1.

Introduccin:
En qumica trabajamos con sustancias en su estado puro. En la naturaleza, la mayor parte de
dichas sustancias se encuentran en forma de mezclas. Para poder separarlas, existen muchas
tcnicas, entre las cuales encontramos la destilacin por arrastre de vapor. Utilizando como
principio los puntos de ebullicin de cada sustancia que compone la mezcla, logramos
obtener sustancias independientes. Los principios de la destilacin son bsicos para un
profesionista que se desenvuelva en el laboratorio.
2. Objetivos:
2.1 Conocer las caractersticas y aplicaciones de la cromatografa en papel.
2.2 Conocer los fundamentos bsicos de la cromatografa como tcnica instrumental
de separacin.
Cromatografa
No cabe duda que el mtodo ms usado para separar una mezcla de sustancias es
la cromatografa. La I.U.P.A.C define la cromatografa como el procedimiento usado para
la separacin de los componentes de una muestra. Los componentes se distribuyen en dos
fases, una estacionaria y la otra mvil.
La cromatografa permite separar, aislar y muchas veces identificar componentes
estrechamente relacionados presentes en mezclas complejas; muchas de estas separaciones
son imposibles por otros medios.
En una cromatografa, la fase estacionaria puede ser un slido o un lquido soportado en un
slido o en un gel (matriz). La fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna,
extendida en una capa, distribuida como una pelcula, etc.
De forma general, la cromatografa es un mtodo fsico de separacin de mezclas complejas,
la cual tiene grandes aplicaciones en muchas ciencias. Las tcnicas cromatografcas estn
basadas en el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos
componentes de una mezcla permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos
componentes.
Las tcnicas cromatografcas son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase mvil que
consiste en un fluido (gas, lquido o fluido supercrtico) que arrastra a la muestra a travs de
una fase estacionaria que se trata de un slido o un lquido fijado en un slido. Los
componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria. De este
modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van
separando. Diferencias sutiles en el coeficiente de particin de los compuestos da como
resultado una separacin efectiva en funcin de los tiempos de retencin de cada
componente de la mezcla.
La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no se excluyen mutuamente:
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms puros y que puedan ser usados
posteriormente (etapa final de muchas sntesis).
Medir la proporcin de los componentes de la mezcla (finalidad analtica). En este caso, las
cantidades de material empleadas son pequeas.
Constante Rf
La constante Rf (Factor de retencin) es simplemente una manera de expresar la posicin de
un compuesto sobre una placa como una fraccin decimal y mide la retencin de un
componente. Se define como:

Rf= distancia del compuesto desde el origen/distancia de la muestra desde el origen.

La distancia recorrida por el compuesto se mide generalmente desde el centro de la mancha,
los clculos se simplifican si el denominador es 10. Para que los Rf sean reproducirles deben
ser fijadas una serie de condiciones (Espesor de la placa, fase mvil, fase estacionaria,
cantidad de muestra)
El mximo valor de Rf que se puede alcanzar es de 1, lo ideal es un Rf entre 0.55 y 0.7. Para
averiguar si dos compuestos son iguales, se colocan ambos sobre la misma placa y se
desarrolla con varios eluyentes. Una vez desarrollados se calculan los Rf y si son distintos,
puede deducirse con toda seguridad que no se trataba del mismo compuesto. Por el contrario,
si los Rf son iguales, los compuestos pueden ser iguales o no.
Clasificacin
Las distintas tcnicas cromatrogrficas se pueden dividir segn como est dispuesta la fase
estacionaria:

Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o

sobre un papel.

Cromatografa en papel

Cromatografa en capa fina

Cromatografa en columna. La fase estacionaria se sita dentro de una columna. Segn el

fluido empleado como fase mvil se distinguen:

Cromatografa de lquidos

Cromatografa de gases

Cromatografa de fluidos sper-crticos

Cromatografa en papel
La cromatografa en papel se ha convertido en una prctica para la separacin de mezclas
complejas de aminocidos, pptidos, hidratos de carbono, esteroides, purinas, y una larga
lista de compuestos orgnicos simples. Los iones inorgnicos tambin pueden ser fcilmente
separados en el papel.
Consiste en la aplicacin de una solucin en un punto cercano a la hoja de papel filtro. Se crea
una fase liquida estacionaria cuando el papel se impregna con un poco de disolvente
adecuado. Un borde del papel cerca del lugar donde se coloca la muestra se sumerge en otro
disolvente en el que los componentes de la mezcla son solubles en diversos grados. El
disolvente penetra en el papel por la accin capilar y al pasar por el punto de la muestra, se
lleva los diversos componentes de sta. Los componentes se mueven con el disolvente que
fluye a velocidades que dependen de sus solubilidades en los disolventes estacionario y
mvil. La separacin de los componentes se produce si hay diferencias en sus solubilidades
relativas en los dos disolventes. El disolvente que fluye llega lo ms lejos del borde del papel,
ambos disolventes se evaporan, y la ubicacin de los componentes separados se identifica

generalmente por aplicacin de los reactivos que forman compuestos coloreados con las
sustancias separadas.
Los componentes separados aparecen como manchas individuales sobre el camino del
disolvente. Si el disolvente fluye en una direccin en la cual no es capaz de separar todos los
componentes de forma satisfactoria, el papel se puede girar 90 y el proceso se repite
utilizando otro disolvente.
3. PROCEDIMIENTO:
Separacin de los componentes de la tinta de un bolgrafo por cromatografa en
papel (CP)
1.-Recortar 5 rectngulos de papel cromatogrfico de 1 cm de ancho por 15 cm de largo.
2.-Pintar con lpiz una lnea base a un centmetro de distancia del borde inferior.
3.-Con un microcapilar, colocar una pequea gota con la tinta de un bolgrafo en cada lnea
base y deja secar.
4.-Enumerar 5 tubos de ensayo y colocarlos en la gradilla.
5.- A cada uno colocar 1.5 ml de los siguientes disolventes
a) Hexano
b) Tolueno
c) Etanol
d) Acetona
e) Agua
6.-Colocar un papel cromatogrfico por cada disolvente, como se muestra en la siguiente
figura:

7. Dejar que el disolvente suba a travs del papel cromatogrfico por capilaridad, arrastrando
parte de la tinta segn avanza.
8. Una vez que se haya completado la subida del disolvente (parar a 1 cm del final) se
habr obtenido una separacin de los diferentes colorantes que forman parte de la tinta del
bolgrafo.
9. Sacar el rollo cromatogrfico, marcar la lnea superior hasta donde lleg el solvente y
sealar las manchas encontradas.
10. Se llena la tabla de resultados en la tabla de registro de datos que se encuentra en la hoja
de resultados. Las tiras se tiran a la basura y los solventes a un frasco de residuos orgnicos.

La destilacin simple y fraccionada son tcnicas bsicas de separacin de mezclas, que son
necesarias para poder separar sustancias en su estado puro cuando normalmente se
encuentran mezcladas con otras sustancias en la naturaleza. Es importante entender cmo se
realizan estos mtodos ya que sern de gran utilidad en un futuro.
En cuanto a la cromatografa en papel, es uno de los mtodos ms usados, por lo cual es
necesario aprender y entender cmo realizarlo correctamente. Al realizar la prctica, pudimos
observar cmo los diferentes colorantes de la tinta de un bolgrafo se separaron, y con esto se
permiti identificar los distintos componentes de la tinta.
Muchas de las separaciones que se realizan en los laboratorios requieren de la cromatografa,
ya que son separaciones muy complejas de realizar. He ah la razn de su importancia.