Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
DOSAGEM DA GLICOSE
GLICOSE-PP
PRINCPIO DO TESTE
A glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidao da glicose para cido glicnico e perxido de hidrognio.
Atravs de uma reao oxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase (POD), o perxido de
hidrognio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, formando um complexo de cor vermelha
(quinoneimina), cuja absorbncia medida em 505 nm, diretamente proporcional concentrao de
glicose na amostra.
Glicose + O 2 + H2O
GOD
POD
Quinoneimina + 4 H 2O
APLICAO CLNICA
A dosagem da Glicose no sangue empregada na avaliao do metabolismo da glicose (controle de
produo, consumo e armazenamento), diagnosticando os diversos estados de hiper e hipoglicemias.
AMOSTRA
Preparo do Paciente
Colher sangue pela manh aps jejum 8 horas, salvo orientaes mdicas.
Amostras utilizadas
Plasma, Soro, Lquor e Lquidos Asctico, Pleural e Sinovial.
Estabilidade e armazenamento da amostra
Nas amostras fluoretadas, a estabilidade da glicose de 3 dias entre 2 a 8C, no havendo
contaminao bacteriana.
As amostras de sangue no contendo antiglicoltico devem ser centrifugadas imediatamente aps a
coleta, e o plasma ou soro separados das clulas ou cogulo. Nas amostras de lquor e de lquidos as
ctico, pleural e sinovial adicionar tambm o anticoagulante Fluoreto na mesma proporo usada para
as amostras de sangue e centrifugar antes de fazer a dosagem.
Volume ideal utilizado para anlise
(Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise).
Volume mnimo utilizado para anlise
(Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise).
Critrios para rejeio da amostra
Os anticoagulantes heparina, EDTA, oxalato e fluoreto no interferem na reao de dosagem.
Fazer referncia ao manual ou POP de coleta, separao e distribuio de material.
REAGENTE UTILIZADO
GLICOSE PP
CAT. 434
MS 80022230067
Componentes do kit
Conservar entre 2-8C.
1- Padro - Contm glicose 100 mg/dL.
O Padro rastrevel ao Standard Reference Material SRM 917 do National Institute of Standards
and Technology NIST.
2- Reagente de Cor - Contm tampo fosfato pH 7,5 fenol 5,0 mmol/L, glicose oxidase 10000 U/L,
peroxidase 1000 U/L, 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L e azida sdica 7,7 mmol/L.
Estabilidade
Os reagentes so estveis at o vencimento da data de validade impressa no rtulo e na caixa quando
conservados na temperatura recomendada, bem vedados e se evite a contaminao durante o uso.
Sinais de Deteriorao dos Reagentes
1- Presena de partculas e turbidez indicam deteriorao dos reagentes.
2- A absorbncia do Reagente de Cor lida contra a gua em 505 nm dever ser inferior a 0,300 durante
toda a sua utilizao ou at a expirao da data de validade do mesmo.
Cuidados e Precaues Especiais
1- Aplicar os cuidados habituais de segurana na manipulao dos reagentes e amostra biolgica.
Ateno:
A urina contm vrias substncias que interferem na dosagem da glicose pela metodologia da glicose
oxidase podendo originar resultados falsamente diminudos. Portanto, esta metodologia no
adequada para dosar a glicose na urina.
PROCEDIMENTO
Procedimento Manual
A-Condies de Reao
Branco
Teste
Padro
Amostra
10 L
Padro (1)
10 L
1000 L
1000 L
1000 L
2- Homogeneizar e incubar os tubos em banho-maria a 37C por 10 minutos. O nvel de gua do
banho-maria deve ser superior ao nvel dos reagentes nos tubos.
3- Ler a absorbncia do Padro (AP) e do Teste (AT), zerando o aparelho com o Branco em 505 nm
(490 a 510 nm).
A cor estvel durante 30 minutos.
Reagente de Cor (2)
CLCULOS
Ver Linearidade.
Como a metodologia obedece lei de Lambert-Beer, a concentrao dos testes pode tambm ser
calculada atravs do Fator de Calibrao (FC).
CP = Concentrao do Padro
AP = Absorbncia do Padro
CT = Concentrao do Teste
AT = Absorbncia do Teste
FC = CP AP
CT em mg/dL = FC x AT
Exemplo
CP = 100 mg/dL
Se AP = 0,333 e AT = 0,313
FC = CP AP = 100 0,333 = 300
CT (mg/dL) = FC AT = 300 0,313 = 94 mg/dL
2- Mtodo Cintico
Notas
1- Metodologia cintica de tempo fixo (2 pontos) e no necessita de Branco de Reao. Deve ser
utilizada em todas as amostras lipmicas.
2- Como o tempo de reao muito pequeno (90 segundos), necessita de fotmetro com cubeta
termostatizada a 37 C e controle rigoroso dos intervalos de tempo.
Tcnica de Anlise
1- Deixar a temperatura do fotmetro e a do Reagente de Cor atingir a temperatura de 37C.
2- Ajustar o comprimento de onda do fotmetro em 505 nm e acertar o Zero de absorbncia com gua
deionizada.
3- Em um tubo rotulado Padro e em outro rotulado Teste pipetar:
Tubo Padro: 1000 L de Reagente de Cor + 10 L de Padro.
Tubo Teste: 1000L de Reagente de Cor + 10 L de Amostra.
4- Misturar e transferir imediatamente para a cubeta termostatizada em 37C e acionar o cronmetro.
5- Fazer uma leitura fotomtrica do Padro (AP) e do Teste (AT) aos 30 segundos (A 30) e uma segunda
Leitura aos 90 segundos (A90).
6- Calcular diferena de absorbncia entre 90 e 30 segundos (A 90 A30) para o Padro e para o Teste.
Clculos
Ver Linearidade.
A do teste ou do Padro= A90 segundos A30 segundos
P = (A90 A30) Padro
VALORES DE REFERNCIA
Amostra: Plasma coletado aps jejum de 8 horas
Crianas e Adultos
65 a 99 mg/dL
Prematuro
20 a 60 mg/dL
De 0 a 1 dia
40 a 60 mg/dL
Acima de 1 dia
50 a 80 mg/dL
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1- GLICOSE-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica.
Elaborado por:
Aprovado por:
Nome
Gustavo Nantes
Assinatura
Data
03/10/2016
___/___/___
___/___/___
___/___/___
___/___/___
___/___/___
___/___/___
Nmero
Cpias
Destino