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Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el
selenito de sodio inhibe flora Gram positiva y la mayora de la flora entrica
excepto Salmonella spp.. La l-cistina es el agente reductor y fue propuesta por
la FDA para el aislamiento de Salmonella en productos alimenticios
incrementando la recuperacin por reduccin de la toxicidad del selenito.
PRUEBA DE LA UREASA
La hidrlisis de la urea es catalizada en algunos microorganismos por una
enzima especfica, la ureasa, dando lugar a dos molculas de amonio, agua y
dixido de carbono. Todo esto da lugar a un cambio en el pH, lo que causa que
cambie el color original del medio (amarillo) a un color rojo bugambilia por el
indicador rojo de fenol. De acuerdo a la degradacin de la urea el color ser
ms o menos intenso. (NH2)2C=O + 2H2O---> CO2+2NH3+H2O (NH4)2CO3
AGAR DE HIERRO Y LISINA (LIA)
Es un medio que sirve para demostrar la produccin de dos enzimas: la lisina
descarboxilasa y la lisina desaminasa, adems la presencia de sales de hierro
sirve para detectar la produccin de H2S por algunos microorganismos.
La descarboxilacion de la lisina ocurre en ambiente anaerbico o sea en el
fondo del tubo y se pone de manifiesto por la alcalinizacin del medio
produciendo un viraje del indicador prpura de bromocresol. La presencia de
glucosa en los componentes del LIA determina primero una reaccin de
fermentacin, produciendo acidificacin y cambio de color del medio a
amarillo y el pH favorable para la reaccin de descarboxilacion que ocurre
despus, volviendo a su color violeta original la parte del fondo del tubo.
La desaminacion de la lisina que se puede producir por los gneros Proteus y
Providencia tiene lugar en la parte superior del tubo produciendo
acido a cetocarbonico que al combinarse con la sal de hierro y en presencia de
oxigeno forma un color violeta rojizo. La produccin de H2S se evidencia por la
presencia de un precipitado negro por utilizacin de las sales de hierro.
Agar XLD
Inhibidores: sales biliares a alta concentracin, citrato y tiosulfato. Lactosa,
sacarosa y xilosa como agentes diferenciales. Lisina como agente diferencial.
Tiosulfato y citrato como agentes diferenciales. Indicador: rojo fenol.
Aislamiento selectivo de especies de Salmonella y Shigella.
Colonias de Salmonella rosas o rojas (no fermentan la lactosa, pero
descarboxilan la lisina, suben el pH) con punto central negro (por produccin
de sulfuro). Las colonias de Shigella se ven transparentes (no fermentan la
lactosa) sin punto central negro. Coliformes (E. coli, Klebsiella, Enterobacter)
pequeas, muy inhibidas, pero amarillas, por la fermentacin de la lactosa.
Gram positivos no crecen.
Tsi