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Produccin in vitro de Pia (Ananas Comosus)

a travs de meristemos.
Carmen Gutirrez Crdoba.
Martha Gilda Oliva Umaa.

Objetivos de investigacin

Determinar el protocolo de micropropagacin de


pia (Ananas comosus)cultivar MS-2.

Objetivos de desarrollo
tecnolgico:
Evaluar diferentes medios de cultivo en la
micropropagacin de pia (Ananas
comosus)cultivar MS-2 para su reproduccin
masiva.
Regenerar plantas in vitro a travs de meristemos.

El proyecto consiste de cuatro


fases a realizar
Establecimiento o iniciacin.
Multiplicacin.
Regeneracin y enraizamiento.

Aclimatacin.

Generalidades de la pia
La pia pertenece taxonmicamente al gnero:
Ananas familia: Bromeliaceas.
Es una monocotilednea, herbcea, perenne.

Su reproduccin es vegetativa por medio de


hijuelos que nacen en el mismo tronco.

Generalidades de la pia
Despus de dos cosechas las plantas deben ser
eliminadas.

El cultivo in vitro de meristemos y yemas axilares,

ayudan a mejorar sustancialmente el proceso de


multiplicacin para la siembra en el campo

(Casale y Garca, 1997).

METODOLOGA.

FASE DE ESTABLECIMIENTO O
INICIACION

Las coronas de (Ananas comosus) cultivar


MS-2 se lavan con agua y jabn a cada corona
se le eliminan parte de las hojas que cubren el
pice .Se reduce el explante a 5cms de largo y
2-3 cms de ancho.
Se desinfecta con hipoclorito de sodio (NaCLO)
al 1.5% durante 10 minutos luego se lavan
con agua destilada y esterilizada tres veces
dentro de la cmara de flujo laminar.

Coronas de pia

Desinfeccin de explantes de pia

Establecimiento o iniciacin:
Extraccin de meristemos de 0,5 cms o menos que
se siembran en los diferentes medios de cultivo. Los
explantes se colocan en un cuarto de crecimiento
con un rango de temperatura entre 26-30 C, un
fotoperiodo de 16 horas luz y 8 oscuridad, humedad
relativa entre 70-80% y una intensidad lumnica de
1500 a 3000 lux.

Establecimiento o iniciacin:
MERISTEMOS

Diferencia entre un explante sano y


uno contaminado por hongo y
bacteria endogena

contaminado

sano

Medio de iniciacin
Medio bsico el MS (1962) Murashige y Skoog
(Anexo1) y se definieron concentraciones de
auxinas y citoquininas de acuerdo a la fase del
cultivo, se utilizo un pH de 5.8 , 30 g de
azcar, 3.0g de phytagel.

Medio de iniciacin

MS (1962) Murashige y Skoog


BAP( benzilamino purina)
1.5mg/l
AIA (acido indol actico)
0.10mg/l

FASE DE MULTIPLICACION
El objetivo de esta fase es la multiplicacin
masiva de brotes en medios con
concentraciones ms altas de reguladores de
crecimiento que los usados en la etapa de
iniciacin. En esta fase se estn utilizando dos
medios de cultivo con diferentes
concentraciones de citoquininas,para evaluar
el ndice de multiplicacin de brotes

MEDIOS USADOS EN FACE DE


MULTIPLICACION
MEDIOS DE MULTIPLICACION 1
MS (1962) Murashige y Skoog
BAP( benzilamino purina)
3mg/l
AIA (acido indol actico)
0.10mg/l

MEDIOS USADOS EN LA FASE DE


MULTIPLICACION
MEDIOS DE MULTIPLICACION 2
MS (1962) Murashige y Skoog
BAP( benzilamino purina)
4mg/l
AIA (acido indol actico)
0.10mg/l

RESULTADOS PARCIALES
Entre los medios de multiplicacin 1 y 2 el
medio 2 es el que esta teniendo mejores
resultados por tener un balance entre auxinas
y citoquininas mas alto.