Ao de la consolidacin del

Mar de Grau

Efecto de la
temperatura en la
actividad enzimtica
Alumna: Leonela Marbella Castaeda
Hernndez.

Docente: Edwin Cerna Villalobos.

Grado y seccin: 4 Ciencias A.
COAR-Tacna

2016

LA TEMPERATURA EN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LA CATALASA

OBJETIVO:
El objetivo de la presente prctica es valuar el efecto de la variacin de la
temperatura en la actividad enzimtica de la catalasa.

I.

INTRODUCCION:

Las clulas regulan la rapidez de las reacciones qumicas mediante enzimas,

que son catalizadores biolgicos que aumentan la rapidez de una reaccin
qumica sin ser consumidas en la reaccin. La mayora de enzimas son
protenas globulares que estn compuestas de aminocidos. ( Solomon Berg
Martin, 2013, pg. 165).
La catalasa es una enzima presente en muchos tipos de clulas. Su funcin
es proteger a las clulas del efecto txico de perxido de hidrgeno (HO)
producido en distintas reacciones. El perxido de hidrgeno es un residuo
del metabolismo celular de muchos organismos vivos, pero dada su
toxicidad, debe transformarse rpidamente en compuestos menos
peligrosos por la enzima catalasa. Para ello se usa con frecuencia esta
enzima que cataliza su descomposicin en agua y oxgeno. (Gonzlez,
Monica, 2010)
La actividad enzimtica es la catlisis de una reaccin por parte de una
enzima, el sustrato se une al sitio activo de la enzima, este proceso es
llamado colisin. Algunas enzimas tienen dos sustratos que se unen a
diferentes partes del sitio activo. Mientras que los sustratos estn unidos al
sitio activo se transforman en sustancias qumicas diferentes, que son los
productos de la reaccin. Los productos se separan del sitio activo,
dejndolo libre para que otros sustratos se puedan unir a l. (Andrew Allot,
2015, pg. 106)
La actividad enzimtica puede ser afectada por muchos factores, uno de
ellos es la temperatura, quien afecta a la tasa de actividad enzimtica. La
mayora de las enzimas tienen una temperatura ptima, en la cual se da la
mayor rapidez de la reaccin. A bajas temperaturas, las reacciones
enzimticas suceden muy lentamente o no ocurren. Al aumentar la
temperatura, se incrementa el movimiento molecular, resultando ms
colisiones moleculares. Por lo tanto, la rapidez de las reacciones
controladas por enzimas se incrementan al aumentar la temperatura, pero
hasta cierta temperatura optima ya que despus comienza el proceso
llamado desnaturalizacin, en el cual se rompen los enlaces de las
estructuras qumicas de las enzimas, por lo que el sitio activo se modifica y
ya no puede unirse al sustrato, lo que provoca la disminucin de la actividad
enzimtica. (Solomon Berg Martin, 2013, pg. 166).

La presente investigacin tiene como problema a la siguiente pregunta:

Cul es el efecto de la variacin de la temperatura en la actividad
enzimtica de la catalasa?

II.
DISEO:
1. HIPOTESIS:
A mayor temperatura aumenta la actividad enzimtica hasta llegar a un
punto ptimo de temperatura, posteriormente la actividad enzimtica
decrece a medida que la temperatura aumenta.
2. VARIABLES:
2.1Variable independiente:
La temperatura (T).
2.2Variable dependiente:
La actividad enzimtica.
2.3Variables controladas:
Cantidad de perxido de hidrgeno.
Cantidad de enzima.
Tiempo de experimentacin.
III.

METODOLOGIA:

1. Materiales:
1.1 Material biolgico:

1.2

Material de vidrio:

1.3

Hgado de pollo
Beaker
Pipeta
Probeta
Embudo
Termmetro
Tubo de ensayo

Materiales de seguridad:

Bata de laboratorio
1.4Otros materiales:
Balanza electrnica
Agua destilada
Perxido de hidrogeno (HO)
Batea
Interfaz Pasco para computador
Sensor de presin de gas Pasco
Sensor de temperatura
Computadora hp (laptop)
Software sparkvue
Esptula para laboratorio
Gradilla para tubos de ensayo
Jabn lquido
Plumilla para lavar
Franelita

2. Procedimientos:

2.1OBTENCIN DEL PREPARADO ENZIMTICO (ENZIMA CATALASA):

El docente nos asign 34g de hgado de pollo, que

anteriormente l haba comprado en el mercado.
Trituramos el hgado con ayuda de un mortero y piln,
posteriormente agregamos poco a poco 45 ml de agua
destilada, hasta obtener una masa (macerado de
hgado).
Filtramos el macerado de hgado y recolectamos el
filtrado (preparado enzimtico) en un beaker.
Despus separamos la enzima obtenida en tres tubos
de ensayo, de 10ml cada uno.

2.2ACONDICIONAMIENTO DE LA TEMPERATURA:
Para la obtencin de 10C se coloc agua potable e
hielo (cuatro cubitos) en una batea y se midi la
temperatura con un termmetro hasta que se obtenga
la temperatura deseada.
Para la obtencin de 22,5C se coloc agua potable en
un beaker y para garantizar dicha temperatura se midi
con la ayuda del sensor de temperatura de marca
Pasco.
Para la obtencin de 40C, 55C Y 68C se procedi a
calentar agua potable (550 ml aproximadamente) en
un beaker y de este modo se garantiz dichas
temperaturas midindolas con el mismo sensor
descrito anteriormente.
Para cambiar de una temperatura a otra se utiliz agua
destilada, para limpiar el sensor.
2.3 MONITOREO DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA:
Despus de haber obtenido nuestra enzima separada
en tres tubos de ensayo y nuestro sustrato (perxido de
hidrogeno), 10 ml en cada uno de ellos, con sus
respectivas temperaturas.
Encendimos el interfaz Pasco, lo conectamos con la
laptop, y luego abrimos el software.
Vertimos la enzima y el sustrato en el frasco de boca
ancha, previamente presionamos el tapn del sensor
(de presin de gas) y esperamos a los resultados. Este
procedimiento se realiz tres veces por cada
temperatura.

3. Normas de seguridad:

Cuando ingresamos al laboratorio, el docente nos

asign batas a cada estudiante, para evitar algn
teido en nuestra ropa.
Asimismo todos ingresamos con el cabello recogido.
3

IV.

Adems cada alumno no manipulaba los materiales, sin

la orden del docente
Conjuntamente nadie poda ingerir ningn tipo de
producto.
Se mantuvo el orden y la limpieza para que dicho
experimento se lleve de una manera escrupulosa.

ANALISIS:

TABLA 1: Datos brutos del efecto de la temperatura en la actividad

enzimtica (velocidad de reaccin enzimtica) de la enzima catalasa.
Repeticin de
velocidad reaccin
enzimtica

Temperatura ( 0.1C)
10.0C
0.673
2.114
4.996
2.594

1
2
3
Promedio
Desviacin
Estndar
2.201
Fuente (datos propios)

22.5C
1.198
0.719
0.479
0.799

40.0C
1.326
1.235
1.052
1.204

55.0C
0.092
0.137
0.137
0.122

68.0C
0.274
0.457
0.274
0.335

0.366

0.14

0.026

0.106

TABLA 2: Promedio y desviacin estndar de la temperatura en la velocidad de

la actividad enzimtica.
Temperatura ( 0.1
C)
10.0
22.5
40.0
55.0
68.0

Promedio de la velocidad de la
reaccin enzimtica
2.594
0.799
1.204
0.122
0.335

Desviacin estndar
2.201
0.366
0.14
0.026
0.106

Datos brutos del Efecto de la temperatura en la actividad enzimtica (velocidad de reaccin enzimtica) de la enzima Catalasa
3.000
2.500
2.000
1.500

Promedio de la Velocidad de la Reaccin Enzimatica (%O/seg.)

1.000
0.500
0.000
100.0
0.0

Temperatura (C) 0.1 C

GRAFICO 1:
Segn los resultados (grfica n 1) obtenidos podemos determinar
que la mayor actividad enzimtica se obtuvo a 10C y luego conforme
aumentaba la temperatura la actividad enzimtica disminua, lo cual
no concuerda con la hiptesis planteada y con las bases tericas, lo
que manifiesta que a mayor temperatura la actividad enzimtica
aumenta hasta cierta temperatura ptima despus empieza a
decrecer mientras la temperatura aumenta.
V.

CONCLUSIONES:
No se acepta la hiptesis debido a los errores cometidos en la
experimentacin esto se comprueba con las barras de error de la
grfica 1, lo cual expresa que existe solapamiento, es decir, los
resultados en el experimento realizado son iguales. Asimismo se
rechaza la hiptesis, por lo que los resultados obtenidos no
concuerdan con las bases tericas lo cual est respaldado por la
informacin que se establece en el libro de Biologa Allot, 2015,
cuando un lquido se calienta, sus partculas reciben energa cintica,
esto significa que a temperaturas ms altas, las molculas
enzimticas y de sustrato se mueven rpidamente aumentando las
posibilidades de colisiones, por lo tanto aumenta la actividad
enzimtica. Pero cuando las enzimas se calientan existe la posibilidad
de que sus enlaces se rompan, es decir ocurre la desnaturalizacin.
Si una molcula enzimtica se desnaturaliza, ya no es capaz de
catalizar reacciones, lo que genera una disminucin de la actividad
enzimtica. Por lo tanto, los aumentos de temperatura producen a la
5

vez un incremento y una disminucin de la actividad enzimtica.

(Andrew Allot, 2015, pg. 107)
Los resultados no fueron los esperados debido a los errores humanos
cometidos, tales como, la prdida de tiempo al momento de colocar
el tapn de jebe en el frasco de boca ancha, o tambin a que algunos
estudiantes agregaron bruscamente el sustrato, asimismo por la
falta de calibracin de los equipos.
Dentro de las limitaciones que tuvimos fueron, la falta de materiales
de seguridad, muchos equipos no consiguieron una temperatura
constante, tambin la falta de calibracin de los equipos, asimismo
ningn alumno recibi la capacitacin adecuada para la manipulacin
del software. Sin embargo podemos resaltar las fortalezas que
tuvimos, puesto que, se observ el trabajo en equipo, adems de
haber cumplido con el objetivo propuesto en la prctica, tambin
contamos con los equipos sofisticados y tecnolgicos; de la misma
manera que contamos con una gua de cmo realizar el experimento.
Respecto a las sugerencias de mejora, particularmente sugiero que
para los prximos experimentos se calibren los equipos antes de ser
utilizados, adems de contar con todos los materiales de seguridad,
puesto que, nuestra seguridad es lo primero, por otro lado sugiero
que el laboratorio cuente con un asistente, quien apoye al docente
con todos los materiales.
VI.

BIBLIOGRAFIA:

Solomon Berg Martin. (2013). Biologia. Mexico,D.F: Cengage Learning

Editores.

Gonzlez, M. (25 de Octubre de 2010). Obtenido de La Gua Quimica,

Enzima Catalasa: http://quimica.laguia2000.com/conceptosbasicos/enzima-catalasa

Andrew Allot. (2015). Biologia . Reino Unido:Oxford University Press.

Solomon Berg Martin. (2013). Biologia. Mexico,D.F: Cengage Learning

Editores.

Andrew Allot. (2015). Biologia . Reino Unido: Oxford University Press.