CUESTIONARIO

COMO SE VEN LAS COLONIAS DE COLIFORMES EN MEDIO ENDO, EMB

y
MacConkey
Medio ENDO
ENDO es un medio de cultivo diferencial y ligeramente selectivo utilizado para la
deteccin de coliformes y otros microorganismos entricos.

COMPOSICIN

Colonias en el medio
Los coliformes fermentadores de lactosa producen colonias rosadas a rojas, mientras
que las colonias de los microorganismos que no pueden fermentar este carbohidrato
son incoloras o rosado plido.
Las colonias tpicas de E. coli en el Agar Endo son rosadas con un brillo verde
metlico caracterstico, debido a la elevada produccin de cidos y aldehdos como
producto de la fermentacin de la lactosa.

MEDIO EMB
Este medio de cultivo permite una diferenciacin muy clara entre las colonias de
organismos fermentadores de lactosa y aquellos que no la fermentan; el contenido de
eosina y azul de metileno inhiben en cierto grado organismos Gram positivos. La
presencia de sacarosa permite para algunos miembros del grupo coliforme fermentarla
con ms facilidad que la lactosa. Las colonias lactosa positiva son azules a moradas
con brillo metlico o poseen centros oscuros con periferias transparentes incoloras y
las que son negativas en lactosa o sacarosa, se observan incoloras o rosa plido
transparentes.

COMPOSICIN

Colonias en el medio

Medio MacConkey
Es un medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciacin de
bacilos gram negativo fermentadores y no fermentadores de lactosa. Se utiliza con
frecuencia para el aislamiento de coliformes.

COMPOSICIN

Colonias en el medio

CALDO VERDE BRILLANTE BILIS LACTOSA

Este medio est recomendado para el recuento de coliformes totales y fecales,
por la tcnica del nmero ms probable. En el medio de cultivo, la peptona
aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis
y el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de
bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepcin de coliformes, y la
lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Es una propiedad del grupo
coliforme, la fermentacin de la lactosa con produccin de cido y gas.
Frmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Bilis de buey deshidratada

20.0

Lactosa

10.0

Peptona

10.0

Verde brillante

0.0133

Suspender 40 g del polvo deshidratado

por litro de agua destilada. Disolver y
distribuir 10 ml por tubo con
campanita de Durham. Preparar
adems, el medio a doble
concentracin. Esterilizar en autoclave
a 121C durante 15 minutos.

pH final: 7.2 0.2

AGAR GLUCOSA BILIS ROJO VIOLETA

El agar glucosa bilis rojo violeta es utilizado para la determinacin y recuento de
microorganismos de la familia Enterobacteriaceae en alimentos y otros productos de
uso diario.
Composicin
Extracto de Levadura 3,0 g
Peptona 7,0 g
Sales Biliares 1,5 g
Glucosa 10,0 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Rojo Neutro 0,03 g
Cristal Violeta 2,0 mg
Agar 15,0 g
Agua destilada para 1000 mL

pH 4

Colonias tpicas
Las colonias de las enterobacterias
que fermentan la glucosa con
produccin de cido forman colonias
rojas o prpuras rodeadas por halos
del mismo color

COMPARAR CON LAS NORMAS TCNICAS PARA VER LOS RANGOS

La evaluacin de la Numeracin de Coliformes Totales y Termotolerantes por el

Mtodo de Tubos Mltiples (NMP), es un mtodo se basa en el principio de que
una nica clula viva puede desarrollarse y producir un cultivo turbio. El mtodo
requiere la realizacin de una serie de diluciones en serie de la muestra de
cultivo, en un medio lquido adecuado para el crecimiento de dicho organismo
de un volumen diez veces mayor. Luego, se incuban las muestras de esos
tubos y, pasado un tiempo, se examinan los tubos. Aquellos tubos que
recibieron una o ms clulas microbianas procedentes de la muestra, se
pondrn turbios, mientras que los tubos que no recibieron ninguna clula
permanecern transparentes. Se calcula mediante una tabla de acuerdo a la
serie y dilucin o alcuotas segn se utilice. (Apha, 1995)
Segn el Instituto de Investigacin Tecnolgica Industrial y de Normas
Tcnicas (ITINTEC) desarroll la Norma Tcnica Peruana (NTP) 214.003
Agua Potable: Requisitos. La cual establece los requisitos fsicos, qumicos,
organolpticos y microbiolgicos que debe cumplir el agua para ser
considerada potable. En esta NTP se consideran Requisitos biolgicos para el
agua y dentro de ellos se considera la ausencia de Parsitos y Protozoarios
para el agua potable y valor mximo admisible para los requisitos
microbiolgicos: Recuento total: 500 UFC/mL, Coliformes totales: Ausencia y
Coliformes Fecales: Ausencia. (Aycachi, 2011)
Segn el reglamento de la calidad del agua para consumo humano (D.S.
N 031-2010-SA), nos muestra en la siguiente tabla los lmites mximos
permisibles de parmetros microbiolgicos y parasitolgicos: