Facultad

de Medicina

Ciclo Bsico Clnico Comunitario

Curso de Histologa (Cuarto semestre - BCC3/4)

GUA DE ACTIVIDADES PRCTICAS

Departamento de Histologa y Embriologa
Facultad de Medicina

Parte 1

Clase prctica 1
Clase prctica 2
Clase prctica 3

Tejido nervioso

Parte 2

Organizacin de las clases prcticas en el curso

Clase prctica 4
Clase prctica 5
Clase prctica 6

Sistema
nervioso
perifrico y
rganos de los
sentidos

9. Intestino, HE
40. Cerebro, Impregn. argntica Golgi
47. Cerebro, Del Ro Hortega
47. Cerebro, Lectina de tomate
105. Mdula espinal, Impregn. argntica
Cajal
106. Mdula espinal, Klver-Barreras
109. Cerebelo y tronco enceflico, HE
109. Cerebelo y tronco enceflico, Nissl
129. Tronco enceflico/mdula espinal,
NADPH-diaforasa (HQ)
132. Conducto raqudeo, tricrmico CajalGallego
S/N- Cerebro, anti GFAP (IHQ)
S/N- Anti-IBA1 (IHQ)
MICROFOTOGRAFAS ELECTRNICAS
31. Corpsculo de Paccini, HE
43. Nervio (longitudinal), impregnacin
argntica
45T. Nervio (transversal), HE
45L. Nervio (longitudinal), HE
55. Lengua, HE
75. Fosas Nasales, HE
118. Globo ocular, HE
119 Globo ocular, HE
120. Odo, HE
132.- Seccin transversal de cuello (huso
neuromuscular), HE
S/N- Anti-IBA1 (IHQ)
MICROFOTOGRAFAS ELECTRNICAS

Temas evaluados en el PRIMER PARCIAL

Parte 4

Parte 3

105. Mdula espinal, Impregnacin

argntica Cajal
106. Mdula espinal, Klver-Barrera
106. Mdula espinal, Hematoxilina eosina
132. Conducto raqudeo, tricrmico de
Cajal-Gallego
Clase prctica 7
106. Mdula espinal, Golgi
rganos del
Clase prctica 8
106. Mdula espinal, Nissl
sistema nervioso
Clase prctica 9
111. Cerebro, Nissl.
central

40. Cerebro, Golgi.
109, Cerebelo y tronco enceflico, HE
109. Cerebelo y tronco enceflico, Nissl.
109. Cerebelo y tronco enceflico, Cajal
109. Cerebelo, Golgi.
S/N- Anti-IBA1 (IHQ)
MICROFOTOGRAFAS ELECTRNICAS
23 Corte de Ganglio Linftico (H-E)
38A/T Corazn (H-E)
38A/L Corazn (H-E)
39B Corazn (Tricrmico de Cajal-Gallego)
38B Corazn (Hematoxilina Fosfotngstica
de Mallory)
49A Arteria elstica (H-E)
49B Arteria elstica (Orcena)
49A (Tricrmico de Cajal-Gallego Orcena)
Clase prctica 10
50 Corte de arteria Muscular y Vena (HE)
Clase prctica 11
Sistemas
60 Corte de esfago (H-E)
Clase prctica 12
cardiovascular y
71 A: Corte de Hgado (H-E)
Clase prctica 13
respiratorio
75 Corte de Fosas Nasales (H-E)

77 Corte de Laringe (H-E)
76 A Corte de Trquea (H-E)
76 B Corte de Trquea (PAS-H)
79 Corte de Pulmn (HE)
79B Corte de Pulmn (PAS-H)
79 Corte de Pulmn (Orcena)
79 Corte de Pulmn (Tricrmico de Cajal
Gallego)
MICROFOTOGRAFAS ELECTRNICAS
Temas evaluados en el SEGUNDO PARCIAL




Tcnicas utilizadas para el estudio del tejido nervioso.

La mayor parte de los tejidos animales puede ser estudiada empleando una tcnica de
coloracin, como la de hematoxilina y eosina o similares. Este no es el caso del tejido nervioso,
debido a la forma compleja de los tipos celulares que lo constituyen, con prolongaciones
delgadas y ramificadas, y a las complejas relaciones estructurales de estos elementos
celulares. El anlisis estructural de este tejido requiere la observacin de preparaciones
coloreadas con distintas tcnicas, cada una de las cuales aporta informacin diferente y
complementaria (localizacin y forma de los cuerpos neuronales, patrn espacial de
distribucin de las prolongaciones, distribucin en el rgano de haces de fibras mielnicas, etc.

Recomendamos la lectura de los captulos correspondientes en los textos utilizados en el
curso, as como la consulta de los siguientes materiales en el EVA:

Tcnicas histolgicas utilizadas en el estudio del sistema nervioso (pdf)
Tcnicas histolgicas para el estudio del sistema nervioso

En general, las tcnicas que permiten la identificacin de cuerpos neuronales y su distribucin
en el rgano formando ncleos o cortezas, reciben la denominacin de tcnicas
histoarquitecturales. Por ejemplo: hematoxilina-eosina, Nissl, tricrmico de Cajal-Gallego.

Las tcnicas que colorean la mielina y permiten detectar la presencia y ubicacin de haces de
fibras mielnicas en los rganos, o mieloarquitecturales: Luxol Fast Blue (y Klver-Barrera),
impregnacin con tetrxido de osmio.

Otro grupo de tcnicas histolgicas clsicas se basan en la impregnacin metlica de los tejidos
(oro, plata), permitiendo en general contrastar la silueta de los elementos celulares contra un
fondo ms plido. Estas tcnicas, conocidas como tcnicas analticas, son por ejemplo la
impregnacin argntica de Golgi, la impregnacin argntica de Cajal de nitrato de plata para
prolongaciones nerviosas, y la tcnica de Del Ro Hortega del carbonato de plata para
microgla.

Otros mtodos comnmente aplicados al estudio estructural del tejido nervioso son las
tcnicas histoqumicas (HQ) e inmunocitoqumicas (IHQ). Las primeras permiten poner en
evidencia estructuras o grupos celulares especficos dentro de un tejido que presente la
especia molecular o actividad enzimtica investigada. Las tcnicas inmunohistoqumicas
permiten evidenciar la presencia de eptopos especficos en el tejido mediante la utilizacin de
anticuerpos especficos.

Finalmente, se deber recurrir a numerosas microfotografas electrnicas para el anlisis de la
ultraestructura de diferentes tipos celulares y estructuras propias del tejido nervioso.

Ms arriba se encuentra la lista de preparaciones utilizadas en las clases prcticas.

En la Parte 4 del curso, destinada al estudio de los sistemas cardiovascular y respiratorio se
utilizarn tcnicas histolgicas habituales y microfotografas electrnicas.

Parte 1 (Prcticos 1, 2 y 3)
Tejido nervioso

Objetivos
a) Comprender cmo se observa cada componente del tejido con las distintas tcnicas
empleadas de modo de lograr identificar los distintos tipos celulares del tejido nervioso en
preparaciones microscpicas y microfotografas.
b) Analizar la distribucin en el rgano, estructura, ultraestructura y principales caractersticas
funcionales de los distintos tipos celulares del tejido nervioso.
c) Reconocer las diferentes tcnicas empleadas en el estudio del tejido nervioso, su finalidad y
los principales conceptos de sus fundamentos tericos.
Materiales

a) Preparaciones microscpicas
9. Intestino, HE
40. Cerebro, Impregn. argntica Golgi
47. Cerebro, Del Ro Hortega
47. Cerebro, Lectina de tomate
105. Mdula espinal, Impregn. argntica Cajal
106. Mdula espinal, Klver-Barreras
109. Cerebelo y tronco enceflico, HE
109. Cerebelo y tronco enceflico, Nissl
129. Tronco enceflico/mdula espinal, NADPH-diaforasa (HQ)
132. Conducto raqudeo, tricrmico Cajal-Gallego
S/N- Cerebro, anti GFAP (IHQ)
Preparado problema S/N- Anti-IBA1 (IHQ)

b) Microfotografas electrnicas
La galera de microfotografas electrnicas est disponible en las tablets y en el EVA en:
PRCTICO: Galera de microfotografas electrnicas de tejido nervioso

Anote (o dibuje) las caractersticas de los tipos celulares observados con diferentes tcnicas
de estudio .

neurona

astrocitos
protoplasmticos

astrocitos
fibrosos

HE

Nissl

Klver-Barrera

Cajal Gallego

Golgi

Del Ro
Hortega

Cajal

lectina de
tomate

NADPH
diaforasa

IHQ anti GFAP

IHQ anti IBA1

oligodendrogla microgla

Mic.
electrnico

Actividades
Observe y dibuje las principales caractersticas morfolgicas de los tipos celulares constitutivos
del tejido nervioso. No olvide analizar el preparado problema.

Prep. 40. Corteza cerebral, impregnacin argntica de Golgi.
Se impregnan neuronas, astrocitos, oligodendrocitos y vasos sanguneos.

Observe las clulas impregnadas que aparecen de color negro y reconozca y describa forma y
tamao del cuerpo y nmero, aspecto, distribucin y patrn de ramificacin de sus
prolongaciones. Se impregnan todas las clulas presentes en el tejido?
Ubique en el preparado los siguientes tipos celulares:
- Neuronas:
Observe la morfologa del soma y la diferente disposicin que adoptan sus prolongaciones.
Clasifquelas de acuerdo a la informacin disponible en el texto de estudio.
Observe las caractersticas morfolgicas de las dendritas y su distribucin. Todas las neuronas
poseen espinas dendrticas? Identifique el axn y reconozca sus principales diferencias
morfolgicas con las dendritas.
- Astrocitos. Identifique:
Astrocitos protoplasmticos; con prolongaciones cortas, muy irregulares, anfractuosas y muy
ramificadas dando a las clulas un aspecto velloso. Se ubican en la sustancia gris o en la
sustancia blanca?
Astrocitos fibrosos; con prolongaciones ms largas y delgadas que generalmente se orientan
en una determinada direccin. Se ubican en la sustancia gris entre los cuerpos neuronales o
en la sustancia blanca?
- Oligodendrocitos; se observan en la sustancia gris y blanca, aunque suele resultar ms fcil
ubicarlos en esta ltima. Presentan un cuerpo pequeo, redondeado u ovoide con
prolongaciones escasas, delgadas y cortas. Se observa la clula completa?
Vasos sanguneos; se pueden identificar en toda la preparacin estructuras cilndricas de
bordes bien definidos y calibre homogneo. Pueden aparecer en secciones transversales,
longitudinales u oblicuas. Busque las prolongaciones astrocitarias que terminan en
expansiones que contactan con los vasos (pie terminal).

Prep 47. Cerebro (tcnica de Del Ro Hortega del carbonato de plata para microgla)
Esta tcnica permite la impregnacin con sales de plata de las clulas microgliales y los vasos
sanguneos.

Microgla; se aprecian como clulas en color negro o gris-violceo sobre un fondo ms plido
presentes en todas la extensin del rgano. Observar el cuerpo pequeo, comprimido, de
morfologa variable. Las prolongaciones, que se extienden a corta distancia del cuerpo, son
angulosas, se ramifican y presentan superficie irregular.

Prep 47. Cerebro (lectina de tomate)
Esta tcnica permite la observacin de clulas microgliales y vasos sanguneos.

La lectina de tomate reconoce con gran afinidad los grupos poli-lactosamina que se expresan
especficamente en la superficie de las clulas microgliales.

Observar las clulas coloreadas en color marrn sobre un fondo claro, con las caractersticas
morfolgicas descritas antes.

Prep. 9. Intestino delgado (hematoxilina y eosina)
A simple vista reconocer que se trata de la seccin transversal de un rgano canalicular.
La pared est forma por cuatro capas, desde la luz al exterior son la mucosa, submucosa,
muscular (capa circular y capa longitudinal) y tnica adventicia (serosa).
En la pared del intestino reconozca y dibuje plexos nerviosos constituidos por neuronas
perifricas, grandes, basfilas y de ncleo vesicular y fibras nerviosas. En la submucosa se
localiza el plexo de Meissner y entre las capas musculares circular y longitudinal el plexo de
Auerbach. Los cuerpos neuronales se encuentran rodeados por clulas gliales denominadas
clulas satlites.

Prep. 105. Mdula espinal (impregnacin argntica de Cajal del nitrato de plata para
terminaciones nerviosas)
Con esta tcnica los filamentos intermedios neuronales (neurofilamentos) y los microtbulos
se asocian y forman un artificio denominado en la microscopa clsica neurofibrillas, las cuales
se observan en marrn oscuro o negro sobre un fondo dorado. Permite analizar el trayecto de
axones (ricos en estos elementos citoesquelticos) y en muchos casos las terminaciones
axnicas presinpticas contactando con los somas de grandes neuronas en el asta anterior.
Algunos vasos aparecen impregnados de color marrn.

Prep 106. Mdula espinal (coloracin de Klver- Barrera)
Esta es una tcnica que combina la coloracin de la mielina por el Luxol Fast Blue (celeste
intenso) con la coloracin de estructuras celulares cidas (ncleo, nuclolo, material basfilo
citoplsmico, grumos de Nissl) con una anilina bsica (azul-violceo). Permite por lo tanto
analizar en un rgano en forma simultnea la citoarquitectura (ubicacin de los cuerpos
celulares - ncleos, capas, etc) y la mieloarquitectura (trayecto y disposicin de haces de fibras
mielnicas).

Reconozca la sustancia blanca, donde estn ausentes los cuerpos neuronales, muy rica en
fibras nerviosas mielnicas. En las secciones transversales de estas fibras puede observarse la
vaina de mielina coloreada en celeste, mientras el axn, que ocupa el lugar central en la fibra,
no se colorea.

En la sustancia gris se reconocen los cuerpos neuronales, con ncleo eucromtico, con
nuclolo evidente, rodeado de un pericarion basfilo en donde pueden diferenciarse grumos
de Nissl.

Tanto en la sustancia blanca como en la gris se observan clulas gliales, aunque esta tcnica
slo permite diferenciar los ncleos. Los astrocitos presentan ncleos ovales, en general con
una indentacin, eucromticos. Las clulas microgliales tienen ncleos pequeos, comprimidos
y heterocromticos. Los oligodendrocitos poseen ncleos cilndricos (pueden observarse como
perfiles circulares en secciones transversales), con la cromatina finamente dispersa.

Prep. 109. Cerebelo y tronco enceflico (hematoxilina y eosina)
En este preparado se puede analizar la organizacin del sistema nervioso central en sustancia
gris (ncleos y cortezas) y sustancia blanca.
A simple vista reconozca dos regiones: una de aspecto laminar, ms basfila correspondiente
al cerebelo, y un sector ms eosinfilo y homogneo correspondiente al tronco.
Con el menor aumento reconozca las zonas de sustancia gris, caracterizadas por la mayor
densidad de cuerpos neuronales, y la sustancia blanca, ms eosinfila.

A nivel del tronco enceflico, la sustancia gris se dispone en ncleos (acmulos neuronales
rodeados por sustancia blanca, sin un lmite bien definido). En cada uno de los ncleos observe
neuronas a mediano y mayor aumento. Observar la forma del cuerpo, caractersticas
tintoriales del ncleo y del pericarion.
A nivel del cerebelo la sustancia gris adopta una disposicin en corteza (lmina de sustancia
gris en la superficie del rgano). La corteza cerebelosa est formada por dos capas de muy
diferente densidad celular (molecular y granular) y entre ellas se encuentra una tercera capa
(de clulas de Purkine).
La sustancia blanca, tanto a nivel del cerebelo como del tronco enceflico, es ms plida,
eosinfila y homognea. Pueden observarse los ncleos de clulas gliales los cuales poseen las
caractersticas ya descritas.

Prep. 109. Cerebelo y tronco enceflico (tcnica de Nissl)
Este preparado es similar al anterior, sin embargo debido a que se utiliz azul de toluidina
como colorante bsico en lugar de la hematoxilina, el citoplasma neuronal se puede observar
de un azul intenso, que pone en evidencia los grumos de Nissl en el pericarion. Los ncleos de
las clulas gliales observan las mismas caractersticas morfolgicas ya descritas.

Prep 129. Tronco enceflico o mdula espinal (deteccin histoqumica de la NADPHdiaforasa)
Esta tcnica permite reconocer la silueta de las neuronas y vasos sanguneos que expresan la
actividad enzimtica NADPH-diaforasa (u xido Ntrico Sintasa). Las clulas gliales no expresan
la enzima.
A simple vista y a menor aumento observe las caractersticas ya descritas de mdula espinal o
tronco enceflico, que depender del corte.
A mediano y mayor aumento observe las clulas positivas a la reaccin que aparecen en color
azul intenso. La enzima responsable de la reaccin (NADPH-Diaforasa u xido Ntrico Sintasa)
se distribuye en el citoplasma de algunas neuronas y vasos sanguneos. En muchas de ellas
aparecen marcados el soma y las prolongaciones, dando una imagen similar a la que se
obtiene con la tcnica de Golgi. En neuronas en que la reaccin es muy intensa, puede no
verse el ncleo celular quedando cubierto por el citoplasma intensamente positivo, pero en
muchos casos se puede observar que el ncleo aparece sin coloracin.

Prep. GFAP. Inmunohistoqumica con anticuerpos anti-GFAP (protena cida glial fibrilar)
La tcnica permite la deteccin especfica de astrocitos gracias a la deteccin de la presencia
de protena cida glial fibrilar (GFAP) mediante anticuerpos especficos. Las secciones fueron
incubadas con un anticuerpo especfico contra la protena GFAP. La localizacin de los
anticuerpos es detectada mediante anticuerpos secundarios acoplados a un sistema
enzimtico cuya actividad produce un precipitado de color marrn. Los astrocitos, detectados
por la presencia de dicha coloracin pueden identificarse en forma especfica, dado que es el
nico tipo celular que expresa la protena GFAP en los filamentos intermedios.

No olvide estudiar las micrografas electrnicas sobre estos temas as como para la sinapsis
PROBLEMA
El problema con se trabajar en este curso se centra en la interpretacin de una preparacin
microscpica obtenida luego de realizar una maniobra experimental en un roedor de
laboratorio. Este procedimiento practicado en animales de experimentacin permite simular
parcialmente situaciones comparables de la patologa humana.
El estudio de las preparaciones ser abordado a lo largo de todo el curso, de modo que los
conocimientos sobre la estructura del sistema nervioso que se vayan adquiriendo

paulatinamente permitirn ir ajustando el anlisis a niveles progresivamente ms complejos e

ir dando respuesta a las distintas preguntas que se formulan.
Problema: Investigando las consecuencias de una lesin
Se practic una lesin experimental a un roedor de laboratorio. Un tiempo despus se aisl un
rgano del sistema nervioso del animal a partir del cual se obtuvieron secciones histolgicas
que fueron procesadas para su anlisis microscpico.

Prcticos 1, 2 y 3
1 Cuntos tipos celulares puede identificar en la preparacin?
2 De qu tipo celular se trata?
3 Cules son sus principales caractersticas morfolgicas?
4 Estas clulas se localizan en la sustancia gris o en la blanca? Las clulas exhiben diferencias
morfolgicas segn su ubicacin en el tejido?
5 La respuesta en el rgano es simtrica? (Ambos lados del rgano presentan similar
reactividad?)
6 Qu ventajas y que inconvenientes plantea la tcnica utilizada en los preparados
problema (IHQ) respecto a otras que permiten identificar el mismo tipo celular?

Parte 2 (Prcticos 4, 5 y 6)
Sistema nervioso perifrico, receptores y rganos de los sentidos

Objetivos
a) Reconocer y analizar la estructura del nervio perifrico, identificar sus componentes y
comprender el significado funcional de las distintas vainas que constituyen las fibras nerviosas.
b) Reconocer distintos tipos de receptores perifricos, analizar su estructura y comprender sus
principales caractersticas funcionales.
c) Reconocer e identificar los distintos componentes estructurales del ojo, comprender sus
relaciones anatmicas y sus principales caractersticas funcionales.
d) Reconocer e identificar los componentes estructurales del odo interno en sus sectores
vestibular y coclear; analizar la estructura del rgano de Corti y de las mculas y crestas
ampulares. Comprender las principales caractersticas funcionales de todas estas estructuras.

Materiales
31. Corpsculo de Paccini, HE
43. Nervio (longitudinal), impregnacin argntica
45T. Nervio (transversal), HE
45L. Nervio (longitudinal), HE
55. Lengua, HE
75. Fosas Nasales, HE
118. Globo ocular, HE
119 Globo ocular, HE
120. Odo, HE
132.- Seccin transversal de cuello (huso neuromuscular), HE
MICROFOTOGRAFAS ELECTRNICAS

NERVIO
Observe y dibuje las principales caractersticas morfolgicas de los distintos constituyentes
estructurales del nervio perifrico.

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Prep 45T. Nervio (seccin transversal), HE

Identifique los fascculos nerviosos separados por el perineuro. Reconozca el epineuro en el
sector ms externo del nervio. Con aumentos mayores observe las fibras nerviosas
individuales y las vainas de mielina de diferente dimetro. Reconozca el endoneuro rodeando
cada fibra nerviosa. Entre las fibras ser observan ncleos que pueden corresponder a
fibroblastos o clulas de Schwann. A mayor aumento, pueden observarse agrupaciones de
fibras amielnicas englobadas por prolongaciones de las clulas de Schwann?

Prep 45L, seccin longitudinal de nervio, HE
Observe e identifique epineuro y perineuro. Con aumentos mayores reconozca fibras nerviosas
mielnicas. En algunos casos la orientacin de la seccin permite observar el axn, que aparece
dbilmente coloreado en el centro de la fibra. Pueden reconocerse interrupciones en la vaina
de mielina correspondientes a los nodos de Ranvier (en estas preparaciones con HE son
imgenes parecidas a alas de mariposa), que se reconocen como sectores no coloreados de
perfiles redondeados. Entre las fibras observe nuevamente los ncleos de fibroblastos y clulas
de Schwann.

Prep 43. Nervio, seccin longitudinal, impregnacin argntica.
Reconozca los componentes estructurales del nervio ya observados en las otras preparaciones.
Con aumentos mayores pueden identificarse los nodos de Ranvier por la presencia de la
llamada cruz de Ranvier. A nivel de los nodos, las sales de plata impregnan parcialmente el
nervio y difunden desde el nodo una pequea distancia hacia cada internodo, constituyendo
una rama de la cruz. La otra rama est constituida por un depsito de sales de plata situado
entre ambos segmentos internodales.


RECEPTORES
Observe y dibuje las caractersticas estructurales de los distintos tipos de receptores.

Prep 31, Corpsculo de Paccini, HE
Reconozca los corpsculos de Paccini, de forma elipsoidal constituidos por lminas
concntricas de tejido conectivo que se disponen rodeando la fibra nerviosa. Reconozca
ncleos de forma alargada que corresponden a las clulas que forman las lminas. La fibra
nerviosa penetra al receptor por un polo de la cpsula. La fibra amielnica envainada se rodea
de numerosas clulas de Schwann aplanadas que dan lugar a la formacin del ncleo interior
del corpsculo. Este se observa al microscopio como una estructura redondeada (central en
algunos cortes) debido a que generalmente los corpsculos estn cortados transversalmente.
El resto de las laminillas recibe el nombre de ncleo exterior.

Prep. 132, Huso neuromuscular (seccin transversal de cuello), HE
A simple vista y menor aumento identifique el conducto raqudeo, mdula espinal, vrtebra y
msculos de la gotera paravertebral. Identifique los husos neuromusculares en corte
transversal dispersos entre los haces de fibras musculares de los msculos paravertebrales.
Identifique la cpsula y las fibras intrafusales.

Prep. 55, Lengua, HE
En la superficie dorsal del rgano reconozca los distintos tipos de papilas linguales. Identifique
los corpsculos gustativos en las paredes laterales de las papilas caliciformes.

Prep. N 75, Fosas Nasales (Hematoxilina-Eosina)
A simple vista y aumento topogrfico reconozca los principales accidentes anatmicos. Se
trata de una seccin frontal de las fosas nasales. En la parte inferior se ubica el paladar,

11

recubierto por epitelio estratificado plano que corresponde al techo de la cavidad bucal. Por la
cara superior, en la cavidad nasal, reconocer el tabique medio y los cornetes. En el epitelio
que reviste la cavidad identifique el epitelio olfatorio, constitudo por epitelio
seudoestratificado con clulas ms altas que a nivel traqueal. En este tejido tambin puede
ubicar zonas con clulas basales, pequeas de ncleo basfilo y que no contactan con la
superficie; clulas de sostn, con ncleos ovalados localizados en la parte apical del epitelio; y
clulas olfatorias. Estas son neuronas bipolares que se distribuyen uniformemente entre las
clulas de sostn. Su ncleo se localiza a nivel intermedio entre los ncleos de las clulas
basales y de sostn. La dendrita transcurre por el espesor del epitelio hasta la superficie
luminal. La lmina propia est constituida por una densa capa de tejido conjuntivo ricamente
vascularizado por un extenso plexo de capilares sanguneos, venas, linfticos y filetes
nerviosos. Identifique tambin la presencia de las glndulas olfatorias de Bowmann, glndulas
tubuloalveolares serosas, que drenan a la superficie.

GLOBO OCULAR

Prep. 118, Seccin de globo ocular, HE (Prep. 119-solo retina)
Los cortes que se observan corresponden generalmente a secciones paralelas al eje
nteroposterior del globo ocular. A simple vista se puede distinguir en el polo anterior la
crnea, de convexidad mayor y coloracin ms plida.
Reconozca e identifique las tres capas que forman la pared del ojo:
Capa externa o esclerocorneal, constituida en su sector anterior por la crnea y en su sector
latero posterior por la esclertica.
Capa media, vea o tnica vascular, formada de adelante hacia atrs por: iris, cuerpo ciliar y
coroides.
Capa interna o nerviosa, constituida por la retina, la cual posee una porcin anterior no
fotosensible y una posterior fotosensible.
Para continuar el estudio microscpico de este preparado iremos analizando sucesivamente
cada una de las capas citadas desde afuera hacia dentro y desde adelante hacia atrs.

CORNEA:
Con aumentos mayores reconozca y analice la estructura de la crnea. Identifique :
Epitelio corneal: en el sector ms anterior del ojo en contacto directo con el aire. Se
conforma por un epitelio estratificado plano.
Membrana de Bowmann.
Estroma o sustancia propia: es la capa ms voluminosa de la crnea, formada por un
tejido conjuntivo denso muy regular y caractersticamente avascular.
Membrana de Descemet.
Endotelio corneal: en contacto con el humor acuoso de la cmara anterior, formado por
un epitelio plano simple que no siempre se conserva en los preparados.

ESCLEROTICA:
Junto con la crnea, constituye la tnica fibrosa del ojo, formada por tejido conjuntivo denso
irregular. En algunos preparados puede observarse la interrupcin de esta capa por la
emergencia del nervio ptico en el polo posterior del globo ocular.

LIMBO ESCLEROCORNEAL:
Es la zona de transicin entre la crnea y la esclertica. A su nivel:
el epitelio corneal se contina con el de la conjuntiva bulbar,
la membrana de Bowman es sustituida por el estroma de la conjuntiva,
el estroma corneal se desordena y se contina con la esclertica,

12

 la membrana de Descemet es sustituida por el retculo trabecular,

el endotelio corneal recubre las trabculas de dicho retculo.
Observe cada uno de los elementos citados a nivel del limbo. Ubique el conducto de Schlemm.
Con qu funcin se relaciona el mismo?

IRIS:
Se trata de una capa de tejido conjuntivo laxo pigmentado que delimita un orificio central: la
pupila. Por su cara anterior contacta con la cmara anterior, mientras que por la posterior
contacta con la cmara posterior, ambas conteniendo al humor acuoso. Analice sus
caractersticas morfolgicas. En su cara posterior observe una capa de caractersticas
epiteliales, pigmentada que corresponde a la porcin iridiana de la retina no fotosensible.
Observe que se trata de un epitelio biestratificado con sus dos capas pigmentadas. El grado de
pigmentacin del tejido conjuntivo laxo que forma el estroma iridiano es variable entre
diferentes individuos. Con qu se relaciona esta pigmentacin?

CUERPO CILIAR:
Se ubica entre el iris y la coroides. Observe en su superficie interna prolongaciones
digitiformes conocidas como procesos ciliares (prolongaciones digitiformes del cuerpo ciliar
hacia el interior del rgano). El eje de los mismos est constituido por tejido conjuntivo laxo
muy vascularizado y su superficie est recubierta por la porcin ciliar de la retina no
fotosensible. Esta retina ciliar est formada por dos capas celulares, de las cuales, a diferencia
de lo que ocurra en el iris, slo la externa es pigmentada. El resto del cuerpo ciliar est
constituido por el msculo ciliar y tejido conjuntivo. Recuerde con qu funcin se relacionan el
msculo ciliar y los procesos ciliares.

COROIDES:
Formada por tejido conjuntivo pigmentado y muy vascularizado. Identifique a su nivel
abundantes clulas pigmentarias y vasos sanguneos de diferente calibre.

RETINA
Sector no fotosensible: Consta de dos zonas ya descritas (retina iridiana y retina ciliar)
Sector fotosensible:
Se ubica en el sector latero posterior del ojo, en contacto con el humor vtreo. Est formada
por 10 capas observndose generalmente una separacin entre el epitelio pigmentario (que
queda unido a la coroides) y las restantes capas. A qu se debe dicho artefacto de tcnica?
Puede relacionarse con alguna patologa?
Reconozca e identifique las capas que la componen y analice sus caractersticas estructurales:
1. Epitelio pigmentario (el cual generalmente queda adherido a la coroides).
2. Conos y bastones.
3. Membrana limitante externa.
4. Nuclear externa.
5. Plexiforme externa.
6. Nuclear interna.
7. Plexiforme interna.
8. Clulas ganglionares.
9. Fibras del nervio ptico.
10. Membrana limitante interna.

Cada una de estas capas de la retina tiene caractersticas y funciones particulares que deber
recordar y relacionar con su estructura. De todas ellas, cul contacta con el humor vtreo?
El sector donde la retina no fotosensible se contina con la retina fotosensible se denomina
ora serrata, qu caractersticas posee el mismo?

13

En algunos de los preparados es posible tambin observar el cristalino; ubquelo y observe sus
caractersticas histolgicas. Topografe las diferentes cmaras que se relacionan con l.

OIDO:

Prep. 120, Odo, HE.
Los preparados corresponden a cortes seriados del hueso temporal en la zona donde se
localizan los distintos sectores del odo. Por ello para observar los distintos elementos
anatmicos que componen el odo deber observar distintos cortes practicados a diferentes
niveles del rgano.
A menor aumento identifique las cavidades y conductos labrados en el hueso temporal, que en
su conjunto conforman el laberinto seo. Determine las comunicaciones y relaciones entre
dichas cavidades. El laberinto seo comprende una cavidad central, el vestbulo, y un conducto
arrollado en espiral, el caracol o cclea. Desde el vestbulo parten y llegan a l 3 conductos
incurvados, los conductos semicirculares seos, que de acuerdo a su posicin se denominan
superior, posterior y externo. En algunos cortes se observan adems regiones
correspondientes al odo medio: platina del estribo y trompa de Eustaquio, cuya pared est
constituida por epitelio pseudoestratificado cilndrico ciliado sobre una lamina propia de tejido
conjuntivo y por fuera tejido seo en su sector inicial y el resto de su trayecto rodeado de
cartlago.
Alojado en el laberinto seo se encuentra el laberinto membranoso; entre ambos existe un
espacio o laberinto perilinftico con tejido conjuntivo laxo y que contiene perilinfa. El
laberinto membranoso contiene endolinfa y comprende utrculo, sculo, conductos
semicirculares membranosos y conducto coclear.

Estructuras membranosas vestibulares
El sculo y el utrculo estn alojados en el vestbulo. Son estructuras saculares de pared
delgada, formada por una capa fibrosa tapizada en su luz por un epitelio pavimentoso simple.
Cada una de estas estructuras posee regiones especializadas que constituyen reas sensoriales
vestibulares denominadas mculas. A su nivel el epitelio se modifica: es ms alto y se pueden
observar dos tipos celulares: clulas de sostn y clulas ciliadas. Las primeras son altas y sus
ncleos se encuentran a diferentes niveles confirindole al epitelio un aspecto estratificado.
Entre ellas se alojan las clulas sensoriales o ciliadas, cuyos estereocilios y un cinocilio se
proyectan hacia la parte inferior de la membrana otoltica (zona prerreceptorial).
Los conductos semicirculares membranosos poseen un extremo dilatado denominado
ampolla, a cuyo nivel existe otra rea sensorial vestibular denominada cresta ampular, cuya
composicin celular es similar a la de las mculas. Tambin en la cresta, los estereocilios y el
cinocilio de las clulas ciliadas se proyectan hacia una zona prerreceptorial, en este caso una
estructura gelatinosa llamada cpula.

Estructuras membranosas cocleares
Identifique el corte del caracol seo, el cual describe 2 vueltas y alrededor de un eje de
tejido seo denominado columela o modiolo. Es posible observar grupos de somas neuronales
localizados en la columela al lado de cada vuelta del caracol, neuronas que pertenecen al
ganglio espiral. El caracol seo posee en su pared medial una saliencia sea proveniente del
modiolo denominada lmina espiral. Desde sta se extiende una lmina fibrosa que separa la
rampa timpnica de la vestibular. La rampa vestibular es a su vez dividida por la membrana
vestibular o de Reissner en rampa vestibular y rampa o conducto coclear. El caracol seo
queda as ocupado por 3 rampas: vestibular, coclear y timpnica. Observe un corte del caracol
seo e identifique las estructuras que forman parte del caracol membranoso o conducto
coclear:

14

1) prominencia espiral
2) estra vascular
3) surco espiral externo
4) membrana vestibular
5) limbo espiral
6) lmina espiral sea
7) membrana tectoria
8) surco espiral interno
9) membrana basilar
La rampa media o coclear se denomina tambin conducto coclear membranoso; en ste se
aloja el rgano de la audicin u rgano de Corti:
Se localiza sobre la membrana basilar, y al igual que las reas sensoriales vestibulares est
formado por clulas sensoriales y clulas de sostn, las cuales se organizan de forma compleja.
Observe el tnel interno formado por el adosamiento de 2 clulas de sostn denominadas
pilares. A ambos lados del tnel interno identifique las clulas falngicas, y sobre ellas las
clulas sensoriales auditivas. Estas ltimas presentan una especializacin en su sector apical
similar a aquella de las clulas sensoriales vestibulares, que a diferencia de stas, las clulas
ciliadas del rgano de Corti no poseen cinocilio, solamente estereocilios, y en este caso la
estructura prerreceptorial es la membrana tectoria.

PROBLEMA

Prcticos 4, 5 y 6
7 A qu rgano corresponde el preparado problema?
8 La distribucin e intensidad de la seal en la preparacin es homognea?
9 Dnde se observa mayor intensidad de la seal?
10 Cmo podra explicar esos datos?

Parte 3 (Prcticos 7, 8 y 9)
rganos del sistema nervioso central

MDULA ESPINAL

Objetivos

Al finalizar esta actividad el estudiante deber ser capaz de:
- Reconocer las caractersticas morfolgicas de la mdula espinal.
- Distinguir las diferencias en los distintos segmentos del rgano.
- Identificar la distribucin de los somas neuronales a nivel de la sustancia gris.
- Describir la organizacin en lminas de Rexed.
- Incorporar el concepto de neurona de proyeccin e interneurona.

Materiales:

105. Mdula espinal, Imprgnacin argntica de Cajal
106. Mdula espinal, HE
106. Mdula espinal, Klver-Barrera
106. Mdula espinal, impregnacin argntica de Golgi
106. Mdula espinal, Nissl
132. Conducto raqudeo, tricrmico de Cajal-Gallego

15

MICROFOTOGRAFIAS ELECTRONICAS

Actividades

La estructura interna de la mdula espinal est organizada en:
Sustancia gris: localizada centralmente, con una disposicin en forma de H, con dos astas
dorsales (posteriores) y dos ventrales (anteriores). Las astas ventrales, voluminosas, dirigidas
hacia adelante y afuera, no alcanzan la superficie medular. Las astas dorsales, ms delgadas,
dirigidas hacia atrs y afuera, llegan a contactar con la superficie medular.
Las astas laterales, asiento de ncleos vegetativos, se observan solamente en los segmentos
dorsales (o torcicos).
Sustancia blanca: se dispone en cordones (anteriores, laterales y posteriores), rodeando la
sustancia gris.
Las dimensiones, disposicin y proporcin entre sustancia gris y blanca presenta variaciones en
los diferentes segmentos.

Prep. 106. Mdula espinal, impregnacin argntica de Cajal para terminaciones nerviosas

Con el menor aumento observe las caractersticas antes mencionadas de las sustancias gris
(central) y blanca (perifrica).
A mediano y mayor aumento, a nivel de la sustancia gris, identifique los somas neuronales
intensamente teidos, al igual que el comienzo de las prolongaciones neurales, ya que se trata
de una tcnica neurofibrilar. En las astas ventrales observe las motoneuronas y en las astas
dorsales identifique neuronas de menor tamao. Puede apreciarse con facilidad la lmina II de
Rexed o sustancia gelatinosa de Rolando, un ncleo del asta dorsal en forma de medialuna
formado por pequeos cuerpos neuronales.

Prep. 106, Mdula espinal, Klver-Barrera
A menor aumento observe las diferencias del aspecto de la sustancia blanca con respecto a la
gris con esta tcnica mieloarquitectural: la sustancia blanca se tie ms intensamente debido a
que hay ms cantidad de mielina.
A mediano y mayor aumento identifique a nivel de la sustancia blanca, las vainas de mielina,
generalmente en cortes transversales de color azul y algunos elementos celulares
principalmente los ncleos de neuroglas. En la sustancia gris observe los somas neuronales
con las caractersticas ya mencionadas en otros preparados.

Prep. 132, conducto raqudeo, Tricrmico de Cajal-Gallego
Observe a menor aumento la presencia de tejido muscular, conjuntivo adiposo, y el cuerpo
vertebral en proceso de osificacin. Inmediatamente por debajo del periostio se reconoce una
lmina de tejido conjuntivo denso que corresponde a la duramadre; entre ella y el periostio se
encuentra el espacio epidural ocupado por tejido adiposo y vasos venosos, y por dentro el
espacio subdural. En ntimo contacto con la superficie medular observe la piamadre. En el
espacio entre la piamadre y la duramadre se observan fragmentos de la aracnoides. Ubique a
ambos lados de la mdula cortes de las races, y en algunos preparados el ganglio raqudeo. En
el centro del preparado reconozca la mdula espinal y observe la disposicin de la sustancia
gris y blanca.
A mediano y mayor aumento identifique los somas neurales en la sustancia gris con un ncleo
eucromtico y nuclolo evidente, neuronas motoras a nivel de las astas ventrales y neuronas
sensitivas en las astas dorsales. Observe las neuronas del ganglio raqudeo que son
seudounipolares con somas esfricos u ovales y ncleos eucromticos y centrales.

Prep. 106, Mdula espinal, impregnacin argntica de Golgi

16

En este preparado pueden visualizarse las diferentes morfologas neuronales y gliales.

Prep. 106, Mdula espinal, tcnica de Nissl
Pueden visualizarse las diferentes agrupaciones neuronales y la disposicin en sustancia gris y
blanca.

PROBLEMA

Prctico 7
11 En qu ncleos se localiza la mayor intensidad de la seal?
12 Dnde puede haberse realizado una lesin que explique consecuencias directas en estas
localizaciones?


CORTEZA CEREBRAL

Objetivos
Al finalizar esta actividad el estudiante deber ser capaz de:

- Resear las principales caractersticas estructurales de la corteza cerebral.
- Identificar sus diferentes sectores: neo, paleo y arquicrtex.
- Identificar las diferentes capas con preparaciones procesadas para diferentes tcnicas
y compararlas entre s. Describir las diferencias entre distintas regiones: motora,
sensorial, asociativas.
- Describir neuronas principales o de proyeccin e interneuronas. Conocer las
principales conexiones intra y extracorticales.
- Referir el concepto de organizacin columnar, identificar la distribucin de las
neuronas que fundamenta la organizacin columnar.

Materiales:


PREPARADO N 111.- CEREBRO (corte frontal) Tcnica de Nissl.
PREPARADO N 40.- CORTEZA CEREBRAL. Tcnica de Golgi.
PREPARADO N 110.- CEREBRO (corte frontal) Mtodo de Cajal.
MICROFOTOGRAFIAS ELECTRONICAS (impresas y colgadas en EVA)

Actividades:

La corteza cerebral es la capa de sustancia gris que reviste los hemisferios cerebrales. Presenta
variaciones en los distintos sectores lo que permite reconocer zonas de arquicortex,
paleocortex y neocortex. Los preparados que observar en clase son obtenidos de cerebros de
rata. Si bien la localizacin de los distintos sectores de la corteza (arqui, paleo y neocortex) es
diferente que en el humano, su estructura histolgica se correlaciona bien. Por ejemplo, el
hipocampo anterior es dorsal en la rata y ventral en el humano.

Prep. 111, Cerebro, (corte frontal), tcnica de Nissl
A simple vista y con el menor aumento, identifique: ventrculos (dentro de los cuales se
pueden ver los plexos coroideos), sustancia blanca, formaciones interhemisfricas, sustancia
gris localizada centralmente en los ganglios basales, y la sustancia gris perifrica que
corresponde a la corteza cerebral. Revistiendo la superficie ubique estructuras menngeas.
Deber observar los distintos sectores de la corteza, con tres patrones histoarquitecturales:

17


1) ARQUICORTEX: este sector de la corteza se localiza en la regin del hipocampo, en el lbulo
temporal humano (el preparado de clase es de rata), constituida fundamentalmente por el
cuerno de Ammon (CA) y el giro dentado (GD). Ambos se organizan en tres capas, que de la
superficie a la profundidad son las siguientes:
(I) capa molecular
(II) capa de las pirmides dobles (en el CA), de los granos (en el GD)
(III) capa de los corpsculos polimorfos
En ambos sectores (CA y GD) las neuronas principales son las ubicadas en la capa media, dado
que su axn constituye la eferencia, si bien las neuronas piramidales son de larga proyeccin y
las granulares proyectan ms localmente.
2) PALEOCORTEX: Constituye una corteza histolgicamente de transicin entre arquicortex y
neocortex. Establece una transicin de tres a seis capas.
3) NEOCORTEX: Constituye la mayor parte de la superficie cortical en el ser humano (recuerde
que el preparado que observar es de rata, y el neocortex ocupa un sector restringido cercano
a la hendidura interhemisfrica y sin plegamientos).
Intente identificar las seis capas de este tipo de corteza, que desde la superficie hacia la
profundidad son las siguientes:
(I)
capa molecular o plexiforme: fundamentalmente neuroplica, con
escasos somas neuronales (neuronas de axn corto).
(II)
capa granulosa externa: predominan neuronas de axn corto, aunque
existen neuronas piramidales pequeas.
(III)
capa piramidal externa: contiene neuronas piramidales pequeas y
medianas, adems de neuronas de axn corto estrelladas.
(IV)
capa granulosa interna: puede tener neuronas piramidales, pero
presenta fundamentalmente neuronas estrelladas, muchas de ellas con abundantes
espinas en sus dendritas (recuerde que stas no son visibles con esta tcnica para lo cual
deber recurrir a la tcnica de Golgi).
(V)
capa piramidal interna o ganglionar: predominancia de neuronas
piramidales, muchas de ellas de gran tamao.
(VI)
capa de los corpsculos polimorfos: Posee neuronas de morfologa
variada: estrelladas, fusiformes, etc.


Prep. 40, Corteza cerebral, tcnica de Golgi.
Ya conocemos este preparado del prctico de tejido nervioso. Recuerde que se observan
neuronas, glas y capilares sanguneos. Analice fundamentalmente la morfologa de las
neuronas corticales. Reconozca: neuronas piramidales, con su tronco dendrtico apical
caracterstico y grupos de dendritas basales. Generalmente las dendritas de estas neuronas
presentan abundantes espinas. El axn, mucho ms delgado que las dendritas, emerge de la
base opuesta al tronco dendrtico apical o de una de las dendritas basales y generalmente solo
es visible su sector inicial.
Las dems neuronas que ubicar en la corteza son interneuronas y se pueden clasificar en base
a la distribucin de sus axn que no sale de la sustancia gris (neuronas de axn corto, Golgi
tipo II). La morfologa del soma es variada (estrelladas, fusiformes, etc.). Se agrupan como
neuronas no piramidales.
Reconozca tambin la presencia de los distintos tipos de gla ya conocidos.

PROBLEMA

Prctico 8
13 Qu le parece que podra observarse si la lesin se hubiera realizado en la corteza motora?

18


CORTEZA CEREBELOSA

Objetivos
Al finalizar esta actividad el estudiante deber ser capaz de:
- Describir las caractersticas morfolgicas de la corteza cerebelosa.
- Identificar las diferentes capas con preparaciones procesadas para diferentes tcnicas
y compararlas entre s.
- Identificar las neuronas de proyeccin (Purkinje) y los distintos tipos de interneuronas.
- Diagramar el circuito caracterstico del cortex cerebeloso, identificar sus principales
componentes celulares as como su conexionado intrnseco, y determinar la
orientacin del corte con respecto al eje mayor de las laminillas

Materiales
PREPARADO N109.- CEREBELO Y TRONCO. Tcnica de HE.
PREPARADO N109.- CEREBELO Y TRONCO. Tcnica de Nissl.
PREPARADO N109.- CEREBELO Y TRONCO. Tcnica de Cajal.
PREPARADO N109.- CEREBELO. Mtodo de Golgi.
MICROFOTOGRAFIAS ELECTRONICAS (impresas y colgadas en EVA)

Actividades

El cerebelo, al igual que otras estructuras del SNC, est constituido por sustancia gris y
sustancia blanca. La sustancia gris se compone de dos partes, la corteza cerebelosa que cubre
toda la superficie externa del cerebelo, y los ncleos del cerebelo que se hallan en el interior
del rgano. La sustancia blanca se encuentra en el centro de las laminillas y cubierta por la
corteza cerebelosa, as como tambin rodeando los ncleos grises. Esta se caracteriza por
tener una disposicin arborescente (ramificada), lo que indujo a que se le diera el nombre de
rbol de la vida.
Prep. 109, Cerebelo y tronco enceflico, HE.
A nivel del cerebelo, localice la corteza. Est formada por varias capas de diferente densidad
celular (molecular, de Purkinje y granulosa) que son identificables incluso con el menor
aumento.
La capa superficial (molecular o plexiforme) presenta baja densidad celular; es
fundamentalmente neuroplica. Los escasos cuerpos celulares que se observan corresponden a
neuronas estrelladas superficiales y profundas.
Las clulas de Purkinje de la capa media son grandes neuronas de soma redondeado u ovoide
del cual se observa la emergencia de un tronco dendrtico apical dirigido hacia la capa
superficial. Se disponen formando una capa del espesor de una clula. Su ncleo es
eucromtico y su citoplasma basfilo. En esta capa tambin se encuentran los cuerpos de las
clulas gliales de Bergmann (un tipo especial de astrocito), que con esta tcnica no se
diferencian de otras glas.
La capa granulosa se reconoce por la gran densidad de somas pequeos y redondeados de las
clulas grano. Esta elevada densidad celular da a esta capa su basofilia caracterstica.
Relativamente escasos y de mayor tamao se encuentran los somas de las neuronas de Golgi.
Localice en esta capa pequeas reas eosinfilas correspondientes a zonas donde se localizan
los glomrulos cerebelosos. stos pueden observarse detalladamente en las micrografas
electrnicas disponibles.

Prep. 109, Cerebelo y tronco enceflico, tcnica de Nissl

19

Esta tcnica utiliza azul de toluidina, un colorante bsico que pone en evidencia los grumos de
Nissl, por lo que el citoplasma neuronal se observa de color azul intenso. Observe los mismos
elementos que en el preparado anterior.
Prep. 109, Cerebelo y tronco enceflico, tcnica de Cajal
Identifique las capas de la corteza cerebelosa. Observe el aspecto fibrilar de la capa molecular,
que le da el nombre de capa plexiforme. En algunos cortes es posible reconocer en esta capa la
presencia de las fibras paralelas.
A nivel de la capa media observe que las clulas de Purkinje estn rodeadas en su sector basal
por un plexo de fibras que corresponde a los cestos que forman los axones de las clulas
estrelladas profundas (clulas en cesto).
En la capa granulosa se observa nuevamente la gran densidad de cuerpos celulares. El eje de
sustancia blanca de las laminillas aparece en color ms oscuro debido a la gran densidad de
fibras nerviosas.
Prep. 109, Cerebelo, impregnacin argntica de Golgi
Con esta tcnica es posible realizar un anlisis ms detallado de la morfologa celular.
Identifique y analice cada una de las clulas citadas a continuacin:

1) a nivel de la capa molecular:
clulas estrelladas profundas y superficiales,
ramificacin dendrtica de las clulas de Purkinje; observe la presencia de espinas a su
nivel,
prolongaciones de las clulas gliales de Bergmann

2) a nivel de la capa de clulas de Purkinje:
ubique el soma de las clulas de Purkinje. En ocasiones puede identificarse la emergencia
del axn por su polo basal.
soma de las clulas gliales de Bergmann.

3) a nivel de la capa granulosa:
clulas granos con sus dendritas cortas y expansiones digitiformes; muy ocasionalmente
puede verse el inicio de su axn ascendente,
clulas de Golgi de aspecto estrellado.

Adems de las clulas citadas, como en el resto del tejido nervioso, pueden encontrarse los
diferentes tipos de clulas gliales ya conocidos.

PROBLEMA

Prctico 9
14. Cmo explicara estos resultados? Qu funciones puede tener la protena detectada?
15 Esta situacin experimental podra tener un correlato en la patologa humana?

20

Parte 4 (Prcticos 10, 11, 12 y 13)

Sistemas cardiovascular y respiratorio

Prcticos 10 y 11 (sistema cardiovascular)

Objetivos:
a) Identificar y analizar la estructura y ultraestructura de los diferentes componentes del
sistema cardiovascular.
b) Comprender las principales propiedades funcionales de los distintos sectores del sistema y
correlacionarlas con sus caractersticas estructurales.

Materiales:
Preparaciones microscpicas:
38A T. Corazn, H-E
38A L. Corazn, tricrmico de Cajal-Gallego
38B. Corazn, hematoxilina fosfotngstica de Mallory
39. Corazn, tricrmico de Cajal-Gallego, H-E
49A. Arteria elstica, H-E
49B. Arteria elstica, orcena.
49A. Arteria elstica, tricrmico de Cajal-Gallego - Orcena
50. Arteria Muscular y Vena, HE
Micrografas electrnicas
CORAZN

Prep. 38A Corazn, H-E.
Identifique a simple vista las cavidades cardacas, los grandes vasos vinculados a estas
cavidades y los elementos valvulares presentes.
Identifique y analice la estructura del endocardio, miocardio y epicardio.
El endocardio, corresponde a la capa ms interna del rgano. Presenta un endotelio,
que reviste las cavidades cardacas, el cual se contina con el endotelio de la tnica
ntima vascular. El endotelio se apoya sobre un muy delgado tejido conectivo laxo, que
por debajo presenta un sector ms grueso de tejido conectivo denso, la capa subendocrdica; en dicha capa se observan vasos sanguneos, fibras elsticas y
musculares lisas. Eventualmente en este sector pueden encontrarse haces de fibras
del sistema de conduccin cardaca.
El miocardio, es el sector ms grueso formado por tejido muscular estriado cardaco (la
estriacin observada es similar a la del msculo estriado esqueltico). Las clulas
musculares se ramifican y anastomosan con fibras vecinas formado un entramado.
Dispuestas en forma perpendicular al eje mayor de las fibras destacan de tanto en
tanto lneas delgadas, intensamente coloreadas que corresponden a los sectores
transversales de los discos intercalares. Estos sectores transversales se disponen
desfasados entre la clula subyacente o suprayacente de modo que describen como
peldaos de una escalera, por lo cual se los ha denominado como trazos
escaleniformes. En el tejido conectivo se pueden observar nervios y elementos
vasculares.

21

 En el epicardio, que corresponde al sector ms externo del rgano, se observa un

epitelio simple plano (membrana serosa que constituye la capa visceral del pericardio)
por debajo del cual se localiza una delgada capa de tejido conectivo laxo submesotelial donde se pueden reconocer vasos coronarios principales y nervios.
Tambin se puede observar la presencia de tejido adiposo.
Aumento Mayor: Con el mayor aumento se reconocen las estriaciones transversales de las
fibras musculares y una delicada estriacin longitudinal. Observe como las fibras se ramifican y
anastomosan. En los sectores de cortes transversales se distingue la disposicin central de los
ncleos.

Prep.39 Corte de corazn (Tricrmico de Cajal-Gallego)
Recordemos que mediante esta tcnica se logra una coloracin del msculo en verde, tejido
conectivo en azul y los ncleos celulares en rojo. Utilice la descripcin histolgica del
preparado anterior.
Identifique los distintos sectores de la pared cardaca: endocardio, miocardio y epicardio.
Reconozca a mayor aumento las caractersticas histolgicas de las clulas musculares
auriculares y ventriculares. Identifique el miocardio inespecfico, el esqueleto cardaco y los
elementos valvulares presentes.
Prep. 38B Msculo Cardaco, hematoxilina fosfotngstica de Mallory
Los preparados corresponden a cortes de miocardio de cerdo. Identifique las caractersticas de
los miocitos contrctiles y del tejido muscular especfico.
A mediano y luego a mayor aumento: Observe la estriacin de las clulas y la presencia de los
discos intercalares. En el subendocardio se observan cortes de fibras ms gruesas y plidas que
corresponden a miocardio especfico o de conduccin. En estas fibras no se observan
estriaciones y presentan menor nmero de miofibrillas, las cuales se agrupan en la periferia
celular dejando una amplia zona central plida.
MACROVASCULATURA

Prep. 49A Corte de Arteria elstica (H-E)
Utilizando progresivamente los diferentes aumentos: Desde la luz hacia la periferia, podr
reconocer:
Tnica ntima, constituida por endotelio y capa subendotelial de tejido conectivo con
algunas clulas musculares lisas y fibroblastos. Por fuera se dispone la lmina
elstica interna que corresponde a la primera de las lminas fenestradas de la capa
media.
Tnica media, formada por lminas elsticas fenestradas dispuestas en forma
concntrica a la luz. Entre ellas se encuentran clulas musculares lisas, as como fibras
elsticas y de colgeno. En el sector externo de esta tnica se pueden reconocer
pequeos vasos sanguneos y linfticos. La lmina elstica externa, que en general es
menos prominente que la interna, corresponde a la ms externa de las lminas
elsticas de la capa media.
Tnica adventicia, constituida por tejido conectivo con fibras colgenas asociadas que
estn orientadas en su mayor parte longitudinales al vaso. Es posible reconocer vasos
de pequeo calibre que forman la vasa vasorum vasos de nutricin de la pared

22

vascular. La adventicia se contina con el tejido conectivo peri-vascular donde se

pueden reconocer adems algunas fibras nerviosas.
Prep. 49B Corte de Arteria elstica (Orcena)
La orcena y la resorcina-fFucsina son colorantes utilizados para la deteccin de fibras elsticas,
las que pueden evidenciarse coloreadas en violceo y castao oscuro mientras que las dems
estructuras tisulares se tien de color marrn plido. Con esta tcnica podr observar
fcilmente la presencia y distribucin de las lminas y fibras elsticas circunferenciales a la luz
del rgano como se describi en la preparacin anterior.

Prep. 50 Corte de arteria Muscular y Vena (HE)
Arteria:
Intente identificar las capas sealadas en el preparado anterior. Esquemticamente reconozca
en la tnica ntima: endotelio, tejido conectivo subendotelial y lmina elstica interna. Esta
ltima se observa como una lnea ondulada, eosinfila y refringente. La tnica media est
formada por varias capas musculares lisas circunferenciales a la luz, entre las que se
encuentran fibras colgenas y elsticas. El lmite externo de la capa media lo constituye la
lmina elstica externa. La tnica adventicia es gruesa y est formada por tejido conectivo con
vasos y nervios. Note que las arterias de mediano calibre como esta presentan una pared
gruesa en comparacin con el dimetro vascular.
Vena:
Acompaando a la arteria se observa una vena de gran calibre (vena muscular). Las venas
poseen comparativamente mayor calibre y mayor luz con pared ms delgada. La pared
presenta mayor contenido de tejido conectivo. Tambin se describe en ellas tres capas: tnica
ntima, media y adventicia. El lmite entre estas tres capas es menos ntido que en las arterias y
carecen de lminas limitantes elsticas interna y externa.
La tnica ntima compuesta por endotelio y tejido conectivo subendotelial de mayor espesor
que las venas ms pequeas. Esta capa puede presentar repliegues denominados valvas
venosas. En la tnica media se observa una o dos capas de clulas musculares lisas de
disposicin circular. La tnica adventicia es la que predomina, siendo ms gruesa en general
que la capa media. Se compone de tejido conectivo y en l se puede reconocer la vasa
vasorum, vasos linfticos y fibras nerviosas.

Prep. 49A Arteria, tricrmico de Cajal-gallego-orcena
En este preparado usted podr observar una serie de cortes de diferentes arterias teidas con
una combinacin de tricrmico de Cajal Gallego y orcena. Basndose en la distribucin de los
diferentes componentes de la pared de estos vasos, as como en el calibre del mismo trate de
identificar a qu tipo de vaso sanguneo corresponde cada uno de ellos (de distribucin y/o de
conduccin).
MICROVASCULATURA
Los elementos vasculares que comprenden la microcirculacin: arteriolas, capilares, vnulas y
capilares linfticos pueden observarse en los siguientes preparados
60. Esfago, HE
23. Ganglio Linftico, HE
71A. Hgado, HE (capilares sinusoidales)

Tambin se pueden observar en
49. Arteria Elstica, HE
50: Arteria muscular, HE

23

Arteriolas
Vasos sanguneos del sector arterial con menos de 100 m de dimetro con luz generalmente
redondeada. En estos vasos se observa la presencia de una tnica ntima constituida por
endotelio (y lmina basal) apoyado sobre la limitante elstica interna de aspecto
festoneado, eosinfila y refringente. Esta lmina elstica interna est ausente en las arteriolas
de menor calibre y en las metarteriolas.
La tnica media presenta de 1 a 2 capas de fibras musculares lisas de disposicin concntrica y
carecen de lmina elstica externa. En las metarteriolas la disposicin de las fibras musculares
es ms discontinua. La tnica adventicia est formada por tejido conectivo laxo.

Capilares
Son los vasos de calibre ms pequeo, con luz redondeada u oval. La pared est formada por el
endotelio que descansa sobre una lmina basal. En los capilares de menor dimetro, una sola
clula endotelial puede extenderse y envolver toda la circunferencia, en los de mayor dimetro
la pared puede estar formado por parte de 2 o 3 clulas. Cuando en las secciones transversales
de un capilar el corte pasa a nivel del ncleo de la clula endotelial, ste protruye hacia la luz.
Tambin pueden observarse la presencia inconstante de pericitos rodeando al los capilares.
Por fuera generalmente presentan una red de fibras reticulares.

Vnulas
Las ms pequeas presentan un dimetro entre 10 y 50 m. Su pared presenta endotelio (y
lmina basal) y pericitos. La capa subendotelial est poco desarrollada y consiste en tejido
conectivo laxo. No se reconoce tnica media. La adventicia conectiva tambin delgada,
presenta escasas fibrillas y clulas aisladas (fibroblastos, macrfagos, plasmocitos). Al igual que
las venas ms grandes no se observa lmina elstica interna ni externa.

Capilares linfticos
Poseen forma variable y alcanzan mayor calibre que los capilares sanguneos. Su pared est
formada por un endotelio delgado (lmina basal poco desarrollada por lo general). Carecen de
pericitos. Los capilares linfticos se renen para formar vasos linfticos de mayor calibre de
paredes delgadas en los que no se observa la constitucin de la pared estructurada como
vimos en los vasos sanguneos.
APARATO RESPIRATORIO

PRCTICOS 12 y 13

Objetivos:
a) Identificar y analizar las caractersticas estructurales y ultraestructurales de los distintos
sectores del aparatorespiratorio
b) Comprender la relacin entre las caractersticas estructurales y las propiedades funcionales
de los distintos componentes del sistema
c) Identificar y reconocer los componentes estructurales de la barrera hematogaseosa.

Materiales:
Preparados Histolgicos N:
o 75 Corte de Fosas Nasales (H-E)
o 77 Corte de Laringe (H-E)
o 76A Corte de Trquea (H-E)
o 76B Corte de Trquea (PAS-H)
o 79 Corte de Pulmn (HE)

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o
o
o
o

79B Corte de Pulmn (PAS-H)

79 Corte de Pulmn (Orcena)
79 Corte de Pulmn (TCG)
Micrografas Electrnicas

Prep. 75. Fosas nasales, HE.
El preparado fue descrito anteriormente.

Prep. 77. Laringe, HE
Corresponde a uma seccin oblicua de laringe. Reconozca la mucosa y determine el tipo de
epitelio de revestimiento (dependiendo del sector enfocado puede ser estratificado plano o
pseudoestratificado cilndrico ciliado); por debajo una lmina propia constituida por tejido
conectivo laxo, donde se localizan acmulos de glndulas tubulo-acinares mucosas y serosas.
Observe la presencia de los cartlagos larngeos de tipo hialino, rodeados por el pericondrio.
Reconozca la presencia de msculo estriado esqueltico que corresponde a los msculos
larngeos, seccionados en diferentes orientaciones.

Prep. 76A. Trquea, HE
Prep. 76B. Trquea, PAS-H
Observe la forma que presenta el corte transversal de este rgano,
En su pared y desde la luz hacia la periferia se reconoce:
La capa mucosa constituida por epitelio seudoestratificado cilndrico ciliado con clulas
caliciformes. Recuerde que tambin posee otros tipos celulares que no se visualizan al
microscopio ptico.
La lmina propia constituida por tejido conectivo rico en fibras elsticas y numerosas
glndulas submucosas bronquiales de tipo mixto seromucoso, cuyos conductos se abren a la
superficie. Por fuera se disponen una serie de anillos con forma de C, los cartlagos
traqueales, de tipo hialino que rodea su cara anterior y lateral, uniendo los extremos
posteriores de los mismos se disponen gruesos haces de fibras musculares lisas que se mezcla
en sus extremos con la capa de tejido conectivo denso que rodea al cartlago.
Estos anillos incompletos estn separados entre si por espacios en los que existe tejido
fibroelstico. No observable debido a la orientacin del corte.
Por fuera del tejido fibroelstico y el pericondrio se observa tejido conectivo laxo con vasos y
nervios.

Prep. 79. Corte de Pulmn (H y E) (PAS)
Con aumento topogrfico y mediano, reconozca estructuras alveolares de paredes delgadas
que conforman el parnquima pulmonar y diferentes cortes transversales y oblicuos de
estructuras canaliculares de la porcin de conduccin, algunas con luz irregular, de diferentes
calibres, que corresponden a los bronquios. Tambin es posible reconocer vasos sanguneos.
Observe tambin rodeando al rgano tejido epitelial simple plano mesotelio que forma parte
de la pleura visceral y que descansa sobre una delgada capa de tejido conectivo denso con
abundantes fibras colgenas y elsticas, que se continua en profundidad con una capa ms
gruesa de tejido conectivo con fibras elsticas que constituye los tabiques interlobulillares e
intersegmentarios.
A mayor aumento identifique las siguientes estructuras y analice la constitucin de sus
paredes.
Bronquios
Los cortes transversales de los bronquios generalmente son fciles de identificar debido al
aspecto festoneado de la luz.
La mucosa bronquial es similar a la de la trquea, presenta un epitelio seudoestratificado
cilndrico ciliado con clulas caliciformes, apoyado sobre una lmina propia constituida por

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tejido conectivo con abundantes fibras reticulares y elsticas, por fuera de la cual se localizan
las fibras musculares lisas que forman un anillo completo. Tambin se pueden reconocer,
glndulas tbulo-acinosas mucosas y serosas, y placas discontinuas de cartlago hialino
rodeado por adventicia.
Es importante tener en cuenta que la estructura bronquial se modifica gradualmente a medida
que disminuye su calibre. En los bronquios menores disminuye la cantidad de cartlago y del
tejido conectivo que lo rodea observndose solo islotes aislados. Las glndulas bronquiales
acompaan al cartlago.
Bronquolos
Corresponden a las ramificaciones pequeas del rbol bronquial, de entre 0,5 y 0,3 mm de
dimetro. Estn revestidos por epitelio cilndrico ciliado. Carecen de cartlago y glndulas. La
capa muscular es de mayor grosor que la de los bronquios, pero puede no ser continua. Las
ramificaciones iniciales de los bronquolos ms grandes, pueden presentar algunas clulas
caliciformes, pero los bronquolos terminales carecen de las mismas y simplemente estn
revestidos por un epitelio cilndrico o cbico con clulas ciliadas y clulas bronquiolares (de
Clara). Estas ltimas carecen de cilias y en su porcin apical forman un abultamiento luminal
convexo.

PORCIN RESPIRATORIA
Este sector est constituido por los bronquolos respiratorios, conductos alveolares, sacos
alveolares y alvolos.
Los bronquolos respiratorios constituyen la transicin desde la porcin conductora hasta la
porcin respiratoria de los pulmones. La pared est revestida por un epitelio similar al de los
bronquolos terminales aunque cada vez se hace ms bajo y carente de cilios en las
ramificaciones sucesivas. Sus paredes estn interrumpidas por dilataciones, los alvolos
(aparece epitelio alveolar). Por fuera se dispone escaso tejido conectivo y una capa muscular
menos desarrollada que en los bronquolos terminales.
A nivel de los conductos alveolares aparecen gran cantidad de alvolos por lo que la pared es
sumamente discontinua. Aqu los alvolos son tan numerosos y prximos entre si que los
limites laterales del conducto son difciles de identificar. Es posible reconocer grupos aislados
alineados de clulas epiteliales bronquiolares interpuestas entre los mencionados alvolos.
Luego de 2 o 3 ramificaciones, cada conducto alveolar termina en un atrio al cual se abren
grupos de cuatro o ms alvolos.
Alvolos
Reconozca con el mayor aumento los compartimientos saculares de pared fina. En los cortes
aparecen con contorno redondeado o poligonal. Los alvolos estn separados por tabiques de
tejido conectivo con una densa red capilar y delicadas fibras colgenas y elsticas. Es posible
encontrar aqu tambin fibroblastos, macrfagos y ocasionalmente linfocitos, plasmocitos o
mastocitos. El revestimiento epitelial alveolar es muy delgado y est constituido por
neumocitos tipo I: clulas aplanadas de ncleo pequeo aplanado y citoplasma de escaso
espesor; y neumocitos tipo II: clulas alveolares grandes de forma irregular cuboidea con
ncleo grande y redondeado, que se observan sobresaliendo hacia la luz del alveolo. En la luz
alveolar se pueden observar macrfagos alveolares pulmonares, los cuales no forman parte de
la pared alveolar.

Prep.79. Corte de Pulmn, orceina
Por medio de esta tcnica se evidencia la distribucin de las fibras elsticas en el parnquima
pulmonar as como en la pared de los bronquios y arterias del rgano que observa.

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