UNIVERSIDADE FEDERAL DO PAMPA

PROGRAMA DE PS GRADUAO EM ENGENHARIAS

EXPERIMENTO 2 MICROSCOPIA TPICA

EDUARDO CESAR PACHLA

JACSON WEBER DE MENEZES

Alegrete
Outubro de 2016

SUMRIO
1.

OBJETIVOS................................................................................................... 3
1.1

Objetivo geral.......................................................................................... 3

1.2

Objetivos especficos............................................................................... 3

2.

RESUMO........................................................................................................ 4

3.

INTRODUO TERICA................................................................................. 5

4.

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL..................................................................8
4.1

Materiais Necessrios.............................................................................. 8

4.2

Procedimento.......................................................................................... 8

5.

RESULTADOS E DISCUSSO........................................................................10

6.

CONCLUSO............................................................................................... 16

1. OBJETIVOS

1.1

Objetivo geral
O objetivo deste experimento determinar uma escala de medida de boa

preciso e o tamanho de cada pixel para os diferentes aumentos de cada objetiva.

1.2

Objetivos especficos

Encontrar uma forma de determinar a periodicidade () da grade de

difrao (distncia entre duas situaes que se repetem, no caso, a
distncia equivalente a uma linha clara e escura).
Figura 1 - Grade de Difrao

Fonte: elaborao prpria

Sabendo a periodicidade, determinar uma escala de medida de tamanho

da imagem gerada pela CCD (utilizando o software da CCD) para cada
objetiva (5x, 10x, 20x, 50x, 80x) Para isso fazer um grfico Tamanho da
tela em milmetros x Aumento da objetiva e encontrar a funo que

melhor se ajusta aos pontos encontrados. Discutir o resultado.

Fazer um grfico Tamanho do pixel em micrometro x Aumento da
objetiva e encontrar a funo que melhor se ajusta aos pontos
encontrados. Discutir o resultado.

Extrapolar para estimar (desprezando limitaes pticas) qual deveria ser

o aumento da objetiva para ver um objeto de 1 m de tamanho, sabendo
que este tamanho ocupa metade da tela gerada pelo software da CCD.

Discutir o resultado.
Fazer um grfico Quantidade de pixel x Aumento da objetiva para uma
distncia equivalente a um perodo da grade de difrao e encontre a

funo que melhor se ajusta aos pontos encontrados. Discutir o resultado.

Representar cinco retngulos (um para cada aumento das objetivas) com
as seguintes informaes: aumento da objetiva (Ex.: 5x), comprimento
horizontal da imagem gerada pela CCD (Ex.: 500 m), tamanho de cada
pixel em m.

2. RESUMO
O experimento relativo a segunda aula prtica da disciplina de Tcnicas de
Caracterizao dos Materiais II tem como objetivo geral determinar uma escala de
medida de boa preciso que relacione o tamanho de um pixel com uma medida
fsica, como por exemplo o micrometro ou o milmetro. Para realizar a tarefa foi
feito o uso de um microscpio ptico, com suporte a CCD e software instalado em
computador, onde foram feitas as medies de quantos pixels compes um ou
mais perodos de uma grade de difrao. Com os valores dos perodos da grade
de difrao medidos atravs de um paqumetro foi feita a relao inicial entre os
pixels e os micrometros. Por fim, atravs de regras de trs simples os dados
iniciais foram sendo desenvolvidos at chegarmos a uma relao direta entre um
pixel e n micrometros para cada objetiva. O experimento deixa como resultado
uma srie de valores para cinco objetivas que podero ser usadas para fazer
medidas de diversas amostras, inicialmente realizadas de forma digital (pixels) e
posteriormente transformadas para medidas fsicas (micrometros).

3. INTRODUO TERICA
O microscpio ptico um instrumento que utiliza luz e um sistema de
lentes para ampliar estruturas micromtricas, impossveis de visualizar a olho nu.
constitudo por uma parte mecnica, que suporta e permite controlar e por uma
parte ptica que amplia as imagens. Em suas aplicaes constam:

Morfologia da amostra e medida de dimenses;

Medidas eltricas com ponteiras de prova em estruturas de

pequenas dimenses;
Controles de processos;
Micro soldas;

Conforme a Figura 2, o microscpio ptico constitudo em sua estrutura

mecnica por:
Figura 2 - Estrutura mecnica do microscpio

A base ou p fornece
suporte ao equipamento;
A coluna ou brao d o
apoio s estruturas;
O tubo a pea de
ligao entre a ocular e o
revolver;
O revlver a pea
giratria que contm as
lentes objetivas;
A platina suporta as
amostras;
O
parafuso
macromtrico
(de
passo largo) para o
movimento de grande
amplitude;
O
parafuso
micromtrico (de passo pequeno) destinado a focar o material.

A Figura 3 ilustra a parte ptica de um microscpio.

Figura 3 - Parte ptica de um microscpio

condensador concentra os raios

luminosos. Ele possui um diafragma de dimetro
modificvel, proporciona uma maior ou menor
intensidade luminosa;
As lentes objetivas, prximas do
objeto, projetam a imagem ampliada do objeto em
direo a ocular;
A lente ocular funciona como
uma lupa, pois amplia a imagem fornecida pela
objetiva.
O funcionamento de um microscpio ptico se

pela difrao da luz, podendo a mesma ser transmitida

ou refletida, sendo que a melhor opo depende da amostra que ser estudada,
ou seja, em caso de amostra transparente a melhor opo a luz transmitida, j
que e luz passa pela amostra e pode chegar aos olhos. Para amostras opacas,
como metais, a melhor opo a luz refletida, j que em caso de utilizao de luz
transmitida, no ser possvel enxergar nada, pois no chegar luz at as lentes
oculares.
As objetivas, lentes responsveis por grande parte do aumento,
apresentam diversas informaes, as quais esto escritas na parte lateral da
objetiva. Algumas informaes so: aumento linear, abertura numrica, correes
pticas, comprimento do tubo, distncia de trabalho, lmina de cobertura, tipo de
meio para observao, etc.
Para o uso prtico de um microscpio importante entender o manuseio do
mesmo de forma menos terica. Portanto o primeiro passo saber que a platina
est um uma posio que no fixa, e pode ser movida em trs direes, as quais
seriam correspondentes aos eixos x, y e z de um grfico em trs dimenses. Este
procedimento feito para mover a amostra e ver diferentes partes da mesmo, j
que a objetiva, dependendo do tamanho da amostra, foca apenas parte dela
(seriam estas as direes x e z). Para colocar a amostra no foco da objetiva,

tornando a imagem ntida, preciso calibras a distncia entre a platina e a lente

da objetiva, o que seria correspondente ao eixo y de um grfico convencional (o
foco da objetiva no depende do usurio, mas sim da prpria lente). Outro ponto
importante para o uso do equipamento o uso do diafragma, localizado no
condensador, o qual altera a quantidade de luz que chegar as lentes oculares, e
dependendo da amostra e do usurio pode possuir configuraes diferentes.
importante tambm fazer uso do revlver para trocar a objetiva, evitando assim
tocar diretamente na lente e danificar o equipamento. As lentes oculares so
calibradas de acordo com o usurio e suas deficincias visuais. Para fazer este
ajuste, primeiramente calibramos uma lente ocular, de acordo com a viso do
usurio, e posterior apenas giramos a outra lente para a mesma posio da j
calibrada, assim fazendo o processo de maneira mais rpida e eficiente.
Os microscpios podem ter, alm de duas lentes oculares, uma CCD, que
uma terceira lente, onde instalada uma cmera que transmite a imagem da
amostra para um computador.
Outro aspecto importante do microscpio ptico, em caso do mesmo
possuir alternativa de uso de luz transmitida ou refletida, fazer o uso das duas,
dependendo da amostra, conforme j explicado. Uma dica interessante usar a
opo da luz refletida para encontrar o foco da objetiva mais rapidamente, desta
forma o menor ponto de luz encontrado, ser onde est o foco da objetiva. Caso a
amostra seja transparente, basta fazer a alternncia para a luz transmitida.
Esta introduo terica no teve foco na teoria por trs do funcionamento
do microscpio ptico, o que interessante saber e importante para o melhor uso
do mesmo, o que agiliza os estudos e d resultados mais qualificados. No entanto,
como objetivo geral do experimento determinar uma escala de medida entre
tamanho de pixel e micrometro, foi descrito de forma clara como fazer o uso do
equipamento.
4. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

4.1

Materiais Necessrios

4.2

Microscpio ptico;
Computador com software do microscpio;
CCD;
Amostra com grade de difrao;
Paqumetro.

Procedimento
Usando um paqumetro, o primeiro passo do experimento foi realizar a

medio das dimenses da grade de difrao, sabendo suas medidas, o segundo

passo foi contar quantas linhas pretas haviam no total. Com o nmero de linhas
pretas, basta reduzir uma linha e temos o nmero de linhas brancas, isso porque a
contagem comeou e terminou em uma linha preta. Tendo em mos o nmero de
linhas pretas e de linhas brancas, para saber o tamanho de uma linha basta fazer
a diviso do tamanho total da grade pelo nmero total de faixas (linhas brancas e
linhas pretas). Para descobrir a periodicidade soma-se a espessura de duas linhas
(uma branca e uma preta). Esta etapa conclui o primeiro objetivo especfico.
Para o segundo objetivo especfico, necessrio saber a periodicidade da
grade, com o valor j registrado atravs do primeiro procedimento, basta focalizar
a grade com cada objetiva (5x, 10x, 20x, 50x, 80x) e registrar a imagem atravs da
CCD. Com a imagem o software do microscpio permite que faamos a medio
de qualquer parte da tela em pixels. A partir da basta relacionar a medida de um
perodo em pixels com a medida em micrometro (feita no procedimento 1). Findase, portanto, o segundo objetivo especfico.
O terceiro objetivo especfico fazer um grfico relacionando tamanho do
pixel em micrometros com o aumento da objetiva para encontrar a funo que
melhor se ajusta aos pontos encontrados. Para isto basta pegar a escala de cada
objetiva (j calculada no segundo objetivo) e criar um grfico de disperso que
relacione tais escalar com a ampliao da objetiva.
Utilizando a equao gerada a partir da linha de tendncia do grfico
Tamanho da tela em micrmetros x Aumento da Objetiva podemos facilmente
calcular qual seria o aumento necessrio para ver um objeto de 1 m de tamanho
sabendo que este tamanho ocupa metade da tela gerada pelo software da CCD.

O quinto objetivo fazer a plotagem de um grfico relacionando quantidade

de pixels com aumento da objetiva para uma distncia equivalente a um perodo
da grade de difrao, posteriormente encontrando a funo que se ajusta aos
pontos encontrados. Para este passo basta pegas os dados obtidos no primeiro
objetivo (dimenso de um perodo em pixels) e relacionar com o aumento da
objetiva.
O ltimo objetivo deste relatrio representar cinco retngulos, sendo um
para cada aumento da objetiva, com o aumento da objetiva, o comprimento
horizontal da imagem gerada pela CCD e o tamanho de cada pixel em m.

5. RESULTADOS E DISCUSSO
Conforme apresentado na Tabela 1 a grade de difrao apresenta formado
quadrado com dimenses de 25,4 x 25,4 mm, ou de 1,00 x 1,00 polegada. A
contagem do nmero de faixas foi feita no microscpio ptico, e o total de faixas
pretas contadas foram 251, como j explicado na metodologia o nmero de faixas
brancas igual ao nmero de faixas pretas menos um. O tamanho de cada faixa
ficou estipulado em 0,0507 mm ou 50,70 m. A periodicidade a soma do
tamanho de duas faixas, 0,1014 mm ou 1014 m.
Tabela 1 - Dados da grade de difrao
Dimenses da
grade
Nmero de faixas
pretas
Nmero de faixas
brancas
Nmero total de
faixas
Tamanho de uma
faixa
Periodicidade

Fonte: elaborao prpria

25,4 x 25,4 mm
251
250
501
0,0507 mm
0,1014 mm

As Tabelas 2, 3, 4, 5 e 6 apresentam os dados de diversos objetivos

especficos. Todos os dados esto relacionados entre si, sendo que a primeira
relao entre micrometro e pixels que consta nas Tabelas a base para os
clculos das outras relaes. Atravs da medio de x perodos (j que a
quantidade varia de objetiva para objetiva, pois quanto maior a ampliao menos
perodos cabem na tela) utilizando o software do microscpio obtemos a medida
deste x em pixels. Como j foi estipulado na Tabela 1 o tamanho de um perodo,
podemos simplesmente relacionar a medida feita no software com a medida que
consta na Tabela 1.
Para o clculo das demais relaes foram feitas regras de trs simples para
cada caso. Desta forma temos as medidas que relacionam o tamanho da tela
(sempre 1270 pixels) com uma medida fsica, no caso micrometro. A determinao
da escala, tambm feita utilizando regra de trs simples, de quanto vale um pixel
em micrometro o objetivo geral do experimento, e a determinao que seguir
como uma espcie de legenda para futuros experimentos utilizando o
equipamento. O tamanho de um perodo nada mais nada menos que a relao
entre micrometros e pixels utilizando como base a medida fsica de um perodo
(101,40 m).
Tabela 2 - Dados da objetiva com aumento de 5x
Objetiva com ampliao
Tamanho de 10
1014
um
perodos
Tamanho da tela
1137,61 um
Escala
0,90
um
Tamanho de um
101,40
um
perodo

de 5x
1132

1270
1
113.2

pixels
pixels
pixel
pixels

Fonte: elaborao prpria

Tabela 3 - Dados da objetiva com aumento de 10x
Objetiva com ampliao de 10x
Tamanho de 4
405,6
um
889
perodos
Tamanho da tela
579,43 um
1270

pixels
pixels

Escala
Tamanho de um
perodo

0,46
101,40

um
um

1
222.25

pixel
pixels

Fonte: elaborao prpria

Tabela 4 - Dados da objetiva com aumento de 20x
Objetiva com ampliao de 20x
Tamanho de 2
202,8
um 904
perodos
Tamanho da tela
284,91
um 1270
Escala
0,22
um
1
Tamanho de um
101,40
um 452
perodo

pixels
pixels
pixel
pixels

Fonte: elaborao prpria

Tabela 5 - Dados da objetiva com aumento de 50x
Objetiva com ampliao de 50x
Tamanho de 1
101,4
um 1130
perodos
Tamanho da tela
113,96
um 1270
Escala
0,09
um
1
Tamanho de um
101,40
um 1130
perodo

pixels
pixels
pixel
pixels

Fonte: elaborao prpria

Tabela 6 - Dados da objetiva com aumento de 80x
Objetiva com ampliao de 80x
Tamanho de 0,5
50,7
um 872
perodos
Tamanho da tela
73,84
um 1270
Escala
0,06
um
1
Tamanho de um
101,40
um 1744
perodo

pixels
pixels
pixel
pixels

Fonte: elaborao prpria

As plotagens dos grficos foram feitas a partir das relaes obtidas nas
Tabelas de 2 6. Utilizando tais dados foram feitas as relaes entre Aumento da
objetiva x Tamanho da tela em micrometro, para o Grfico 1, Tamanho do pixel
em micrometros x Aumento da objetiva para o Grfico 2 e Quantidade de pixels
em um perodo x Aumento da objetiva para o Grfico 3.

Os grficos foram plotados no software Microsoft Excel, onde foi traada

uma linha de tendncia, a equao para esta linha e o coeficiente de
determinao para esta equao.
Para o Grfico 1 a melhor curva que se adequou aos pontos foi de funo
exponencial, obtendo um coeficiente de determinao de 99,98%. Pelo grfico
podemos observar que quanto maior for o aumento da tela em micrometros,
menor ser o aumento da objetiva. Isto nada mais que a traduo do motivo de
para a objetiva com aumento de cinco vezes conseguirmos fazer a leitura de dez
perodos e com a objetiva de oitenta vezes conseguirmos fazer a leitura de apenas
meio perodo. Ou seja, quanto maior o aumento da objetiva, menor ser o
tamanho da viso de parte da amostra.
Grfico 1 - Aumento da Objetiva x Tamanho da Tela em Micrometro
1200.00
f(x) = 5627.16 x^-0.99
R = 1

1000.00
800.00

Tamanho da tela (um)

600.00

Objetiva x Tamanho da
tela em microns

400.00

Power (Objetiva x
Tamanho da tela em
microns)

200.00
0.00

50 100

Aumento da Objetiva (X)

Fonte: elaborao prpria

A partir da equao gerada no Grfico 1 podemos determinar como y
sendo o tamanho da tela e x o aumento da objetiva. A ideia termos uma tela
com 2 m de tamanho, portanto isolando o x e colocando valor de y = 2 m
chegamos a uma objetiva de aumento equivalente a 2975,62. Com esta objetiva

poderemos ver um objeto de 1 m de tamanho ocupando metade da tela gerada

pelo software da CCD.
Grfico 2 - Aumento da Objetiva x Tamanho do Pixel em Micrometros
1.00
0.90
0.80

f(x) = 4.43 x^-0.99

R = 1

0.70
0.60

Comprimento de um pixel (um)

0.50
0.40

Objetiva x Micron

0.30

Power (Objetiva x Micron)

0.20
0.10
0.00

50
0 100

Aumento da Objetiva (X)

Fonte: elaborao prpria

O Grfico 2, relao entre o aumento da objetiva e o tamanho do pixel em
micrometro passa a mesma informao obtida no Grfico 1.
O Grfico 3, ao contrrio dos dois primeiros teve como curva adequada
uma funo linear, onde o aumento da objetiva diretamente proporcional ao
nmero de pixels em um perodo. Esta informao bastante esclarecedora, no
sentido de que quanto maior for o aumento maior ser a resoluo da imagem,
pois mais pixels teremos em uma faixa de distncia fsica (neste trabalho foi
utilizado micrometro).

Grfico 3 - Aumento da Objetiva x Quantidade de Pixels em um Perodo

2000
1800
1600

f(x) = 21.86x + 10.76

R = 1

1400
1200

Pixels em um Perodo 1000

Objetiva x Periodo

800

Linear (Objetiva x
Periodo)

600
400
200
0

0 20 40 60 80 100

Aumento da Objetiva (X)

Fonte: elaborao prpria

A Figura 4 conclui o ltimo objetivo especfico proposto para o experimento.
Tal imagem pode ser colocada no ambiente onde o equipamento est instalado a
fim de facilitar o uso para futuros experimento realizados no mesmo. Na imagem
constam cinco retngulos com informaes bsicas sobre cada objetiva. A
primeira informao apresenta o aumento da objetiva, a segunda informao o
tamanho da tela em micrometros que ser visvel na tela do computador ou da
televiso utilizada. Vale lembrar que a tela sempre ter a mesma quantidade de
pixels no eixo horizontal, o qual fiado em 1270 pelo software. A ltima
informao que consta em cada retngulo a escala de um pixel em micrometro.
Esta escala pode determinar a dimenso de uma clula em caso da amostra ser
uma gotcula de sangue por exemplo, a dimenso de um poro no caso da amostra
ser uma placa de concreto ou a dimenso de uma microfissura, no caso da
amostra ser algum metal.

Figura 4 - Retngulos com aumento de tela e escala para cada objetiva

Fonte: elaborao prpria

6. CONCLUSO
Com a meta de ao final do experimento ter uma escala que relacione pixel e
micrometro para cada objetiva precisamos passar por vrios desafios e caminhos
at poder calcular tal relao. Desta forma fizemos uso completo de um
microscpio ptico e aprendemos muitas funes bsicas do mesmo, tanto como
manuseio fsico do equipamento como seu funcionamento terico.
Chegamos s escalas das objetivas instaladas no microscpio e ainda
criamos uma equao que permite estimar uma escala para objetiva com
ampliao diferente das demais. Feito isso para finalizar o experimento como
forma de resumir os resultados mais importantes foram feitos retngulos

apresentando o tamanho da tela da CCD para cada objetiva em micrometro e a

escala de cada objetiva em uma nica figura.
O experimento mostrou-se vlido para a aprendizagem sobre o uso do
equipamento e seu funcionamento bem como conseguiu concluir todos os
objetivos requeridos inicialmente.