UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE

MXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES
ZARAGOZA

Extraccin e Identificacin de
carbohidratos de reserva en animales y
plantas
/09/2016

Laboratorio de Bioqumica Celular y de Tejidos

EQUIPO 9
Bravo Ruiz Sharon Vernica
Galicia Galindo Miriam
Gonzlez Hernndez Adriana
Santiago Martnez Luis Fernando
Grupo 1452
Ciclo: 2017-1

 Objetivos

Analizar la importancia biolgica de los carbohidratos de reserva.

Extraer polisacridos de muestras diferentes.
Identificar a stos con la prueba de lugol y Benedict, antes y despus de su hidrlisis.

Resultados
Tabla 1

Determinacin de Almidn y Glucgeno en muestras de Arroz e Hgado de Rata con reactivos de Lugol y
Benedict.
Terico

Hidrolisis
Muestra

Antes

Despus

Antes

Despus

Benedict

Benedict

Lugol

Lugol
La

muestra
despus
de la

Almidn
(Arroz)
Se observ
una
coloracin
violeta muy
obscuro en la
muestra.
Prueba:
negativa

La
La muestra se
torn de un
color azul claro.
Prueba:
negativa

muestra
presento una
coloracin azul
rey muy
oscura.
Prueba:
positiva

hidrolisis y reposar
unos minutos presento
una coloracion caf
rojizo.
Prueba: Negativa

El reactivo de
Benedict no
reacciona con el
almidn por falta de
grupos aldehdo
libre.
Slo dar positivo si
se rompe en maltosa
o glucosa por exceso
de calor.
Positivo: rojo
castao

Positivo: Azulnegro

La muestra
presento una
coloracin
azul muy
claro.

Glucgeno
(Higado)

La coloracin
obtenida azul
verdoso
observando
precipitados en
la solucin.
Prueba:
Positiva

1
4

Tomo una
coloracin Caf
rojiza. Pudiendo
observarse un
tono naranja a
la luz
Prueba:
Positivo

Se obtuvo una
coloracin naranja
tenue.
Prueba: Negativo

Positivo: marrn
anaranjado

Positivo: Rojo
Caoba o
castao no
muy intenso

5 6

Imagen: Se muestra la tincin de la papa con

Lugol para la determinacin de Carbohidratos

La papa adquiri coloracin intensa oscura en ciertos
puntos.

Anlisis de resultados

Almidn

En el primer tubo de la tabla 1, se observa la muestra de almidn con reactivo de Benedict sin hidrolizar, dio una coloracin
violeta. El almidn es un polisacrido y tiene muy pocos grupos aldehdo libres por lo que no es un azcar reductor, esto hace
que el cobre presente en el reactivo de Benedict no se reduzca, negativo a presencia de azucares reductores. Para
identificar positivamente la presencia de carbohidratos ste polisacrido debera separarse en monosacridos como la maltosa o
glucosa.
El segundo tubo es una muestra de almidn con reactivo de Benedict ahora hidrolizado. No hay presencia de precipitados y el
color es azul, caracterstico del Cu 2+, no se redujo, por lo que negativo a presencia de azucares reductores pese a la
hidrlisis; despus de la hidrlisis el almidn debi haberse separado en glucosa para darnos una coloracin naranja rojiza.
En el tercer tubo que contiene almidn al agregar dos gotas de yodo (lugol) nos dio una coloracin azul negruzco, esto se debe a
que en esta reaccin el yodo entra a la estructura helicoidal del almidn, es decir, que los tomos de yodo se introduce entre las
espirales provocando la fijacin de yodo en las molculas del almidn (amilosa). La amilosa es de estructura lineal, con enlaces
(1-4), que forman hlices en donde se juntan las molculas de yodo formando un color azul oscuro; mientras que en la
amilopectina es de estructura ramificada, con los enlaces (1-4) (1-6), que forman hlices ms cortas y las molculas de yodo
son incapaces de juntarse presentando un color intermedio entres naranja o amarillo. La coloracin azul-negro nos indica
positivo a presencia de almidn (polisacrido de las plantas).
El cuarto tubo es una muestra de almidn con lugol pero hidrolizado. Despus de la hidrlisis nos dio negativo a presencia
de almidn, cuando se calent el tubo el color desapareci tornando a rojo castao ya que el almidn se modific separando el
espiral lo que hizo que el yodo se liberara, cuando se estaba enfriando las espiras se reorganizaron y empez a volver el color.
o

Glucgeno
3

El primer tubo de la imagen en glucgeno de la Tabla 1, es el testigo negativo de Lugol.

El segundo tubo es testigo negativo de glucgeno para el reactivo de Benedict.
El tercer tubo es una muestra de glucgeno ms dos gotas de yodo lugol sin hidrolizar. La coloracin es caf rojiza, el lugol sirve
para la identificacin de polisacridos como almidones y glucgeno, formando un complejo de inclusin que se caracteriza por
presentar distintos colores segn las ramificaciones que presenta el polisacrido. Con glucgeno el lugol produce un color
castao poco intento. Podemos presenciar ste color en la muestra pero mucho ms oscuro, positivo a presencia de
glucgeno.
El cuarto tubo es de la muestra de glucgeno con reactivo de Benedict sin hidrolizar. Al agregar el reactivo la solucin se torn
azul turbio, pero para ser positivo debera haber un precipitado rojo- naranja (xido cuproso), no hubo precipitado ni cambio de
color, por lo que inferimos es negativo a monosacridos.
El quinto tubo es una muestra de glucgeno ms lugol despus de hidrolizar. La coloracin es naranja tenue, por lo que es una
prueba negativa. Al hidrolizarse, se separ el polisacrido en unidades ms simples, por lo que al modificarse la estructura del
glucgeno se liber el yodo que se haba incluido en sta estructura.
El ltimo tubo, es una muestra de glucgeno ms reactivo de Benedict, despus hidrolizarse. El color es un verdoso rojizo, con un
poco de precipitado naranja poco perceptible. ste pequeo precipitado y la turbidez naranja nos dan una prueba positiva de
presencia de glucosa (monosacrido del glucgeno). Como no nos dio un color uniforme naranja o un precipitado, la
concentracin de glucgeno que se hidroliz es baja.

Conclusiones

En las muestras de glucosa, en la reaccin de Benedict tienen la capacidad de reducir al cobre y formar un precipitado de color
anaranjado o rojizo por lo que podemos afirmar que son azcares reductores, tienen esta capacidad porque los monosacridos
presentan grupos aldehdos o cetonas libres para intercambio de electrones con el cobre, por ende el cobre se reduce de Cu 2+ de
color azul a Cu1+ de color rojo. De sta manera identificamos monosacridos.
El reactivo de Benedict sirve para la identificacin de monosacridos. Para lograr entonces la presencia de monosacridos fue
necesaria la hidrolisis de los polisacridos (glucgeno y almidn), para separarlos en monosacridos. Mediante la reaccin de
Benedict podemos identificar azcares reductores y comprobar que la reduccin que se lleva a cabo es por el efecto del grupo
aldehdo del azcar (CHO) en forma de Cu+ y el nuevo ion se observa a modo de precipitado de color rojo anaranjado o amarillo
ladrillo que corresponde al xido cuproso (Cu 2 O).
Con la reaccin del Lugol podemos identificar de modo general polisacridos, pero de modo especfico entre uno de ellos se
encuentra el almidn que lo identificamos en la prctica.
El color que dan los polisacridos con el lugol, se debe a que el yodo ocupa espacios vacos en las hlices de la cadena de
unidades de glucosa, formando un compuesto de inclusin que altera las propiedades fsicas del polisacrido, especialmente la
4

absorcin lumnica. Esta unin del yodo a la cadena es reversible, y por calentamiento desaparece el color, que al enfriarse
reaparece.
El lugol da con el almidn color azul y con el glucgeno color rojo caoba.