INMUNOLOGA

ERITROCITARIA
Dra Mara Elena Alfonso

Objeto de la
Inmunohematologa
Antgenos
Anticuerpos
Reacciones inmunolgicas
componentes de la sangre.

de

todos

los

APLICACIONES
Herramientas para el diagnstico, prevencin y
tratamiento de la aloinmunizacin
Diagnstico
y
seguimiento
de
las
enfermedades autoinmunes relacionadas con
las clulas sanguneas
Estudio de los problemas relacionados con la
exclusin de la paternidad.

APORTES
Gentica humana
Antropologa
Criminalstica
Medicina legal.

Grupos sanguneos eritrocitarios

Caractersticas inmunoqumicas en la membrana
de los eritrocitos de algunos de los miembros de
la especie y ausentes en otros.
Bajo estricto control gentico, heredndose de
acuerdo a las leyes de Mendel.
Caractersticas permanentes de los individuos,
se nace y se muere con ellos.

Membrana eritrocitaria
Compuesta por doble capa de lpidos y
protenas
Lpdos:
Fosfolpidos..60%
Colesterol- 30%
Glicolpidos- 10%

Monosacridos de la superficie
externa de la membrana
El cido N-acetil neuroamnico (NANA) o
cido silico
Fucosa
Galactosa
Manosa
N-acetil glucosamina (NacGlc)
N-acetil galactosamina (NacGal) .

Transferasas
Los monosacridos se unen unos a otros por
enzimas glucosiltransferasas.
Cada transferasa est bajo control gentico
La transferasa recibe el nombre del azcar
especfico que une a la cadena de
carbohidratos.

Citoesqueleto
Red de de protenas debajo de la membrana celular.
Brinda resistencia y deformabilidad al hemate.
Principal componente: espectrina
La espectrina interactua con protenas como la actina
(protena 4.1), , dematina (prot 4.9), tropomiosina y
aducina

Citoesqueleto
La espectrina se une a la membrana plasmtica a
travs de la ankirina (prot 2.1) y la actina
La ankirina , en asociacin con la prot 4.2 une los
tetrmeros de espectrina a la protena de
transmembrana banda 3 .
La protena 4.1 adems interacta con la protena
transmembrana glicoforina C

Principales protenas de la superficie

del eritrocito
Protena
Transp de aniones
Glicoforina A
Transp de glucosa
Glicoforina B
Polipptidos Rh
Glicoforina C
Glicoforina D

sinnimo
Banda 3
SPG
banda 4.5
SPG
SPG
SPG

Ag que contiene
ABH, Ii
M,N
ABH, Ii
Ss, N
Rh
Ge
Ge

Otras protenas de la superficie del

eritrocito
Protena
Acetilcolinesterasa
Dombrock
Duffy
Kell
Kx
Kidd
Luteran
LW

sinnimo
AchE
DARC

ICAM-4

Ag que contiene
Yta, Ytb
Doa, Dob, Gya, Hy, Joa
Fya, Fyb, etc
K
Kx
Jka, Jkb, Jk3
Ags luteran
LWa , LWb, Lwa+b

Otras protenas de la superficie del

eritrocito
Protena
Xga
JMH
Oka
Scianna
CD 35
CD 44
CD 55
JMH
CD 59

sinnimo
CD 99
CD147
CR 1
DAF
MIRL

Ag que contiene
Xga
JMH
Oka
Sc1, Sc2
Kna ,McCa , Sla , Yka
Ina, Inb
Ags cromer

Otras protenas de la superficie del

eritrocito
Protena
Banda 3
Acuaporina 1
C4a, C4b

sinnimo

Ag que contiene
Diego
Colton
Chido/Rodger

Determinantes antignicos
Regin del Ag que se une al Ac
Eptope: sitio de unin al Ac en un DA ( 1-7
resduos de azcares o 4-5 aa )
Pueden ser secuenciales (Ej en polisacridos o
polipptidos lineales) o conformacionales
(protenas)

Localizacin de los antgenos de los grupos

sanguneos en la membrana de los hemates

Glcidos: H, A, B, P, P1, I e i
Sobre cadenas de oligosacridos, unidas
directamente a los glicofingolpidos o a los
dominios de las membrana asociados a la
banda 3 y 4.5.

Localizacin de los antgenos de los grupos

sanguneos en la membrana de los hemates

Glicoprotecos asociados a las glicoforinas.

Glicoforina A (GPA): antgenos M y N
Glicoforina B (GPB): antgenos S, s y U.
Glicoforinas C y D: antgenos del sistema
Gerbich
Otras protenas de membrana : restantes
antgenos de los grupos sanguneos.

Estructura y funcin de los componentes de la membrana que

representan a los sistemas de grupos sanguneos
eritrocitarios.
No
001
002
003
004
005
006
007
008
009
010
011
012
013

Sistemas
ABO
MNS
P
Rh
Lutheran
Kell
Lewis
Duffy
Kidd
Diego
Cartwirg
Xg
Scianna

Estructuras
Carbohidratos
Glicoforina A y B
Carbohidratos
Polipptidos Rh
Super familia de las Igs
Glicoprotena
Carbohidratos
DARC
Glicoprotena
Banda 3
Acetilcolinesterasa
Glicoprotena (CD99)
Glicoprotena

Funcin
Desconocida
Desconocida
Desconocida
Transportadores?
R de lamininas
endopeptidasa?
Ligando (s-Lex)
Receptor de citocinas
Transporte de urea
intercambio de aniones
Desconocida en hemates
Receptor
Desconocida

Estructura y funcin de los componentes de la membrana que

representan a los sistemas de grupos sanguneos
eritrocitarios.
No
014
015
016

Sistemas
Dombrock
Colton
LW

017
018
019
020
021
022
023
024

Chido/Rodger
H
Kx
Gerbich
Cromer
Knops
Indian
Ok

025

RAPH

Estructuras
Glicoprotena
Acuaporina-1
Superfamilia de las Igs
(ICAM-4)
Complemento C4A/C4B
Carbohidratos
Polipeptido
Glicoforina C/D
DAF
CR1
CD44
Superfamilia de las Igs
(CD147)
Desconocida

Funcin
Desconocida
Canales de agua
Ligando de integrinas
CD11/CD18
Componentes del C
Desconocida
Transporte?
Esquelticas de memb.
Regulador del C
Receptor del C
R del hialuronato
Receptor
Desconocida

Desarrollo de Ags de eritrocitos.

1a semana de fertilizacin:

ABH, Le

Recin nacido
Dbil expresin de:I, Le y Sda
Ms dbiles que en adultos: A, B, P1, Lua, Lub, Yta, y
Ch/Rg
Bien expresados: Rh, K, Fy, MNSs, Di, Sc, Do, Co, Ge

Molculas de Igs
Isotipo. Caracterizan clases y subclases de Igs en una misma
especie.
Alotipo. Variaciones en las cadenas pesadas y ligeras , y ,
no relacionadas con la especificidad antignica, presentes en
algunos indivduos de una especie. Ej G1m(z), G1m (f)
Idiotipo. Cofiguracin del sitio de unin al Ag que le da a la
molcula su especificidad.Est determinada por una secuencia de
aa que interactuan con el Ag-.
Los Acs IgG de un mismo indivduo tiene igual isotipo y alotipo
pero difrerentes idiotipos

Red idiotipo-anti idiotipo

Red de autorregulacin
Ac1 dirigido contra un Ag
Ac2 dirigido contra regin Fab del Ac1
El Ac2 regula la produccin de Ac1 (su
idiotipo es igual al del Ag )

Anticuerpos
IgG
Cad pesada
Cad ligera
Subclases
Forma molecular
PM

y
IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
monmero
150 000

IgM

IgA

IgA1, IgA2

pentmero
970 000

monmero
y dmero
160 000

Anticuerpos
Conc en plasma (g/L)
Adulto
nio
T 1/2 (dias)

IgG

IgM

IgA

8 -16
similar

0.5 -2.0
aprox 0.1

1.4 -4.0
indetectable

21

% intravascular

52

Unin a Fc

si

74
no

6
40
si

Anticuerpos
IgG
Comportamiento
serolgico usual

IgM

Ac incomp. Aglutinina

Actividad serolgica
despues de 3h a 56 0C

No se afecta Reducido

Agentes reductores
(2 ME, DTT)

aglutina

No aglutina

IgA

Aglutinina
(dmeros)
No se afecta

Pcialm.
inactivada

Anticuerpos
IgG
Presente en

Paso placentario
Fijacin de C

intravascular
extravascular

IgM

IgA

intravascular

intravascular
secreciones

si

no

IgG3>IgG1>IgG2>IgG4

+++

no
si (via

alterna)

Anticuerpos (continuacin)
Estructura de la molcula de anticuerpo

Anticuerpos (continuacin)
Flexibilidad de las molculas de anticuerpo

Anticuerpos (continuacin)
Isotipos de inmunoglobulinas

Anticuerpos (continuacin)
Fragmentos de una IgG tras protelisis

Anticuerpos (continuacin)

Interaccin antgeno anticuerpo (continuacin)

Avidez.
La afinidad en un sitio de unin no siempre refleja la verdadera
fuerza de la interaccin Ag - Ac. Antgenos complejos
conteniendo mltiples determinantes antignicos se mezclan con
anticuerpos conteniendo mltiples sitios de unin, la interaccin
del anticuerpo con el antgeno en un sitio incrementar la
probabilidad de reaccin en un segundo sitio.
La fuerza de esas interacciones mltiples entre un anticuerpo
multivalente y un antgeno se denomina avidez. La avidez de un
anticuerpo es una mejor medida de su capacidad de unin en un
sistema biolgico que la afinidad de sus sitios de unin
individuales. Una elevada avidez puede compensar una baja
afinidad.

Interaccin antgeno anticuerpo (continuacin)

Algunas propiedades de los Acs

Avidez. Tiempo que media entre la mezcla del
reactivo con los eritrocitos y la aparicin de la
aglutinacin.
Especificidad. Capacidad para identificar
correctamente las muestras carentes del
antgeno en cuestin.
Potencia. reciproco de la mayor dilucin del
reactivo que provoca una reaccin de
aglutinacin de 1+.

ANTICUERPOS DE GRUPOS SANGUNEOS

ERITROCITARIOS
Aloanticuerpos: reconocen antgenos que no
estn presentes en los eritrocitos del
individuo.
Autoanticuerpos:
reaccionan
con
los
antgenos eritrocitarios del propio individuo.
Aloanticuerpos naturales: se desconoce el
estmulo antignico que los gener. Aparecen
en el suero de individuos que carecen de los
antgenos correspondientes Ej: anticuerpos
ABO.

Acs naturales contra Ags de grupo sanguneo

Acs presentes en el suero de indivduos dirigidos

contra Ags eritrocitarios sin evidencia de
exposicin al aloAg

Ej anti A y anti B

Ejemplos de Acs naturales

Sistema o Ag
ABO H/h

Especificidad del Ac
A, B, H
A1
HI

Lewis
P/P1
MnSs

Sd
Di
Ge
Kk
Lu

Indivduos
Todos los que carecen del Ag
1-8% de A2 y 22-35% de A2B
Ocasional en A1 y A1B

Lea
Leb
Pk, PP1, pk

20% de le (a-b-), ABH secretores

A menudo acompaado de - Lea
Todos los carentes de los Ags

M
N
S
Sda
Wra

0.02%de M-N+
0.02%de M+NMuy raro en S1-2% de la poblacin
1% de la poblacin
raro
raro
0.02% de la poblacin

K
Lua

Acs naturales.
Posible orgen
Heteroaglutininas dirigidas contra
sustancias ambientales que tienen similitud
antignica con los aloAgs eritrocitarios.Ej E
coliAlgunos son espontneos.
Naturaleza
La mayora son aglutininas frias IgM, pero
tambien oueden ser IgG e IgA

Respuesta inmune a Ags eritrocitarios

Ag- CPA
linfocito T

LinfocitoB

Clula plasmtica

Acs

clula B de memoria

Interaccin antgeno anticuerpo (continuacin)

Opsonizacin y fagocitosis de microorganismos mediada por anticuerpos

Interaccin antgeno anticuerpo (continuacin)

Opsonizacin y fagocitosis de microorganismos mediada por complemento.

Respuesta primaria

Al primer contacto con el Ag

Inicio ms lento
Menos potente
Menos duradera
Generalmente IgM
Se producen clulas B de memoria
Deteccin de Acs: dias o semanas

Respuesta secundaria
Al segundo contacto con el Ag
Las clulas b de memoria proliferan y producen
Acs
Inicio ms rpido inicio
Ms potente
Ms duradera
Generalmente IgG
Deteccin de Acs:

Propiedades generales de la respuesta (continuacin)

Cintica de las respuesta humorales primarias y secundarias

Propiedades generales de la respuesta (continuacin)

Especificidad,memoria y autolimitacin de las respuestas inmunitarias.

Regulacin de la respuesta inmune humoral

por Acs eritrocitarios.

Vmedia de clula plasmtica

Unin de Ag -Ac a los macrfagos
Supresin activa por clulas T
Degradacin y eliminacin del Ag
Acs anti idiotpicos

PRODUCCIN DE ALOANTICUERPOS
Resultado de
eritrocitos por:

la

inmunizacin

con

Transfusiones de sangre
Paso trasplacentario de hemates fetales
durante el embarazo o el parto.

La aloinmunizacin eritrocitaria

seleccin de componentes sanguneos

carentes de los Ags especficos

Clases de Igs en la aloinmunizacin eritrocitaria.

Anti A y anti B
En indivduos A y B: preferentemente IgM
En indivduos O: predominantemente IgG y
parcialmente IgA

Clases de Igs en la aloinmunizacin eritrocitaria.

Acs anti Rh
Generalmente Ig G
IgM (resp primaria)
IgG, en ocasiones IgA

Clases de Igs en la aloinmunizacin eritrocitaria.

Anti K, Fya y Jka
Predominantemente IgG
En algunos indivduos mezcla IgM-IgG
Anti Lu
A veces parcialmente IgA
Indivduos hiperinmunizados
Mayor diversidad de clases y subclases.

Persistencia de Acs segn clase.

IgM. Tiende a concentracin despues del
ltimo estmulo y generalmente
indetectable en 1-2 aos.
Algunos IgG (Ej anti D). ms lentamente
y pueden detectarse a los 30 aos
Otros IgG (Ej -Jka).Indetectables en pocos
meses

Fases de la destruccin
inmune de los hemates
Anticuerpos + Ag eritrocitario + C
Interaccin eritrocitos / fagocitos
Liberacin de mediadores inflamatorios

Hemlisis intravascular
Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B)
C C3a y C5a
hemlisis
Va
Extrnseca

FNT
Va
intrnseca

IL-1
P.
Vascular

IL-8
Vaso
constriccin

Expresin
trombomodulina
CID
Generacin
de trombina

Supresin
protena C

hipotensin
Fallo renal

Acciones de C3a y C5a

En fagocitos mononucleares y neutrfilos:

estallido respiratorio, R C3b

En neutrfilos y basfilos: Activacin y

produccin de mediadores solubles
C5a: Activa la fagocitosis y produccin de
mediadores inflamatorios.

Mecanismo de hemlisis extravascular

Hemlisis Causada por los auto o

aloanticuepos IgG e IgA fijadores o no
del complemento.
Los hemates se destruyen en el
hgado o el bazo en dependencia de las
inmunoprotenas presentes en los
eritrocitos.

Hemlisis extravascular
Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk)
E +IgG
Hemlisis
intravascular

E +IgG + C

HeI
C3dg
RFc

IgG +C3b

factores

IgG + C3bi

factor H

RFc + RC1 (C3b)

RC3 (C3bi)

Macrfagos
Fagocitosis/ ADCC
Destruccin
bazo

Destruccin
bazo/hgado

extravascular
IL-8
IL-6
IL-1B
IL-1ra
24
horas
IL-8
IL-6
IL-1B
IL-1ra
FNT

Activacin
de
clulas
B,
produccin
de
alo
y
autoanticuerpos

Factores que modulan la

patogenicidad de los anticuerpos
eritrocitarios
1Caractersticas
de
los
anticuerpos
Clases y subclases, especificidad, rango trmico,
activacin del complemento, afinidad

2Concentracin
de
inmunoprotenas
unidas unidas a los hemates in vivo
3- Caractersticas del antgeno
Densidad y distribucin de los antgenos

4- Presencia de los antgenos en los tejidos y

secreciones
5- Fragmento del complemento unido a la
clula
6- Actividad del sistema mononuclear
fagoctico de los pacientes

Relacin entre clase de Ig y comportamiento

serolgico
Acs IgM
La mayora aglutinan eritrocitos resuspendidos en
salina Ej -A, -B
IgM anti-D mejor con Ac diludo en suero.Ttulos
mayores frente a eritrocitos tratados con enzimas
Acs IgM naturales de los sistemas ABO, Le, P aglutinan
ms fuertemente a 40C, aunque -A y -B aglutinan
tambien a 37oC
Anti A1, -HI, -Lea, -Leb y -P1. Aglutinan mejor entre 20250C
Aglutininas anti D: A 370C

Relacin entre clase de Ig y comportamiento

serolgico
Acs IgG
Generalmente no aglutinan hemates resuspendidos en
salina, no aglutinantes o incompletos.
Se han descrito IgG antiD, -K y - M potentes que
pueden aglutinar en salina

Acs IgA
Algunas IgA antiA pueden aglutinar en salina
IgA anti D generalmente no agutinan en salina

Diferencias en respuestas individuales.

Diferencias genticas: HLA, otros gene.
Alteraciones en algunas enfermedades
Ej: Enf. Autoinmunes tendencia a formar
aloAcs
Hipoganmaglobulinemia. capacidad de
formacin de Acs
LLC. < formacin de Acs que otros tipos de
leucemias.

Diferencias en respuestas individuales.

En recien nacidos. La respuesta tpica: Acs
IgM de bajo ttulo. Raras veces IgG en los
primeros meses contra especificidades
diferentes de -A y -B
En algunos pacientes aparecen debilitacin de
Ags y presencia de Acs cotra ellos.

Frecuencia de aloinmunizacin eritrocitaria

Frecuencia de anti D inmune
(incluyendo- DC y - DE)
En donantes: 0.16 -0.25%
En embarazadas: 1/500 - 1/1600
En receptores de transfusin: 0.56%

Datos de Blood Transfusion in Clinical Medicine

Frecuencia de aloinmunizacin eritrocitaria

Frecuencia de otros Acs
En donantes: 0.10 -0.19%.
Especificidades ms frecuentes: -E y -K
En embarazadas: 0.14%.
Especificidades ms frecuenters:-E, -K
En receptores de transfusin: 0.0.39 -1.12%
En Talasemia: > 20%
En anemia drepanoctica: 18- 32%
Datos de Blood Transfusion in Clinical Medicine

Activacin del C por Acs eritrocitarios

Hemlisis en clulas no tratadas.
Casi todos son dirigidos contra los grupos
ABO, lewis, P e Ii
Ocasionalmente -Jka

Activacin del C por Acs eritrocitarios

Hemlisis en clulas tratadas con enzimas
Algunos de los anteriores producen una lisis
ms rpida y extensa. Otros como el -Jka que
generalmente no producen lisis de clulas no
tratadas.
Algunos Acs fijan C hasta C3
Ej -Lea, -Jka y pocofrecuente- K y Fya