Sei sulla pagina 1di 23

Biotecnologa de los Productos

Agroindustriales
1
INFORME DE LA PRACTICA
DE LABORATORIO N 3

DETERMINACION DE CAPACIDAD FERMENTATIVA


DE UNA LEVADURA
I. INTRODUCCION
La presente practica de laboratorio nos es de mucha utilidad para
su aplicacin en el contexto de la biotecnologa, puesto que al
manejar microorganismos es necesario tener el conocimiento de
cuanto metabolito deseado va a producir en una determinada
cantidad de sustrato, es por esto que con este ensayo se hace el
respectivo calculo en caso de necesitar una reproduccin mayor,
en el amplio campo de la agroindustria.

II.

OBJETIVOS
Calcular el rendimiento real de produccin de alcohol
mediante fermentacin en base al sustrato utilizado.
Comparar dicho rendimiento real con el ideal
o
estequiometrico, obteniendo la eficiencia del proceso
realizado.

III. FUNDAMENTACION TEORICA


GLUCOLISIS
Es una de las rutas ms importante por su frecuencia en los
seres vivos. El metabolismo de la glucosa comienza con la
gluclisis, (ciclo de Embden Meyerhof) acoplada a la ruta
de las pentosas. Durante la gluclisis una molcula de
glucosa rinde dos molculas de cido pirvico, es decir una
molcula de seis tomos de carbono se escinde en dos de
tres.
Se puede estructurar en 2 etapas:
1. Pasar de Glucosa a Fructosa-1,6-difosfato.
2. Pasar de Fructosa-1,6-difosfato
gliceraldehido.

a dihidroxiacetona

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
La primera fase es una fase1 de alteracin qumica para
dejar la molcula til para la clula.
Primera fase de la gluclisis
1. La glucosa se fosforila en el alcohol por la
hexoquinasa. La hexoquinasa une el fosfato del ATP mediante
un enlace fosfoster y la transforma en Glucosa-6-fosfato.
La Glucosa-6-P est preparada para los procesos que
continan en la gluclisis. La fosforilacin transforma 1
molcula neutra en una molcula cargada negativamente. Hace
que ahora, la glucosa-6-P no pueda volver a salir por la
membrana debido a su carga negativa.
2. A la clula no le gusta la forma aldosa y hace la forma
cetosa (Fructosa-6-P). Es realizado por la fosfoglucosa
isomerasa.
3. Implica la adquisicin de un segundo fosfato que va a
parar al C1 y forma la fructosa-1,6-bisfosfato. Lo relaiza
la fosfofructoquinasa-1 (PFK-1). La fructosa-1,6-bisfosfato
es completamente simtrica. La PFK-1 es un enzima clave en
la gluclisis.
4. La fructosa-1,6-bisfosfato se parte por la mitad y da
dos
molculas
(dihidroxiacetona-fosfato
(DHAP)
y
gliceraldehido-3-fosfato (G3P)). La gluclisis se da a
partir
del
gliceraldehido-3-P.
El
equilibrio
est
desplazado hacia la dihidroxiacetona-fosfato. Slo un 5% es
Gliceraldehido-3-P.
La
desaparicin
continua
de
G3P
transforma la DHAP en G3P. Todo acaba siendo G3P.
Segunda fase de la gluclisis
A partir del G3P comienzan las transformaciones que dan
lugar a Piruvato (Pyr) (reacciones de oxidacin).
1. La primera reaccin es que el enzima Gliceraldehido-3Fosfatodeshidrogenasa oxida el grupo aldehdo a cido
(gasta un NAD, que se reduce a NADH). Produce un enzima que
es capaz de incorporar un fosfato al cido carboxlico
correspondiente. Se forma un ster. La fosforilacin a
nivel de sustrato se consigue porque hay ATP con un fosfato
ya activado.
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
2. El 1,3-Bisfosfoglicerato cede
1 fosfato para sintetizar
1
ATP. La reaccin la cataliza la fosfogliceratoquinasa. El
producto de la sntesis de ATP es el 3-fosfoglicerato.
Sufre transformaciones que dan lugar a la sntesis de
Pyruvato. El P3 debe pasar a la posicin 2. Se consigue
mediante el enzima fosfogliceromutasa. La mutasa tiene un
fosfato activo, que se lo da a la posicin 2. En un momento
hay dos fosfatos, pero luego, se lo quita de la posicin 3.
Todas las mutasas funcionan as. Se hace para liberar el OH
en la posicin 3.
3. Se produce la deshidratacin del OH. Se transforma el
alcohol en enol, por la enolasa. Es parecido a Pyruvato,
pero con enol y un fosfato. Se llama fosfoenolpiruvato
(PEP). Es una molcula muy inestable que se transforma en
Pyruvato por la Pyruvatoquinasa y se acopla la energa que
se desprende para sintetizar ATP.
ANLISIS ESTEQUIOMTRICO DE LA GLUCLISIS
Glucosa + 2Pi + 2 ADP + 2 NAD+

2 Pyr + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+ + 2 H2O

La gluclisi es una va que transforma la glucosa en


Pyruvato y, a su vez, reduce 2 NAD+ del citosol a NADH y usa
2 ADP para formar 2 ATP.
La clula en cuanto puede, transforma otros monosacridos a
molculas que estn en la va de la gluclisis.

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
1

Figura 1. Diagrama de la glucolisis

Limitaciones del Proceso


La determinacin de los factores que limitan la gliclisis
fermentativa del etanol son complejos debido a la
interrelacin existente y a la naturaleza de los parmetros
intervinientes durante el proceso de fermentacin. Algunos
de ellos se deben tener en cuenta en la fermentacin
alcohlica industrial. En las limitaciones que surgen
durante el proceso se pueden enumerar algunos de los ms
importantes como son:

Concentracin de etanol resultante: Una de las


principales
limitaciones
del
proceso,
es
la
resistencia de las levaduras a las concentraciones de
etanol (alcohol) que se llegan a producir durante la
fermentacin,
algunos
microorganismos
como
el
saccharomyces cerevisiae pueden llegar a soportar
hasta el 20% de concentracin en volumen. En
ingeniera bioqumica estos crecimientos se definen y
se modelan con las ecuaciones de crecimiento celular
dadas por las ecuaciones de Tessier, Moser y de la
ecuacin de Monod.

Acidez del substrato: El pH es un factor limitante en


el proceso de la fermentacin ya que las levaduras se
encuentran afectadas claramente por el ambiente, bien
sea
alcalino
o
cido.
Por
regla
general
el
funcionamiento de las levaduras est en un rango que
va aproximadamente desde 3.5 a 5.5 pH. Los procesos
industriales procuran mantener los niveles ptimos de
acidez durante la fermentacin usualmente mediante el
empleo de disoluciones tampn. Los cidos de algunas
frutas (cido tartrico, mlico) limitan a veces este
proceso.

Concentracin de azcares: La concentracin excesiva


de hidratos de carbono en forma de monosacridos y
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
disacridos puede frenar1 la actividad bacteriana. De
la misma forma la baja concentracin puede frenar el
proceso. Las concentraciones lmite dependen del tipo
de azcar as como de la levadura responsable de la
fermentacin. Las concentraciones de azcares afectan
a los procesos de osmosis dentro de la membrana
celular.

Contacto con el aire: Una intervencin de oxgeno (por


mnima que sea) en el proceso lo detiene por completo
(es el denominado Efecto Pasteur). Esta es la razn por
la que los recipientes fermentadores se cierren
hermticamente.

La temperatura:
El
proceso de
fermentacin es
exotrmico, y las levaduras tienen un rgimen de
funcionamiento en unos rangos de temperatura ptimos,
se debe entender adems que las levaduras son seres
mesfilos. Si se expone cualquier levadura a una
temperatura cercana o superior a 55 C por un tiempo
de 5 minutos se produce su muerte. La mayora cumple
su misin a temperaturas de 30 C.

Ritmo de crecimiento de las cepas - Durante la


fermentacin las cepas crecen en nmero debido a las
condiciones favorables que se presentan en el medio,
esto hace que se incremente la concentracin de
levaduras.

CICLO DE KREBS.

El ciclo de Krebs se desarrolla en las mitocondrias. El


cido pirvico formado durante la gluclisis se convierte
en acetil CoA, el cual a travs del ciclo de krebs se
transforma en anhdrido carbnico. El paso de cido
pirvico a acetil CoA tiene lugar en la matriz mitocondrial
y es catalizado por la piruvato deshidrogenasa. El acetil
CoA ahora entra en el ciclo de Krebs unindose al cido
oxalactico para formar el cido ctrico, por medio de una
isomerasa se transforma en isoctrico, el cual por medio de
una descarboxilasa da lugar al alfa-cetoglutrico, este
paso supone la liberacin de anhdrido carbnico y NADH.
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
1

Figura 2.

Diagrama del ciclo de Krebs

El proceso comienza con la oxidacin


produciendo un acetil-CoA y un CO2.

del

piruvato,

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
El acetil-CoA reacciona con una
molcula de oxalacetato (4
1
carbonos) para formar citrato (6 carbonos), mediante una
reaccin de condensacin.
A travs de una serie de reacciones el citrato se convierte
de nuevo en oxalacetato. El ciclo consume netamente 1
acetil-CoA y produce 2 CO2. Tambin consume 2 NAD+ y 1 FAD,
produciendo 3 NADH y 3 H+ y 1 FADH+.
El resultado de un ciclo es (por
piruvato): 1 GTP, 3 NADH, 1 FADH2, 2CO2

cada

molcula

de

Cada molcula de glucosa produce (va gluclisis) dos


molculas de piruvato, que a su vez producen dos acetilCoA, por lo que por cada molcula de glucosa en el ciclo de
Krebs se produce: 2 GTP, 6 NADH, 2 FADH2, 4CO2.
Por cada molcula de acetil CoA se forman dos molculas de
anhdrido carbnico, una GTP, tres NADH y un FADH2, el
ciclo necesita la incorporacin de dos molculas de agua.
En el ciclo de krebs se encuentran acopladas las
lanzaderas, las cuales intervienen en diferentes procesos
anablicos. De esta forma a partir del ciclo de krebs
pueden formarse aminocidos, cidos grasos incluso glucosa
(gluconeognesis).
FERMENTACIN
Todas las clulas estn capacitadas para sintetizar ATP por
el proceso de la gliclisis. En muchas clulas, si el
oxgeno no est presente, el piruvato es metabolizado en un
proceso llamado fermentacin.
La fermentacin complementa a la gliclisis y hace posible
producir ATP continuamente en la ausencia del oxgeno. Por
la oxidacin del NADH producido en la gliclisis, la
fermentacin regenera el NAD+, el cual interviene otra vez
en para producir ms ATP.
C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP 2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP +
25.5 kcal
Se puede ver que la fermentacin alcohlica es desde el
punto de vista energtico una reaccin exotrmica, se
libera una cierta cantidad de energa.
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
Un clculo realizado sobre la1reaccin qumica muestra que
el etanol resultante es casi un 51% del peso, los
rendimientos obtenidos en la industria alcanzan el 7%.

Figura 3. Proceso de fermentacin


En la fermentacin alcohlica, el cido pirvico de la
gliclisis pierde un carbono en la forma de bixido de
carbono para formas acetaldehdo, el cual es reducido a
alcohol etlico, el NADH se convierte en NAD+ (es oxidado).
Esta es la fermentacin que ocurre normalmente en las
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
levaduras. Como en la fermentacin
del cido lctico, la
1
fermentacin alcohlica permite a la gliclisis continuar y
asegurar que el NADH regresa a su estado oxidado (NAD+).
La energa neta ganada en la fermentacin es de 2
molculas/glucosa de ATP. En ambas fermentaciones (lctica
y alcohlica), todo el NADH producido en la gliclisis es
consumido en la fermentacin, por lo tanto no hay
produccin neta de NADH, y ningn NADH entra a la CTE y
forma ATP.
RESPIRACION:
La reaccin
siguiente:

qumica

global

de

la

respiracin

es

la

C6 H12 O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O + energa (ATP)


En este punto la clula ha ganado solo 4 ATP, 2 en la
gluclisis y dos en el ciclo de Krebs, sin embargo ha
capturado electrones energticos en 10 NADH2 y 2 FADH2.
Estos transportadores depositan sus electrones en el
sistema de transporte de electrones localizado en la
membrana interna de la mitocondria.
La cadena respiratoria est formada por una serie de
transportadores de electrones situados en la cara interna
de las crestas mitocondriales y que son capaces de
transferir los electrones procedentes de la oxidacin del
sustrato hasta el oxgeno molecular, que se reducir
formndose agua.
Como resultado de esta transferencia de electrones, los
transportadores se oxidan y se reducen alternativamente,
liberndose una energa que en algunos casos es suficiente
para fosforilar el ADP y formar una molcula de ATP. Se
trata de la fosforilacin oxidativa que permite ir
almacenando en enlaces ricos en energa la energa
contenida en las molculas NADH2, FADH2, NADPH2, que se
liberan en la gluclisis y en el ciclo de Krebs y que ser
ms tarde fcilmente utilizada. Toda cadena respiratoria
que comience por el NAD conduce a la formacin de 3 ATP
mientras que si comienza por el FAD produce slo 2 ATP. El
rendimiento energtico del NADP es similar al del NAD, as
como el del GTP lo es al del ATP.
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
1
IV. MATERIALES Y METODOS

MATERIALES

Levadura simple
Agua destilada
Sacarosa

INSTRUMENTOS

Vasos de precipitacin
Balones de vidrio
Balanza analtica
Potencimetro
Refractmetro

METODOLOGIA DE TRABAJO

Se preparo 400 g de solucin de sacarosa de 20 y 10 Bx, a


las cuales se aadi el 0.5% de levadura (1.5g), agitando
vigorosamente a fin de homogenizar correctamente las
muestras.
Se separaron alcuotas de 100 g en los vasos de
precipitacin con las cuales se tomaron los datos
requeridos.
Se tomo medidas de pH y Bx iniciales, as como peso
exacto.
Luego, estos datos se fueron tomando progresivamente
durante una semana hasta obtener los Bx y pH finales.
Las soluciones de 300 g iniciales puestas en los balones
fueron utilizadas para medir cambios de peso a travs de
la semana de fermentacin.
Con estos datos se hizo el clculo respectivo para obtener
la cantidad de alcohol producido por fermentacin.

V.

RESULTADOS Y DISCUSION

No todos los datos respectivos fueron tomados pero al ser


referenciales no alteran nuestros resultados, los mismos
datos que se muestran a continuacin:
Tabla 1. Datos obtenidos con soluciones de sacarosa para
hallar produccin de alcohol mediante levadura.
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
DIAS

SOLUCION 10 Bx1
Bx REALES pH PESO (g)

Da 1
(inicial)
Da 2
Da 3
Da 4
Da 5
Da 6
Da 7
Da 8
(final)

SOLUCION 20 Bx
Bx REALES pH PESO (g)

10

5,3

300,6

19,7

5,45

300,1

-------------

-------------

293,3
----286,2
285,8
285,6

-------------

-------------

292,6
----278,4
274,9
273,2

2,8

---

285,4

7,1

---

271,9

Los datos en lneas punteadas no se tomaron por ser fin de


semana o no hubo instrumento disponible, de los Bx solo se
requiri el inicial y final de cada solucin por lo que
tenemos los datos necesarios para nuestros clculos.
Sabemos
que
el
rendimiento
estequiometrico
de
fermentacin proviene de la reaccin qumica siguiente:
C12 H 22 O 11 + H 2

O
SACAROSA PM : 342

2 C
6 H 12 O 6

GLUCOSA PM :360

C
6 H 12 O 6 2 C
2 H 5 OH +

GLUCOSA PM : 180

ETANOL PM : 92

la

2
C O2

+energa

DIOXIDO DE CARBONO PM 88

Y el de la respiracin seria:
C
6 H 12 O 6 + 6 O 2=6 C O 2 +6 H 2 O

GLUCOSA PM : 180

Donde lo ideal sera que toda el azcar de la solucin se


transforme en alcohol se tiene el rendimiento ideal que
seria:
Rendimiento ideal :

Producto producido
100
Sustrato consumido

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
360 g C61H 12 O 6
92 g C 2 H 5 OH

1 mol C 12 H 22 O 11 180 g C6 H 12 O 6
100
342 g C 12 H 22 O11
1 mol C 12 H 22 O11
1 mol C 12 H 22 O11

1mol C 12 H 22 O11
Rend . Ideal=

Luego:
Rendimientoideal=53.8

El rendimiento real viene de la misma proporcin entre


alcohol producido y sacarosa consumida, pero como las
soluciones tuvieron ciertos grados Bx al ltimo da, se
asume que no todo el azcar fue consumida por lo que se
hallo el rendimiento real en base a los siguientes
clculos:
Bx
i Pi Bx
f P f =g Azucar consumida

g Azucar iniciales

g Azucar finales

PiPf =g C O2 producidos

De lo que se tiene para las soluciones:

10 Bx
Dixido
20 Bx
Dixido

-> 22.0688 g azcar


de carbono producido
-> 39.8148 g azcar
de carbono producido

consumido,

15.2

de

consumido,

28.2

de

Tambin se tiene:
g Glucosa consumida=g Azucar consumida

360 g Glucosa
342 g Azucar

g Glucosa consumida=X ( por fermentacion ) +Y ( por respiracion)

g C O2 producidos=PiPf = A ( por fermentacion ) + B( por respiracion)


Luego:
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales

1
10 Bx -> 23.230316 g glucosa
consumida
20 Bx -> 41.910316 g glucosa consumida

Adems, de la reaccin inicial de glucosa y productos:


180 g glucosa ---- 88 g Dixido de carbono
X ---------------- A

180 g glucosa ---- 264 g Dixido de carbono

A=

88 X
180

B=

264 Y
180

Y ---------------- B
Ahora, de la glucosa consumida y el CO2 total producido:

10 Bx ->

15.2 g=

88 X 264 Y
+
180
180

23.230316 g=X + Y
Donde nos interesa hallar el valor de X, que seria la
glucosa consumida en el proceso de fermentacin y no el Y
que seria de respiracin:
X = 19.3000195 g de glucosa consumida por la fermentacin.

20 Bx ->

28.2 g=

88 X 264 Y
+
180
180

41.910316 g=X +Y

Luego, X seria:
X = 34.0245649 g de glucosa consumida por la fermentacin.
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
Despus de esto hallamos el rendimiento
real del proceso:
1
X
Rendimientoreal=

92
( 180
) g de etanol100

Bx i BxiBx f Bx f

10 Bx ->
19.3000195
R . Real=

92
( 180
)100

22.0688

Rendimiento real solucin de sacarosa de 10 Bx


R. real = 44.6986443 %

20 Bx ->
34.0245649

R . Real=

92
( 180
)100

39.8148

R. real = 43.6780624 %
Despus de esto se hall la eficiencia:

10 Bx ->
Eficiencia=

20 Bx ->

Eficiencia=

44.6986443
100=83.083
53.8

43.6780624
100=81.186
53.8

Es sabido que a elevadas concentraciones de soluto,


algunas
levaduras
experimentan
una
plasmlisis
celular, y otras alteraciones que disminuyen el
crecimiento microbiano lo cual sugerira la baja o
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
nula produccin de etanol
1 (Casas, 1999). Para nuestro
caso solo se utilizaron concentraciones de 10 y 20
Brix
las cuales son ideales para que la levadura
produzca alcohol evitando que la levadura se estrese,
lo cual lo podemos verificar con el rendimiento
obtenido
para
la
muestra
de
10Brix
tuvo
un
rendimiento de 44.6% y de la de 20 Brix tuvo un
rendimiento de 43.6 % el cual est cerca al
rendimiento ideal; obtenindose como eficiencia el
83.083
81.186
y el
respectivamente para cada
muestra, de esto podemos decir que la levadura tuvo un
buen rendimiento en la produccin de alcohol.

La fermentacin alcohlica es un proceso muy complejo;


el incremento de la concentracin de etanol a medida
que transcurre la fermentacin supone un obstculo
para el correcto crecimiento y desarrollo microbiano
por los efectos negativos que esto conlleva (Oviedo et
al, 2009).Esto se relaciona con lo dicho por (Casas,
1999) ya que a altas concentraciones de azcar la
levadura va a tener problemas ya que se incrementa la
presin osmtica el cual sera un problema al inicio,
y el otro problema sera que a mayor concentracin de
azcar la concentracin de alcohol en el medio va a
ser ms alto entonces la levadura quedara inhibida.

Segn Concepcin M (1999), la fermentacin es un


proceso mediante el cual la levadura convierte
azcares
en
alcohol,
CO2
y
otros
metabolitos
secundarios, teniendo en cuenta que los fermentos
alcohlicos son productos biolgicos, la interrelacin
de los eventos microbiolgicos, bioqumicos y de
ingeniera, as como su conocimiento y cuidadoso
manejo son los llamados a jugar el papel esencial en
el xito del proceso fermentativo, siendo este ltimo
el causante de las principales prdidas en la
produccin.

La fermentacin est influenciada por varios factores


como la temperatura, pH, concentracin de azcares y
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
otras variables que influyen
en el crecimiento de los
1
microorganismos (Gmez, et al 2007).

La temperatura ptima para la formacin de alcohol se


estima en el rango de 32 C a 35 C (Navarro et al,
1986).

El xito de una buena fermentacin depende de la


eficacia del tratamiento preliminar: concentracin del
azcar, pH y temperatura ptimos; la adicin de
sustancias nutritivas al mosto, contaminacin por
otros
microorganismos,
empleo
de
un
organismo
resistente
a
altas
concentraciones
de
alcohol,
mantenimiento de condiciones anaerobias y la inmediata
destilacin del producto fermentado (Prescott y Cecil,
1992).

VI.

CONCLUSIONES

Se logr hacer la medida respectiva de grados Brix y


masa de las soluciones con las cuales se trabaj
obteniendo el rendimiento terico o estequiomtrico, a
su vez comparndolo con el rendimiento real basado
tambin en calculo, obtenindose una eficiencia de
83.083% y 81.186% entre ambos rendimientos para cada
solucin respectivamente.
Nuestro rendimiento real se diferencia un tanto con el
ideal por lo que se concluye que falto un mayor tiempo
de proceso fermentativo para que dicha eficiencia se
acerque al 100%.

VII. BIBLIOGRAFIA
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
Casas,

E.

1999.

alteraciones
Universidad
Facultad

en

1
Microorganismos

alimentos

Complutense

de

de

Ciencias

responsables

altamente
Madrid.

Biolgicas,

de

azucarados.

Tesis

Doctoral.

Departamento

de

Microbiologa. Madrid, Espaa.


Gmez, S. 2007. Capacidad fermentativa de cepas de
Saccharomyces

Cerevisiae

nativas

de

la

regin

productora de mezcal de Durango. XII Congreso Nacional


de Biotecnologa y Bioingeniera. Mxico.
Navarro,

A.

1986.

Produccin

de

etanol

por

fermentacin con alta concentracin levaduras. Revista


Argentina de Microbiologa 18 (1): 7-11.

Oviedo, L. et al; 2009.

Levaduras autctonas con

capacidad fermentativa en la produccin de etanol a


partir de pulpa de excedentes de pltano Musa (AAB
Simmonds) en
Revista

el departamento

Colombiana

de

de Crdoba,

Biotecnologa.

Colombia.

Universidad

Nacional de Colombia. Vol. XI, Nm. 1. Colombia. pp.


40-47.
Prescott

Cate,

Samuel,

Cecil

Gordon,

Dunn.

1992.

Microbiologa Industrial. Aguilar Madrid. p: 110-158

VIII.

ANEXOS
Imgenes de la prctica realizada

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
1

Figura 1. Soluciones de sacarosa


con las que se trabaj
Figura 2. Medicin de pH

Figura 4. Medida de grados Bx


Figura 3. Pesado de soluciones

INFORME DE LA PRACTICA DE LABORATORIO N 4

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
1
DETERMINACION DE CONTENIDO
ALCOHOLICO

DE SOLUCION DE SACAROSA FERMENTADA POR


LEVADURA
I.

INTRODUCCION

Ya hemos estudiado la capacidad fermentativa de la levadura,


mediante clculos estequiometricos de lo que se debera
producir, no siendo este rendimiento tan alto por diversos
factores, en la presente prctica se trabaj con una de las
soluciones fermentadas mediante destilacin y densimetra de tal
forma que se halle la cantidad de alcohol producido en dicha
solucin, a su vez que podamos comparar esta cantidad con lo
calculado en la primera practica para ver que tanto se asemejan
nuestros resultados.

II.

OBJETIVOS

Determinar mediante densimetra el contenido alcohlico


de la solucin fermentada, a su vez que se tome como
referencia la temperatura de la misma.
Determinar mediante el mismo mtodo el contenido
alcohlico del destilado de la muestra, apoyndose en
tablas hidroalcoholicas.
Comparar resultados con los de la prctica anterior.

III. MATERIALES Y METODOS


MATERIALES

Solucin
de
sacarosa
de
20Bx
proveniente de la prctica anterior.
Agua destilada

inicial

fermentada

INSTRUMENTOS

Equipo de destilacin simple


Baln de destilacin
Matraz Erlenmeyer
Vasos de precipitacin
Picnmetros
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales

Balanza analtica
Alcoholmetro

METODOLOGIA DE TRABAJO

De la solucin de sacarosa fermentada se hall


mediante tablas hidroalcoholicas, la cantidad de
alcohol presente en dicho mosto mediante densidad y
temperatura, adems de tomar el dato de grados Gay
Lussac mediante el uso del alcoholmetro.
Esta solucin se pas al equipo de destilacin, donde
se obtuvo alcohol, luego se enraso en una fiola a 100
ml de esta solucin se volvi a tomar dichos datos,
comparando
con
los
valores
de
la
tabla
hidroalcoholica.
Adems de comparar dicha cantidad con el alcohol
producido
estequiometricamente
de
la
prctica
anterior.

IV. RESULTADOS Y DISCUSION


Los datos con los que se trabaj fueron los siguientes:
Tabla 1. Datos bsicos de mosto utilizado y destilado para
determinar contenido alcohlico
DATOS
MUESTRA
MOSTO
FERMENTADO
INICIAL
SOLUCION
DESTILADO-AGUA

GL
(Alcoholmetro)

Densidad
(g/ml)

Temperatura
(C)

0.997786

23

---

0.987779

26

RESULTADO
Contenido
alcohlico
(tabla)
0.141833333

4.94796878 %

Como podemos observar, lo que nos muestra el alcoholmetro es un


valor muy alto para lo que nos seala la tabla, estos valores se
hallaron
mediante
interpolacin
utilizando
como
base
la
temperatura y densidad de la solucin (Anexo 1).
De aqu notamos que hay una diferencia profunda entre dicho
rendimiento
obtenido
mediante
destilacin
y
el
obtenido
estequiometricamente, por lo que se asume que no toda la
Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |
Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
sacarosa presente en el mosto 1fue degradada para que pase a
convertirse en alcohol.

Luego podemos inferir que la diferencia de resultados entre el


alcoholmetro y la tabla se debe a que la solucin no es una
muestra especfica de agua y alcohol si tambin presenta otras
sustancias orgnicas las cuales hacen que se obtenga resultados
errneos, lo cual hizo aumentar la densidad que no es baja, como
es la caracterstica del alcohol, de aqu que haya equilibrio
entre dicha densidad
y la del azcar hacindola parecida a la
del agua, por tanto al comparar estas densidades con la tablas
nos arrojan contenidos alcohlicos diferentes a los encontrados
en los clculos estequiometricos de la prctica anterior

V.

CONCLUSIONES
Se encontraron valores inferiores a los encontrados
por el mtodo estequiometrico.
Se pudo observar que hubo diferencia en los clculos
de contenido alcohlico.

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
VI. ANEXOS

Imgenes de la prctica realizada

Figura 1. Determinacin de
grados Gay Lussac mediante

Figura 2. Destilacin de muestra


fermentada

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Biotecnologa de los Productos


Agroindustriales
1

Figura 3. Tabla hidroalcohlica utilizada

Quiroz Lozada, Melany del Pilar Alvarado Rivera, Jos Antonio |


Ingeniera Agroindustrial

Potrebbero piacerti anche