ROTAVIRUS

CARACTERSTICAS
Los rotavirus pertenecen a la familia Reoviridae. Son virus sin
envoltura, icosadricos, de 70 nm de dimetro y presentan una
cpside proteica de tres capas que rodea a un genoma de 11
fragmentos de RNA de doble cadena. Su forma semeja a la de una
rueda de carreta. (Lozano, 2016)
Los rotavirus pertenecen al gnero rotavirus. Estos virus, que se
replican en el intestino, tienen un genoma RNA de doble cadena con
11 segmentos que codifican para cada una de las protenas virales
(VP). Las principales propiedades antignicas de los rotavirus (grupo,
subgrupo y serotipo) estn determinadas por estas protenas que
pueden clasificarse en estructurales (VP1 a 4, VP6 y VP7) o no
estructurales (NSP1 a 5). El genoma est contenido en el ncleo junto
a tres protenas VP1, VP2 y VP3. Rodeando este ncleo existe una
cpside interna compuesta por la protena estructural principal VP6
que determina la clasificacin antignica del virus en siete grupos (A
al G). Los virus del grupo A causan la mayora de las diarreas por
rotavirus a nivel mundial. La envoltura o cpside exterior consiste en
dos VP, VP4 y VP7, que forman capsmeros que irradian desde la
cpsula interna y tienen el principal papel desde el punto de vista 46
Precop SCP Enfermedad por rotavirus inmunolgico, puesto que
estimulan anticuerpos neutralizantes y pueden estar involucrados en
la inmunidad protectora y, por lo tanto, ser objetivos importantes
para la elaboracin de vacunas. (Figura 1) Tanto VP4 como VP7
participan en la determinacin de los serotipos, dependiendo de si
son glicosiladas o si son sensibles a la accin de proteasas. Los
serotipos VP7 especficos se denominan tipos G (glicosilados) y los
serotipos VP4 especficos se denominan tipos P (susceptible de
separacin por accin de las proteasas). Existen por lo menos 20
serotipos P y 14 serotipos G. De estos, 10 tipos G y 11 tipos P han
sido hallados en los rotavirus humanos aislados. Dentro del grupo A
las que predominan alrededor del mundo son las cepas de los
serotipos G1 al 4, G9 y P1. (Figura 2). Existen tambin genotipos P
dependiendo de su similitud en secuencia de cidos nucleicos. Los
genotipos P son denominados por un nmero en parntesis
cuadrados. Los genotipos P[4] y P[8] corresponden a dos subtipos de

serotipo P (P1A y P1B). El genoma segmentado permite la

recombinacin cuando dos tipos diferentes de rotavirus infectan
simultneamente la misma clula, similar al cambio gentico
observado en los virus de la influenza. A pesar de que este proceso
podra, tericamente, producir numerosas combinaciones G-P, parece
haber restricciones significativas para esta recombinacin y slo
pocas combinaciones de serotipo predominan, asociadas con
genotipos P: P[8] y P[4]. Las cepas con serotipos G1, G3, G4 y G9 se
asocian con genotipos P[8] y los serotipos G2, se asocian ms
frecuentemente con el genotipo P[4]. En lugares donde predomina el
clima templado, los virus del tipo G1P[8], G3P[8], G2P[4] y G4P[8]
constituyen la mayora de las cepas cocirculantes. Sin embargo, la
relativa prevalencia de algunos serotipos vara geogr- ficamente y
muchas veces de un ao a otro. Adems de los cuatro serotipos
predominantes del grupo A son frecuentes las infecciones por
serotipos inusuales, es el caso del serotipo G9 que se ha reportado en
varios pases, tanto en vas de desarrollo como en pases
industrializados, lo que le permite ser catalogado como el quinto
serotipo en importancia, y obliga a su cubrimiento por una vacuna
que pretenda una proteccin global contra la enfermedad. (Po Lpez
L, MD. Diana Carolina Cceres, MD. Eduardo Lpez Medina, MD. )
FIGURA 1 . ROTAVIRUS

FUENTE: Adaptado de Cunlife et. al. 2002

FIGURA 2: CLASIFICACION DEL ROTAVIRUS

FUENTE: Modificado de Parashat et. al Emera Infect 1998

METODOS DE DETECCION
Las tcnicas de identificaci6n de rotavirus actualmente disponibles se basan
en alguno de los siguientes mtodos: observaci6n directa (ME), deteccin de
antgenos (inmunoensayos como ELISA y aglutinacin partculas) o
detecci6n de ARN (electroforesis en gel, hibridacin, amplificaci6n gentica).
Estas tcnicas requieren que el virus est presente en una concentracin de
104 - 105 partculas virales por gramo de deposicin en el caso de ME,
ELISA, aglutinacin de latex2 - 3 - l 4 " 1 6 o de 107 a 10" partculas virales
por gramo en el caso de electroforesis de ARN.
Se ha establecido que durante la infeccin aguda el RV es excretado en una
concentracin de al menos 107 partculas virales por gramo de deposici6n9
- 15> 17 , lo que tericamente predice que la electroforesis de ARN podra
tener una menor sensibilidad en algunas circunstancias. En el 150 Volumen
66 Numero 3 Detection de rotavirus 151 caso de los inmunoensayos las
variaciones observadas en sensibilidad y especificidad se relacionan
aparentemente con factores tales como manejo de la muestra (transporte,
conservacin, tiempo entre coleccin y procesamiento), calidad de los

anticuerpos dc captura, presencia en la muestra dc enzimas que degradan

protenas o cidos nucleicos. Estos factores hacen aconsejable que se
evale la eficiencia diagnostica de los diversos mtodos en condiciones
semejantes a las circunstancias en que se
presentan los pacientes
infectados11' l4 18" 20 . En la presente investigacin se comparan los
resultados obtenidos por cuatro mtodos diagnsticos disponibles en Chile,
a saber: ELISA, aglutinacin de ltex, ELISA acoplado a aglutinacin de
partculas (RV-Test Pack) y electroforesis de ARN (Rotagel ). (Rivera M. et.
al, 1995)
Actualmente existen diversos mtodos en el mercado que pueden utilizarse
para el diagnstico de rotavirus, las cuales pueden realizarse directamente
a partir de la materia fecal, fundamentalmente buscando antgenos
especficos del grupo A (VP6).54 De tal forma que la tcnica de eleccin
depender del equipo y reactivos con que se disponga cada laboratorio de
anlisis clnicos.
Varios mtodos para la identificacin del rotavirus o antgeno del mismo en
heces han sido desarrollados en la actualidad. Los mtodos ms usados son:
microscopia electrnica, inmunoensayos enzimticos como ELISA
(Inmunoensayo ligado a la absorcin de enzimas), y aglutinacin en ltex,
en ciertas ocasiones se llega a utilizar la tcnica de reaccin en cadena de
la polimerasa (PCR).

1.MICROSCOPA ELECTRNICA
El descubrimiento de rotavirus mediante inmunoelectromicroscopia permiti
caracterizar la morfologa del virus y, consecuentemente utilizar la
microscopia electrnica.58 Mediante el microscopio electrnico es posible
observar la morfologa de los viriones presentes en muestras clnicas. La
limitacin del mtodo adems del costo del microscopio.59 Es necesaria una
alta concentracin de viriones (aproximadamente 109 partculas virales/mL.
dependiendo del virus) presentes en la muestra, por ello es poco sensible.59
47 Esto hace que sea una tcnica poco utilizada, ms an con el desarrollo
de tcnicas alternativas de utilidad similar.59 El microscopio electrnico nos
permite obtener resultados positivos rpidos de muestras de materias
fecales de pacientes con diarrea, ya que tanto los rotavirus como los
adenovirus, coronavirus y calcivirus pueden ser visualizados e identificados
como causantes de enfermedad.59 Tambin existen otras muestras en las
que puede ser de gran utilidad la microscopia electrnica ellas son: lquido
vesicular, biopsia de tejidos, verrugas, orina o suero es posible obtener
resultados positivos, mediante coloracin negativa.59 Si la concentracin de
virus en la muestra clnica es baja, y por tanto no visible directamente por
microscopio electrnico, se pueden utilizar tcnicas que aumenten la
visualizacin, como lo es la inmunoelectromicroscopia, que consiste en el

agregado de anticuerpos especficos antivirales y la formacin de agregados

de partculas que son ms fcilmente visibles que las partculas solas.
2. INMUNOCROMATOGRAFA
Son inmunoensayos en fase solida donde se fijan los anticuerpos especficos
para el virus en la superficie de una matriz, tubo o microplaca.60 Se emplea
como sistema de amplificacin del conjugado, el oro coloidal para aumentar
la sensibilidad del mtodo. Posteriormente se pone en presencia del suero o
muestra que contiene el antgeno que se quiere demostrar; una vez que
ocurre la reaccin antgeno-anticuerpo la cual es observada por la
acumulacin de oro coloidal del conjugado en el papel de nitrocelulosa), se
hace 48 un lavado y se agrega un anticuerpo marcado de captura, que
depende de la marcacin del anticuerpo observar figura 11.60 Los ms
conocidos son: ELISA (Inmunoensayo ligado a la absorcin de enzimas), y la
aglutinacin en ltex dependiendo del trazador que se utilice para
evidenciar la reaccin.

FIGURA 3: TECNICA DE INMUNOCROMATOGRAFA

FUENTE: Tesis mexicana 22187

3. ELISA (INMUNOENSAYO LIGADO A LA ABSORCIN DE
ENZIMAS)
El mtodo de Elisa es capaz de detectar 106 partculas virales por gramo de
heces, lo cual lo hace ms sensible que el microscopio electrnico.60 El uso

de anticuerpos monoclonales incrementa an ms la sensibilidad y

especificidad de esta prueba.60 Existen una gran cantidad de mtodos de
ELISA comerciales los cuales varan en cuanto a sensibilidad y especificidad
dependiendo de la casa comercial y si la prueba est hecha con anticuerpos
monoclonales, policlonales o ambos.60 Los ELISA comerciales detectan
nicamente rotavirus del grupo A (utilizan anticuerpos anti-VP6). Los cuales
tienen como finalidad el diagnstico de la infeccin por rotavirus mediante
el uso de anticuerpos monoclonales que detectan la existencia del antgeno
vrico VP6 (cpside interna del virin) en muestras de heces fecales.60 Los
cuales generan complejos inmunes que pueden ser visibles incluso
mediante microscopia electrnica. Con esta tcnica se es posible procesar
una gran cantidad de muestras clnicas de forma rpida y sencilla.60 No
obstante puede haber resultados falsos positivos, por lo que se recomienda
que aquellas muestras positivas obtenidas fuera del periodo epidmico se
repitan nuevamente, la figura 12 muestra la placa donde se realiza el
estudio para la deteccin de RV. Las ventajas de esta prueba permiten
obtener resultados de una forma rpida y fcil, tiene poca complejidad
tcnica, es de fcil manipulacin, emplea pocos reactivos y proporciona una
informacin diagnstica rpida, debido a que los resultados se obtienen en
un periodo de 30 minutos, lo cual resulta muy conveniente para el
tratamiento de esta enfermedad.

FIGURA 4: ELISA. DETECCIN DE ANTGENO VIRAL EN HECES

PARA ROTAVIRUS

FUENTE: Tesis mexicana 22187

4. AGLUTINACIN DE LTEX
Esta tcnica se usa comnmente para la demostracin de antgenos de
rotavirus en materias fecales.63 Las partculas de ltex son esferas de
poliestireno que se unen fcilmente al fragmento cristalizable (Fc) de
molculas de inmunoglobulina G (IgG) o inmunoglobulina M (IgM), esta

ltima es mucho ms eficiente en aglutinar partculas naturales.63 Los

fragmentos de unin del anticuerpo (FAb) quedan expuestos y son capaces
de unirse al antgeno que se encuentra en la muestra.63 Cuando los
antgenos tienen varios eptopes (o estructuras antignicas repetitivas), los
anticuerpos multivalentes acoplados a mltiples partculas de ltex se unen
al antgeno y se produce un entramado de las partculas de ltex que dan
como resultado una aglutinacin visible.63 Esta es fcil de realizar, requiere
slo unos minutos y no necesita equipo, la imagen 13 muestra donde el
resultado se puede leer a simple vista. Sin embargo, ofrece como
desventaja la presencia de reacciones cruzadas sobre todo con otros
antgenos en la muestra y tambin ocurren interferencias por el fenmeno
de prozona, en el que un exceso de anticuerpos no permite la formacin del
entramado.63 Esta tcnica se usa comnmente para la demostracin de
antgenos de rotavirus en materias fecales.

FIGURA 5: AGLUTINACIN DE LTEX

FUENTE: Tesis mexicana 22187

5. REACCIN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)

Conocida como PCR (siglas en ingls de polymerase chain reaction)
mediante esta tcnica se pueden encontrar cantidades mnimas del cido
nucledo del rotavirus en muestras de heces fecales gracias a la
amplificacin selectiva y repetitiva de una secuencia de nucletidos de un
microorganismo determinado que hace un proceso de sntesis de ADN. En la

Actualidad se han desarrollado tcnicas de PCR para muchos de los virus

productores de gastroenteritis, aunque no se utilizan de forma rutinaria.
Estas tcnicas son ms sensibles que los mtodos de inmunoensayo, se
suelen utilizar para confirmar los resultados de otras tcnicas y son tambin
tiles para el estudio de muestras como LCR o suero y muestras
ambientales, como ocurre en el caso de rotavirus con las tcnicas de
transcripcin inversa y reaccin en cadena de la polimerasa (RT-PCR).
Vemos en la figura 14 los tres pasos fundamentales de la PCR:
a) La desnaturalizacin del ADN en la muestra, lo que se logra al someterlo
a altas temperaturas (95 C) para lograr la separacin de las cadenas.
b) La hibridizacin de los cebadores (a 55 C) que son unos fragmentos
cortos de ADN complementarios a los extremos 5' y 3' de las secuencias por
amplificar y a partir de los cuales se inicia la sntesis.
c) La extensin de estos cebadores por la enzima ADN polimerasa (a 72 C)
termoestable (polimerasa extrada de la bacteria Thermus aquaticus) que
produce dos bandas de ADN que son idnticas a la banda blanco original.

FIGURA 6: PCR

FUENTE: Tesis mexicana 22187

ACCIONES O MEDIDAS QUE SE DEBEN TOMAR FRENTE AL

PELIGRO DEL ROTAVIRUS:
Tomar medidas de cuidado e higiene ambiental que incluyan todos los
utensilios
y
tambin
los
alimentos:

- Lavarse las manos con agua y jabn, en especial despus de ir al bao

y/o cambiar paales, y antes de comer.
- Consumir agua segura. Si no hay seguridad de que el agua sea potable,
es preciso hervirla o potabilizarla con dos gotas de lavandina por cada litro
de agua.
- Mantener la lactancia materna durante el primer ao de vida de los
bebs, ya que disminuye el riesgo de contagio de esta infeccin en un 50%.
Frente a cuadros de gastroenteritis (diarrea y/o vmitos) se
recomienda aumentar la frecuencia de la lactancia (leche materna) en el
caso de los bebs, y brindar permanentemente agua a los nios ms
grandes, a fin de evitar la deshidratacin, antes y despus de realizar la
consulta con el mdico.
Tambin ofrecerles una alimentacin adicional y adecuada y/o recibir ms
leche materna al da, durante dos semanas como mnimo. Esto le ayudar a
recuperar al nio la energa perdida como consecuencia de la afeccin.
Asimismo, se recomienda que los nios con diarrea no asistan a la guardera
o jardn maternal, a fin de evitar el contagio hacia otros nios.
Actualmente, existen dos vacunas para la prevencin de esta enfermedad.
En los casos en que se recomiende su aplicacin, el esquema de vacunacin
consiste en la administracin de 2 3 dosis segn la marca comercial a
partir de los 2 meses de vida. (Inmunoprevenibles., 2016)

PREVENCIN
Medidas generales de prevencin
Una infeccin por rotavirus no se puede prevenir solo con medidas
higinicas porque el virus tiene una elevada capacidad infectante y es
muy resistente, tanto a jabones como a productos desinfectantes.
Aun as, se recomienda seguir una serie de medidas higinicas, sobre
todo, si se entra en contacto con personas con una gastroenteritis por
rotavirus.
Lo ideal es evitar el contacto directo con personas infectadas con el
virus rotavirus. En el caso de que el paciente sea un hijo, esto no es
posible. Por este motivo, es importante extremar las medidas
higinicas. Esto incluye lavarse las manos despus del contacto con el
paciente y desinfectar utensilios compartidos como la vajilla, los
pomos de la puerta, los mandos de la televisin o el servicio.

Es conveniente que un nio infectado por rotavirus no acuda al

colegio hasta que se haya recuperado para evitar la transmisin del
virus a compaeros y amigos del nio.
Una infeccin por rotavirus es la primera causa de hospitalizacin por
diarrea en los nios por lo que tambin aqu hay que extremar las
precauciones para no infectar al personal sanitario.
Vacuna para el rotavirus
Actualmente existen en el mercado dos vacunas para prevenir la
infeccin por rotavirus. Estas vacunas estn indicadas para lactantes.
Se administran por va oral y, dependiendo de la marca comercial
suelen ser necesarias 2 o 3 dosis. La prevencin frente al rotavirus
suele ser completa pasadas las 6 semanas de la toma de la dosis. Por
este motivo, es importante vacunar al beb antes de que cumpla los
6 meses porque es cuando el nio es ms propenso a contraer una
gastroenteritis por rotavirus.
La vacuna frente al rotavirus est indicada, sobre todo, para aquellos
nios que acuden a la guardera antes de cumplir los dos aos y que
estn en contacto directo con otros nios. Este es uno de los motivos
por los que es necesario terminar con la pauta de vacunacin antes
de que el nio cumpla 12 meses. Las vacunas para el rotavirus se
pueden administrar con el resto de las vacunas del calendario de
vacunacin.
La mayora de los bebs que reciben la vacuna no presentan diarrea
por rotavirus y, casi todos ellos, quedan protegidos de las diarreas por
rotavirus severas.
Se recomiendan las dosis a las edades siguientes:

Primera dosis: 2 meses

Segunda dosis: 4 meses

Tercera dosis: 6 meses (de ser necesaria segn la marca de la

vacuna utilizada)

A da de hoy la vacuna frente al rotavirus no est incluida en el

calendario de vacunacin espaol.

Ante la vacunacin, debemos estar pendiente de varias posibles

complicaciones. Estas son las siguientes:

Durante la primera semana tras la toma de la primera dosis de

la vacuna, hay que presetar atencin por si el beb presenta
episodios de dolor abdominal con llanto marcado, vmitos o se
observa la presencia de sangre en las heces. Adems, el beb
podra mostrarse dbil o muy irritable.

Tambin hay que estar atento ante posibles sntomas inusuales

como una reaccin alrgica severa o fiebre alta. En cualquier
caso de duda o alarma, es importante consultar al mdico.
(Martin, 2014)

BIBLIOGRAFA
Inmunoprevenibles., P. -P. (2016). Ministerio de la salud Presidencia de la
Nacion . Recuperado el 23 de setiembre de 2016, de
http://www.onmeda.es/enfermedades/infeccion_rotavirus.html
Lozano, H. G. (16 de junio de 2016). Universidad Nacional Autonoma de
Mexico. Recuperado el 23 de setiembre de 2016, de
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/inf-tractogastro.html
Martin, C. (23 de julio de 2014). Onmeda.es. Recuperado el 23 de setiembre
de
2016,
de
http://www.onmeda.es/enfermedades/infeccion_rotavirus.html
Po Lpez L, MD. Diana Carolina Cceres, MD. Eduardo Lpez Medina, MD. .
(s.f.). Enfermeda por Rotavirus. Recuperado el 23 de setiembre de
2016,
de
https://scp.com.co/precopold/precop_files/modulo_6_vin_2/45-55%20ENFERMEDAD
%20ROTAVIRUS.pdf
Rivera M. et. al. (1995). Comparisson of four different tests for rapid
diagnosis of rotavirus infection in infants. Rev. Chil. Pediatra, 150-155.