculas de ltex

La polimerizacin en emulsin es el procedimiento que se aplica para la preparacin de
partculas de ltex. En primer lugar el estireno se mezcla con la solucin de tensioactivo (dodecil
sulfato de sodio), forma un miles de millones de micelas emulsionadas que son de dimetro
uniforme. A continuacin, se aade una pequea cantidad de persulfato de potasio a la misma
que es un iniciador de polimerizacin soluble en agua. Cuando termine el proceso de
polimerizacin, las cadenas de poliestireno se organizan en las micelas. La parte de hidrocarburo
de la cadena de poliestireno se une al centro y el ion sulfato de terminal a la superficie de las

esferas que est expuesta a la fase de agua. Otros hidrocarburos y sus derivados tambin se
utilizan para la produccin de las partculas de ltex uniformes, algunos de los ejemplos se
stryrene-dlvinylbenzene, metacrilato de metilo, estireno vinil tolueno, polivinil tolueno etc.
Tamao de las partculas de ltex son por lo general oscila entre 0.05m a 2 micras. Debido a
la presencia de iones de sulfato y sulfonato en la superficie de la partcula que proporciona una
carga superficial negativa inherente a la partcula.

Se pueden emplear otras partculas insolubles como el poliestireno o la bentonita

Prueba de aglutinacin de ltex incluye algunas de las ventajas son:

1.
Capacidad
para
obtener
2. Un
coste
prueba
3. Tiempo relativamente corto para obtener resultados.
1.

resultados
individual

semicuantitativos.
bajo.

Goldsby A.Richard, Kindt J. Thomas, A. Osborne Barbara, Kuby Janis, Kuby

Inmunologa, WH Freeman & Co
2.
John Ridley: Fundamentos de Ciencias de Laboratorio Clnico
3.
Barbara H. Estridge, Anna P. Reynolds, Norma J. Walters: Tcnicas bsicas de
laboratorio mdico

AGLUTINACIN EN LATEX

Antecedentes

Planteamiento del problema

Las lectinas se han convertido en herramientas muy tiles en laboratorios
biolgicos y en la medicina, por ello, se han extrado lectinas en animales,
vegetales, y micro organismos, una propuesta que se tiene para obtener estas
lectinas es, extraerlas de hongos comestibles, pero una de las dificultades para su
extraccin es, que dichos se encuentran constituidos en su mayora de un 80 o
90% de agua, esto nos pone en duda si sera factible la inversin en ls mtodos
para la extraccin de dichas lectinas.
Por lo que surge la siguiente pregunta:
Es viable, la inversin que se realizara, para obtener lectinas de hongos comestibles?

Hiptesis
Es seleccionado una especie de hongos comestible, la cual se somete a
deshidratacin, y se le aplicaron el mtodos de purificacin y aislamiento de lectinas,
para comprobar si existe la presencia y el tipo en las diferentes especies de hongos
comestibles.

JUSTIFICACIN
Oaxaca es considerado el estado con mayor biodiversidad en Mxico,
donde se conserva una gran tradicin etnomicolgica, sobre todo, en lo que se

refiere a los hongos enteognicos; con respecto a los hongos silvestres

comestibles. el estudio de los basidiomicetos, se ha enfocado hacia los hongos
comestibles ya que no poseen toxinas que pudieran causar alguna enfermedad
adems de que cuentan con muchas propiedades nutricionales tienen fibra
,protenas , aminocidos esenciales , cerca de doce vitaminas diferentes , las
cuales podemos encontrar en la pared celular del hongo , tambin pueden ser
una gran alternativa para la salud en el caso de las enfermedades crnico
degenerativas . Contienen propiedades nicas y diferentes a las aportadas por
otros alimentos ampliamente consumidos.
Las lectinas protenas que podemos encontrar en el hongo ha tenido gran
impacto debido a que son una herramienta invalorable en laboratorios biolgicos,
poseen propiedades , anticancergenas , antitumorales , estas protenas las
podemos encontrar en la pared celular pero debido a que la pared no es fcil
de romper resulta complicado su extraccin por ello los cientficos han buscado
extraerlas en vegetales y animales y no existen investigaciones acerca de las
lectinas de los hongos comestibles .
Al extraer lectinas se podra promover lo que sera el cultivo de hongos.
Podra ser una alternativa para el desarrollo de las comunidades de la
sierra de Oaxaca siendo esta regin la que mayor diversidad de hongos presenta
actualmente en nuestro pas, las investigaciones o inversin en este tipo de
procedimientos, no cuentan con el impulso o la prioridad que se necesita para
explotar los beneficios que se estos hongos brindan, es por eso que esta
investigacin o la aplicacin, se tiene que promover tanto en nuestro pas como en
el extranjero, en Europa se realizan este tipos de investigaciones, pero no cuentan
con regiones que brinden los hongos, tanto en variedad de especies como en
cantidad, como en esta regin del estado de Oaxaca, el desarrollo seria notable
para los habitantes que pueden cultivar los hongos en sus tierras.
De igual manera no solo sera vender los hongos para estas
investigaciones, si no tambin obtener beneficios para nuestra comunidad, y asi
podran obtener una mejor alimentacin, un ingreso econmico estable y
aprovechar los recursos ya existentes dentro de las poblaciones.
La gran demanda de los mercados internacionales sobre estos productos
puede ser una oportunidad para desarrollar actividades econmicas y ambientales
y que a su vez contribuir al manejo integral de los recursos forestales.

Objetivo General
Aislar e identificar lectinas de hongos comestibles de la sierra de Oaxaca.

Objetivos especficos

Reconocer las especies de hongos que se consideran como alimento , en

la sierra de Oaxaca para extraer el que tenga mejores condiciones .

Reconocer la tcnica particula de latex glucosiladas para

presencia de lectinas.

Seleccionar del hongo comestible las cepas fungicas

Elaborar extractos de hongos comestibles

hemaglutinante .

Realizar el ensayo de actividad hemaglutinante

Determinar la concentracin de lectiana

para analizar su actividad

Diagrama del actividades

RECOLECCIN DE
ELABORACIN DE EXTRACTOS
ACUOSOS
ANALISIS DE EXTRACTOS
FUNGICOS
Determinacin
de
concentracin
de protenas

identificar la

ENSAYO DE
ACTIVIDAD
HEMAGLUTINANTE

Tcnica de
partculas de ltex

Metodologa
Recoleccin de hongos: Se recolecta una especie de hongos
comestibles en la sierra de Oaxaca.
Preparacin de extractos acuosos
Se inocularan matraces con medio 1.25 % Extracto de Malta,
Los matraces se incubaran a 28 C a 100 rpm durante 14 das
Luego del perodo de incubacin se filtr para separar el micelio
y la fraccin extracelular
Tratar el micelio en mortero con N2 lquido
el polvo de micelio obtenido es resuspendido en buffer 50 mM
fosfato de sodio pH 7.4, suplementado con 0.15M NaCl (buffer
fosfato salino PBS).
Luego de dos horas de incubacin con agitacin se filtrara y
centrifugara durante 30 minutos a 8.000 rpm. El sobrenadante
obtenido se guarda para los anlisis posteriores.
Los sobrenadantes se utilizaron como material de partida para los
ensayos de actividad hemaglutinante.

Ensayo de actividad hemaglutinante HAG

Se estima mediante la realizacin de este mismo ensayo sobre diluciones seriadas
al medio de cada muestra.
se llevan a cabo en microplacas de titulacin de fondo redondo.
En cada pocillo se coloc 25 l de 0.15 M NaCl, 25 l de solucin de seroalbmina
bovina (BSA) al 1% en 0.15 M NaCl, 25 l demuestra y 25 l de suspensin de
glbulos rojos al 4 %.
Se mezcla por agitacin suave y se incuba la placa durante 30 minutos a
temperatura ambiente.
Se registraron como positivos aquellos pocillos en los que se observ aglutinacin
de los glbulos rojos y negativos en los que se observ sedimentacin fcilmente
redispersable por agitacin
Cada muestra se analiza por triplicado.

Ensayos de inhibicin de HAG

El ensayo se realiz siguiendo el mismo procedimiento que para el ensayo
de actividad HAG, pero sustituyndose 25 l de 0.15 M NaCl por 25 l del
carbohidrato en estudio (en las concentraciones que se indican) y
preparados en 0.15M NaCl.

Determinacin de la concentracin de protenas

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

12.

Cronologa de actividades
Febrero
Actividad

Marzo

Abril

RECOLECCIN DE HONGO
ELABORACIN DE EXTRACTOS
ACUOSOS
ANLISIS

DE

EXTRACTOS

FNGICOS
DETERMINACION

DE

CONCENTRACION

DE

PROTEINAS
ENSAYO DE

ACTIVIDAD

HEMAGLUTINANTE
PURIFICACION DE LECTINAS

Bibliografia
1. Budtz-jorgensen, e. (1990): etiology, pathogenesis, therapy and prophylaxis
of oral yeasts infections. acta odontol scand. 48: 61-69.

Mayo

2. Bencomo a, gmez p, basanta p. lectinas. propiedades biolgicas,

aplicaciones y perspectivas. revista cubana de hematologa e inmunologa.
1985; 1(2): p. 130-141.
3. Bird gmg. lectins: a hundred years. inmunohematoloyi. 1988; 4(3): 45-48.
4. Guillot J y Konska G (1997) Lectins in higher fungi. Biochemical
Systematics and Ecology 25:203-230
5. Tsivileva OM, Nikitina VE y Loshchinina EA (2008) Isolation and
characterization of Lentinus edodes (Berk.) singer extracellular lectins.
Biochemistry (Moscow) 73:1154-1161.
6. Guillot J y Konska G (1997) Lectins in higher fungi. Biochemical
Systematics and Ecology 25:203-230.
7. Jung EC, Kim KD, Bae CH, Kim JC, Kim DK y Kim HH (2007) A mushroom
lectin from ascomycete Cordyceps militaris. Biochimica et Biophysica Acta General Subjects 1770:833-838.
8. Khan F, Ahmad A y Khan MI (2007) Interaction of Fusarium solani Lectin
with Monosaccharides and Oligosaccharides: A Fluorometric Study.
Photochemistry and Photobiology 83:966-970.
9. Leonidas DD, Swamy BM, Hatzopoulos GN, Gonchigar SJ, Chachadi VB,
Inamdar SR, Zographos SE y Oikonomakos NG (2007) Structural Basis for
the Carbohydrate Recognition of the Sclerotium rolfsii Lectin. Journal of
Molecular Biology 368:1145-1161
10. Thakur A, Rana M, Lakhanpal TN, Ahmad A y Khan MI (2007) Purification
and characterization of lectin from fruiting body of Ganoderma lucidum:
Lectin from Ganoderma lucidum. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) General Subjects 1770:1404-1412
11. Olausson J, Tibell L, Jonsson BH y Pahlsson P (2008) Detection of a high
affinity binding site in recombinant Aleuria aurantia lectin. Glycoconjugate
Journal 8:753-762
12. Matsumura K, Higashida K, Hata Y, Kominami J, Nakamura-Tsuruta S y
Hirabayashi J (2009) Comparative analysis of oligosaccharide specificities
of fucose-specific lectins from Aspergillus oryzae and Aleuria aurantia using
frontal affinity chromatography. Analytical Biochemistry 386:217-221

13. Liua WK, Ho JCK y Ng TB (2001) Suppression of cell cycle progression by a

fungal lectin: Activation of cyclin-dependent kinase inhibitors. Biochemical
Pharmacology 61:33-37.
14. Mo H, Winter HC y Goldstein IJ (2000) Purification and characterization of a
Neu5Ac2- 6Gal1-4Glc/GlcNAc- specific lectin from the fruiting body of the
polypore mushroom Polyporus squamosus. Journal of Biological Chemistry
275:10623-10629.
15. Entlicher, G., K. Jesenka, L. Jarosova-Dejlova, M Jarnik and J. kocourek,
1985. Lectins: Biology, Biochemistry, Clinical Biochemistry. Walter de
Gruyter Inc., Berlin, New York, ISBN 10:3110102986, pp: 680.
16. Bernard d, davis. 1993. tratado de microbiologia. segunda edicin. edit.
salvat, editores. pp 1151.
17. Bohinski, robert c.1991.bioqumica.cap.10.quinta edicin.edit. addisonwesle
18. Cisterna r, campelo c, gorrino t, malera c, sarria l. association between hiv
and another dna virus in vitro. eur j clin microb infect disc 1995;14(7):591-6.
19. tesis para el rea de ing. de alimentos. escuela superior politcnica del
litoral, tcnica Elisa
20. Trabajo de inmunologa especial: MIRANDA MACAVILCA, George C.
laboratorio clnico y anatoma patologa. (Universidad alas peruanas)
21. Sharon N, Lis H. Lectins cell aglutinating and sugar-specific proteins.
22. Elsa Saavedra Hernndez, Alma Prez Santiago, Eduardo Prez Campos,
Flix Crdoba Alva Efecto de la concanavalina a en el cultivo del
fitopatgeno ustilago maydis Interciencia, vol. 28, nm. 5, mayo, 2003, pp.
276
23. Memorias del XIV Congreso de Bioenergtica y Biomembranas. Sociedad
Mexicana de Bioqumica A.C Snchez Medina M. A., Villagmez E., Prez
Santiago A. D. y Crdoba Alva F.Unidad de Bioqumica e Inmunologa,
Instituto Tecnolgico de Oaxaca