Maraculla J. Bioqumica humana. Barcelona: Ed Revert.

1994

Vjar E. Prcticas de Bioqumica descriptiva.Mxico:Universidad de

Sonora.2005

Cromatografa en capa fina (TLC) se utiliza actualmente para dos diferentes mtodos de
anlisis de lpidos. En el primer enfoque, las diferentes clases de lpidos estn
separadamente extrados y luego cada clase de lpidos se analiza a travs de la metodologa
nica de TLC. En el segundo enfoque, mezclas complejas de los lpidos se separan en las
placas de TLC y, a continuacin se caracteriza ms. Las clases de lpidos se dividen en lpidos
neutros como los triglicridos (forma que se forma una molcula de glicerol y tres cidos
grasos), los lpidos polares como los fosfolpidos y colesterol. Idealmente, los lpidos son
depositadas en una sola de almina o de gel de slice de placa de TLC con sistemas de
solventes secuencial corriendo en la misma dimensin. Relativamente lpidos no polares
como lpidos neutros, cidos grasos y colesterol migran a posiciones nicas en la mitad
superior del cromatograma, mientras que los lpidos relativamente polares como los
fosfolpidos y esfingolpidos estn separados en la mitad inferior del cromatograma.
En el modo de adsorcin (gel de slice o almina es un agente absorbente excelente) una
aplicacin principal es para la separacin de clases de lpidos diferente de tejidos animales y
vegetales. A travs del uso de una fase mvil compuesta de hexano y ter dietlico
essimple de resolver los lpidos simples como steres de colesterol, triglicridos, cidos
grasos libres, colesterol y diacilgliceroles. Cuando se realiza una separacin en fase reversa
utilizando placas de TLC, todo, menos el flujo del disolvente es al revs. Utilizando la tcnica

de los compuestos en fase reversa polares se mueven ms rpido que los no polares
y lo ms polar que es el disolvente, lo menos que cosas se mueven a la placa.
En una carrera de adsorcin estndar, lpidos complejos, como los fosfolpidos y glicolpidos
permanecen en el origen, y estos se pueden cuantificar como si fueran una clase de lpidos
nico. Esto ofrece beneficios sobre los lpidos de purificacin por HPLC. Si dos dimensiones
procedimientos de TLC se utilizan con los lpidos complejos, una mejor resolucin es posible
que se puede lograr en un solo plazo de HPLC. Cuando se realiza en dos dimensiones de TLC,
una excelente resolucin puede conseguirse utilizando el aluminio o lminas de cristal de
copia de seguridad.
Para el trabajo de anlisis de rutina, diez o ms muestras se pueden aplicar a una placa de
20 x 20 cm y luego la cantidad de lpidos presentes pueden ser cuantificadas por
carbonizacin-densitometra, que consiste en pulverizar la placa con un oxidante y
calefaccin para carbonizar los lpidos. Antes de usarlo, se recomienda que las placas se
activa con el calor a una temperatura de 110 F por una hora. Los lpidos migran a lo largo de
la placa formando manchas nicas e independientes en la placa. Entonces, para la deteccin
de puntos despus de una carrera, en la que el disolvente elegido en frente es capaz de
migrar hasta la mitad de la placa (aproximadamente 30 minutos) las placas se secan en el
aire en una campana de qumicos a temperatura ambiente durante 20 minutos. Todos los
lpidos pueden ser fcilmente visualizados con un solo medio de contraste soluble en agua
como amido 10B negro. Este tinte preferentemente interacta con entidades relativamente
no polares y cuando est presente en una solucin 1 M de cloruro de sodio se asociar con
manchas de lpidos en el cromatograma.
El uso de este colorante amido negro es generalizada y no ayudan a diferenciar los
compuestos de lpidos separados. Como una ayuda a la identificacin de clases de lpidos
separados, las placas de TLC se puede tratar con una variedad de reactivos especficos para
los tipos de lpidos especficos. Las siguientes ayudas actualmente estn recomendadas:
1.

Reactivo de ninhidrina se muestra lpidos que contienen aminocidos, tiles para la

identificacin de la fosfatidiletanolamina y la fosfatidilserina.

2.

Vapores de yodo o de amonio molibdato de un aerosol de cido-perclrico o un

aerosol de cido sulfrico se pueden usar para revelar la presencia de todos los
materiales de los lpidos.

3.

Reactivos dragendorff son especficos para la colina.

4.

Dinitrofenilhidrazina y el reactivo de Schiff son especficos para plasmalgenos

(cualquier grupo de fosfolpidos de glicerol con sede en la que se sustituye un grupo
de cidos grasos por un aldehdo graso).

5.

Hidroxilamina frrico aerosol cloruro de cido son especficos para los cidos grasos
esterificados.

El poder de la tecnologa para la deteccin de lpidos de TLC cuantitativo es impresionante.

Es posible detectar la presencia de 25 ng de fosfolpidos, 25 ng de colesterol, y 50 ng de
lpidos neutros y cidos grasosos.
El uso de estas herramientas simples, es posible identificar los componentes de los lpidos y
los lpidos rpidamente y con alta especificidad.

Witman G.,Moskovitcz M. Cromatografa de Capa Fina en la Purificacin de

los Lpidos.(Actualizado 27 Ago 2016, Citado 29 Ago 2016).Disponible en:
http://www.dynamicadsorbents.com/spanishweb/chromatographylipids.htm