DIAGNOSTICO

INMUNOLÓGICO DE
HEPATITIS VIRALES
M G . R O B E RT C A B A L L E R O B A R D A L E S
VIRUS DE LA HEPATITIS B
HEPADNAVIRUS
Hepatotropo
No citopático

 Diámetro: 42 nm
 Env: 7 nm
 Core: 28 nm
PRINCIPALES GENES Y PRODUCTOS

GEN P. M. (Da) FUNCIÓN

S 25 000 – 30 000 Codifica las proteinas de envoltura.

( S, pre S2 y pre S1 )
Codifica las proteinas de la
C 17 000 – 22 000 nucleocapside
HBcAg y HBeAg antigénicamente
distinto.
P 65 000 Codifica la polimerasa de DNA viral.

X 17 000 – 28 000 Codifica la proteina X

 CICLO INFECCIOSO
CORRIENTE
ADN pol SANGUINEA
ARN Pre-
genómico

cccDNA
NÚCLEO
virión
ARNm

HBsAg

CORRIENTE HEPATOCITO
SANGUINEA CITOPLASMA
 CICLO VITAL DEL HBV
FASE REPLICATIVA FASE NO REPLICATIVA

Hepatocito

Tiempo; sexo

Edad de la infección
“inmunocompetencia”
HBV DNA libre Factores antivirales HBV DNA
integrado

HBsAg
HBsAg
HBeAg
HBV
antiHBe
 PATOGENIA DE LA HEPATITIS B
INMUNIDAD CELULAR

Hepatocito
LT CD4
LT CD8
HLA I
antiHBs HLAII
INFg FNTa

Hepatocito M

INMUNIDAD
HUMORAL

SUPRESIÓN DE LA INFECCIÓN
VIRUS DE LA HEPATITIS B
El VHB pertenece a la familia hepadnaviridae DNA.

Estructura de VHB
1. Parte externa o envoltura
Contiene HBsAg, liberados de celulas infectadas
como pequeñas particulas de 22nm
El HBsAg puede ser identificado en suero
despues de 30-60dias despues de la
exposicion.
2. Parte interna o
nucleocapside
DNA bicatenario
incompleto.
Dos proteinas DNA
polimerasa y proteina
que ayuda a la sintesis
de la cadena larga.
HBcAg ( no se encuentra
en el suero)
HBeAg ( se encuentra en
suero)
GENOMA VIRAL
Posee cadena de ADN (cadena corta y
larga)
La cadena corta posee 4 regiones que
codifican proteínas virales.
Región S .- codifica proteínas que
componen la envoltura del virus
(HbsAg).
Region C .- sintetisa proteínas del core
(HbcAg).
Region P .- sintesis de DNA
polimerasa.
Region X .- sintesis de la proteina X.
PATOGENIA
HEPATITIS B AGUDA
Periodo de incubación 4-28 semanas con
promedio de 60-110 dias.
FASES
1era Fase .- se manifiesta la replicacion viral.
2da Fase .- proceso viral agudo. Fase anicterica.
3era Fase .- fase icterica puede verse que la
bilirrubina excede 2.5-3mg.
4ta Fase .- fase de convalescencia.
HEPATITIS B CRONICA
Enfermedad hepatica necroinflamatoria
HBsAg presente enperiodo de 6 meses a mas.
Diagnostico de la HB cronica en tres situaciones

Hepatitis B aguda aumentó de la transaminasa

Sintomas inespecificos con aumento de la
transaminasa
Pacientes asintomaticos detctados en estudios
rutinarios
HEPATITIS POR VIRUS B
Vías de transmisión

Sexual

Vertical
Percutánea
Exposición a sangre o fluidos contaminados (semen,
saliva, leche, lágrimas, orina, secreciones vaginales,
sudor, menbranas mucosas”percutanea”…)

Sexual - Prostitutas y homosexuales presentan

riesgo elevado. Promiscuidad.
Parenteral , Trabajadores Sanitarios. Transmisión
horizontal en convivientes
Perinatal – Madres que son AgHBe positivo
transmiten la infección con mucha mayor frecuencia.
Es la principal forma de transmisión en
poblaciones con alta prevalencia del Virus B.
CONCENTRACIÓN DEL VIRUS DE LA
HEPATITIS B EN DIVERSOS FLUIDOS
CORPORALES

Bajo/N
Alto Moderado Detectable
o
sangre semen orina
suero secreciones heces
vaginales sudor
saliva lágrimas
leche humana
EPIDEMIOLOGÍA
La OMS estima mas de 2000 millones de
infectados por VHB en el mundo.
300millones son portadores cronicos
250 000 mueren anualmente
El HVB causa importante cirrosis y
hepatocarcinoma.
cirrosis (5-8%).
hepatocarcinoma (80%)
HEPATITIS POR VIRUS B
Zona de baja endemicidad: <2 % de portadores

Zona de endemicidad intermedia: 2-7 %

Zona de alta endemicidad:> 7 %

El Perú se ubica entre los paises de endemia
intermedia.
Es variable de acuerdo a las regiones y de las
zonas.
El departamento con mayor letalidad se ubica
Apurimac con un 17% seguido de ayacucho (9%) ,
Loreto (8%).
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
Alteraciones bioquimicas

Bilirrubinemia elevada (directa e indirecta)

Transaminasas elevadas (20 - 40 veces sobre lo
normal). Mas elevada la (GPT)
Fosfatasa alcalina y GGPT moderadamente elevada
Hemograma y pruebas de coagulación normales
Rara vez se requiere de biopsia
MARCADORES
INMUNOLOGICOS
MARCADORES INMUNOLOGICOS

DIRECTOS INDIRECTOS

HBsAg antiHBs
HBeAg antiHBe
DNA antiHBc-Total
antiHBc-IgM
 HEPATITIS B
AGUDA

HBsAg
Periodo clínico

Ac antiHBc TOTAL
Ac anti HBc IgM Ac Anti HBs
HBeAg

Ac Anti HBe
ADN vírico

2 4 6 8 10 12 MESES
 HEPATITIS B CRÓNICA

Periodo clínico

Ac anti HBc IgM

HBeAg
Ac anti HBcTOTAL

ADN vírico
Ac Anti HBe
HBsAg

2 4 6 8 10 12 MESES
PRUEBAS INMUNOLOGICAS
PRUEBAS DE TAMIZAJE
Aglutinación indirecta
Hemaglutinación.
Enzimoinmunoensayo
Radioinmunoensayo
Inmunodifusión

PRUEBAS CONFIRMATORIAS
Neutralización previa.
Estudio histológico hepático.
 Marcadores
Existe marcadores séricos para el diagnóstico de Hepatitis B
aguda o crónica.
 Ag HBs – marcador general de infección.
 Anti-HBs – recuperación y/o inmunidad.
 IgM Anti-HBc – marcador de infección aguda.
 IgG Anti-HBc – infección pasada o crónica.
 Ag HBe – replicación del virus y por tanto infectividad.
 Anti-HBe – indica que el virus ya no se replica. Sin embargo,
el paciente puede ser todavía Ag HBs positivo a partir del
VHB integrado.
 DNA-VHB - indica replicación del virus. Se usa sobre todo
para la monitorización del tratamiento.
HEPATITIS C
Familia: Flaviviridae
Es un virus RNA de cadena simple que
codifica un poliproteina viral.
Presenta una capside icosaedrica (core) y una
envoltura que contiene las glucoproteinas E1
y E2 .
Los genes estructurales: el gen C codifica la
proteína del core; genes E1 de 37 Kd y E2 de
61 Kd codifican las proteínas de la envoltura
Genes no estructurales ( NS2 , NS3, NS4A,
NS4B, NS5A, NS5B)
REPLICACIÓN VIRAL
El VHC no se integra con el
genoma de la célula infectada
una vez que entra al citoplasma
de la célula huésped, perderá la
cubierta y el genoma viral
actuaría como un templete de
trascripción de una molécula de
RNA complementaria
(negativa).Esta molécula negativa
servirá a su vez como un
templete para la síntesis de la
molécula RNA genomica positiva.
Este fenómeno explica que,
inhibiendo la replicación viral,
sea posible la erradicación y
curación de la infección por el
VHC.
Las enzimas capaces de realizar
estos pasos, normalmente serían
proteínas codificadas por el
virus.
HEPATITIS C
Modo de transmisión:
Transfusiones sanguíneas
Compartir jeringuillas
Los tatuajes y piercing
Vía sexual
Vía materno – fetal
Compartir cepillos de
dientes o maquinillas de
afeitar.
CLÍNICA
Un alto porcentaje de estos pacientes se produce una
infección crónica; (esto ocurre en cerca del 50-60%
de las hepatitis post transfusionales por virus C).
Aproximadamente en la mitad de los pacientes que
presentan una infección crónica por virus C, se
desarrolla lentamente una cirrosis, la que puede
asociarse en algunas ocasiones a la aparición de un
hepatocarcinoma. Otra característica descrita con
frecuencia en la evolución de estos pacientes, es la
gran fluctuación en el nivel sérico de transaminasas,
las que puede variar hasta en 10 veces con respecto
al valor anterior, en períodos de pocos días. Sin
embargo, la enfermedad es mas frecuentemente
reconocida en adultos; los casos informados son
infrecuentes en niños menores de 15 años.
Reservorio: El hombre; se ha
transmitido experimentalmente a los
chimpancés.
Período de Incubación: Oscila de dos
semanas a seis meses, pero por lo
común es de seis a nueve semanas.
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
Pruebas serologicas
Elisa de 1ra generación NS4 (C100-3).
Elisa de 2da generación c22-3 de la región del core, c33c
(NS3) y el c100-3 (NS4).
Elisa de 3ra generación NS4, NS3 y NS5.
Test Confirmatorios
RIBA, LIA TEST e INNO-LIA
Test Moleculares
PCR
Las alteraciones más constantes son el
aumento de la bilirrubina en sangre y el
aumento de la actividad de las
transaminasas (enzimas hepáticos,
conocidos por sus iniciales ALT o GPT y
AST o GOT). Se hallan entre 20 y 40
veces más elevadas de los valores
normales.
ELISA
Contiene una mezcla de péptidos
sintéticos o recombinantes o una
combinación de estos, se mide los Ac Ig
G que contiene la muestra.
La presencia de Acs Anti-HCV media la
unión del trazador en la fase sólida.
La actividad enzimatica resulta
directamente proporcional a la
concentración de acs presentes en la
muestra.
ELISA INDIRECTO
PRUEBA CONFIRMATORIA
RIBA
Es una tecnica por la cual se separan proteinas por electroforesis
en gel de poliacrilamida y se depsues se transfieren
electroforeticamente a un papel de nitrocelulosa donde son
detectados con ac que reconocen los ag que hay en ellas.
RIBA-1: contenía unas bandas que comprendían Ag original que
codificaba 5-1-1 producido por E. coli y el Ag c100-3 producido
en células de levadura, así como otras 2 bandas de control de las
IgG.
RIBA-2: dos Ag, uno del gen no estructural (c33c) y otro del
core (c22-3).
RIBA-3: se añadio una proteína modificada y 2 Ag
sintéticos (c100p y c22p), así como la proteína
recombinante NS5.
PRUEBAS MOLECULARES
PCR
Identifica la infección aguda en un 80% antes de la
seroconvercion y de 80 a 100% en enfermedad hepática
activa.
Determina el RNA viral como expresión de fase infectiva
y replicativa.
Un ciclo consta de los siguientes pasos:
desnaturalización, unión y extensión.
AMPLICOR PCR
El método consta de cuatro pasos:
Preparación del reactivo
Preparación de la muestra
Amplificación (PCR)
Detección