PRCTICA N 3

RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LPIDOS Y PROTENAS

I OBJETIVO

II

Reconocer compuestos orgnicos como los lpidos y las protenas que son constituyentes importantes en
todos los seres vivos

MATERIALES

III
3.1

Aceite comestible
Albmina al 2%
Leche
Alcohol
Cloroformo
ter etlico
Solucin alcohlica de Sudn III
Tinta roja
Hidrxido de sodio NaOH20%
Hidrxido de sodio NaOH 40%
Sulfato de cobre CuSO41%
cido ntrico HNO3concentrado
Tubos de 16x150 mm
Tubos de 13x100 mm
Beakers de 50mL
Mechero
Pipetas Pasteur de plstico de 2,5mL
Guantes
Pinza de madera
Gradilla para tubos

PROCEDIMIENTO
DETERMINACIN DE LPIDOS

3.1.1 Solubilidad de los Lpidos

Los lpidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgnicos como el ter y cloroformo.
Preparacin:
1. En cuatro tubos rotulados de 13x100 mm colocar 1 mL de aceite.
2. Agregar los solventes en el siguiente orden:
Tubo N 1: agua destilada 1 mL
Tubo N 2: alcohol
1 mL
Tubo N 3: cloroformo
1 mL
Tubo N 4: ter etlico1 mL
1. Agitar cada uno de los tubos con la misma intensidad.
2. Observar cada tubo y determinar el grado de solubilidad de mayor a menor.
3. Interpretar la diferencia de solubilidad del lpido en los diferentes solventes.
3.1.2 Solubilidad y Tincin en Sudn III
El Sudn III es un tinte diazo altamente soluble en lpidos tindolos en la gama del rojo cereza
Al anaranjado.
Preparacin:
1. En dos tubos de 13x100 mm colocar 1 mL de aceite.
2.
Agregar a un tubo 1 mL de Sudn III y al otro tubo agregar 1 mL de tinta roja, agitar y dejar reposar.
3. Observar la coloracin producida en la zona del aceite en uno de los tubos e interpretar los resultados.

3.1.3Saponificacin
Las grasas (acilglicridos) reaccionan en caliente con hidrxido sdico descomponindose en cidos grasos y
glicerina. La saponificacin se produce cuando los cidos grasos se combinan con los iones sodio del
hidrxido para dar jabones, que son por ende las sales sdicas de los cidos grasos.
Preparacin
1. En un tubo 16x150mm colocar 2 mL de aceite y 2 mL de hidrxido de sodio NaOH 20%.
2. Agitar enrgicamente y colocar el tubo en bao mara en ebullicin por 20 a 25 min.
3. Observar la formacin de 3 fases en el tubo: una inferior, que contiene la solucin de soda
Sobrante junto con la glicerina formada; otra intermedia, semislida, que es el jabn
Formado; y la superior, que contiene el aceite inalterado.

3.2 DETERMINACIN DE PROTENAS

3.2.1Reaccin de Biuret
Los compuestos que contienen dos o ms enlaces peptdicos forman un complejo con las sales de cobre en
un medio fuertemente alcalino, dando un color prpura o violeta, debido a la formacin de un complejo de
coordinacin entre los iones del Cu +2 y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte
de los enlaces peptdicos.
Preparacin
1. En dos tubos 16x150 mm colocar por separado2mLde la solucin de albmina 2% (o
Solucin declara de huevo al 10%) y 2mLde leche.
2. Agregar a cada tubo 2mL de hidrxido de sodio NaOH40% y mezclar.
3. Aadir a cada tubo 6 gotas de sulfato de cobre CuSO 41%.
4. Incubar los tubos a 37 C por 10 min.
5. Observar la coloracin producida y determinar si la reaccin es positiva o negativa.
6. Interpretar los resultados.
3.2.2Reaccin Xantoproteica
Se emplea para determinar la presencia de protenas solubles en una solucin, empleando cido ntrico
(HNO3) concentrado. Las protenas solubles que presentan aminocidos aromticos (fenilalanina, tirosina y
triptfano), dan derivados nitrogenados que se colorean de amarillo.
Preparacin
1. En un tubo de 16x150 mm colocar 2 mL de la solucin de albmina al 2% o clara de huevo
al 10%.
2. Agregar 2 mL de cido ntrico (HNO3) concentrado.
3. Observar la formacin de un precipitado blanco y hervir por 3 min.
4. Observar la coloracin producida y determinar si la reaccin es positiva o negativa.
I.

CUESTIONARIO P#3
1.
Defina emulsin y micela.
2. Cul es la semejanza y diferencia qumica entre el cido araqudico y el cido
araquidnico?
3. Desarrolle la reaccin de saponificacin entre el cido oleico y el hidrxido de sodio.
4. Qu aminocidos presentan anillos bencnicos? Esquematice cada uno de ellos.
5.
Qu supone la desnaturalizacin de una protena?
6.
Qu es la proteinuria?

II.

INFORME

Cartula- Introduccin- Marco terico- Resultados y Fundamentos- Conclusiones- Cuestionario- Referencias

bibliogrficas (estilo Vancouver).