PESQUISA

CONSTRUINDO
FLORES

Marcelo Carnier Dornelas

phD pela Universit de Paris XI (France)

Pesquisador do Departamento de Cincias
Florestais da Escola Superior de
Agricultura Luiz de Queiroz - USP
mcdornel@carpa.ciagri.usp.br

O controle molecular da arquitetura floral

Fotos cedidas pelo autor

A uniformidade estrutural
das plantas
Uma idia unificadora em biologia
vegetal que a variedade de formas dos
vegetais reflete simplesmente variaes
de um plano de desenvolvimento comum. Diferentes permutaes de umas
poucas caractersticas-chave do desenvolvimento vegetal podem gerar um universo de formas distintas. Provavelmente
no h ilustrao melhor deste princpio
do que a comparao entre uma flor e um
ramo. A noo de que estas duas estruturas poderiam ser fundamentalmente equivalentes foi exemplificada pela primeira vez pelo
famoso naturalista e poeta Goethe (o mesmo que escreveu
Fausto), em um tratado sobre
a metamorfose, h mais de 300
anos. Goethe concluiu que As
flores que se desenvolvem das
gemas devem ser vistas como
ramos ou plantas inteiras, inseridas na planta-me, como esta
est inserida na terra (Goethe,
1790). Comparando-se flores e
ramos, quatro detalhes precisam ser esclarecidos. Primeiro,
as diferentes partes de uma flor
(spalas, ptalas, estames e carpelos) so os equivalentes de
folhas em um ramo. Segundo, os rgos
de ramos e flores so separados por
entrens, mas no caso das flores, estes
so to curtos que raramente so visveis.
Terceiro, os rgos dos ramos e das flores
podem ter uma filotaxia distinta, ou seja,
so diferencialmente arranjados ao redor
de um eixo. Finalmente, o crescimento
indeterminado que caracteriza um ramo
suprimido, no caso de uma flor, tanto
apicalmente, porque uma flor, em geral,
pra de produzir rgos ao redor do eixo
central, quanto lateralmente, pois novos
brotos no surgem nas axilas dos rgos
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Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

florais, como pode acontecer nas axilas

das folhas dos ramos.
Portanto, a comparao entre flores e
ramos aponta quatro variveis importantes: a identidade dos rgos produzidos,
o tamanho do entren, a filotaxia e a
determinao do crescimento. Desse
modo, as inmeras formas e hbitos
visveis das plantas simplesmente refletem variaes e permutaes desses quatro aspectos fundamentais do desenvolvimento. Quais os princpios criadores e
reguladores desses parmetros? Eles poderiam ser manipulados pelo Homem?

Figura 1: A flor de arabidpsis

(Arabidopsis thaliana) do tipo
selvagem possui 4 spalas (no
visveis nesta foto), 4 ptalas brancas, 6 estames e um gineceu composto por 2 carpelos unidos
O desenvolvimento de ramos e flores
depende do comportamento das regies
de proliferao celular na planta, os meristemas apicais. Na periferia dos meristemas, grupos de clulas so arregimentados para formar meristemas secundrios

ou primrdios de rgos. A filotaxia

depende do padro preciso em que ocorre essa repartio. A determinao tambm reflexo desta partio, principalmente se ela favorece a continuidade do
meristema ou a formao de primrdios.
A identidade dos rgos formados depende das caractsticas do desenvolvimento dos primrdios (principalmente
de seu padro de divises celulares).
Finalmente, o crescimento da regio entre os mesmos determina o tamanho dos
entrens.
Dessa forma, a grande questo :
como as clulas ainda indiferenciadas aprendem suas posies
relativas de tal forma a se diferenciarem de maneira correta?
Esta pergunta tem preocupado,
h muito tempo, pesquisadores
que estudam a formao de padres de desenvolvimento em
diferentes organismos, na tentativa de compreender como o
comportamento de um grupo
de clulas coordenado. A formao de padres durante o
desenvolvimento tem sido mais
intensamente estudada em animais, particularmente a moscadas-frutas, do gnero Drosophila. Recentemente, entretanto,
vrios grupos trabalhando com
plantas modelo como a boca-de-leo
(Antirrhinum majus) e arabidpsis (Arabidopsis thaliana, Figura 1) usaram dados genticos e moleculares para formular um modelo de um processo formador
de padro de desenvolvimento nico de
plantas: a especificao dos rgos florais.
O modelo ABC do
desenvolvimento floral
Embora uma vasta gama de mutaes
genticas possa alterar o processo de

formao de uma flor, relativamente poucos genes foram encontrados que estejam envolvidos com a especificao dos
rgos florais per se. Mutaes em tais
genes causam transformaes hometicas em dois verticilos adjacentes da flor.
Os dois verticilos mais externos de mutantes apetala2 (ap2) de arabidpsis, por
exemplo, contm carpelos e estames no
lugar de spalas e ptalas, respectivamente. Mutaes nos genes APETALA3
(AP3) ou PISTILLATA (PI) de arabidpsis
causam a substituio de ptalas por
spalas e de estames por carpelos. Finalmente, no mutante agamous (ag; Figura
2) de arabidpsis, os dois verticilos mais
internos so alterados: estames so transformados em ptalas e carpelos em spalas. (Coen & Meyerowitz, 1991; Meyerowitz et al., 1991; Ma, 1998). Em adio ao
controle da identidade dos rgos florais,
o gene AG deve suprimir o crescimento
do meristema floral uma vez que os
carpelos esto formados, pois a mutao
ag tem o efeito adicional de causar a
proliferao indeterminada do meristema. Desta forma, o quarto verticilo de
uma flor ag constitui o primeiro verticilo
de uma nova flor mutante, que contm
outras em seu interior. Portanto, o gene
AG tambm responsvel pelo hbito
determinado do meristema floral.
As modificaes das caractersticas
dos rgos florais dos mutantes descritos
acima sugerem um modelo combinatorial simples para a determinao da identidade destes rgos (Coen & Meyerwitz,
1991; Figura 3). Segundo este modelo, os
genes responsveis pela identidade esto
ativos em trs regies sobrepostas, cada
uma compreendendo dois verticilos adjacentes. Devido sobreposio das regies de expresso de cada gene, uma
combinao nica de genes especifica a
identidade de cada verticilo (Figura 3a).
Se a regio de atividade B (que requer a
expresso dos genes AP3 e PI em arabidpsis) est ausente, ambos os verticilos
1 e 2 sero especificados apenas pela
regio de atividade A (AP2 em arabidpsis) e contero spalas (Figura 3b). De
maneira similar, nesse caso, os verticilos
3 e 4 sero ambos especificados pela
regio de atividade C (AG em arabidpsis) e contero carpelos. Para explicar os
fentipos dos mutantes ap2 e ag, necessrio adicionar ao modelo a previso de
que as atividades A e C so mutuamente
antagonistas. Ou seja, em um mutante
para genes do tipo A, a ao de C se
expande para os quatro verticilos e em
um mutante do tipo C, dessa vez, a
atividade de A que expressa nos quatro
verticilos (Figuras 3c, d).
Esse modelo, criado para explicar os

fentipos de mutantes simples,

passa por uma prova final: ele
fielmente prev o fentipo de
mutantes duplos. Por exemplo, o
modelo prev que, se as funes B
e C fossem removidas, C deveria
definir a identidade dos quatro
verticilos, que se desenvolveriam
em carpelos. De fato, todos os
verticilos do mutante duplo ap2ap3
contm carpelos (Meyerowitz et
al., 1991). Similarmente, se as atividades B e C estivessem ausentes,
A deveria definir a identidade de
todos os rgos da flor. Como
previsto pelo modelo, spalas se
desenvolvem em todos os verticilos de
mutantes duplos agpi. O fentipo deste
duplo mutante apresenta ainda vrios
verticilos concntricos adicionais (todos
compostos de spalas), devido ao efeito
da mutao ag de suprimir a determinao do meristema floral.
O que aconteceria se ambas as funes A e C fossem removidas? A atividade
B sozinha definiria a identidade dos verticilos 2 e 3, porm nenhuma das atividades identificadas estaria presente nos
verticilos 1 e 4. O modelo no faz nenhuma previso bvia sobre o fentipo resultante, pois nenhum destes estados ocorre
em nenhum verticilo da flor do tipo
selvagem. A funo B associada
formao de ptalas e estames; assim,
espera-se que, na ausncia de A e C, B
cause a produo de rgos intermedirios entre ptalas e estames. De fato, os
verticilos 2 e 3 das flores do mutante
duplo ap2ag so ocupados por ptalas
estaminoidais. Os verticilos 1 e 4 deste
duplo mutante contm folhas. Igualmente, no triplo mutante ap2ap3ag, no qual
as funes A, B e C foram desativadas, as
flores so formadas por folhas organizadas em vrios verticilos concntricos.
Estas observaes indicam que a folha
seria o estado basal a partir do qual a
identidade de cada rgo floral seria
determinada.
Por meio destes resultados, a equivalncia de flores e ramos (e portanto de
rgos florais e folhas), clamada por
Goethe h mais de 300 anos, foi finalmente demonstrada.
O ABC no suficiente
Durante a dcada passada, todos os
genes descritos acima foram clonados e
seqenciados. A localizao dos respectivos RNA mensageiros foi determinada
por hibridizao in situ e corresponde,
de fato, s regies descritas pelo modelo
ABC (veja a reviso de Ma, 1998). Todos
os genes do modelo ABC codificam fato-

Figura 2: A flor do mutante

agamous de arabidpsis
composta por uma srie de
verticilos contendo apenas
spalas e ptalas

res de transcrio, sugerindo que seus

respectivos produtos ativam ou reprimem a transcrio de outros genes requeridos para a diferenciao de tipos celulares rgo-especficos. Embora o modelo ABC explique com sucesso como a
combinao de genes hometicos pode
especificar a identidade dos primrdios
dos rgos florais, ele no explica como
os domnios de expresso de cada gene
hometico so definidos. Outros mutantes hometicos do desenvolvimento floral de arabidpsis, como superman (sup;
Figura 4) e leafy (lfy), foram caracterizados e os genes correspondentes, clonados. O estudo do fentipo destes mutantes e dos mutantes duplos entre esses e os
do modelo ABC, permitiu o aprimoramento do modelo (Ma, 1998). Assim,
SUP, cujo mutante apresenta o desenvolvimento de anteras no lugar de carpelos,
embora possua os verticilos 1, 2 e 3
normais (Figura 4), estaria envolvido na
reteno da expresso dos genes de
funo B. O gene LFY faria o papel
contrrio, ativando os genes de funo B.
Tanto LFY quanto SUP tambm codificam
reguladores de transcrio. Outros fatores de transcrio, como o codificado
pelo gene PERIANTHIA (PAN, Figura 5),
controlam o nmero de rgos florais
sem alterar suas identidades (veja a reviso de Baum, 1998). Assim, as flores do
mutante pan possuem mais spalas e
ptalas que as do tipo selvagem (Figura
5).
Em animais, a atividade e a extenso
do domnio de expresso de fatores de
transcrio envolvidos no desenvolvimento so geralmente controladas por
cascatas de sinalizao. O exemplo de
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

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estudo mais detalhado deste mecanismo

o da cascata iniciada pelo gene WINGLESS (WG) de Drosophila. O produto do
gene WG utilizado como um sinal na
comunicao entre as clulas. Como resultado desta comunicao, decises relativas ao destino celular so tomadas,
tais como a expresso de genes hometicos. Um elemento chave da cascata de
sinalizao de WG o gene SHAGGY
(SGG) que codifica uma protena-kinase.
Homlogos de SGG foram recentemente
clonados em arabidpsis e denominados
ASK (Dornelas et al., 1998; 1999). Os
genes ASK formam uma famlia multignica, cujos produtos parecem fazer parte
de uma cascata de sinalizao semelhante quela em que SGG est envolvido. Os
produtos dos genes ASK controlam o
domnio de expresso de AG e AP3 e,
portanto, a arquitetura floral (Dornelas et
al., in press). Assim, aparentemente, mecanismos controladores de alguns aspectos do desenvolvimento podem ter sido
conservados entre animais e plantas.
Evoluo e biotecnologia
Como tanto os genes hometicos do
modelo ABC quanto os genes reguladores ASK so conservados durante a evoluo, espera-se que os mecanismos de
desenvolvimento dos rgos florais sejam semelhantes entre as diferentes espcies de plantas. De fato, vrios homlogos dos genes envolvidos na diferenciao floral foram clonados em vrios gneros e famlias, tanto de mono- como de
dicotiledneas, e o princpio de funcionamento dos mesmos parece conservado
pela evoluo (Baum, 1998).
A obteno de plantas transgnicas,
onde se modifica a expresso dos genes
envolvidos no florescimento, tem de-

nando verticilos e/ou modificando a identidade e a posio de cada rgo floral,

abre um invejvel universo de possibilidades agronmicas.
Assim, com a possibilidade atual de construir flores por meio da manipulao gentica molecular, a expresso
engenharia gentica ganhou um aspecto arquitetnico renovado.
Referncias

Figura 3: Modelo ABC para a especificao da identidade dos rgos

florais. O modelo prev os casos em
que todos os fatores esto presentes,
como no tipo selvagem (a); quando
o fator B est ausente, como no
mutante apetala3, de arabidpsis;
quando o fator A est ausente, como
no mutante apetala2 e quando o
fator C est ausente, como no mutante agamous. Se: spala; Pe: ptala; Es: estame; Ca: carpelo
monstrado que possvel a manipulao
da arquitetura floral pelo Homem (Ma,
1998; Dornelas et al. in press). As conseqncias biotecnolgicas so bvias. A
capacidade de modelar a arquitetura floral artificialmente, eliminando ou adicio-

Figura 4: A flor do mutante superman de arabidopsis

possui estames (rgos masculinos) no lugar dos carpelos (rgos femininos) no verticilo central
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Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

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Figura 5: As flores do mutante perianthia de arabidopsis

apresentam um nmero superior de spalas e ptalas (5 ou
mais) que as do tipo selvagem (sempre 4)