MANUAL DE PROCEDIMIENTOS

DE LABORATORIOS

LIMA PERU
INTRODUCCION

Actualmente, existe un consenso respecto a que la organizacin y gestin de los

servicios de salud se establezca teniendo como referencia inicial al Centro de
Salud con sus respectivos Puestos dependientes.
En todo Establecimiento de Salud, se incluye la atencin del Servicio de
Laboratorio que es un rgano de apoyo para el diagnstico, control y tratamiento
de las enfermedades. El Servicio de Laboratorio como parte de los servicios de
salud adquiere importancia no slo por el apoyo en el diagnstico de ciertas
enfermedades sino que otros componentes del equipo de salud que pueden ser
Programas de Salud, se benefician con el apoyo del Laboratorio.
Es fundamental que los Servicios de Laboratorio del primer Nivel de atencin que
incluye a los Laboratorios de los Centros y Puestos de Salud brinden atencin
oportuna con un personal capacitado, infraestructura adecuada y equipamiento e
insumos acorde con las necesidades de los usuarios.
El Coordinador de Laboratorio en esta oportunidad propone este Manual para que
los Servicios de Laboratorio de los Centros y Puestos de Salud cuenten con
documentos estandarizados para un mejor desarrollo de sus actividades.
El presente manual ha sido elaborado en forma simple y eminentemente prctica
para que su contenido sea fcil de entender por el personal que labora en el
laboratorio.
El objetivo principal es protocolizar y estandarizar los procedimientos de
laboratorio que empiezan con la toma de muestra (siguiendo las pautas de control
de calidad pre analtica) hasta el procesamiento de sta (fase analtica) en la
determinacin correspondiente, y por ltimo, en la emisin de los resultados (fase
pos analtica). Debemos recalcar que cuando se realizan pruebas de laboratorio
debe tenerse en consideracin los cuidados, es decir, las muestras deben
obtenerse en condiciones apropiadas y rotularse debidamente.
Esperamos que el presente manual sirva de gua efectiva y que pueda ser
enriquecido con nuevos aportes con la finalidad de alcanzar un trabajo de calidad.

GENERALIDADES

OBJETIVO:
Establecer y estandarizar los procedimientos bsicos de los un exmenes de
Laboratorio que sirvan de ayuda diagnstica al clnico.
CAMPO DE APLICACIN:
La aplicacin de las tcnicas de laboratorio nos sirve para estandarizar los
procedimientos para que sea de utilidad al personal tcnico y profesional de los
laboratorios clnicos.
RESPONSABILIDADES:
El Centro Nacional de Laboratorios en Salud Pblica, a travs de su Direccin
Ejecutiva de Laboratorios de Referencia, es responsable de autorizar la
elaboracin, la revisin y la actualizacin del presente manual, de acuerdo con los
procedimientos aprobados por el Instituto Nacional de Salud.
Los directores de los establecimientos de salud son responsables de autorizar,
proporcionar los recursos necesarios, y designar al personal responsable para la
aplicacin de las disposiciones contenidas en el presente manual.
El personal de los establecimientos de salud es responsable de planificar las
acciones, organizar, controlar y capacitar al personal para cumplir las
disposiciones contenidas en el presente manual.
Los jefes o responsables de los laboratorios deben asegurar el control interno de
la calidad, la idoneidad del personal, equipos, materiales, reactivos e
instalaciones.
El personal mdico, profesional y tcnico, es responsable de seguir las
especificaciones contenidas en el presente manual y aplicar los procedimientos
especficos indicados.

TOMA
DE
MUESTRA

OBTENCIN DE MUESTRAS SANGUNEAS

OBJETIVO: Establecer y uniformizar criterios en el procedimiento de obtencin de

muestras sanguneas con un adecuado control de calidad, ya que de ello depende
que el resultado del anlisis de la muestra sea el correcto. Se efectuar en ayunas
o no, dependiendo de la prueba a usar.
OBTENCIN DE SANGRE VENOSA CON JERINGA:
Materiales y equipos requeridos: Algodn, Alcohol al 70%, Ligadura o torniquete
de 25 a 30 cm de largo. Jeringas de 5 mls, Viales con anticoagulante EDTA.
Obtencin de la muestra: Verificar que los elementos por utilizar estn listos, y
que el paciente se sienta cmodo. Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro
dedos por encima de la flexin del codo o a 10 cm del codo, sujetar con un medio
nudo. Limpiar la zona con alcohol al 70% o alcohol yodado, en un rea de 2
pulgadas .El paciente deber abrir y cerrar la mano durante unos segundos y
despus la mantendr cerrada, esto ayudar a visualizar las venas superficiales
Se retira el estuche protector de la aguja y se coge la jeringa de tal manera que el
bisel se encuentre hacia arriba. Se coloca la aguja en direccin paralela a la vena,
se perfora la piel haciendo avanzar la aguja 0,5-1 cm en el tejido subcutneo,
luego se perfora la vena. Se aspira la jeringa hasta el volumen requerido. Retirar el
torniquete e indicar al paciente que deje de hacer puo. Se coloca el algodn seco
encima de la puncin y se retira la aguja. Retirar la aguja de la jeringa. Verter la
muestra lentamente por las paredes del vial con anticoagulante. No olvidar colocar
una gota en la lmina portaobjeto para realizar el frotis. Agitar el vial en crculos
sobre la mesa para homogeneizar la muestra con el anticoagulante.
La Toma de muestra se debe realizar en las venas de la fosa cubital.
OBTENCIN DE SANGRE VENOSA EN TUBOS AL VACO:
Materiales requeridos : Algodn, Alcohol al 70%, Ligadura o torniquete de 25 a 30
cm de largo, Tubos al vaco con anticoagulante EDTA (K3), EDTA (Na2) u otro
anticoagulante, Agujas con dispositivo para extraccin de sangre al vaco: - N 21
para adultos. - N 22 para nios y neonatos. De preferencia, ambas de bisel corto
para evitar la coagulacin.
Obtencin de la muestra : Se retira el estuche protector de la aguja y ste se
enrosca al dispositivo para extraccin de sangre al vaco. Colocar la ligadura
cuatro dedos por encima de la flexin del codo o 10 cm por encima de ste y pedir
al paciente que abra y cierre la mano varias veces, para favorecer la dilatacin de
las venas. Una vez escogida la vena, desinfectarla con una pieza de algodn
embebido en etanol al 70%. Se coloca la aguja en direccin paralela a la vena, se
perfora la piel haciendo avanzar la aguja entre 0,5 cm y 1 cm en el tejido
subcutneo, se inserta el tubo al vaco por la parte posterior y no preocuparse por
la cantidad de sangre extrada ya que el mismo sonido del vaco avisar que la
extraccin termin. Retirar la ligadura tirando del extremo doblado. Colocar un
pedazo de algodn seco sobre la parte donde se encuentra oculta la aguja. Sacar
la aguja con un movimiento rpido y depositarla en el recipiente de metal con
desinfectante. Pedir al paciente que presione firmemente el algodn durante 3
minutos, con el brazo extendido. No se recomienda que se flexione el brazo a

causa del riesgo que se forme un hematoma. Mezclar por inmersin suave la
sangre con el anticoagulante contenido en el tubo. No agitar el contenido.
Ventajas de una extraccin de sangre venosa: Pueden hacerse repetidos
exmenes con la misma muestra. Parte de la muestra (plasma o suero) puede
congelarse para referencia futura.
Desventajas de una extraccin de sangre venosa: La puncin venosa, por su
largo procedimiento, requiere mayor preparacin que el mtodo capilar. El mtodo
es tcnicamente difcil en nios, individuos obesos y pacientes en shock. La
hemlisis debe ser evitada, pues se puede obtener una disminucin en el recuento
de eritrocitos. Debe evitarse prolongada estasis venosa producida por el
torniquete, pues produce hemlisis y otros cambios que ponen la sangre en un
estado inadecuado para el anlisis de gases, recuentos celulares, determinacin
de pH sanguneo y algunas pruebas de coagulacin. La sangre anti coagulada si
no es de obtencin reciente no debe ser utilizada en extensiones de sangre, pues
algunos anticoagulantes producen cambios en las plaquetas que pueden causar
aglutinaciones, agregacin plaquetaria y dificultan la identificacin de leucocitos.
Puesto que algunos de los componentes de la sangre no son estables, los
recuentos de leucocitos y plaquetas e ndice de sedimentacin deben realizarse
antes de que pasen dos horas desde que se obtuvo la muestra.
OBTENCIN DE SANGRE CAPILAR:
Cuando la cantidad de sangre que se precisa es muy pequea o cuando por
diferentes motivos no pueda practicarse una puncin venosa, debe recurrirse a la
puncin capilar. Materiales requeridos: Algodn, Alcohol al 70%, Lancetas
desechables.
Procedimiento. La sangre capilar se obtiene de la cara lateral del dedo medio o
anular en los adultos y del dedo gordo del pie o taln en los nios. Desinfectar la
zona con alcohol al 70%, secar con algodn estril. Punzar la piel con una lanceta
estril desechable (2 mm de profundidad). Usar gasa estril para desechar la
primera gota y recoger las siguientes en tubos capilares. Evitar comprimir la
extremidad para obtener sangre porque se altera la composicin sangunea.
Ventajas: Puede obtenerse con facilidad. Es preferible cuando han de realizarse
extensiones de sangre perifrica.
Desventajas; Slo se pueden obtener pequeas cantidades de sangre y los
exmenes de repeticin requieren nuevas muestras. La sangre en capilares
frecuentemente se hemoliza interfiendo con la mayora de pruebas de laboratorio.
Los resultados obtenidos en pruebas con sangre capilar no pueden ser
comparados con los resultados de las pruebas con sangre venosa. El dedo no
slo es delicado sino difcil de desinfectar adecuadamente en el tiempo disponible.
En pacientes con resistencia disminuida a la infeccin (aquellos con leucemia,
agranulocitosis, diabetes, uremia y enfermedades con deficiencias inmunolgicas),
una muestra tomada del dedo es mucho ms probable que conduzca a una
infeccin que otra tomada del brazo. El recuento de eritrocitos y leucocitos, as
como el recuento de plaquetas y reticulocitos, no debe realizarse en sangre capilar
debido a la difcil estandarizacin del flujo sanguneo capilar.

REALIZACIN Y TINCIN DEL FROTIS SANGUNEO

La prctica del frotis sanguneo, tambin llamado extendido, es de gran
importancia en hematologa ya que el diagnstico de muchas enfermedades
hematolgicas puede realizarse con slo observar las caractersticas morfolgicas
de las clulas sanguneas, de manera que ste no debe ser excesivamente grueso
ni excesivamente fino. Todas las lminas por usar, sobre todo nuevas, deben ser
limpiadas con algodn y alcohol al 70% para eliminar la grasa que viene adherida.
Materiales: Alcohol al 70%. Algodn. Lanceta descartable. Portaobjetos de vidrios
limpios y desgrasados (25 x 75 mm).
Fundamento Consiste en la extensin de una gota de sangre sobre un portaobjeto
(25 x 75), empleando el canto biselado de otro portaobjeto de igual dimensin
Procedimiento: Una vez extrada la sangre con cualquiera de las metodologas, se
coloca una pequea gota de sangre (5mL) (aprox. 3 mm de dimetro) sobre un
portaobjeto a 2 cm aproximadamente de uno de los extremos. Colocar el canto de
otro portaobjeto esmerilado sobre la superficie del primer portaobjeto (en la que se
encuentra la gota de sangre) formando un ngulo de 45. Deslizar suavemente y a
velocidad moderada el portaobjeto sobre el otro en sentido longitudinal, hasta que
la gota de sangre quede bien extendida sobre la superficie del primer portaobjeto.
El grosor del frotis sanguneo puede variar segn sea el ngulo que formen entre
s ambos portaobjetos. As, si es superior a 45, la extensin obtenida ser gruesa
y corta, si es inferior a 45 ser larga y fina. El secado del frotis es a temperatura
ambiente y en posicin horizontal.
TENER EN CUENTA EN LOS EXTENDIDO DE SANGRE:
Zona excesivamente gruesa: Se halla en la regin inmediata al punto de partida de
la extensin (cabeza). En ella se aprecia siempre un aumento de linfocitos. Zona
excesivamente fina: Corresponde al final de la extensin y termina en un rea
donde las clulas adoptan una posicin acartonada (barbas). En esta regin existe
un exceso de granulocitos y monocitos. Zona ideal: Corresponde a la regin
intermedia del frotis y en ella existe un reparto equilibrado de clulas.

EXAMENES
HEMATOLOGICOS

COLORACIONES USADAS
Una vez seco el frotis, se procede a la tincin hematolgica con el colorante de
Romanowsky, constituido por la mezcla de eosina y azul de metileno. Dentro de

stas tenemos: Colorante de Giemsa, Colorante de May-Grunwald, Colorante de

Wright. y Colorante de Leishmann.
TINCIN CON COLORANTE DE WRIGHT:
Fundamento El colorante de Wright va a permitir suministrar un medio para
estudiar la sangre y determinar las variaciones y anormalidades de estructura,
forma y tamao de los eritrocitos, su contenido de hemoglobina y sus propiedades
de coloracin. La informacin obtenida de un frotis de sangre perifrica depende
en gran parte de la calidad del extendido y la coloracin.
Materiales: Colorante de Wright. Frasco gotero. Solucin amortiguada tamponada
Procedimiento: Una vez obtenido el frotis sanguneo, se le dejar secar entre 15 y
20 minutos. Luego se coloca la preparacin en un soporte y se cubre con el
colorante de Wright, dejndolo por espacio de 5 minutos. Posteriormente se aade
solucin amortiguada tamponada en partes iguales hasta obtener un brillo
metlico, dejando 6 minutos adicionales. Finalmente se lava con agua corriente y
se deja secar. Se coloca en el microscopio y, con pequeo aumento, se revisa la
calidad de la coloracin, la cantidad aproximada de glbulos blancos y se escoge
el sitio para iniciar el recuento. Se coloca una gota de aceite de inmersin y se
enfoca a un aumento de 100x La forma de los glbulos rojos se examinar
detenidamente observando adems del color (cantidad de hemoglobina),
presencia de plaquetas, su agrupacin y distribucin.
Posteriormente, se hace el recuento diferencial de glbulos blancos en 100
clulas, para lo cual se deber conocer las diferencias entre neutrfilos,
eosinfilos, linfocitos y monocitos. Una extensin de sangre bien teida debe
caracterizarse por una buena diferenciacin de las estructuras subcelulares en los
leucocitos, una coloracin rosada de los hemates y la ausencia de precipitados
Los defectos ms frecuentes observados en la tincin del frotis sanguneo son:
Coloracin excesivamente azul, debido a: Frotis excesivamente grueso. Lavado
insuficiente. Tincin muy prolongada. Empleo de colorante excesivamente alcalino.
Coloracin con una tonalidad rosada: El colorante, el tampn o el agua de lavado
tienen un pH demasiado cido.
Presencia de precipitados: Obedecen a una accin excesiva del colorante. Esto se
puede evitar con la filtracin.

HEMOGRAMA-HEMATOCRITO
El hemograma de Schilling constituye uno de los exmenes de laboratorio ms
usados en el campo de la hematologa. Comprende las siguientes pruebas:

RECUENTO DE GLBULOS BLANCOS

Principio: La sangre anticoagulada se deposita en un lquido que permite
evidenciar los leucocitos, mantenindolos visibles, mientras que los eritrocitos son
hemolizados. El recuento del nmero de leucocitos o glbulos blancos se expresa
por mm3 (milmetro cbico).
Equipos Microscopio y Hemocitmetro (Cmara de Neubauer) que consta de los
siguientes elementos: Una lmina portaobjeto gruesa, en el centro se hallan dos
superficies cuadriculadas iguales separadas del resto de la lmina por surcos y
dos barras transversales algo ms elevadas. Una laminilla cubreobjetos plana,
que, al colocarse sobre las barras elevadas de la lmina forma una cmara entre
el cubreobjetos y la superficie cuadriculada. La altura entre el cubreobjetos y la
lmina portaobjetos es de 0,1 mm. Cada cuadrcula mide 3 mm de lado y se divide
en 9 cuadrados grandes. Cada uno de los cuales mide 1 mm2 de superficie, que
se subdivide a su vez en 16 cuadrados medianos. El cuadrado grande central se
divide en 25 cuadrados pequeos y cada uno de ellos en 16 cuadraditos. Cada
cuadrado pequeo mide 0,2 mm de lado (0,04 mm2 de superficie), y cada
cuadradito mide 0,05 mm de lado (0,0025 mm2 de superficie).
Materiales y reactivos requeridos: Pipeta de glbulos blancos (De Thoma) o pipeta
automtica (de 0 a 100 mL). Presenta cerca del extremo superior una marca de
11, inmediatamente contina una dilatacin (bulbo) que contiene una perla que
funciona como mezcladora, luego sigue el extremo ms largo de la pipeta (tallo)
que est dividida en 10 partes, con 2 marcas: 1 (parte final del bulbo) y 0,5 (a la
mitad del tallo). Se le acopla a su extremo superior 1 tubo de goma y una bombilla
para aspirar. Diluyente de glbulos blancos: Solucin de Turk al 1%. Contador
manual (Slo si fuera necesario). Papel filtro.
Procedimiento: Una vez obtenida la sangre con anticoagulante o sangre capilar del
dedo, se procede a aspirar la sangre con la pipeta de glbulos blancos hasta la
marca de 0,5 y a limpiar la punta con papel absorbente. Introducir la pipeta en el
tubo que contenga solucin de Turk y absorber hasta la marca de 11 (no debe
haber burbujas). Tapar ambos extremos y proceder a mezclar manualmente o en
un rotador automtico por 2 3 minutos. Monte la laminilla de vidrio en la cmara
para recuento que debe estar limpia y seca. Agitar la pipeta y descartar las cuatro
primeras gotas para luego colocar una gota pequea de esta solucin en la
cmara. Deje reposar por espacio de 3 minutos para que las clulas se
sedimenten. Enfocar con objetivo de 10x y contar en 4 cuadrados grandes
angulares. Cuando se usa la pipeta automtica, se toma 20 mL (0,02 mL) de
sangre total con anticoagulante o sangre capilar con anticoagulante y se diluye en
un tubo que contenga 380 mL de solucin de Turk (aqu tenemos una dilucin
1:20).
Adems de los leucocitos contados dentro de cada uno de los cuadrantes, se
deben contar todos los leucocitos que se encuentren adheridos en la lnea
horizontal superior y vertical exterior, o de lo contrario, todos los leucocitos,
adheridos a la lnea horizontal inferior y vertical interior.
Resultados leucocitos contados en 4 campos altura x dilucin x rea
N de leucocitos x mm3 = N leucocitos contados x 50 4/200
Valores de referencia 5000 - 10 000 leucocitos / mm3

RECUENTO DE GLBULOS ROJOS:

Principio: La sangre se diluye en un lquido que nos permite observar claramente
los hemates, luego esta dilucin se coloca en una cmara de Neubauer con la
ayuda de una pipeta automtica o pipeta Pasteur y se cuentan en el microscopio a
un objetivo de 40x para calcular el nmero de glbulos rojos por mm3
Equipos Microscopio. Hemocitmetro (cmara de Neubauer).
Materiales y reactivos requeridos: Pipeta de glbulos rojos (De Thoma) o pipeta
automtica (de 0-100 mL). Presenta cerca del extremo superior una marca de 101,
inmediatamente contina una dilatacin (bulbo) que contiene una perla roja
mezcladora, luego sigue el tallo (extremo ms largo), el cual est dividido en 10
partes con 2 marcas: 1 acabando el bulbo y 0,5 a la mitad del tallo. Se requiere
igual que el recuento de leucocitos una boquilla para aspirar. Diluyente de glbulos
rojos: Cloruro de Sodio al 0,9% . Diluyente de Hayem .Contador manual (slo si
fuera necesario). Papel filtro.
Procedimiento : Mezclar la sangre obtenida con el anticoagulante o tomar sangre
capilar. Llenar la pipeta de glbulos rojos con sangre hasta la marca de 0,5 para
realizar una dilucin de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilucin ser 1/100. Limpiar
la punta con gasa o papel absorbente. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito
conteniendo diluyente (Hayem) y llenar de lquido de dilucin hasta la marca de
101. Se coloca en un rotador automtico o se hace rotar manualmente de 2 a 3
minutos. Agitar bien la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una
gota pequea cerca de un extremo de la cmara para que por capilaridad se llene
exactamente. Hacer el recuento con objetivo de 40x.
Se puede realizar con la pipeta automtica, se toma 20 mL (0,02mL) de sangre
total con anticoagulante, o sangre capilar y se deposita en un tubo de 12 x 75 que
contenga 4 mL de solucin de Hayem (aqu se tiene una dilucin de 1:200). Se
deja reposar aproximadamente 5 minutos y se procede a cargar la cmara con la
misma pipeta usando un nuevo tip. El inconveniente aqu es el gasto de reactivo (4
mL) pero las medidas son mas exactas. Dejar en reposo por 3 minutos. Enfocar la
cuadrcula a 10x, luego con el objetivo de 40x contar sobre el cuadrado grande
central de la cmara slo en 5 cuadrados pequeos: uno central y cuatro
angulares (80 cuadraditos en total). En el recuento se incluyen las clulas que
cubren o tocan por dentro o por fuera las lneas limitantes superior e izquierda en
el cuadrado pequeo de recuento y no se consideran los correspondientes a los
lmites inferior y derecho. .Se hace el recuento en los puntos ABCD y E y se sigue
los mismos parmetros del recuento de leucocitos.
Resultados
N de hemates x mm3 = hemates contados x 10 000
Valores de referencia : (Unidades tradicionales millones de clulas/mm3).
Hombres : 4 500 000 - 5 500 000 .
Mujeres : 4 000 000 - 5 000 000 .
Nios (4 aos): 4 200 000 - 5 200 000 .
Lactantes (1 - 6 meses) : 3 800 000 - 5 200 000
Recin nacidos : 5 000 000 - 6 000 .

DETERMINACIN DEL VOLUMEN GLOBULAR (HEMATOCRITO)

Mide la fraccin que comprende a los glbulos rojos (masa globular), respecto al
volumen total de la muestra de sangre venosa o capilar. Puede expresarse en
porcentaje o como valor decimal.
Hematocrito = altura de la columna de glbulos rojos
altura de la columna de sangre total
Mtodo de Wintrobe :
Materiales requeridos: Tubo de Wintrobe graduado de 0 - 100 mm. Pipetas
Pasteur o pipetas de transferencia. Tapn de goma.
Procedimiento: Llenar la sangre extrada con anticoagulante con una pipeta
pasteur, comenzando desde el fondo hasta la marca superior de 100 mm, teniendo
cuidado de no provocar espuma. Tapar el tubo con un tapn de goma para evitar
la evaporacin. Centrifugar a 3000 rpm por 30 minutos.
Resultados (lectura): Del tubo graduado se mide directamente el nivel de la
columna de glbulos rojos.
Valores de referencia:
Hombres : 40% - 54%
Mujeres : 38% - 48%
Mtodo de microhematocrito :
Materiales requeridos: Capilares rojos y azules (75 mm x 1,5 mm). Plastilina.
Procedimiento: Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente
del pulpejo del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa
con anticoagulante de Wintrobe o EDTA. Debe llenarse aproximadamente 70% 80% del capilar. Ocluir (tapar) un extremo del capilar con plastilina. Colocar el
capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrfuga de microhematocrito, con
el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma. Centrifugar por 5
minutos entre 10 000 - 12 000 rpm.
Resultados (lectura): La lectura se realiza con una escala estandarizada que
expenden en el comercio. Uso de la escala: Sostenga el tubo frente a la escala de
manera que el fondo de la columna de eritrocitos (no el extremo inferior del tubo)
quede exactamente al mismo nivel de la lnea horizontal correspondiente al cero.
Desplace el tubo a travs de la escala hasta que la lnea marcada con el nmero
1,0 quede al nivel del tope de la columna de plasma. Vigile que el fondo de la
columna de eritrocitos contine sobre la lnea cero. El tubo debe encontrarse
completamente en posicin vertical. La lnea que pase al nivel del tope de la
columna de eritrocitos indicar la fraccin de volumen de stos.
Valores de referencia:
Hombres : 40% - 50% .
Mujeres : 38% - 44% .
Nios (5 aos) : 38% - 44% .
Lactantes (3 meses) : 37% - 42% .
Recin nacidos: 50% - 58%

La disposicin celular es: Parte superior, una columna de plasma. En la interfase

estn los leucocitos y plaquetas. Parte inferior est la columna de eritrocitos .
FROTIS DE SANGRE PERIFRICA
Se debe considerar lo siguiente: Calidad del frotis Debe abarcar 80% de la lmina
con cabeza, cuerpo y cola. Extensiones gruesas dificultan la visualizacin e
identificacin celular, mientras que las delgadas originan una distribucin anormal
de los elementos.
Eritrocitos Se estudia su tamao, forma, color y si existen inclusiones o elementos
extraos.
Plaquetas: Debe observarse de 3 a 10 plaquetas aproximadamente por 100
glbulos rojos o varias plaquetas y grupos ocasionales por campo. Visto con
objetivo de inmersin, no debe existir menos de una plaqueta por campo.
FRMULA LEUCOCITARIA
La frmula leucocitaria tiene por objetivo determinar los porcentajes de las
distintas clases de leucocitos normales y anormales en la sangre. A partir de los
porcentajes puede incluso calcularse el nmero real de cada clase de leucocitos
por mm 3 de sangre (valor absoluto), conocindose el total de leucocitos.
Por ejemplo: Si se tiene 60% de neutrfilos segmentados y el recuento total de
leucocitos total es de 20 000, entonces la cifra absoluta de neutrfilos
segmentados sera:
60/100 x 20 000 = 12 000 (valor absoluto)
Valores de referencia absolutos de neutrfilos segmentados = 3000 - 5000
Conclusin: Los valores relativos slo nos sirven cuando los valores totales de
leucocitos se encuentran dentro del valor normal. En caso contrario (leucocitosis o
leucopenia) se debe emplear la frmula para obtener el valor real, y as determinar
que elemento celular se encuentra fuera del rango normal, sea elevado o
disminuido.
Procedimiento : Se examina la lmina a pequeo aumento para comprobar si los
elementos celulares estn bien distribuidos. Si es favorable se examina con el
objetivo de inmersin. La parte ideal para visualizar clulas para la frmula
leucocitaria es en la parte final del cuerpo y comienzos de la cola, recorriendo la
lmina de izquierda a derecha o de arriba hacia abajo hasta contar 100 leucocitos
incluidos los agranulocitos y granulocitos.. Aqu no se incluyen los elementos
inmaduros de sangre roja.
A medida que se va contando, se va anotando el nmero de cada una de las
clases de glbulos blancos observados. Se determina luego los porcentajes de
cada uno de ellos para luego comparar con los porcentajes normales. Si se tiene
en el recuento de leucocitos valores por encima de 10 000 y por debajo de 5000
se debe repetir el recuento.
Valores de referencia :
Neutrfilos segmentados : 55-65 %
Neutrfilos abastonados : 3-5 %
Eosinfilos : 0,5-4,0 %

Basfilos : 0-0,5 %
Monocitos : 4-8 %
Linfocitos : 25-35 %
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN
La velocidad de sedimentacin es un examen hematolgico que no est incluido
en el desarrollo de un hemograma; sin embargo, es una prueba muy importante
por su gran sensibilidad, pues resulta normal en las enfermedades funcionales, as
como en los procesos inactivos o estrictamente locales.
MTODO DE WINTROBE :
Fundamento : Mide la tendencia de los eritrocitos a la sedimentacin al colocar
sangre anticoagulada en un tubo pequeo. Se lee la columna de plasma al cabo
de una hora de reposo.
Procedimiento : Mezclar la sangre con anticoagulante mediante movimientos
rotatorios sobre una superficie lisa . Con una jeringa Pipeta Pasteur vertir la
sangre en el tubo de wintrobe que tiene una graduacin de 0 100 mms de arriba
hacia abajo . La sangre debe llenarse hasta la marca 0 y se coloca en posicin
vertical sobre una gradilla especial .
Resultados Medir los milmetros descendidos de glbulos rojos mediante la
columna de plasma por encima del paquete globular.
Valores de referencia:
Hombres : 0 - 5 mm/hora
Mujeres : 0 - 10 mm/hora
TIEMPO DE COAGULACIN DE SANGRE TOTAL : MTODO DE LEE WHITE
Principio : Se observa la formacin del cogulo en tubos de vidrio en condiciones
estandarizadas; esta prueba mide el mecanismo intrnseco de la coagulacin.
Materiales : Un bao mara a 37 C, o un matraz al vaco, con agua a la misma
temperatura. Dos tubos de ensayo limpios, de 10 x 75 mm, del mismo calibre,
marcados en el nivel de 1 mL. Un cronmetro. Materiales para puncin venosa.
Mtodo :
Mediante una jeringa de material plstico extraiga poco ms de 3 mL de sangre
venosa, puncione la vena rpidamente, de la manera adecuada. Cronometrar el
tiempo desde el momento que la sangre entre a la jeringa
Llenar cada uno de los tubos de ensayo con 1 mL de sangre. Taponar con
parafilm. Colocar en bao mara a 37 C .
Despus de 3 a 5 minutos sacar el primer tubo del bao mara. Inclinar hacia un
plano de 90 en rotacin a intervalos de 30 segundos hasta que la sangre coagule
(la sangre no fluye cuando el tubo est en posicin horizontal) .
Examine el segundo tubo inmediatamente despus que haya coagulado la sangre
del primero, lo que por lo general es inmediato. Cronometrar. Se notifica como
tiempo de coagulacin la media de los dos tubos.

Resultados : El tiempo normal de coagulacin en tubo es : 5 a 15 minutos a 37 C.

Interpretacin : El tiempo de coagulacin est prolongado cuando hay severa
deficiencia de todos los factores de coagulacin, excepto en la trombocitopenia y
deficiencia de factor VII o XIII. Tambin est prolongado en presencia de heparina
o anticoagulantes circulantes endgenos. Un tiempo de coagulacin normal no
excluye un desorden de la hemostasia. Es una prueba muy poco dolorosa y es
prolongada apenas cuando la deficiencia es severa. El factor deficiente puede
estar a 5% de lo normal sin afectar la prueba.
TIEMPO DE SANGRA: MTODO DE DUKE
Principio : Mediante esta prueba se estudia la adhesin de las plaquetas al
endotelio vascular y su capacidad para formar el trombo plaquetario que detiene la
hemorragia a nivel de un vaso de pequeo calibre.
Con una lanceta se hace una pequea incisin en el lbulo de la oreja. La sangre
fluye por esta incisin y se mide el tiempo que transcurre hasta que se detiene el
sangrado.
Este ensayo se lleva a cabo: Para diagnosticar ciertos padecimientos
hemorrgicos. Antes de realizar operaciones quirrgicas. Antes de efectuar una
puncin en el hgado o el bazo.
Materiales : Una lanceta estril. ter. Filtro de papel (o papel secante). Si es
posible, un cronmetro o, en su lugar, un reloj con segundero.
Mtodo : Limpie con suavidad el lbulo de la oreja utilizando una pieza de algodn
embebida en ter. No frote. Djese secar .
Haga la incisin en el lbulo de la oreja con cierta profundidad, al mismo tiempo
cronometrar. La sangre deber fluir libremente sin que se necesite exprimir el
lbulo de la oreja .
Despus de 30 segundos. Recoja la primera gota de sangre en una esquina del
papel secante. No toque la piel con el papel .
Espere otros 30 segundos y recoja la segunda gota de sangre con el papel
secante, un poco ms adelante de la primera .
Cuando las gotas de sangre dejen de fluir, detener el cronmetro (o anote el
tiempo transcurrido segn el reloj, o contar el nmero de gotas recogidas en el
papel secante y multiplicarlo por 30 segundos) .
Resultados Comunique el tiempo de sangrado redondendolo al medio minuto
ms cercano.
Observaciones Si el tiempo de sangrado se prolonga examine una extensin de
sangre teida segn el mtodo de Romanowski para observar si las plaquetas son
escasas. Interpretacin del resultado .
El valor de referencia del tiempo de sangra segn este mtodo es de 1 a 4
segundos.
RECUENTO DE PLAQUETAS
Principio : El recuento de plaquetas se puede observar en un microscopio
convencional.

Recuento en lmina : Se cuentan 10 campos con objetivo de 100x y se multiplica

por 1000 que es la frmula convencional para recuento de plaquetas.
Valores de referencia : 150 000 - 450 000 plaquetas/mm3.
Causas de aumento (trombocitosis) : La trombocitosis puede ser secundaria a un
estmulo medular inespecfico (posthemorrgica o tras una crisis hemoltica),
paraneoplsica o posquirrgica. Es especialmente importante la que se produce
tras la esplenectoma. La trombocitopenia esencial aislada es muy rara, pero
puede aparecer asociada a trastornos mieloproliferativos. En estos casos, las
plaquetas pueden ser funcionalmente inoperantes y cursar, paradjicamente, con
hemorragias.
Causas de disminucin (Trombopenia) Es fundamental descartar que no se haya
producido un error de lectura como consecuencia de una agregacin parcial de las
plaquetas en la muestra estudiada. Especialmente llamativos son los casos en los
que existe una agregacin precisamente en presencia de EDTA, que es el
anticoagulante utilizado para mantener incoagulable la muestra de sangre en la
que se ha de realizar la lectura. Las verdaderas trombopenias pueden obedecer
a una causa central (generalmente asociada a leucopenia y anemia), perifrica
(inmunolgica, secuestro, consumo) o mixta (vrica). La prpura trombocitopnica
idioptica es relativamente frecuente.
LEUCOGRAMA
Los leucocitos de dividen en:
GRANULOCITOS : Aquellos que tienen grnulos especficos: neutrfilos,
eosinfilos y basfilos. Los grnulos observados en extendido estn cargados de
lisosomas y enzimas hidrosolubles que son agentes antibacterianos necesarios
para la digestin de partculas fagocitarias. Aqu tenemos:
Neutrfilos abastonados : Es el granulocito en banda. Mide de 10m a 14m,
ncleo condensado que puede presentar una dos constricciones, pero no tiene
puente de cromatina. El citoplasma presenta grnulos especficos e inespecficos,
membrana celular lisa, citoplasma de color ligeramente rosado dependiendo de la
coloracin.
Neutrfilos segmentados : Mide igualmente de 10m a 14m, ncleo que presenta
mayor condensacin y est formado por varios lbulos (hasta 4) unidos por
puentes de cromatina. El citoplasma est cargado de grnulos.
Alteraciones leucocitarias de los neutrfilos :
Granulaciones txicas : Son grnulos basfilos ms oscuros que lo normal y se
observan durante el transcurso de infecciones severas y estadios txicos.
Vacuolas txicas : Se observan en el citoplasma de los neutrfilos durante
infecciones severas y estados txicos.
Cuerpos de Dohle : Son reas teidas de azul en el citoplasma de los
polimorfonucleares neutrfilos y se encuentra en infecciones, especialmente en
neumonas.

Palillo de tambor : Es un pequeo apndice (cromatina sexual) que permite

conocer el sexo del individuo mediante una simple observacin en un frotis de
sangre perifrica en los neutrfilos. Se presenta en las mujeres.
Polisegmentacin : Son neutrfilos con 5 o ms lobulaciones. Se observa en las
anemias por deficiencia de vitamina B-12 y cido flico, Sndrome de Down y otras
anomalas.
Adems existe aumento (neutrofilia) en: Infecciones bacterianas por agentes
piognicos. Abscesos y septicemias. Procesos inflamatorios y necrosis tisular.
Trastornos metablicos por intoxicacin. Procesos malignos: Carcinoma.
Hemorragias y hemlisis. Postesplenectoma.
Desviacin a la izquierda Significa el aumento de las formas inmaduras (en banda
o cayado, y juveniles) dentro de los neutrfilos. Constituye un importante valor
diagnstico y pronstico. Puede observarse en: infecciones e intoxicaciones.
Desviacin a la derecha Corresponde a la hipersegmentacin nuclear. La mayora
de PMN presentan ms de 5 lobulaciones. Ocurre en: Anemia perniciosa.
Hipersegmentacin constitucional hereditaria. Reacciones mieloides de la sepsis.
Afecciones hepticas. Leucemia mieloide. En la agona.
Existe disminucin (neutropenia) en: Aplasia medular Mieloptisis de la mdula
sea Agentes citotxicos y Granulopoyesis inefectiva (anemias megaloblsticas).
Eosinfilos : Son parecidos a los neutrfilos, pero son algo mayores.
Generalmente el ncleo es bilobulado y lo que ms caracteriza a esta clula es la
presencia de grnulos color naranja-marrn vistos claramente, muchas veces
estos grnulos hacen que se pierda la membrana celular por el rompimiento de
sta, ya que estas clulas son muy frgiles. Patologa.
Existe aumento en: Infecciones parasitarias. Reacciones alrgicas. Enfermedades
cutneas. Neoplasias.
Basfilos : La caracterstica ms importante de esta clula es la cantidad de
grnulos de color azul negruzco que se encuentra ocupando toda la clula (esto
cuando la clula es madura) y parte de la clula cuando sta es inmadura.
Presenta un ncleo que muchas veces no logra observarse por la cantidad de
grnulos que contienen histamina y heparina.
Existe aumento en: Leucemia por basfilos.
AGRANULOCITOS : No poseen grnulos. Aqu tenemos a los linfocitos y
monocitos.
Linfocitos : Pueden ser: Linfocitos grandes que miden de 15m a 25m, presentan
generalmente un ncleo ligeramente oval discretamente indentado, la cromatina
es densa pero no tanto como en el linfocito pequeo (esto lo puede confundir con
el monocito). Citoplasma abundante, azul plido y puede contener grnulos
azurfilos inespecficos.
Linfocitos atpicos Llamados tambin virus linfocitos, clulas linfomonocitoides,
clulas activadas de Turk, clulas de Turk, virocitos, inmunoblastos, etc. Miden de
15m a 30m, ncleo irregular, indentado, excntrico y puede observarse nucleolos.
El citoplasma es amplio, color azul tenue, y puede presentar grnulos azurfilos y
vacuolas.

Estas clulas pueden observarse en mononucleosis infecciosa, hepatitis viral,

herpes zoster, enfermedades autoinmunes y normalmente pueden hallarse hasta
en 5% .
Linfocitos pequeos :Miden de 9m a 15m, presentan un ncleo que ocupa casi
toda la clula, excntrico, cromatina fuertemente densa. El citoplasma es escaso,
basfilo y puede contener grnulos azurfilos inespecficos.
Monocitos : Son los leucocitos de mayor tamao en la sangre (14m a 20m). Su
ncleo es generalmente excntrico, aunque puede ser central. Su cromatina
nuclear es laxa, distribuida en forma regular, la forma del ncleo generalmente es
de una madeja de lana o arrionada, aunque puede tener forma de un
abastonado. El citoplasma es de color gris y puede presentar grnulos
inespecficos (azurfilos) que carecen de significado clnico.
Estn elevados en: Tuberculosis. Endocarditis bacteriana. Enfermedades virales
como sarampin, rubola, etc. Colagenosis, neoplasias, etc.
CRITERIOS PARA EL DESARROLLO DE UN LEUCOGRAMA :
Se considera leucocitosis cuando la cifra de glbulos blancos excede de 10 000.
Se considera leucopenia cuando la cifra de glbulos blancos es inferior a 5 000.
No olvidar que el ejercicio produce leucocitosis fisiolgica de consideracin, de all
que el recuento debe hacerse en condiciones basales.
En los granulocitos debe informarse el nmero de lobulaciones del ncleo. A
mayor edad de la clula mayor el nmero de lbulos y lo contrario.
ALTERACIONES ERITROCITARIAS
Aqu se encuentran incluidas las clulas progenitoras de la serie roja que
normalmente se encuentra en la mdula sea, pero cuando stas pasan a sangre
perifrica antes de su maduracin en normocitos o hemates pueden indicar
alguna patologa como leucemias, anemias u otras alteraciones celulares. Aqu
tenemos:
PRONORMOBLASTO : Es una clula primitiva (inmadura) de aproximadamente
25m a 35m de dimetro, citoplasma basfilo, presencia de 1 a 2 nucleolos, existe
una condensacin ligera de la cromatina, citoplasma ligeramente excntrico.
Esta clula se divide en:
NORMOBLASTO BASFILO :Es ligeramente menor que el pronormoblasto, 12m
a 18m, citoplasma igualmente basfilo, pero, se diferencia del anterior en que ya
no presenta nucleolos y su cromatina nuclear es ms condensada ya que es un
elemento menos inmaduro
El siguiente paso en la maduracin es: NORMOBLASTO POLICROMATFILO: Es
una clula que mide de 12m a 16m, aunque usualmente puede ser mayor que el
normoblasto basfilo, presenta ncleo excntrico y lo que ms caracteriza a esta
clula es que ya presenta pequeas cantidades de hemoglobina citoplasmtica
que se traduce en un color violeta (azul y rojo). Su cromatina es ms condensada
que la anterior.

NORMOBLASTO ORTOCROMTICO: Mide de 10m a 14m, esta clula es bien

caracterstica y no debe confundirse con el linfocito ya que prcticamente es un
hemate nucleado, como tambin se le conoce. Presenta su citoplasma rosado,
ncleo totalmente excntrico como una bola maciza.
Este normoblasto ya no se divide, sino que pierde su ncleo por un mecanismo de
expulsin y se convierten en: RETICULOCITOS Estos todava presentan en su
citoplasma restos de ARN y protoporfirina resultados de la conversin del
normoblasto ortocromtico a reticulocito y solo se pueden observar con
coloraciones especiales. En sangre perifrica se les puede observar como
elementos macrocticos y policromatfilos.
NORMOCITOS O HEMATES : Discos cuya biconcavidad hace que aparezcan
con cierta palidez central al no captar el colorante en esa zona. Miden
aproximadamente de 7,2m a 7,4m y puede llegar hasta ocho. Presenta un
pigmento respiratorio que le da el color rosado caracterstico que es la
hemoglobina que se encarga del transporte de oxgeno.
Se dividen en:
Alteraciones en tamao :Pueden ser de dos tipos:
Macrocitos : Hemates que presentan un tamao superior al normal (ms de 9m) y
su expresin mxima es el megalocito. Suelen aparecer en la anemia
megaloblsticas debida a dficit de vitamina B12 o cido flico. Se suele observar
cuando hay un aumento de la actividad eritropoyetina, como un mecanismo de
compensacin a la prdida de los hemates, sea por anemia severa o
hemorragias. En la sangre perifrica se pueden observar como hemates grandes
policromatfilos o reticulocitos.
Microcitos : Hemates que presentan un tamao inferior al normal (menos de 6m) y
se encuentran en pacientes con anemia ferropnica y talasemias.
Alteraciones en la forma Llamadas tambin poiquilocitosis. Entre stos tenemos:
Esferocitos: Son hemates esfricos como unas pelotas, no son bicncavos,
presentan un dimetro inferior al normal pero ms grueso. Su vida media es de 14
das, producen taponamiento de los vasos sanguneos. Se encuentran en la
enfermedad esferocitosis hereditaria o enfermedad de Mihkowski-Chauffard
(defecto congnito de la membrana eritrocitaria). Tambin pueden ser adquiridos
por factores extraeritrocitarios.
Codocitos : Llamados tambin dianocitos. En la regin central presentan un rea
con mayor contenido hemoglobnico (zona densa). La interfase entre la membrana
celular y el centro es transparente. Se encuentran en hemoglobinopatas,
talasemias, anemia ferropnica y en algunas hepatopatas crnicas con aumento
de colesterol y fosfolpidos.
Drepanocitos: Son hemates cuya membrana hemtica se altera y se hace
falciforme (forma de hoz o media luna). Su apariencia es propia del estado
homocigoto de la hemoglobina S. Su enfermedad se conoce como drepanocitosis
hereditaria.
Eliptocito : Los hemates son alargados (ovalocitos). Se encuentran en la
enfermedad llamada ovalocitosis hereditaria. Su presencia se debe a una
alteracin congnita de la membrana del hemate, aunque puede ser adquirida en
caso de una anemia megaloblsticas , ferropnica o arregenerativa.

Crenocitos : Son aquellos que presentan membrana ondulante e irregular. Se

encuentran en algunas anemias hemolticas. Este fenmeno puede ser inducido in
vitro exponiendo los hemates a una solucin hipertnica. Cuando la caracterstica
es muy notable puede emplearse el trmino equinocito.
Equinocitos : Tambin llamados acantocitos. Las prominencias de la membrana
eritrocitaria son ms aguzadas (alargadas) y distribuidas irregularmente. Se
encuentran en la acantocitosis que se caracterizan por la ausencia de
lipoprotenas plasmticas.
Dacriocitos : Son hemates en forma de lgrima. Se encuentran en la anemia
ferropnica, anemia megaloblsticas y talasemia.
Esquistocitos: Son fragmentos hemticos. Se encuentran en anemias
hemolticas, microangiopatas, quemaduras y con ms evidencias en individuos
esplenectomizados.
Estomatocitos : Son hemates que en lugar de una deplecin central clara tienen
una banda plida central que les da un aspecto de boca. Se hereda como carcter
autosmico dominante. Esta enfermedad es causada por anormalidad hereditaria
de la membrana eritrocitaria.
Selenocitos : Son eritrocitos alterados que adoptan forma semilunar. Es un
artificio de tcnica que aparece especialmente en frotices sanguneos de
pacientes anmicos.
Excentrocitos: Son hemates con distribucin irregular de la hemoglobina. Su
tamao es inferior al normal y se caracteriza por poseer contornos parcialmente
arrugados, pero adems se observa una distribucin irregular de la hemoglobina
que aparece desplegada de la parte interna hacia uno de los extremos.
Qnizocito: Son hemates que presentan un estoma o boca en la regin central
completamente coloreada y lo dems incoloro. Morfolgicamente es todo lo
contrario a las caractersticas del estomatocito. Se encuentran en algunas
anemias como las ferropnicas.
Alteraciones de color: Aqu observamos las diferentes tonalidades de color de los
hemates dependiendo del contenido hemoglobnico. Tenemos:
Hipocroma : Son hemates con disminucin del contenido de la hemoglobina y
dependiendo de la cantidad de este pigmento es que observamos a los hemates
con diferentes caracteres de color. Aqu estn incluidos los anulocitos, que son
hemates en forma de anillo en que solo la membrana eritrocitaria est coloreada y
que se traduce en una hipocroma de grado severo (+++).
Hipercroma : Son hemates vidos de hemoglobina. Pueden encontrarse en caso
de enfermedades como la policitemia vera o la policitemia fisiolgica y
esferocitosis hereditaria.
Policromatofilia : Presencia de hemates con tonalidad (azul y rojo) morada. Se le
relaciona con inmadurez celular, clulas nucleadas, presencia de reticulocitos,
macrocitos, etc. Esto debido a su elevada cantidad de ARN. Anisocroma:
Diferentes tonalidades de color como hemates hipocrmicos, hipercrmicos,
normocrmicos y policromatfilos. Se encuentran en ciertas anemias refractarias.
GRUPO SANGUINEO FACTOR RH
Procedimiento :

a) En una lmina de vidrio escavada o llana colocar 3 gotas de sangre por

separado.
b) Agregar 1 gota de suero anti-A a la lra gota de sangre, l gota de suero anti-B a
la 2da y 1 gota de suero anti-D a la 3ra. Mezclar con palillos desechables para
cada gota.
c) Mover circularmente la lmina de vidrio. Observar presencia o ausencia de
aglutinacin y determinar el respectivo grupo sanguneo y factor Rh.
Interpretacin :
GRUPO
SANGUINEO
O

SUERO ANTI- A

SUERO ANTI-B

No Aglutinacin

No Aglutinacin

Aglutinacin

No Aglutinacin

No Aglutinacin

Aglutinacin

AB

Aglutinacin

Aglutinacin

FACTOR RH

SUERO ANTI D

POSITIVO

Aglutinacin

NEGATIVO

No Aglutinacin

GOTA GRUESA
Procedimiento :
a) Hacer la asepsia del pulpejo del dedo medio de la mano (generalmente). En
caso de nios del lbulo de la oreja, del dedo gordo del pie o del taln.
b) Seleccionar dos lminas.
c) Efectuar la puncin con lanceta descartable en la zona elegida.
d) Eliminar la primera gota de la sangre con algodn seco, presionar suavemente
hasta obtener una segunda gota con la cual se realiza la gota gruesa (extender
circularmente hasta alcanzar aproximadamente 1.5 cm. de dimetro.
e) Con la tercera gota realizar el frotis.
f) Dejar secar a temperatura ambiente.

COLORACION GIEMSA (GOTA GRUESA)

Preparar la dilucin con la dilucin madre Giemsa: una gota de solucin madre
Giemsa por cada ml. de buffer o agua destilada.
Gota Gruesa:
a)
b)
c)
d)

Agregar 1 ml. de la dilucin Giemsa.

Dejar reposar por 10 min.
Enjuagar con agua o buffer.
Dejar secar al medio ambiente.

Frotis:
a)
b)
c)
d)
e)

Fijar con metanol por 10 seg, y dejar secar.

Aadir 2 ml. de la dilucin Giemsa.
Dejar reposar por 15 min.
Lavar con agua o buffer.
Dejar secar al medio ambiente y observar con objetivo de inmersin.

Resultados : Gota Gruesa (Identificacin y densidad parasitaria):

N de Parsitos

Cuando es menos de 40 parsitos por 100 campos

+/2

40 a 60 parsitos en 100 campos

1 parsito por campo

++

2 a 20 parsitos por campo

+++

21 a 200 parsitos por campo

++++

Ms de 200 parsitos por campo

COLORANTES Y SOLUCIONES MS USADOS EN HEMATOLOGA

SOLUCIN DE TURK :
Reactivos cido actico glacial 2,0 mL Solucin acuosa de violeta de genciana al
1% 1,0 mL Agua destilada c.s.p. 100 mL
Procedimiento Mezclar los reactivos y guardar en frasco mbar en lugar fresco
REACTIVO DE DRABKIN :
Reactivos Bicarbonato de sodio 1,0 g Cianuro de potasio (KCN) 50 mg
Ferricianuro de potasio (K3Fe2 (CN)6) 200 mg Agua destilada c.s.p. 1000 mL
Procedimiento Mezclar todo y guardar en frasco oscuro protegido de la luz. Es
estable un mes.
SOLUCIN AMORTIGUADORA TAMPONADA :
Reactivos : Hidrofosfato disdico (Na2HPO4 2H20): 3,76 g; Fosfato de potasio
dihidrogenado: 2.10 g; Agua destilada c.s.p. :1000 cc . Ajustar a un pH de 7,2 para
coloraciones de Wright o Leishmann.
Procedimiento Mezclar todos los reactivos y guardar en frasco de vidrio en lugar
fresco.
COLORANTE DE GIEMSA :
Reactivos: Colorante Giemsa en polvo 1,0 gr; Metanol (CH3 OH) : 66,0 mL y
Glicerol 66,0 mL
Procedimiento : Disolver el colorante con el glicerol. Adicionar el metanol, mezclar
bien y dejar a temperatura ambiente de 7 a 14 das (maduracin). Filtrar antes de
su empleo. Guardar en frasco color caramelo.
COLORANTE DE LEISHMAN :
Reactivos : Colorante de Leishmann 1,5 g y Metanol (CH3 OH) 100 mL.
Procedimiento : Disolver el colorante en metanol y trasvasarlo a un frasco oscuro o
color caramelo, agitar, luego filtrar.
COLORANTE DE WRIGHT :
Reactivos: Colorante de Wright :0,3 g ; Metanol (CH3 OH): 97,0 mL; y Glicerol
97,0 mL
Procedimiento : Disolver en un mortero el colorante con el glicerol. Una vez
disuelto se adiciona el metanol trasvasndolo a un frasco oscuro (color caramelo),
luego agite. Filtrar antes de usar.

URIANALISIS

EXAMEN COMPLETO DE ORINA

RECOLECCIN DE LA MUESTRA:
La orina deber ser de preferencia la primera de la maana.
El paciente se practicar un lavado escrupuloso, de la regin genital,
particularmente del meato urinario.
- El primer chorro lo desechar y el segundo lo recoger en un frasco limpio,
seco y con tapa adecuada ( Si es posible el Laboratorio proporcionara el
envase adecuado) .
- La muestra deber ser procesada lo ms pronto posible, en caso contrario
refrigerar 4-8C).
El examen rutinario de Orina completa incluye : 1) Examen Fsico
2) Examen Qumico
3)Microscopa del sedimento
urinario.
-

1) EXAMEN FISICO
a) Color: Normalmente es amarillo claro. Pueden encontrarse color amarillo
oscuro, mbar, rojizo o negrusco.
b) Aspecto: Normalmente es transparente, puede observarse ligeramente turbio,
turbio, muy turbio.
c) Reaccin: Es expresada por el pH , se utiliza tira indicadora puede ser cida,
neutra, alcalina de acuerdo al cambio de color.
d) Densidad: Se mide con el urodensmetro el cual se introduce limpio y seco en
la probeta que contiene la orina. Leer en la porcin ms inferior del menisco.
Varia entre 1015 1025.
2) EXAMEN QUIMICO
Existe actualmente tiras reactivas mltiples para determinar en orina el pH,
protenas, glucosa, sangre, cuerpos cetnicos, bilirrubinas, urobilingeno, cido
ascrbico , nitritos.
La tira debe introducirse brevemente en la orina fresca y bien mezclada, sacudir el
exceso y leer comparando los colores de la tira con la cartilla patrn, de acuerdo al
tiempo especificado por el fabricante.
Cualquier hallazgo deber verificarse con la pruebas confirmatorias.
PRUEBAS CONFIRMATORIAS :
2.1) PROTEINAS: Los cidos como el tricloroactico y el sulfosaliclico precipitan
las protenas produciendo turbidez.
Procedimiento:
a) En un tubo colocar 3 ml. del sobrenadante despus de haber centrifugado la
orina problema.

b) Calentar el tubo con el sobrenadante.

c) Agregar 3 ml. de cido tricloroactico y mezclar por agitacin.
d) Dejar en reposo por 10 minutos. Luego observar.
Resultados:
Turbidez escasa

1+

Turbidez y grnulos

2+

Turbidez, grnulos y flculos

Precipitado slido

3+
4+

2.2)GLUCOSA: El sulfato de cobre en medio caliente y alcalino, es reducido a

xido cuproso, por sustancias reductoras como la glucosa y otros azcares.
Procedimiento:
a) En un tubo de 16 x 125 colocar 5 ml. de reactivo de Benedict.
b) Agregar 0.5 ml. de orina.
c) Mezclar y calentar, moviendo el tubo suavemente, por 2 minutos. Tener cuidado
porque la mezcla puede salpicar.
d) Enfriar y observar.
Resultados:
Una reaccin positiva muestra turbidez por precipitados de color de acuerdo a la
cantidad de sustancia reductora presente en la orina.
Verde

1+

Amarillo

2+

Rojo ladrillo

3+

2.3)PIGMENTOS BILIARES: Los pigmentos biliares al reaccionar con el yodo en

solucin alcohlica producen un color verde.
Procedimiento:
a) En un tubo colocar 4 ml. de orina.
b) Aadir 0.5 ml. del reactivo lugol para bilis en zona (lentamente y con el tubo
inclinado).
c) Dejar en reposo por l minuto.
Resultado
Positivo = Anillo de color verde en la zona de contacto de la orina con el reactivo.
2.4) UROBILINOGENO: El urobilingeno de la orina al reaccionar con el
paradimetilaminobenzol en solucin cida (Rvo.de Ehrlich) forma un compuesto de
color rojo cereza.

Procedimiento:
a) En un tubo colocar 4 ml. de orina.
b) Aadir 8 gotas de reactivo de Ehrlich y mezclar.
c) Dejar reposar 5 minutos.
Resultados:
Positivo = por cruces de acuerdo a la intensidad del color rojo cereza.
2.5) SANGRE (THEVENON) : El cido actico libera la hemoglobina de los
hemates, la que a su vez libera oxigeno que reacciona con el piramidn en
solucin alcohlica para formar un compuesto de color violeta.
Procedimiento:
a) En un tubo colocar 5 ml. de orina.
b) Agregar 3 gotas de cido actico al 50% y mezclar agitando fuertemente.
c) Aadir 1 ml. de perxido de hidrgeno en zona.
d) Luego agregar en zona 1 ml. de reactivo de piramidn al 1% y esperar 1
minuto.
Resultado:
Positivo = Formacin de anillo de color violeta. Informar en cruces de acuerdo a
la Intensidad del color.
3) EXAMEN MICROSCOPICO DEL SEDIMENTO URINARIO :
Procedimiento:
a) Mezclar bien la muestra y colocar 10 ml. en un tubo de 13 x 100.
b)Centrifugar a 1500 r.p.m. por 5 minutos.
c)Decantar el sobrenadante.
d)Agitar el tubo para resuspender el sedimento.
e)Colocar l gota pequea del sedimento en una lmina y cubrir con una laminilla.
f) Observar al microscopio con 10X (clulas, cilindros, parsitos).
g)Luego observar a 40X(identificacin detallada leucocitos, hemates, grmenes
Resultados:
Leucocitos
N por campo. (piocitos) anotar.
Hemates

N por campo

Clulas epiteliales
Grmenes

Escasas, regular cantidad, numerosas, abundantes.

Por cruces

Cristales

Identificacin

Cilindros

Identificacin

Filamento mucoide Por cruces

Otros

Trichomona vaginalis,oxiuros,etc.

EXAMENES
INMUNOLGICOS

AGLUTINACIONES
Procedimiento :
1) Colocar en cada una de las 5 columnas(placa de vidrio marcada) en forma
descendente : 0.04 ml., 0.02 ml., 0.01ml., 0.005 ml., del suero problema.
2) Agregar el antgeno respectivo(l gota) verticalmente en cada una de las
columnas.
3) Mezclar.
4) Movilizar la placa con movimientos circulares por 3 minutos.
5) Observar la presencia de aglutinacin.
Resultados:
Aglutinacin de acuerdo a la dilucin.
Suero
0.04 ml.
0.02 ml.
0.01 ml.
0.005ml.

Ag Tfico O y H , Ag Paratfico A y B
1/40
1/80
1/160
1/320

Ag Brucella
1/50
1/100
1/200
1/400

Si continua la aglutinacin diluir el suero 1/16 (0.1 ml. SP y 1.5 ml. SSF)
0.08 ml.
0.04 ml.
0.02 ml.
0.01 ml.
0.005ml.

1/640
1/1,280
1/2,560
1/5,120
1/10,240

1/800
1/1,600
1/3,200
1/6,400
1/12,800

RPR (PRUEBA DE REACCION RAPIDA)

Cualitativa:
a) Colocar 1 gota de muestra (suero o plasma) y 1 gota de los controles, usando
un dispensador diferente para cada uno en los crculos separados de las tarjeta
visualizadora. Con la ayuda de un palillo extender la muestra por toda la
superficie interna del crculo.
b) Homogenizar el reactivo (carbn activado) y agregar una gota en cada crculo.
c) Rotar la tarjeta a 100 r.p.m. o manualmente por 8 min.
d) Observar: Grumos gruesos REACTIVO
Grumos medianos REACTIVO DEBIL
Grumos pequeos o ausencia de ellos NO REACTIVO
Cuantitativa:
a) Colocar 50 ul. de suero fisiolgico al 0.9% dentro de los crculos N 2, 3, 4 y 5
b) Agregar 50 ul. de suero a los crculos N 1 y 2

c) Homogeneizar el contenido del crculo N 2 y pasar 50 ul. al crculo N 3, as

sucesivamente hasta el N 5.
d) Homogeneizar el carbn activado y agregar 1 gota a cada crculo. Rotar la
tarjeta a 100 r.p.m. por 8 min. Reportar la dilucin ms alta que resulte reactiva.
Crculo N
1
2
3
4
5

Diluciones
1:1
1:2
1:4
1:8
1:16

PRUEBAS DE EMBARAZO
1.- EN ORINA
Procedimiento :
a) Con dispensador descartable colocar l gota de orina (filtrada o del
sobrenadante) y 1 gota de cada Control en crculos separados de una lmina
de fondo oscuro.
b) Aadir 1 gota de suero anti-HCG , mezclar y luego oscilar la lmina
circularmente por 30 segundos.
c) Agregar l gota de partcula de latex cubiertas con HGC, mezclar luego oscilar la
lmina por 2 minutos. Observar.
Resultados:
Positivo
=
Negativo
=

NO AGLUTINACION
AGLUTINACION

2.- EN SANGRE
Procedimiento :
a) En pocillos diferentes colocar l gota (50 ul) de suero y de los Controles.
b) Aadir l gota de Enzima Conjugada
c) Incubar por 3 minutos a temperatura a ambiente
d) Lavar 5 veces con agua destilada.
e) Agregar 1 gota de Substrato A. y luego 1 gota de Substrato B en cada pocillo e
incubar por 2 minutos a temperatura ambiente. Observar si hay coloracin
Resultados:
Positivo
= Color Azul
Negativo =
Transparente

EXAMENES
MICROBIOLOGICOS

COLORACION GRAM
Procedimiento :

a) A la lmina que contiene la muestra seca y fijada, se aplica el colorante cristal

violeta por 1 minuto y se lava.
b) Aplicar el lugol por 2 minutos y lavar.
c) Decolorar con alcohol acetona hasta no observar el color azulado y lavar.
d) Aplicar la safranina por 20 segundos.
e) Secar y leer con objetivos de inmersin.
f)
Resultados : Los gram positivos se tien de color azul oscuro y los gram
negativos de color rojo.
COLORACION DE ZIEHL-NEELSEN (BAAR)
Procedimiento :
a) A la lmina que contiene la muestra fijada al calor, se aplica la fucsina bsica
cubriendo toda la extensin. Por debajo de la lmina flamear de modo que se
observe la presencia de vapores; repetir el proceso por 3 veces (evitar la
ebullicin). Dejar 5 min. con el colorante.
b) Lavar con agua corriente y decolorar con alcohol cido hasta obtener una
coloracin clara o rosa plido por 2 minutos .
c) Lavar con agua corriente y colorear con azul de metileno por 1 min.
d) Lavar, dejar secar y observar con objetivo de inmersin.
Resultados :
Negativo

No BAAR en 100 campos

Paucibacilar

1 a 9 BAAR en 100 campos

Menos de 1 BAAR por campo en 100 campos

++

1 a 10 BAAR por campo en 50 campos

+++

Ms de 10 BAAR por campo en 20 campos

DIAGNSTICO DE LOS PARSITOS INTESTINALES DEL HOMBRE

OBTENCIN DE LA MUESTRA : CONDICIONES GENERALES

- Los parsitos intestinales del hombre son protozoarios y/o helmintos, llamados
comnmente gusanos intestinales. Estos helmintos o gusanos pueden ser
cilndricos (nemtodes), anillados o segmentados (cstodes).
- Para observar los trofozotos, quistes u ooquistes de los protozoarios, as como
las larvas y huevos de helmintos, se debe usar un microscopio; en cambio, la
mayor parte de los gusanos o helmintos adultos son macroscpicos y su
morfologa puede estudiarse directamente, con ayuda de una lupa.
- Los protozoarios intestinales eliminan con las heces sus formas evolutivas
(trofozotos, quiste, ooquistes y espora), segn la especie involucrada.
- Los helmintos intestinales adultos (progltidos de Taenia sp., Enterobius
vermicularis y scaris lumbricoides) pueden salir al exterior espontneamente o
despus del tratamiento.
- Los gusanos intestinales se eliminan con las heces.
- Los mtodos de diagnstico de los parsitos intestinales pueden ser: directo o
por concentracin de los elementos parasitarios que se eliminan en las heces.
- En las heces podemos encontrar formas adultas y microscpicas (huevos, larvas,
trofozotos, quistes, ooquistes y esporas) de los parsitos intestinales; por ello, es
importante obtener una buena muestra fecal, as como la conservacin ptima del
espcimen.
- La muestra debe ser obtenida (entre 3 y 6 gramos) lo ms fresca posible
(mximo 90 minutos, si se busca Entamoeba histolytica), y depositada en un
frasco de boca ancha con tapa rosca y rotulada correctamente con los datos de
identificacin.
- La muestra debe obtenerse antes del uso de medicamentos antiparasitarios, o
hasta 2 a 5 das despus de su administracin.
- Las heces depositadas en el suelo no son las recomendadas para el diagnstico,
debido a que pueden contaminarse con formas biolgicas, como por ejemplo:
larvas similares a los enteroparsitos del hombre, larvas de nemtodes, huevos de
caros o insectos, etc.
- Si el paciente no es regular en la evacuacin de sus deposiciones y ha evacuado
en la noche anterior al examen, se recomienda guardar la muestra en una
refrigeradora o en un lugar fresco no expuesto a la luz solar, para que no se
alteren las formas parasitarias.
En algunos parasitismos relacionados al parasitismo intestinal, es necesario el
examen de bilis, esputo, secrecin, biopsia, tejido de necropsia o frotis peri anal.
HECES
- Caractersticas de la muestra :
a. Recipiente o contenedor: boca ancha, con tapa rosca.
b. Cantidad : 3 - 6 g
c. Condiciones ptimas: No estar mezclado con orina, que no exista el
antecedente de haber ingerido bario u otros productos de contraste, y llevar la
muestra al laboratorio en corto tiempo (de 2 - 4 horas de su obtencin).
- Registro de datos :
Se debe consignar la siguiente informacin: Nombre, edad, sexo, ocupacin,
sntomas y signos, fecha de inicio de sntomas y diagnstico presuntivo.

- Procesamiento de la muestra :
a. Debe realizarse lo antes posible y en un lugar apropiado (que no le llegue la luz
directa). Las muestras diarreicas y las que contienen sangre, deben examinarse
en forma macroscpica y microscpica apenas lleguen al laboratorio.
b. Se aplicar la metodologa correspondiente
c. Los reactivos y colorantes empleados en el procesamiento deben estar en
envases adecuados, mantenerse fuera de los rayos del sol o luz, etiquetados (con
nombre y fecha de preparacin), sometidos a un control peridico y con una
preparacin proporcional a la demanda .
- Reporte de resultados :
Escribir el nombre completo de los parsitos, indicando el estadio evolutivo
.RECHAZO DE UNA MUESTRA
- Es importante controlar cada hoja de pedido y verificar si tiene toda la
informacin (etiquetado). De no cumplirse ello, se debe establecer contacto con la
persona responsable para efectuar las correcciones necesarias.
- Los criterios para rechazar una muestra son los siguientes:
. No indicar el tipo de muestra o procedencia.
. No indicar el examen requerido.
. Demora en el envo al laboratorio.
. Muestra sin rotular o mal rotulada.
. Muestra que presente evidencia de haber sido derramada.
. Recipiente o contenedor inapropiado.
. Muestra con contaminacin.
. Muestra escasa o seca en el hisopo o contenedor.
. Presencia de una sola muestra, a pesar de la presencia de varias rdenes.
. Volumen o cantidad inadecuada.
. En casos de rechazar una muestra, el personal de laboratorio debe explicar al
solicitante las observaciones y motivos en la ficha de solicitud de diagnstico. Si
no fuera posible la obtencin de otra muestra, revisar nuevamente los exmenes
realizados.
. Tener en cuenta el examen parasitolgico por macroscopa.
EXAMEN DIRECTO MACROSCPICO
- Fundamento.
Permite observar directamente las caractersticas morfolgicas de los parsitos
adultos, enteros o fraccionados, as como los cambios en las caractersticas
organolpticas de las heces eliminadas, (color, presencia de sangre y/o moco,
consistencia, etc.).
- Materiales.
. Suero fisiolgico
. Aplicador (bajalengua).
. Pinza de metal.
- Procedimiento.
. Agregar suero fisiolgico en cantidad suficiente para homogeneizar la muestra.

. En caso de presencia de parsitos adultos, tamizar o colar la muestra.

- Observacin.
Observar las caractersticas organolpticas de las heces, tiles para la ayuda
diagnstica (consistencia, color, presencia de moco, sangre, alimento sin digerir),
as como la presencia de gusanos cilndricos, anillados o aplanados (enteros o
parte de ellos)
- Resultado.
En caso que la muestra no sea normal, es decir, contenga informacin til para el
diagnstico (ejemplo: presencia de glbulos rojos, fibras musculares no digeridas,
mucus, etc.), se debe adicionar al informe del examen parasitolgico las
caractersticas macroscpicas de las heces.
EXAMEN DIRECTO MICROSCPICO
- Fundamento.
Buscar, principalmente en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas
mviles de parsitos de tamao microscpico (trofozotos, quistes de protozoos:
Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Balantidium coli, etc.; as como larvas o
huevos de helmintos: Strongyloides stercoralis, Ancylostoma duodenale, Necator
americanus, Trichostrongylus sp., Paragonimus, Fasciola, etc.).
- Materiales.
. Lminas portaobjetos.
. Laminillas cubreobjetos.
. Aplicador de vidrio o madera.
. Microscpio ptico.
. Marcador de vidrio.
. Suero fisiolgico
. Solucin de lugol
Procedimiento.
. Colocar en un extremo de la lmina portaobjeto una gota de suero fisiolgico y,
con ayuda de un aplicador, agregar 1 a 2 mg de materia fecal, emulsionarla y
cubrirla con una laminilla cubreobjeto.
. Colocar en el otro extremo de la lmina portaobjeto, una gota de lugol y proceder
a la aplicacin de la muestra fecal como en el prrafo anterior.
. Con el suero fisiolgico, los trofozotos y quistes de los protozoarios se observan
en forma natural, y con lugol, las estructuras internas, ncleos y vacuolas.
Observacin .
. Observar al microscopio a 10X 40X. No es aconsejable usar objetivo de
inmersin (100X), pues se puede ensuciar el microscopio.
. Recorrer la lmina siguiendo un sentido direccional, ejemplo: de derecha a
izquierda, o de arriba a abajo.
Resultado.
En un formato y en el cuaderno de registro correspondiente, se anotar el nombre
de la especie del parsito y su estado evolutivo
TCNICA DE LA SEDIMENTACIN ESPONTNEA EN TUBO

a. Fundamento.
Se basa en la gravidez que presentan todas las formas parasitarias para
sedimentar espontneamente en un medio menos denso y adecuado como la
solucin fisiolgica. En este mtodo es posible la deteccin de quistes, trofozotos
de protozoarios, huevos y larvas de helmintos.
b. Materiales.
- Tubos de vidrio o plstico de 13 x 100, 16 x 150, o tubos de 50 mL de capacidad
que terminen en forma cnica.
- Lminas portaobjetos.
- Laminillas de celofn recortadas adecuadamente (22 x 22 mm 22 x 30 mm.).
- Solucin fisiolgica
- Pipetas de vidrio o plstico.
- Agua destilada
- Gasa recortada en piezas de 9 x 9 cm.
c. Procedimiento.
- Tomar una porcin de heces (1 - 2 g) y homogeneizar con suero fisiolgico en un
tubo limpio o en el mismo recipiente en que se encuentra la muestra.
- Colocar una gasa, hundindola en la abertura del tubo y sujetndola con una liga
alrededor de ella.
- Filtrar el homogeneizado a travs de la gasa, llenando el tubo hasta la cuarta
parte de su contenido.
- Agregar suero fisiolgico hasta 1 cm por debajo del borde del tubo.
- Ocluir la abertura del tubo con una tapa, parafilm o celofn.
- Agitar enrgicamente el tubo por 15 segundos aproximadamente.
- Dejar en reposo de 30 a 45 minutos. En caso que el sobrenadante est muy
turbio, eliminarlo y repetir la misma operacin con solucin fisiolgica .
- Aspirar el fondo del sedimento con una pipeta y depositar 1 2 gotas del
aspirado en los extremos de la otra lmina portaobjeto.
- Agregar 1 2 gotas de solucin lugol a una de las preparaciones.
- Cubrir ambas preparaciones con las laminillas de celofn y observar al
microscopio
d. Observacin.
Examinar primero la preparacin con solucin fisiolgica para observar formas
mviles y de menor peso especfico (trofozotos, quistes y larvas) y luego la
preparacin con lugol para observar sus estructuras internas, de estos y de otros
parsitos de mayor peso especfico (huevos, larvas).
e. Resultado.
Informar la presencia de las formas evolutivas de los parsitos .
DIAGNSTICO DE ENTEROBIUS VERMICULARIS
MTODO DE TEST DE GRAHAM : CINTA SCOTCH TRANSPARENTE

- FUNDAMENTO.
La hembra de Enterobius vermicularis deposita sus huevos en las mrgenes del
ano durante la noche. La tcnica de Graham tiene por objeto adherir estos huevos
a la cinta adhesiva transparente o cinta scotch, la que se extender
posteriormente en una lmina portaobjeto para su observacin microscpica.
- MATERIALES.
. Lminas portaobjetos desengrasadas.
. Cinta adhesiva transparente o cinta scotch de 1 pulgada de ancho.
. Solucin salina o tolueno.
. Aplicador (bajalengua).
PROCEDIMIENTO.
. Extender la cinta adhesiva transparente sobre la superficie de la lmina
portaobjeto, adhiriendo una porcin pequea a ambos extremos, dejando una
lengeta separar la cinta de la lmina portaobjeto cuando se va a tomar la muestra
. La obtencin de la muestra se realiza en la noche, 2 a 3 horas despus que el
paciente (generalmente nios) est dormido, o a la maana siguiente y sin que se
haya realizado el aseo de la regin peri anal.
. El paciente debe estar inclinado exponiendo la regin gltea, se despega la cinta
adhesiva levantando la lengeta hasta que quede expuesta la parte adherente y,
con ayuda de un bajalengua, se aplica el lado adhesivo .
. Se adhiere la cinta haciendo toques en la regin peri anal en sentido horario
terminada la aplicacin, extender la cinta adhesiva y volverla a pegar en la lmina
portaobjeto, envolver con el papel y colocar el nombre del paciente.
- MICROSCOPA DE LAS LMINAS.
. En el laboratorio, se desprende la cinta engomada del frotis peri anal por un
extremo, se agrega solucin de hidrxido de sodio 2% o solucin salina, aplicando
1 2 gotas de la sustancia elegida que clarificar la muestra y que permitir una
mejor observacin de los huevos y/o adultos de E. Vermicularis. Es necesario
observar la lmina en su totalidad.
. En ocasiones, se pueden observar al microscopio, huevos de otros helmintos,
principalmente huevos de Taenia sp., scaris lumbricoides, Trichuris trichura entre
otros.
OBSERVACIN .
Observar los huevos embrionados o hembra adulta de E. vermicularis.
RESULTADO .
Informar el nombre del parsito y su estadio evolutivo
GENERALIDADES DE RESULTADOS
. Los resultados indicarn el(los) mtodo(s) empleado(s), el gnero o la especie
del parsito observado y su estadio evolutivo. La densidad parasitaria puede
expresarse como el nmero de formas parasitarias observadas por campo de
microscopio con objetivo de 10X y 40X.
. Todo formato de respuesta de resultados debe contener los datos de
identificacin: nombre, edad, sexo, fecha, las caractersticas organolpticas de las
heces (consistencia, color, presencia de sangre y moco), datos de la observacin
microscpica (presencia de leucocitos, eritrocitos, levaduras, fibras musculares no

digeridas y parnquima de clulas vegetales en cantidad considerable), ya que

esta informacin facilitar un mejor diagnstico clnico.
Los resultados obtenidos deben registrarse en un libro de registros del laboratorio.
RESULTADO POSITIVO .
. El informe debe contener el nombre del paciente, los agentes observados y su
estadio o forma evolutiva: quistes (q), ooquistes (o), trofozotos (t), esporas (e),
huevos (h) o larvas (l).
. La intensidad parasitaria puede expresarse cualitativa o semicuantitativamente:
Cualitativamente: Escaso, regular o buena cantidad, segn sea el grado de
facilidad o dificultad para ubicarlos.
Semicuantitativamente: Contando las formas parasitarias:
Si se observan 1 2 elementos en toda la lmina, escribir el nombre del agente y
su estadio evolutivo
(+) Si se observan de 2 a 5 elementos por campo microscpico 10X 40X.
(++) Si se observan de 6 a 10 elementos por campo microscpico 10X 40X.
(+++) Si se observan >10 elementos por campo microscpico 10X 40X.
RESULTADO NEGATIVO .
Informar que no se observaron quistes, trofozotos, ni huevos de parsitos.
REACCION INFLAMATORIA
a) Realizar frotis de muestra fecal con mucosidad. Dejar secar y fijar por calor.
b) Aplicar azul de metileno por 5 min.
c) Lavar, dejar secar y observar al microscopio con objetivo de inmersin.
Nota: Se reporta en porcentaje de leucocitos polimorfonucleares
mononucleares.
THEVENON EN HECES
a)
b)
c)
d)
e)

Hacer una emulsin de heces con suero fisiolgico en un tubo de ensayo.

Agregar 0.5 ml. de cido actico al 50% en zona.
Agregar 0.5 ml. de perxido de hidrgeno en zona.
Agregar 0.5 ml. de piramidn al 2% en zona.
Lectura dentro del minuto. Prueba positiva: anillo color violeta.