Diagnstico laboratorial de Infeces do Trato

Urinrio (ITU)

A maioria das Infeces do Trato Urinrio (ITUs) diagnosticada atravs de

dados clnicos e laboratoriais como piria e ou bacteriria e tambm pela
urocultura com contagem de colnias.
Pesquisa da Piria
Reflete a possibilidade de resposta inflamatria do trato urinrio. A causa
mais comum a infeco bacteriana que poder ser confirmada pela
urocultura; porm a piria poder ser evidenciada nas situaes clnicas
apresentadas abaixo, cuja urocultura resulta negativa.
a) No infecciosa

- nefropatias
- clculos e corpos estranhos
- ciclofosfamida
- trauma genitourinrio
- neoplasias
- glomerulonefrite
b) Infecciosa (microrganismos de difcil cultivo):
- Tuberculose e infeces causadas por micobactrias atpicas
- Haemophilus influenzae- Chlamydia spp. e Ureaplasma urealyticum
- Gonococos
- Anaerbios

- Fungos
- Vrus (herpes, adenovrus, varicela-zoster)
- Leptospiras
c) Outras causas infecciosas
- durante ou at uma semana aps o tratamento adequado da ITU
- Infeco mascarada pela antibioticoterapia
- Infeces adjacentes ao trato urinrio (apendicite, diverticulite e prostatite)
A pesquisa de piria poder ser realizada por diferentes mtodos manuais e
automatizados:

Obs.: Altas doses de vitamina C podem dar falso negativo para nitrito na fita, e
a presena de Trichomonas pode dar teste positivo para esterase leucocitria.
Bacterioscopia urinria
1.
Com urina no centrifugada, apenas homogeneizada, utilizar uma ala
bacteriolgica calibrada com 10 ul de urina e depositar sobre uma lmina de
microscopia limpa.
2.
Esperar secar, fixar na chama (ligeiramente) e corar pelo mtodo de
Gram.
3.
Contar na objetiva de imerso (aproximao de 1000x).
4.
Se encontrar 1 ou mais bactria por campo, sugere-se 10*5 UFC.
5.
A presena de clulas epiteliais e vrios tipos morfolgicos de bactrias
sugere contaminao.

Bacteriria

A pesquisa de bacteriria poder ser realizada atravs da bacterioscpia da

urina, testes bioqumicos e cultura de urina.
Quantificao da bacteriria - Contagem de colnias
O critrio de diagnostico tradicional de Kass (1956), determina a contagem .
10*5 UFC/ml como limite indicativo de infeco urinaria. Contudo, no caso de
pacientes do sexo feminino apresentando infeco urinaria sintomtica no
complicada, este limite corresponde a uma alta especificidade e uma baixa
sensibilidade. De fato, cerca da tera parte das mulheres com sndrome clinica
de disuria, frequncia,
urgencia e piuria e que melhoram com o uso de antimicrobianos, apresentam
contagens entre 102 a
104 UFC/ml, segundo criterio de Stamm (1982). Portanto, atualmente torna-se
necessario que os
laboratorios utilizem os criterios propostos por Stamm e comecem a detectar
microrganismos a partir
de 102 UFC/ml, principalmente nesta populao de mulheres.
Mtodos mais utilizados
Lmino-cultivo

O produto possui um recipiente plstico, onde a

urina pode ser coletada, cuja tampa est conectada a uma haste contendo os
meios de cultura como CLED e MacConkey, variando de acordo com o
fabricante.
Vantagens: facilidade de semeadura, no necessita de ala calibrada,
facilidade de transporte.
Desvantagens: semi-quantitativo, pouca superfcie de isolamento.
Semeadura com ala calibrada
A maioria dos microbiologistas recomendam a semeadura das urinas somente
com a ala calibrada 0,01l (10 L), procurando detectar-se contagem de
colnias a partir de 100 UFC/ml.
Inicialmente a urina homogeneizada em "oito" em cima da bancada. Em
seguida, a ala calibrada estril inserida no lquido. Depois ela utilizada
para inocular cada meio de cultivo, traando inicialmente uma linha reta no
centro da placa, de uma extremidade outra, completando-se o espalhamento
da amostra (ver figura).

Os meios de cultura utilizados devem ser um seletivo (Mac Conkey ou

Teague/EMB) e um no-seletivo (gar sangue de carneiro 5%). Incuba-se a 3537C por 24h - este perodo pode ser prolongado quando houver suspeita de
infeco por Enterococcus, S. agalactiae e leveduras. Tambm pode ser
utilizado o meio CLED, que permite crescimento de gram-negativos e impede o
espalhamento do "vu" do gnero Proteus.

Outros dados laboratoriais

Outros dados laboratoriais podem contribuir para o diagnstico de uma ITU,
como hematria, proteinria (que pode ser sugerida atravs da urina
espumosa) e tambm a hemocultura.
Fonte: BRASIL, Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Principais Sndromes
Infecciosas.

Meios de Cultura Bacteriolgicos

importante que o profissional conhea cada meio de cultura e os adeque ao
perfil bacteriano esperado para cada material.
Alguns procedimentos so essenciais na hora da preparao de cada meio de
cultura para a obteno de melhores resultados e evitar contaminaes.
O processo de autoclavao deve ser realizado sempre a 121C durante 15
minutos, sob presso de 1 atm.
Quando distribuir o meio antes de autoclavar, os tubos no precisam estar
esterilizados; quando distribuir o meio aps a autoclavao, os tubos, frascos,
placas, pipetas e vidrarias ou materiais auxiliares obrigatoriamente devem ser
estreis e os meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para
que a esterilizao seja por igual em todo o contedo dos tubos.

Vejamos abaixo os meios de cultura mais utilizados na rotina clnica de

bacteriologia:

gar nutriente
Meio relativamente simples, de fcil preparo e barato, muito usado nos
procedimentos do laboratrio de microbiologia.
Utilidade: anlise de gua, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar
das amostras submetidas exames bacteriolgicos e isolamento de
organismos para culturas puras, conservao e manuteno de culturas em
temperatura ambiente, como mtodo opcional para os laboratrios
que no dispem do mtodo da criopreservao (congelamento das cepas em
freezer - 80C) e observao da esporulao de espcies de bacilos Gram
positivos.
Cor original do meio: branco opalescente
Positivo: Crescimento na superfcie do gar;
Negativo: Ausncia de crescimento.
gar Sangue de Carneiro (5%)
O meio, usando uma base rica formada a partir do gar Mueller-Hinton, oferece
timas condies de crescimento a maioria dos microrganismos. A
conservao dos eritrcitos ntegros favorecem a formao de halos de
hemlise ntidos, teis para a diferenciao de Streptococcus
spp. e Staphylococcus spp.
utilizado no isolamento de microrganismos no fastidiosos, verificao de
hemlise dos Streptococcus spp. e Staphylococcus spp. e usado na prova de
satelitismo (para identificao presuntiva de Haemophilus spp.).
A cor original do meio vermelho.
Beta hemlise: presena de halo transparente ao redor das colnias semeadas
(lise total dos eritrcitos).
Alfa hemlise: presena de halo esverdeado ao redor das colnias semeadas
(lise parcial dos eritrcitos).
Gama hemlise (sem hemlise): ausncia de halo ao redor das colnias
(eritrcitos permanecem ntegros).

gar chocolate
Utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresam neste
meio quase todos os tipos de microrganismos. base do meio, adicionado
sangue de cavalo, carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com que
as hemcias lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais
para o crescimento dos microrganismos exigentes.
utilizado no crescimento de microrganismos exigentes Haemophilus
spp., Neisseria spp., Branhamella catarrhalis e Moraxella spp.
A cor original do meio castanho escuro (chocolate).
gar MacConkey
O cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram positivos
especialmente enterococos e estafilococos. A concentrao de sais de bile
relativamente baixa em comparao com outros meios, por isso no to
seletivo para Gram negativos como, por exemplo, o gar SS.
utilizado para isolar bacilos Gram negativos (enterobactrias e no
fermentadores) e verificar a fermentao ou no da lactose.
Cor original do meio: rosa avermelhado.
Colnias cor de rosa: fermentadoras de lactose.
Colnias incolores: no fermentadoras de lactose.
gar Salmonella-Shigella (SS)
Possui componentes (sais de bile, verde brilhante e citrato de sdio) que
inibem microrganismos Gram positivos. A incorporao de lactose ao meio
permite diferenciar se o microrganismo lactose positiva (bactrias que
fermentam a lactose produzem cido que na presena do indicador vermelho
neutro resultando na formao de colnias de cor rosa), e bactrias que no
fermentam a lactose formam colnias transparentes. Tissulfato de sdio e o
citrato frrico permitem a deteco de HS evidenciado por formao de
colnias de cor negra no centro.
utilizado para selecionar e isolar espcies de Salmonella e Shigella, em
amostras de fezes, alimentos e gua.
Cor original do meio: vermelho alaranjado.
Colnias com centro negro (H2S) ou colnias incolores: suspeita
de Salmonella.
Colnias incolores: suspeita de Shigella spp.
Colnias cor de rosa ou vermelho: suspeita de Escherichia coli ou Klebsiella
spp.
As bactrias no fermentadoras de lactose so incolores.
As bactrias fermentadoras de lactose aparecem na cor rosa.

gar Hektoen enteric (HE)

Os sais biliares e os corantes azul de bromotimol e fucsina cida inibem o
crescimento da maioria dos microrganismos Gram positivos. Lactose, sacarose
e salicina fornecem carboidratos fermentveis para incentivar o crescimento e
diferenciao de enterobactrias. utilizado para isolar e diferenciar os
membros da espcie Salmonella e Shigella de outros Enterobacteriaceae.
Cor original do meio: azul-esverdeado
Colnias amarelas a salmo: enterobactrias fermentadoras de carboidratos.
Colnias azuis-esverdeadas com ou sem centro preto: suspeita de Salmonella
spp. e Shigella spp.

gar Cystine Lactose Electrolyte Deficient (CLED)

Usado para isolamento e quantificao de microrganismos presentes em
amostras urina. A deficincia de eletrlitos inibe o vu de cepas de Proteus.
utilizado para isolar e quantificar microrganismos Gram positivos, Gram
negativos e leveduras.
Cor original do meio: azul claro.
Colnias lactose positiva: cor amarela.
Colnias lactose negativa: cor azul.

gar Thayer-Martin
um meio rico e superior a outros meios de cultivo destinados para o
isolamento de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis, pois contm em
sua frmula antibiticos que inibem o crescimento de Neisserias saprfitas e
outras bactrias, quando em amostras colhidas de stios contaminados.

 utilizado para o isolamento seletivo de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria

meningitidis, a partir do material de investigao.
Cor original do meio: marrom-chocolate
Colnias pequenas e opacas: suspeita de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria
meningitidis.
gar Lwenstein-Jensen
A base do meio constituda por ovos integrais, o que permite amplo
crescimento das micobactrias e o crescimento satisfatrio para o teste de
niacina (que positivo para Mycobacterium tuberculosis).
utilizado no Isolamento primrio das micobactrias.
Cor original do meio: verde claro
Positivo: Crescimento de colnias amarelas
Negativo: ausncia de crescimento.
gar Mueller-Hinton
Meio padronizado por Kirby & Bauer e pelo CLSI que oferece condies de
crescimento das principais bactrias.
utilizado na realizao do teste de avaliao da resistncia aos
antimicrobianos pelos mtodos de difuso em disco e E-test para
enterobactrias, no fermentadores, Staphylococcus e Enterococcus sp.
Cor original do meio: amarelo palha.
A zona do dimetro particular para cada antibitico e organismo, sendo
comparado com dimetros padronizados pelo CLSI, que determina cada
microrganismo sendo sensvel, intermedirio ou resistente.
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