Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
Objetivo:
Analizar diferentes muestras de leche para determinar sus respectivos iones debido a las
diferentes propiedades que presentan.
Identificar especies inorgnicas en huesos.
Introduccin:
La Leche es el lquido segregado por las hembras de los mamferos a travs de las glndulas mamarias,
cuya finalidad bsica es alimentar a su cra durante un determinado tiempo. Lquido de composicin
compleja, blanco y opaco, de sabor ligeramente dulce y de pH cercano a la neutralidad. De olor
caracterstico y puro. Debe tener consistencia (coherencia entre sus partculas) homognea y carecer
de grumos y copos.
La leche tiene una gran importancia desde el punto de vista nutricional, tecnolgica y econmica; en
el aspecto nutricional, la leche existe especialmente para la alimentacin, ha sido recomendada
ampliamente (FAO y UNESCO), como un alimento indispensable para nios (y para ancianos), debido
a que ayuda a la formacin y el mantenimiento de unos huesos fuertes y sanos y a prevenir la
aparicin de la osteoporosis ; y desde el punto de vista tecnolgico; se destina para la elaboracin de
diferentes derivados lcteos.
El proceso de pasteurizacin hace perder ms del 20% de vitamina C, y un 12% de la tiamina y la
vitamina B12. Las protenas resultan muy poco afectadas por este proceso. La composicin de la leche
se ve modificada a lo largo de perodo (casi diez meses), modificndose la concentracin de grasa,
protenas y lactosa. La grasa con agua forma una emulsin; la protena insoluble de la leche (casena)
ligada con algunas sales minerales forma la suspensin y la lactosa junto con las protenas solubles
(globulinas y albminas) y sales minerales forman la solucin. Se puede considerar que la leche
contiene tres componentes bsicos: agua (87.5%), grasa (3.8 %) y slidos no grasos (SNG). La materia
orgnica de la porcin no grasa consiste principalmente de las protenas (3.1% el cual se compone de
casena 80%, albminas 5% y globulinas 12%), lactosa (4.6%) y cidos lctico y ctrico.
La leche es un alimento de primer orden, sano, fortificadamente de fcil digestin y econmico; as
que es un objeto de gran comercio, que sera todava mayor si no fuera origen de tantas
adulteraciones y falsificaciones. Adems en el momento que sale de la ubre y en algunos casos antes,
tropieza con mil grmenes que la invaden y descomponen ms o menos rpidamente. En la mayora
de los caso el 87% del peso total de la leche est formado por agua, en la que se encuentran los
nutrientes en perfecta suspensin. Es importante destacar la cantidad elevada de sodio mientras que
el potasio est en menor porcentaje.
El anlisis de los alimentos es la disciplina que se ocupa del desarrollo, uso y estudio de los
procedimientos analticos para evaluar las caractersticas de los alimentos y de sus componentes. Esta
informacin es crtica para el entendimiento de los factores que determinan las propiedades de los
alimentos, as como la habilidad para producir alimentos que sean consistentemente seguros, nutritivos
y deseables para el consumidor. Las pruebas qumicas ms empleadas en la leche son: Acidez, pH,
prueba de fosfatasa, prueba de reductasa, prueba de alcohol, contenido de grasa, slidos totales y
formaldehido.
ACIDEZ
La acidez verdadera es la que est dada por la presencia del cido lctico y otros cidos originados
durante la fermentacin; a esta acidez tambin se le conoce como acidez desarrollada o real.
Durante la fermentacin de la lactosa ocurren adems otras fermentaciones que dan origen a olores o
aromas caractersticos y por esto a pesar de que el cido lctico es inodoro se dice que la leche cida
posee un olor caracterstico. La acidez es probablemente uno de los parmetros ms importantes, el
cual controla la calidad en el proceso de la leche. La acidez permitida en la leche es de 6.6 a 8.4
pH
Potencial hidrgeno, es una medida de la acidez o alcalinidad de una disolucin. La leche tiene una
reaccin dbilmente acida, con un pH comprendido entre 6.5 y 6.6 como consecuencia de la
presencia de casena, y de los aniones fosfricos y ctricos. La diferencia entre la escala pH y los grados
dornic es que el pH nos indica la acidez real que existe en este momento, mientras que la acidez
dornic nos indica la cantidad de cido lactico que se puede producir a partir de la lactosa. Cuando
toda la lactosa se ha transformado en cido lctico, el pH y los grados dornic coinciden.
PRUEBA DE FOSFATASA
La fosfatasa es una enzima normalmente presente en la leche cruda. En las condiciones ordinarias de
pasteurizacin (lenta, rpida o ultrarrpida) la enzima se inactiva. Se ha demostrado que esta enzima
es ms difcil de destruir que la mayora de los organismos patognicos termo resistentes que pudieran
estar presentes en la leche, como por ejemplo el bacilo tuberculoso. La prueba es de gran utilidad
para decidir si la leche ha sido o no pasteurizada, si la leche pasteurizada se ha mezclado con leche
cruda, o incluso su la pasteurizacin ha sido deficiente.
Este mtodo se basa en la hidrlisis del fenil fosfato que en presencia de la fosfatasa de la leche libera
fenol; este se determina colorimtricamente hacindolo reaccionar con 2.6 dibromoquinonclorimida
obtenindose un color azul, cuya intensidad se mide con el espectrofotmetro.
PRUEBA DE REDUCTASA
Para estimar el nmero aproximado de microorganismos en la leche cruda se utiliza un mtodo
indirecto basado en la reduccin del colorante azul de metileno que es un indicador de xidoreduccin (es azul cuando est oxidado e incoloro cuando esta reducido). La actividad reductora de
los microorganismos se manifiesta por el tiempo de la reduccin del colorante a una temperatura de
37 a 38 grados centgrados. La incubacin se hace tubos estriles a 37 grados con 10 c.c de leche y 1
c.c. de indicador, constituido por 5 mg de azul de metileno disueltos en 100 c.c. de agua estril. A
intervalos regulares se observa el color de la mezcla, pudiendo as definirse diferentes categoras de
leches.
Ejemplos:
sustancias
amorfas.
Las sustancias inorgnicas del hueso ms importantes son el calcio y el fsforo, constituyen el 90% del
total corporal, aunque tambin se hallan presentes magnesio, sodio, carbonato, hidroxilo y fluor.
Generalmente se acepta que el hueso es una estructura cristalina (la composicin qumica del cristal
seo vara durante la vida) constituida por cristales de hidroxiapatita. Por tanto, el hueso es el principal
compartimiento del organismo para el equilibrio qumico de estos minerales.
Materiales:
Reactivos:
Muestras de leche
Huesos de pollo previamente cocidos y
descarnados
Vaso de precipitados
Sistema de filtracin
Tubos de ensayo
Parrilla
Papel pH
Estructura
Peso
Molecular
Punto de
Fusin
Punto de
ebullicin
Densidad
cido actico
C2H4O2
60.1 g/mol
16.7 C
118 C
1.05
g/cm
Nitrato de
plata
AgNO3
169.87 g/mol
212 C
444 C
4.4
g/cm
Molibdato de
amonio
(NH4)6Mo7O24
4H2O
1235.86
g/mol
N/A
N/A
N/A
cido ntrico
HNO3
63.02 g/mol
-42 C
86 C
1.5 g/cm
Oxalato de
amonio
(NH4)2C2O4
H2O
142.11 g/mol
70 C
Se
descompone
1.50 kg/L
Sustancia
cido actico
Nitrato de plata
Molibdato de
amonio
cido ntrico
Oxalato de
amonio
0
0
Procedimiento
I.DETERMINACIN DE PORCENTAJE DE AGUA EN LECHE
1. Pesar un vaso de precipitados de 50 mL y agregar 10 mL de la muestra de leche y pesar nuevamente. Registrar
los datos.
2. Colocar el vaso con la muestra de leche en una parrilla elctrica para evaporar el lquido y calentar
suavemente. Evitando que la leche se queme. Si se forma una capa sobre la superficie del lquido romperla
suavemente con un agitador de vidrio.
3. Cuando se haya evaporado el lquido dejar evaporar a temperatura ambiente y pesar el vaso con la muestra
de leche para determinar el porcentaje de agua.
II.ENSAYO DE ESTABILIDAD
1. Colocar en un vaso de precipitados 5 mL de leche.
2. Agregar 5 mL de etanol.
3. Observar si se produce la formacin de agregados (color blanco). Esto indica que la leche no est en buenas
condiciones.
III.DETERMINACIN DE NITRGENO
1. Depositar en un tubo de ensayo 5 mL de la muestra de leche y agregar 50 mg de xido de calcio y agitar.
2. Calentar suavemente el tubo en bao mara.
3. Humedecer una tira de papel indicador de pH con agua destilada y acercarlo a la boca del tubo. Registrar el
valor de pH.
4. Repetir lo anterior con la casena y con el suero.
IV. DETERMINACIN DE IONES CLORURO, FOSFATO Y CALCIO EN LECHE
1. Colocar 50 mL de leche en un vaso de precipitados y aadir 5 mL de cido actico (1:1) y dejar reaccionar
durante tres minutos.
2. Filtrar para obtener el suero.
3. Colocar 3 mL del suero obtenido en cada uno de tres tubos de ensayo.
4. En el primer tubo determinar iones cloruro, segn se procedi en la prctica anterior.
5. En el segundo tubo determinar iones fosfato adicionando 2 mL de molibdato de amonio 1% tratado con cido
ntrico en cantidad suficiente para disolver el cido molbdico que se forma. Calentar y observar y registrar los
cambios.
6. En el tercer tubo determinar iones calcio adicionando 10 gotas de oxalato de amonio 0,2 M.
V. DETERMINACIN DE CALCIO EN HUESOS
1. Los huesos de pollo previamente cocidos se colocan en solucin de vinagre y se dejan reposar durante una
semana.
2. Tomar 2 mL de la solucin resultante en un tubo de ensayo y adicionar hidrxido de amonio 5 M hasta hacerla
ligeramente bsica (checar pH).
3. Agregar oxalato de amonio 0,2 M gota a gota hasta observar cambios. Registrar.
Tipo de leche
Peso de vaso
de
precipitados
Peso de vaso de
precipitados ms
10mL de leche
Peso de vaso de
precipitados ms
leche seca
Porcentaje de
solido de la
leche
Porcentaje de
agua en la
leche
Deslactosada
30.6018 g
40.8711 g
32.60 g
19.4579 %
80.5421 %
En Polvo
30.5717 g
40.6730 g
32.07 g
14.8327 %
85.1673 %
Entera
30.2672 g
40.2260 g
32.92 g
26.6391 %
73.3609 %
Podemos observar que aun cuando la leche en polvo es la que tiene mayor porcentaje de agua, est
dentro del promedio que es de 87.5%.
Clculos realizados
32.60 30.6018
(100%)] = 80.5421 %
% = 100% [
40.8711 30.6018
% = 100% [
32.07 30.5717
(100%)] = 85.1673 %
40.6730 30.5717
% = 100% [
32.92 30.2672
(100%)] = 73.3609 %
40.2260 30.2672
II.ENSAYO DE ESTABILIDAD
2
1
III.DETERMINACIN DE NITRGENO
Al depositar el xido de calcio en los 5 mL de cada una de las muestras de
leche, no se observ ningn cambio perceptible y al calentar a bao mara,
las sustancias se volvieron amarillas pastel. La muestra 2 la que contena
leche deslactosada fue la que tuvo una coloracin amarilla mayor, por lo
que podemos decir que esta muestra es la que tiene mayor concentracin
de nitrgeno. Las tres muestras tuvieron un pH igual a 8, por lo que las sustancias eran ligeramente
bsicas.
IV. DETERMINACIN DE IONES CLORURO, FOSFATO Y CALCIO EN LECHE
Al agregar el cido actico a cada uno de las muestras de las leches, estas obtuvieron una apariencia
similar a un cuajado, y un olor desagradable, como cuando se echa a perder. La filtracin fue lenta
para la muestra No.2, la de la leche en polvo, obteniendo muy poca casena. La leche deslactosada
fue la que filtro con mayor rapidez y de la que se pudo obtener mayor cantidad de casena .
Muestra
de leche
Muestra
No. 1
Muestra
No. 2
Muestra
No. 3
Procedencia
Cloruros
Fosfatos
Calcio
Leche
deslactosada
Se observa un precipitado
de color blanco en forma
de esfera como una
servilleta mojada, flota en
la
solucin
completamente cristalina.
Por lo que podemos concluir que
presenta iones fosfato.
Se
form
un
precipitado blanco
en el fondo. Dando
positivo a la prueba
para iones calcio
En la muestra se observa
una leve neblina
alrededor de las paredes
del tubo de ensaye pero
de un color poco
distinguible. Esta turbidez
solo es apreciable en la
parte inferior del tubo.
Al adicionar a la solucin
molibdato de amonio se
observa una pelotita de
menor tamao en
comparacin con las
muestras 1 y 3. Su apariencia
fsica era de consistencia
como pelota de espuma y un
color amarillo deslavado.
Se forma un pequeo
precipitado en el
fondo del tubo de
ensaye con
apariencia como
granitos de arena, la
cantidad fue
considerablemente
menor en
comparacin con las
dems muestras.
Se observa la presencia
de una solucin turbia
por lo que podemos
suponer la presencia de
iones cloruro debido a
que la solucin turbia es
blanca.
Al agregar el molibdato
de amonio se form un
precipitado blanco en
forma de esfera que
tena apariencia como
una bolita de servilleta hmeda,
lo que indica la presencia de
iones fosfato en la leche. A
diferencia de la formada con la
leche
deslactosada,
esta
permaneca en el fondo del tubo
de ensaye.
Se
form
un
precipitado blanco,
en mayor cantidad
que en la leche
deslactosada por lo
que
podemos
concluir que tiene
una
mayor
cantidad de iones
calcio.
Leche en
polvo
Leche entera
2 CH3COOH + Ca Ca(CH3COO)2 + H2
c) Proponga otra prueba sencilla para la determinacin de iones calcio en la solucin.
Con una solucin EDTA o ensayo a la llama, esperando encontrar una coloracin amarilla.
d) Cmo detectara iones fosfato?
Conclusin
En esta prctica pudimos comprobar que tanto la leche como los huesos son ricos en calcio y fosforo.
Utilizando tres tipos de leche para las pruebas podemos concluir que la leche en polvo tiene ms
cantidad de agua que la leche deslactosada y estas tienen ms que la leche entera. En cuanto a las
pruebas de leche realizadas pudimos probar que la leche entera deslactosada tienen cloruros, fosfatos
e iones calcio en su composicin dando positivas todas sus pruebas. En cambio la leche en polvo las
pruebas de fosfatos e iones calcio son perceptiblemente positivas a la vista debido a los cambios
fsicos observados, pero en la prueba de iones cloruros las modificaciones en la apariencia de la
muestra no fueron tan evidentes como en las otras dos muestras. De las tres muestras utilizadas, la leche
entera fue de la que se pudo obtener mayor volumen de casena y en la cual el filtrado era constante
con flujo rpido, en cambio en la leche en polvo se observaba una casena de consistencia muy
espesa lo cual provoc que el volumen obtenido, en el doble de tiempo que la muestra anterior, fuera
a penas suficiente para realizar las 3 pruebas durante la prctica.
El vinagre extrae el calcio del hueso, formando acetato de calcio, el cual es soluble en agua, el
propsito de agregar oxalato de amonio es que se forme oxalato de calcio. Este compuesto no es
soluble en agua, por lo cual precipita, indicndonos la presencia de calcio. En tanto los huesos
podemos destacar que el resultado esperado pudo ser observado dando positivo en la prueba.
Bibliografa
http://pasaelanalisis.blogspot.mx/2008/11/analisis-de-leche-fresca.html
http://analisisquimicosdelaleche.blogspot.mx/2011/11/analisis-quimicos-de-la-leche.html
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Alimentosricosenproteinas_8076.pdf