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facilita el procedimiento. El musculo tena que estar aislado del animal porque as nosotros
controlbamos la concentracin de ACh debido a que ya que no haba ningn axn que inervara a las
musculo y lo estimulara por la liberacin de ACh endgena.
El musculo recto abdominal se caracteriza por ser un musculo muy sensible a la ACh adems de
poseer un gran nmero de fibras musculares, estas son razones por las que dicho musculo fue til
para la prctica ya que el agonista empleado fue precisamente ACh y tambin nos permiti utilizar
diferentes concentraciones de esta ya que el efecto en cuanto al parmetro que nos interesaba medir
que fue la fuerza de contraccin es directamente proporcional a la concentracin de ACh relacionado
al nmero de fibras musculares que una determinada concentracin es capaz de activar por la unin
a los receptores colinrgicos de tipo nicotnico que se encuentras en estas, hasta que se llega a un
efecto mximo. Antes de montar el musculo recto abdominal calibramos el equipo BIOPAC con una
tensin de 5 g ya que era necesario mantener la elasticidad de las fibras musculares constantes
asegurando que los cambios nicamente se debieran al efecto mecnico que es la contraccin del
muscular.
Objetivos
Objetivos generales:
Demostrar el agonismo de la Acetilcolina sobre los receptores colinrgicos de tipo nicotnicos.
Demostrar el antagonismo competitivo de los bloqueadores neuromusculares no
despolarizantes sobre los receptores colinrgicos de tipo nicotnicos.
Objetivos particulares:
Demostrar el efecto agonista de la Acetilcolina a concentraciones de 25, 77.5, 250, 775, y
1550 g/mL; sobre la fuerza de contraccin, en una preparacin in vitro de musculo recto
abdominal de rana.
Analizar el efecto de la acetilcolina a concentraciones de 25, 77.5, 250, 775, y 1550 g/ml en
conjunto con d-tubocurarina a una sola concentracin constante sobre la fuerza de contraccin
en una preparacin in vitro de msculo recto abdominal de rana.
En la tabla 1 se observa los datos obtenidos por cada equipo en cuanto a la fuerza de contraccin en
gramos, del musculo recto abdominal de rana dependiendo de la concentracin de ACh, para el caso
del equipo uno al adicionar la ltima concentracin de 1550 g/mL an se observ un aumento de la
fuerza de contraccin as que se consider que a esta concentracin se da la respuesta mxima, una
fuerza de contraccin de 12.14 g; mientras que para el equipo 2 la concentracin en donde se
present la mayor fuerza de contraccin, con un valor de 12.22 g, fue de 750 g/mL posteriormente
al adicionar la ACh 1550 g/mL dicha fuerza se mantuvo en el valor ya mencionado. Todo lo anterior
referido a cuando se encuentra solamente la ACh. En la tabla tambin se presentan las fuerzas de
contraccin a las diferentes concentraciones de ACh pero ya en presencia de d-tubocurarina a
concentracin constante, y se observa de manera clara que en el caso del equipo 1 y 2 que al
adicionar la mayor concentracin de ACh ya no se alcanza la misma fuerza de contraccin que
cuando se encontraba sin la presencia de d-tubocurarina, sino que se obtienen valores de fuerza de
8.03 g y 8.61 g respectivamente, como fuerzas de contraccin mximas. Para el manejo de datos de
ambos equipos se realiz un promedio de la fuerza obtenida en cada concentracin, para la ACh
colina sola as como en presencia de la d-tubocurarina.
Finalmente para la realizacin de la grfica a partir de la respuesta mxima obtenida por cada equipo
se determin la fuerza de contraccin como porcentaje de respuesta, esto de manera individual (por
equipo) y tambin se realiz con los promedios.
100
ACh Eq 1
ACh+d-tubocurarina Eq 1
ACh Eq 2
ACh+d-tubocurarina Eq 2
ACh promedio
ACh+d-tubocurarina
promedio
Fuerza (%)
80
60
40
20
0
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
Log [ACh]
Figura 1. Porcentaje de la fuerza de contraccin en una preparacin in vitro del
musculo recto abdominal de rana, con respecto al logaritmo de la concentracin de
Acetilcolina (ACh) en ausencia y presencia de d-tubocurarina (342 g/mL), a
concentraciones crecientes de ACh (25,77.5, 250, 775,1550 g/mL). Resultados
individuales de los equipos y promedio de ambos.
En la figura 1 se observa en porcentaje, la fuerza de contraccin del musculo recto abdominal de
rana con respecto al log de las concentraciones de ACh sola, as como en presencia del bloqueador
neuromuscular (d-tubocurarina). En la grfica se observ el valor de las pendientes de cada recta,
tanto individuales como las del promedio, para el caso de las individuales con la ACh sola para el
equipo 1 fue 27.5 3.065 para el equipo dos fue de 25.12 3.355 y en cuanto al promedio fue de
26.30 3.130; y en el caso de la ACh+ d-tubocurarina para el equipo 1 la pendiente tuvo un valor de
30.4 2.371, equipo 2 31.29 2.18 y en el promedio una pendiente con valor de 30.72 0.44. El
valor de la pendiente de la recta que representa solo a la ACh fue muy cercano al valor de la
pendiente que representa a la ACh + d-tubocurarina, tanto en el caso por equipo como en los
promedios.
En cuanto a los valores de ordena al origen fueron los siguientes para el caso de ACh sola para el
equipo 1 fue de -7.47 9.959 para el equipo 2 fue de 4.07 10.90 y para el promedio la ordenada
tuvo un valor de -1.67 10.17; para el caso de ACh en presencia de d-tubocurarina para el equipo
uno fue de -58.88 7.705, equipo 2 -52.47 7.086 y para el promedio el valor fue de -55.66
1.459.
100
ACh promedio
ACh+d-tubocurarina
promedio
Fuerza (%)
80
60
40
20
0
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
Log [ACh]
Figura 2. Promedio del porcentaje de la fuerza de contraccin en una preparacin in
vitro del musculo recto abdominal de rana, con respecto al logaritmo de la
concentracin de Acetilcolina (ACh) en ausencia y presencia de d-tubocurarina (342
g/mL), a concentraciones crecientes de ACh (25,77.5, 250, 775,1550 g/mL).
En la figura 2. Se observan nicamente las rectas de los promedios de los datos de ambos equipos,
con valores en la pendiente en el caso de la ACh sola de 26.30 3.130 y en presencia de la dtubocurarina el valor de la pendiente fue de 30.72 0.44. Tambin se consideraron las ordenadas al
origen los valores obtenidos fueron de -1.67 10.17 y -55.66 1.459 respectivamente.
En ambas graficas se observa un desplazamiento de la recta que representa al % de fuerza de
contraccin a diferentes concentraciones de la ACh en presencia de d-tubocurarina, dicho
desplazamiento es hacia la derecha.
TABLA 2. VALORES DE LA DOSIS EFECTIVA 50 PARA LA ACH Y ACH + d-TUBOCURARINA
EC50
ACh
21.97 g/mL
ACh + d-tubocurarina
693.54 g/mL
En la tabla 2 se observan los valores de la concentracin efectiva 50, estos valores fueron calculados
a partir de los valores de la figura 2. Para la ACh sola la concentracin necesaria para producir 50%
de contraccin en el musculo recto abdominal con respecto a la contraccin mxima fue de 21.97
g/mL mientras que combinada con d-tubocurarina aument hasta 693.54 g/mL.
Discusin
Como ya se explic en la figura 1 se observa que el porcentaje de respuesta aumenta conforme
aumenta la concentracin de ACh adicionada en la cmara de rgano aislado en donde se
encontraba el musculo recto abdominal de rana, esto es debido a que el musculo utilizado est
formado por un determinado nmero de fibras musculares y a su vez en estas fibras se encuentra
una cantidad especfica de receptores nicotnicos, tomando en cuenta esto al administrarse una
concentracin de ACh esta va a unirse a dichos receptores provocando la activacin de un cierto
nmero de fibras musculares, dando as la respuesta que es la contraccin con una fuerza especfica.
Pero al ir aumentando la concentracin de ACh se va aumentar las interacciones de sus molculas
con los receptores en las fibras y al aumentar este nmero de uniones entonces va a haber una
activacin de un mayor nmero de fibras musculares lo que ocasiona que la fuerza de contraccin
aumente. Va a existir un momento en que la cantidad de ACh presente en la preparacin sea
suficiente para ocupar a todos los receptores nicotnicos de las fibras desencadenando la activacin
de todas estas y causando as la mayor fuerza de contraccin. Nosotros tomamos la ltima
concentracin que fue de 1550 g/mL para considerar que se present la respuesta mxima ya que
al adicionar esta concentracin aun hubo un aumento de la fuerza concentracin, quiz si se hubiese
seguido aumentando la concentracin de la ACh se poda determinar exactamente cul era la
concentracin en donde se alcanza la respuesta mxima.
Conclusiones
Conforme aumentaba la concentracin de acetilcolina en la cmara con el msculo recto
abdominal de rana la fuerza de contraccin tambin aument.
La fuerza de contraccin del musculo recto abdominal de rana con acetilcolina en presencia de
la d-tubocurarina fue menor que la obtenida con acetilcolina sola.
Se comprob que la d-tubocurarina se comporta como un antagonista competitivo debido a
que provoca un desplazamiento a la derecha en la grfica log de la concentracin contra
porcentaje de respuesta.
La CE50 de ACh, aumenta en presencia de d-tubocurarina.
Referencias
Campbell L, Kruidering-Hall M. 2013. Relajantes musculares. En: Farmacologa bsica y clnica. 12
edicin. Mc Graw hill educacin, Mxico. pp 465-483
Hibbs R, Zambon A. 2012. Frmacos que actan en la unin neuromuscular y en los ganglios
autnomos. En: Goodman & Gilman. Las bases farmacolgicas de la teraputica. 12 edicin. Mc
Graw hill educacin, Mxico. pp 255-277
Cardona E, Garcia L, Cardona D. 2013. Farmacometria. En:Farmacologia general. 3 edicin. Textos
universitarios, Mexico. pp 195-202