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Acta Otorrinolaringol Esp. 2015;66(1):43---48

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ARTCULO DE REVISIN

Conceptos y aplicaciones de la ingeniera tisular

en Otorrinolaringologa
Leandro Ribeiro , Eugnia Castro, Manuela Ferreira, Diamantino Helena, Raquel Robles,
Antnio Faria e Almeida y Artur Cond
Department of Otorhinolaryngology of Vila Nova de Gaia/Espinho Hospital Center, Portugal
Recibido el 17 de enero de 2014; aceptado el 10 de marzo de 2014
Disponible en Internet el 25 de octubre de 2014

PALABRAS CLAVE
Ingeniera de tejidos;
Cuerdas vocales;
Oreja;
Rinoplastia;
Trquea;
Perforacin de la
membrana timpnica

KEYWORDS
Tissue engineering;
Vocal cords;
Ear pinna;
Rhinoplasty;
Trachea;
Tympanic membrane
perforation

Resumen
Introduccin: La ingeniera de tejidos es un campo en rpido desarrollo, haciendo unos sustitutos biolgicos para la reparacin y regeneracin de tejidos da
nados, jugar un papel importante
en el futuro de la Otorrinolaringologa.
Objetivo: En este artculo se explican los principios de la medicina regenerativa y sus posibles
aplicaciones en Otorrinolaringologa.
Materiales y mtodos: Los autores han buscado en la literatura publicada sobre el tema, eligieron referencias pertinentes y se extrajo y sistematizado de la fecha.
Resultados y conclusiones: Hay posibilidades muy interesantes para futuros tratamientos en
Otorrinolaringologa que aplican los conceptos de la ingeniera de tejidos.
2014 Elsevier Espa
na, S.L.U. y Sociedad Espa
nola de Otorrinolaringologa y Patologa CrvicoFacial. Todos los derechos reservados.

The concepts and applications of tissue engineering in Otorhinolaryngology

Abstract
Introduction: Tissue engineering is a rapidly developing field that, making biological substitutes
for the repair and regeneration of damaged tissues, will play an important role in the future of
otorhinolaryngology.
Objective: In this article we explain the principles of regenerative medicine and its potential
applications in Otorhinolaryngology.
Materials and methods: The authors searched the published literature on this topic, chose
relevant references, and extracted and systematized the data.

Autor para correspondencia.

Correo electrnico: leandro.Ribeiro@live.com.pt (L. Ribeiro).

http://dx.doi.org/10.1016/j.otorri.2014.03.007
0001-6519/ 2014 Elsevier Espa
na, S.L.U. y Sociedad Espa
nola de Otorrinolaringologa y Patologa Crvico-Facial. Todos los derechos
reservados.

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L. Ribeiro et al
Results and conclusion: There are some exciting possibilities for future treatments in otorhinolaryngology applying the concepts of tissue engineering.
2014 Elsevier Espa
na, S.L.U. and Sociedad Espa
nola de Otorrinolaringologa y Patologa
Crvico-Facial. All rights reserved.

Introduccin
En la poca actual, el paradigma de la medicina cambia constantemente, a medida que van surgiendo nuevos
conceptos y mtodos de soporte vital y control de las enfermedades. La ingeniera tisular se est convirtiendo en uno
de los tratamientos de referencia ms prometedores de la
prctica mdica. Basndose en procedimientos tecnolgicos
altamente avanzados, la reconstruccin de tejidos y rganos
puede convertirse, a corto plazo, en el tratamiento puntero
para un creciente nmero de situaciones mdicas en las que
las intervenciones farmacolgicas o quirrgicas clsicas tienen una eficacia limitada. De hecho, los avances recientes
en este campo muestran claramente unos resultados impresionantes en cuanto a la rehabilitacin de rganos y tejidos,
funcional o estructuralmente comprometidos1 .
La Otorrinolaringologa, como especialidad mdica con
un amplio abanico de intervenciones quirrgicas, asume de
modo natural el liderazgo en la aplicacin de las tcnicas de
la ingeniera tisular.
El objetivo de esta revisin es describir los fundamentos
de la medicina regenerativa y sus posibles aplicaciones en
Otorrinolaringologa.

Fundamentos
El principal objetivo de la ingeniera tisular es la restauracin de los tejidos funcionales o estructurales, utilizando
elementos vivos que se integrarn posteriormente en los
pacientes1 . En este proceso, existen generalmente tres
componentes bsicos presentes: las clulas, los factores
reguladores/de crecimiento y los andamiajes, que pueden
utilizarse simultneamente, o no2,3 .

Clulas
Muchos documentos publicados en los ltimos 20 a
nos se han
centrado principalmente en la terapia celular1 , que consiste
en el depsito de clulas vivas seleccionadas en un andamiaje adecuado que, cuando se expone a un microentorno
especfico, se multiplicar y diferenciar en la estructura
deseada. Pueden utilizarse diferentes subtipos celulares: las
clulas madre y las clulas adultas1---3 .
Las clulas madre se caracterizan, no solo por su capacidad de autorenovacin continua e ilimitada, sino tambin
por la posibilidad de diferenciarse en cualquier fenotipo
celular2 . Se supone que las clulas madre son las que mayor
potencial tienen dentro la medicina regenerativa, aunque
su uso est limitado por cuestiones ticas, y por el posible riesgo de transformacin neoplstica. Las clulas madre
pueden obtenerse de los tejidos embrionarios o maduros.
Las clulas embrionarias se derivan de los blastocitos, y

por tanto pueden transformarse en cualquier tipo de clula

madura de las tres capas germinales4 . Por otro lado, las
clulas madre adultas pueden recolectarse de ciertos nichos
del cuerpo, por ejemplo la mdula, el tejido adiposo o el
sanguneo4 , no tienen una potencia totalmente diversa, ya
que se posicionan en la ltima etapa de la lnea diferenciadora, y tienen una capacidad finita de multiplicacin,
dependiendo del origen del tejido.
Las clulas adultas pueden obtenerse a partir de una
muestra de biopsia del tejido a regenerar, y su replicacin
es inducida in vitro antes de ser trasplantadas. Al ser filogenticamente ms avanzadas, las clulas adultas no tienen
la capacidad de replicarse indefinidamente, o transformarse
en diferentes tipos de clulas. Estas caractersticas, junto
a la posibilidad de perpetuacin de los cambios patolgicos
preexistentes en el rgano o tejido donantes, constituyen
unas limitaciones importantes para su uso.

Factores reguladores/de crecimiento

Los factores de crecimiento son molculas que regulan la
proliferacin, diferenciacin y funcin celulares, y que por
tanto pueden inducir, acelerar o inhibir dichos procesos celulares. Constituyen un elemento esencial para la medicina
regenerativa. Dependiendo de la tcnica utilizada, estas
molculas pueden incluirse en un andamiaje, que sirve
como medio para controlar su liberacin, y que controlar
e influir en el crecimiento celular3 .

Andamiajes
Los andamiajes son estructuras tridimensionales porosas
que aportan un soporte mecnico y una proteccin fsica
a las clulas y factores de crecimiento2 . Dichos andamiajes debern estar compuestos por una matriz biocompatible
y reabsorbible1,2,5 , que permite una regeneracin tisular
completa. El colgeno y la fibrina son los materiales ms
comnmente utilizados, y se obtienen generalmente de
fuentes naturales; tambin puede utilizarse el cido poligliclico, un polmero sinttico2 .

Aplicaciones de la ingeniera tisular en

Otorrinolaringologa
Laringologa
Las cuerdas vocales son capaces de vibrar a una frecuencia
de hasta 1000 Hz3 , debido a su microestructura que se compone del epitelio, la lmina propria y el msculo vocal. La
lmina propria se compone de una capa superficial (espacio
de Reinke), una capa intermedia y una capa ms profunda,

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Conceptos y aplicaciones de la ingeniera tisular en Otorrinolaringologa

cada una de las cuales consta de componentes celulares
especficos, relacionados finalmente con la funcin orgnica.
El epitelio estratificado cubre la superficie total de las
cuerdas vocales, y representa una barrera frente a las
agresiones fsicas, qumicas y microbiolgicas5 . Los fibroblastos son los principales tipos de clulas de la lmina
propria. Estas clulas se producen e integran en una matriz
extracelular. Dicha matriz soporta todas las clulas tisulares y desempe
na un papel importante en la regulacin
de la migracin, proliferacin y diferenciacin celular6,7 . El
cido hialurnico abunda particularmente en la capa superficial de la lmina propia, hidratando las cuerdas vocales y
hacindolas compresibles. Las capas restantes se componen
principalmente de colgeno y elastina que son responsables,
respectivamente, de la resistencia elstica y de la traccin
de las cuerdas vocales5,6 .
Cuando se altera la ultraestructura de la matriz extracelular, bien debido a intervenciones quirrgicas o a factores
tales como infecciones, traumatismos o radiaciones, puede
producirse un trastorno de la funcin vibrtil de las cuerdas vocales6,8,9 . En tales situaciones, existe normalmente
un proceso de curacin aberrante que favorece el depsito
de colgeno y la disminucin de la produccin de cido hialurnico y fibras de elastina, que, en ltimo caso, produce
la formacin de cicatrices, que son responsables de la disfona. Se han descrito una serie de intervenciones teraputicas
para impedir y/o tratar las cicatrices o la atrofia de las cuerdas vocales, invariablemente con un xito limitado, debido
a la dificultad de restablecer la onda mucosa. Por ello, el
objetivo de la medicina regenerativa en relacin a las cuerdas vocales es la restauracin de las funciones vibratoria
y respiratoria de la laringe mediante la reconstruccin de
la matriz extracelular de la lmina propria, utilizando los
elementos que se describen posteriormente.

Factores reguladores/de crecimiento

Los factores de crecimiento son los nicos elementos que
han sido aplicados exitosamente hasta la fecha en la bioingeniera de las cuerdas vocales5,10 . Entre ellos, el factor de
crecimiento de los fibroblastos asume una posicin importante, ya que tiene una funcin esencial en la regulacin de
la formacin de cicatrices. Hirano demostr que el factor
de crecimiento de los fibroblastos mejoraba la produccin
de cido hialurnico por parte de los fibroblastos de las
cuerdas vocales, a la vez que inhiba el depsito local de
colgeno11,12 . Describi un caso clnico en el que se utilizaba
el factor de crecimiento de los fibroblastos en el tratamiento
de la atrofia de las cuerdas vocales de un varn de 63 a
nos,
con clara mejora de los parmetros acsticos a la semana
de la intervencin12 .
Otra citoquina que se ha venido estudiando cada vez ms
para el tratamiento de las cicatrices vocales es el factor
de crecimiento de los hepatocitos, debido principalmente
a sus propiedades antifibrticas y angiognicas5 . De modo
similar al factor de crecimiento de los fibroblastos, el factor de crecimiento de los hepatocitos estimula tambin la
produccin de cido hialurnico y elastina, e inhibe la sntesis del colgeno13,14 . Hirano realiz otro experimento, al
inyectar hidrogel impregnado del factor de crecimiento de
los hepatocitos en las cuerdas vocales previamente da
nadas

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de un cnido. Aqu se observ la regeneracin estructural

de la cuerda vocal, con una mejora de la onda mucosa3,5 .
A pesar de los prometedores resultados, el perfil de seguridad de estos factores de crecimiento de nuevo uso no ha
sido totalmente definido, habindose considerado que el
riesgo de transformacin maligna limita considerablemente
su aplicacin clnica5 .

Andamiajes
Cualquier andamiaje utilizado en Otorrinolaringologa
deber tener unas caractersticas estructurales, una composicin qumica y unas propiedades mecnicas similares
a las de la lmina propria. Dichos andamiajes deberan
componerse de material biocompatible y reabsorbible que
promueva la adhesin, proliferacin y diferenciacin celular, a fin de permitir la restauracin exitosa de la matriz
extracelular5,15 .
Se han utilizado gran variedad de materiales, tales como
hidrogeles basados en cido hialurnico (Carbylan-SX y
Carbylan-GSX)12 . Estos biomateriales, cuando se aplican a
una cuerda vocal da
nada (como en una biopsia profunda),
modulan la formacin de cicatrices y conservan por tanto
las propiedades viscoelsticas de las cuerdas vocales9 .
Tambin se han utilizado los andamiajes biolgicos acelulares como alternativa a los hidrogeles. Dichas estructuras
se derivan de la mucosa intestinal porcina, la lmina propria
de las cuerdas vocales bovinas, o la vena umbilical humana.
Se someten a procedimientos de descelularizacin basados
en una respuesta inmune desencadenada mediante el contacto con los fibroblastos de las cuerdas vocales humanas16 .
Kishimoto et al.17 realizaron un estudio en 6 pacientes con
una cicatriz o sulcus en la cuerda vocal, a los que se coloc
dichos andamiajes en una bolsa epitelial, tras la extirpacin
del tejido cicatricial. A los 6 meses de la intervencin, se
observ una restauracin considerable de la matriz extracelular, con mejora de los parmetros acsticos, y degradacin
total del material del andamiaje. Por tanto, constituye un
recurso mdico prometedor.

Clulas
La terapia celular en laringologa se basa en la inyeccin de clulas, que producirn elementos de la matriz
extracelular, originando la reconstruccin de la microestructura de la cuerda vocal. Dichas clulas son generalmente
fibroblastos18 , clulas madre del tejido medular o adiposo19
(que son capaces de producir, in vitro, todos los elementos de la cuerda vocal)20 , y clulas madre del tejido
embrionario21 . En todos los estudios celulares basados en
terapias, se ha observado una clara mejora de las propiedades fibroelsticas de las cuerdas vocales18---21 . Sin embargo,
el riesgo potencial de transformacin neoplstica de los tejidos diana3,5 , y muchas cuestiones ticas en relacin a la
manipulacin de clulas embrionarias, han limitado su uso.

Ciruga plstica y reconstructiva

Muchas intervenciones de cabeza y cuello, tales como
las rinoplastias, septoplastias, correcciones de perforacin septal, o reconstrucciones del pabelln auricular,

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L. Ribeiro et al

implican el uso de cartlagos autlogos, que se obtienen del

septo nasal, costillas o concha2 . A pesar de ser un recurso
limitado en cuanto a su extensin finita y configuracin
geomtrica particular, el cartlago septal ha sido el ms
comnmente utilizado, debido a sus caractersticas estructurales y accesibilidad22,23 . Por ello, la ingeniera tisular
puede resultar una alternativa, con la posibilidad de originar
una mayor cantidad de cartlago con la forma deseada.
El primer trabajo sobre este rea, y el ms popular, fue
publicado en 1997 por Cao et al.24 Se describi la produccin de una matriz de cartlago con forma de oreja para
tratar a un ni
no de tres a
nos, utilizando condrocitos bovinos,
a
nadidos a una matriz de cido poligliclico previamente
moldeada (andamiaje). Dichos elementos se implantaron en
la espalda de un ratn de laboratorio, observndose los condrocitos de nueva replicacin a las 12 semanas.
Ms recientemente, Yanaga et al.25 publicaron una serie
de 4 casos en los que la tcnica quirrgica de reconstruccin de una microtia congnita se bas en la bioingeniera.
En tales casos, los condrocitos se obtuvieron del cartlago
conchal y se expandieron in vitro para formar una matriz, a
la que se a
nadi el factor de crecimiento de los fibroblastos.
A continuacin se implant el tejido resultante subcutneamente, de modo superficial sobre la fascia abdominal
durante unos 6 meses, originando gran cantidad de cartlago
maduro que posteriormente se adapt y trasplant a la piel
temporal, a fin de reconstruir el pabelln auricular. Se realiz un seguimiento de estos pacientes durante 5 a
nos, con
buenos resultados. En particular, no se observ reabsorcin
alguna del tejido cartilaginoso.
El mismo equipo aplic este procedimiento a la
rinoplastia26 . De modo similar, se inyect subcutneamente
en el dorso nasal una matriz gelatinosa obtenida de los condrocitos recolectados en el cartlago conchal, originando
un slido neocartlago en dos semanas. En este estudio,
75 pacientes fueron sometidos a un seguimiento de 6 a
nos
desde la intervencin quirrgica, obtenindose resultados
prometedores.
Por tanto, estas intervenciones pueden suponer una
alternativa al uso de otros materiales, particularmente el
cido hialurnico, que es absorbido a lo largo de los a
nos de
manera considerable.

un carcinoma tiroideo. Los autores utilizaron una matriz

de polipropileno como andamiaje, recubierta de colgeno
recolectado de una dermis porcina, que fue localmente
implantada, tras la reseccin del segmento traqueal da
nado.
A las dos semanas de la intervencin, el tejido implantado se
haba integrado plenamente en las estructuras adyacentes,
observndose la regeneracin completa del epitelio respiratorio a los 2 a
nos, sin complicacin alguna.
Macchiarini et al. sugirieron una tcnica diferente en
200831 . En este documento, los autores describen la reconstruccin bronquial en un paciente de 30 a
nos, que padeca
broncomalacia avanzada. Se utiliz como andamiaje el bronquio de un cadver, previamente sometido a procedimientos
de descelularizacin, al que se a
nadieron clulas epiteliales
y condrocitos recolectados del bronquio sano. El material
obtenido se someti a anastomosis con el bronquio afectado, observndose un alivio sintomatolgico inmediato. El
paciente recibi el alta a los 10 das de la operacin.
Estos trabajos ilustran la posibilidad de reconstruir los
segmentos comprometidos de las vas areas, utilizando tcnicas recientes de bioingeniera.

Ciruga de cabeza y cuello

Factores reguladores/de crecimiento

El mayor xito de la bioingeniera en la ciruga de cabeza

y cuello se ha observado en el tratamiento de la estenosis traqueal. Esta situacin se produce frecuentemente
tras una intubacin endotraqueal prolongada, o una traqueotoma quirrgica/percutnea, aunque tambin puede
deberse a factores tales como traumatismos, radiacin,
cncer, o enfermedades inflamatorias crnicas (amiloidosis,
sarcoidosis, policondritis recurrente)27,28 . Entre las diferentes opciones de tratamiento, la que se considera ms eficaz
implica la reseccin del segmento estenosado, seguida de
anastomosis29 , aunque este procedimiento no es aplicable
cuando la situacin afecta a un gran segmento traqueal del
cartlago cricoide29 .
En 2005, Omori et al.30 describieron la primera reconstruccin exitosa de un gran segmento traqueal en un varn
de 78 a
nos, que haba sido previamente destruido por

El cido hialurnico asume, una vez ms, un papel esencial en el tratamiento de las perforaciones de la membrana
timpnica. Su forma esterificada (Merogel) fue probada por
Ozturk36 para el tratamiento de la perforacin de la membrana timpnica en ratones de laboratorio. Los resultados se
compararon con las membranas timpnicas perforadas contralaterales, tras la aplicacin local de un placebo. A los
7 das, los autores observaron que la membrana timpnica
tratada con Merogel tena un mayor ndice de oclusin que
la membrana timpnica tratada con placebo (un 91,7 frente
al 70,85%), reflejando una cantidad relativamente superior
de factor de crecimiento de los fibroblastos y del factor de
crecimiento endotelial en el anlisis inmunohistoqumico.
El factor de crecimiento de los fibroblastos parece ser
otro factor de crecimiento clave, ampliamente estudiado.
Kanemaru et al.37 realizaron un estudio consistente en la

Otologa
La perforacin timpnica crnica es una situacin comn,
derivada con frecuencia de las infecciones de odo, traumatismos o extrusin del conducto por timpanostoma32 .
El cierre espontneo, que se produce en hasta el 90% de
las perforaciones agudas, ocurre por migracin epitelial.
Esto puede conllevar la formacin de una neomembrana
que carezca de la capa intermedia, que es susceptible, no
solo de nuevas perforaciones debido a su grosor reducido,
sino tambin a la formacin de bolsas de retraccin32,33 .
La timpanoplastia con fascia temporal o pericondrio tragal
sigue siendo el tratamiento de eleccin, aunque normalmente con una morbilidad quirrgica considerable. Por este
motivo, se han hecho recientemente grandes esfuerzos a fin
de encontrar biomateriales alternativos que permitan unas
intervenciones ms fciles y eficaces34,35 .
Como ya se ha descrito para las cuerdas vocales, la bioingeniera aplicada al tratamiento quirrgico de la perforacin
timpnica crnica implica los elementos siguientes:

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Conceptos y aplicaciones de la ingeniera tisular en Otorrinolaringologa

aplicacin de una esponja de gelatina impregnada de factor
de crecimiento de los fibroblastos en membranas timpnicas
crnicamente perforadas tras la escarificacin de los bordes de las heridas, y compararon estos resultados con las
membranas timpnicas de control sometidas al mismo procedimiento, aunque carentes de factor de crecimiento de
los fibroblastos. Como se haba predicho, el ndice de oclusin fue considerablemente superior en el grupo tratado con
el factor de crecimiento de los fibroblastos, sin evidencia de
efectos laterales, lo que se hallaba en concordancia con los
resultados de Ozturk36 .
La pentoxifilina es un frmaco vasodilatador que maximiza la tensin del oxgeno en los tejidos perifricos32 .
Ramalho et al.38 estudiaron sus efectos utilizando su forma
oral junto con un factor de crecimiento endotelial tpico en
chinchillas con perforaciones timpnicas subagudas. En el
protocolo descrito, se aplic el factor de crecimiento endotelial cada 70 h, y se utiliz pentoxifilina a dosis diarias de
20 mg/kg durante 10 das. Se utiliz una esponja en cada
membrana timpnica perforada, como andamiaje. Alrededor de un mes posterior al tratamiento, el ndice de oclusin
fue del 8,7% en el grupo de placebo, del 3,6% en el grupo
tratado con pentoxifilina nicamente, del 30,3% en el grupo
tratado con factor de crecimiento endotelial nicamente, y
del 16,5% en el grupo sometido a pentoxifilina y factor de
crecimiento endotelial. Dados estos resultados, los autores
concluyeron que el factor de crecimiento endotelial promueve el cierre de las membranas timpnicas perforadas, a
diferencia de la pentoxifilina nicamente, o en asociacin.
A pesar de estos prometedores estudios, existen muchas
cuestiones que deben esclarecerse an. La ms importante
de todas es que deben determinarse la dosis ideal y la duracin del tratamiento, debiendo prestarse atencin especial
a la definicin de los riesgos potenciales que pueden derivarse del uso de estos factores, tales como la formacin de
coleastomas.

47

andamiaje en la Ingeniera tisular debido a sus efectos positivos sobre la proliferacin celular40 . Al combinarse con las
sales de calcio, sus propiedades se resaltan considerablemente, particularmente en lo referente a manipulacin y
resiliencia40 , segn se observ en un estudio realizado por
Weber et al.41 , quienes establecieron una comparacin con
la tcnica del parche de papel utilizada en las miringoplastias, sobre chinchillas con perforaciones timpnicas crnicas
inducidas. Al finalizar el estudio, las membranas timpnicas
perforadas tratadas con alginato de calcio tenan un ndice
superior de oclusin en comparacin a los controles, mientras que los potenciales auditivos confirmaron la ausencia
de efectos txicos.
A pesar de estos prometedores resultados, debern
evaluarse ampliamente estos materiales, en cuanto a los
posibles riesgos de su uso en comparacin a los materiales autlogos actualmente utilizados en la prctica comn,
con resultados muy satisfactorios pero con una morbilidad
considerable.

Conclusin
Con el incremento del conocimiento y el establecimiento de
conceptos de la medicina regenerativa, as como el constante desarrollo de nuevos biomateriales, el paradigma de la
medicina experimentar pronto un cambio. En el futuro, el
doctor, y particularmente el otorrinolaringlogo, asumir un
papel en el proceso que incluye, no solo el diagnstico, sino
tambin la restauracin de las funciones biolgicas comprometidas, formando parte de un equipo multidisciplinario que
incluir pronto a ingenieros, bilogos y otros profesionales
afines.
De nuevo, se precisan claramente estudios adicionales
que regulen las cuestiones ticas inherentes, particularmente en relacin al uso de clulas madre embrionarias,
y para esclarecer los perfiles de seguridad a largo plazo de
estos biomateriales prometedores.

Andamiajes
Se han estudiado diversos materiales para la reconstruccin
de la membrana timpnica, como los componentes de la
matriz extracelular y el alginato de calcio.
Los componentes de la matriz extracelular proceden
de fuentes naturales (dermis acelular y duramadre), utilizndose como plantillas para la reconstruccin tisular
basada en su ultraestructura, particularmente la presencia de protenas funcionales tales como el colgeno y
los proteoglicanos32 . La matriz extracelular extrada de la
dermis y duramadre porcinas, sometida a procesos de descelularizacin, fue utilizada en un estudio por Deng et al.39
En este trabajo, los fibroblastos aislados de la membrana
timpnica de un cerdo de Guinea se a
nadieron al biomaterial descrito, colocndose luego en una membrana timpnica
crnicamente perforada, utilizando la tcnica de subcapa
de la timpanoplastia. Los anlisis microscpicos posteriores revelaron la reconstruccin progresiva de una membrana
timpnica caracterstica de 3 capas, asociada a la mejora de
los umbrales auditivos en el examen del potencial auditivo
evocado.
Por otro lado, el alginato es un polmero natural originado por las algas marinas, que se ha venido utilizando como

Conflicto de intereses
Los autores declaran no tener ningn conflicto de intereses.

Agradecimientos
Grupo 3Bs Research (Biomateriales, Biodegradables y Biomimtica).

Bibliografa
1. Saxena A. Tissue engineering. J Indian Assoc Pediatr Surg.
2005;10:14---9.
2. Sivayoham E, Saunders R, Derby B, Woolford T. Current concepts
and advances in application of tissue engineering in otorhinolaryngology and head and neck surgery. J Laryngol Otol.
2013;127:114---20.
3. Hirano S. Tissue engineering for voice disorder. JMAJ.
2011;139:827---30.
4. Thomson J, Itskovitz-Eldor J, Shapiro S, Waknitz MA, Swiergiel
JJ, Marshall VS, et al. Embryonic stem cell lines derived from
human blastocysts. Science. 1998;282:1145---7.

Documento descargado de http://www.elsevier.es el 11/10/2016. Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.

48
5. Gugatschka M, Ohno S, Saxena A, Hirano S. Regenerative medicine of the larynx. Where are we today? A review. J Voice.
2012;26:670, e7---13.
6. Chen X, Thibeault S. Biocompatibility of a synthetic extracellular matrix on immortalized vocal fold fibroblasts in 3 D culture.
Acta Biomater. 2010;6:2940---8.
7. Dailey S, Gunderson M, Chan R, Torrealba J, Kimura M, Welham
NV. Local vascularized flaps for augmentation of Reinkes space.
Laryngoscope. 2011;121:37---60.
8. Johnson B, Fox R, Chen X, Thibeault S. Tissue regeneration of
the vocal fold using bone marrow mesenchymal stem cells and
synthetic extracellular matrix injections in rats. Laryngoscope.
2010;120:537---45.
9. Thibeault S, Klemuk S, Chen X, Quinchia Johnson BH. In vivo
engineering of the vocal fold ECM with injectable HA hydrogelslate effects on tissue repair and biomechanics in a rabbit model.
J Voice. 2011;25:249---53.
10. Kishimoto Y, Welham N, Hirano S. Implantation of atelocollagen
sheet for vocal fold scar. Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg.
2010;18:507---11.
11. Hirano S, Nagai H, Tateya I, Tateya T, Ford CN, Bless DM. Regeneration of aged vocal folds with basic fibroblast growth factor
in a rat model: a preliminary report. Ann Otol Rhinol Laryngol.
2005;114:304---8.
12. Hirano S, Kishimoto Y, Suehiro A, Kanemaru S, Ito J. Regeneration of aged vocal fold: first human case treated with fibroblast
growth factor. Laryngoscope. 2008;118:2254---9.
13. Hirano S, Bless D, Heisey D, Ford C. Role of hepatocyte growth
factor and transforming growth factor beta 1 in production of
extracellular matrix by canine vocal fold fibroblasts. Laryngoscope. 2003;113:144---8.
14. Kishimoto Y1, Hirano S, Kitani Y, Suehiro A, Umeda H, Tateya
I, et al. Chronic vocal fold scar restoration with hepatocyte
growth factor hydrogel. Laryngoscope. 2010;120:108---13.
15. Farran AJ, Teller SS, Jha AK, Jiao T, Hule RA, Clifton RJ,
et al. Effects of matrix composition, microstructure, and viscoelasticity on the behaviors of vocal fold fibroblasts cultured
in three-dimensional hydrogel networks. Tissue Eng Part A.
2010;16:1247---61.
16. Xu CC, Chan RW, Weinberger DG, Efune G, Pawlowski KS. A
bovine acellular scaffold for vocal fold reconstruction in a rat
model. J Biomed Mater Res A. 2010;92:18---32.
17. Kishimoto Y, Hirano S, Kojima T, Kanemaru S, Ito J. Implantation
of atelocollagen sheet for the treatment of vocal fold scarring
and sulcus vocalis. Ann Otol Rhinol Laryngol. 2009;118:613---20.
18. Chhetri DK, Head C, Revazova E, Hart S, Bhuta S, Berke GS.
Lamina propria replacement therapy with cultured autologous
fibroblasts for vocal fold scars. Otolaryngol Head Neck Surg.
2004;131:864---70.
19. Kanemaru S, Nakamura T, Yamashita M, Magrufov A, Kita T,
Tamaki H, et al. Destiny of autologous bone marrow-derived
stromal cells implanted in the vocal fold. Ann Otol Rhinol Laryngol. 2005;114:907---12.
20. Long JL, Zuk P, Berke GS, Chhetri DK. Epithelial differentiation
of adipose-derived stem cells for laryngeal tissue engineering.
Laryngoscope. 2010;120:125---31.
21. Hertegrd S, Cedervall J, Svensson B, Forsberg K, Maurer FH,
Vidovska D, et al. Viscoelastic and histologic properties in
scarrid rabbit vocal folds after mesenchymal stem cell injection. Laryngoscope. 2006;116:1248---54.
22. Chang AA, Reuther MS, Briggs KK, Schumacher BL, Williams GM,
Corr M, et al. In vivo implantation of tissue- engineered human
nasal septal neocartilage constructs: a pilot study. Otolaryngol
Head Neck Surg. 2012;146:46---52.
23. Alexander TH, Sage AB, Chen AC, Schumacher BL, Shelton E,
Masuda K, et al. Insulin-like growth factor-I and growth differentiation factor-5 promote the formation of tissue-engineered
human nasal septal cartilage. Tissue Eng. 2009;16:1213---21.

L. Ribeiro et al
24. Cao Y, Vacanti JP, Paige KT, Upton J, Vacanti CA. Transplantation
of chondrocytes utilizing a polymer-cell construct to produce
tissue-engineered cartilage in the shape of a human ear. Plast
Reconstr Surg. 1997;100:297---302.
25. Yanaga H, Imai K, Fujimoto T, Yanaga K. Generating ears from
cultured autologous auricular chondrocytes by using two-stage
implantation in treatment of microtia. Plast Reconstr Surg.
2009;124:817---25.
26. Yanaga H, Imai K, Yanaga K. Generative surgery of cultured autologous auricular chondrocytes for nasal augmentation.
Aesthetic Plast Surg. 2009;33:795---802.
27. Kanemaru S, Hirano S, Umeda H, Yamashita M, Suehiro A,
Nakamura T, et al. A tissue-engineering approach for stenosis of the trachea and/or cricoid. Acta Otolaryngol. 2010;130:
79---83.
28. Imaizumi M, Nomoto Y, Sato Y, Sugino T, Miyake M, Wada I,
et al. Evaluation of the use of induced pluripotent stem cells
for the regeneration of tracheal cartilage. Cell Transplant.
2013;22:341---58.
29. Tsakiridis K, Darwiche K, Visouli AN, Zarogoulidis P, Machairiotis
N, Christofis C, et al. Management of complex benign posttracheostomy tracheal stenosis with bronchoscopic insertion of
silicon tracheal stents, in patients with failed or contraindicated
surgical reconstruction of trachea. J Thorac Dis. 2012;4 Suppl.
1:32---40.
30. Omori K, Nakamura T, Kanemaru S, Asato R, Yamashita M,
Tanaka S, et al. Regenerative medicine of the trachea:
the first human case. Ann Otol Rhinol Laryngol. 2005;114:
429---33.
31. Macchiarini P, Jungebluth P, Go T, Asnaghi MA, Rees LE, Cogan
TA, et al. Clinical transplantation of a tissue-engineered airway.
Lancet. 2008;372:2023---30.
32. Hong P, Bance M, Gratzer P. Repair of tympanic membrane perforation using novel adjuvant therapies: a contemporary review
of experimental and tissue engineering studies. Int J Pediatr
Otorhinolaryngol. 2013;77:3---12.
33. Parekh A, Mantle B, Banks J, Swarts JD, Badylak SF, Dohar JE,
et al. Repair of the tympanic membrane with urinary bladder
matrix. Laryngoscope. 2009:1206---13.
34. Demirpehlivan IA, Onal K, Arslanoglu S, Songu M, Ciger E, Can
N. Comparison of different tympanic membrane reconstruction
technics in type I timpanoplasty. Eur Arch Otorhinolaryngol.
2011;268:471---4.
35. Farhadi M, Mirzadeh H, Solouk A, Asghari A, Jalessi M, Ghanbari H, et al. Collagen- immobilized patch for repairing small
tympanic membrane perforations: in vitro and in vivo assays. J
Biomed Mater Res Part A. 2012;100:549---53.
36. Ozturk K, Yaman H, Cihat Avunduk M, Arbag H, Keles B, Uyar
Y. Effectiveness of MeroGel hyaluronic acid on tympanic membrane perforations. Acta Otolaryngol. 2006;126:1158---63.
37. Kanemaru S, Umeda H, Kitani Y, Nakamura T, Hirano S, Ito J.
Regenerative treatment for tympanic membrane perforation.
Otol Neurotol. 2011;32:1218---23.
38. Ramalho RO, Bento RF. Healing of subacute tympanic membrane
perforations in chinchillas treated with epidermal growth factor
and pentoxifylline. Otol Neurotol. 2006;27:720---7.
39. Deng Z, Wu J, Qiu J, Wang J, Tian Y, Li Y, et al. Comparison of porcine acellular dermis and dura mater natural
scaffolds for bioengineering tympanic membranes. Tissue Eng.
2009;15:3729---39.
40. Hott ME, Megerian CA, Beane R, Bonassar LJ. Fabrication of tissue engineered tympanic membrane patches using
computer-aided design and injection molding. Laryngoscope.
2004;114:1290---5.
41. Weber DE, Semaan MT, Wasman JK, Beane R, Bonassar LJ,
Megerian CA. Tissue-engineered calcium alginate patches in the
repair of chronic chinchilla tympanic membrane perforations.
Laryngoscope. 2006;116:700---4.