Tcnica de D dbil

Se denomina D al mismo antgeno D cuando se expresa de forma tan dbil que

nicamente es detectable por la prueba de la antiglobulina indirecta. Se trata
de una cuestin simplemente cuantitativa. El nmero de lugares antignicos D
en la superficie de los hemates Du es tan pequeo que no permite la
aglutinacin de los mismos al enfrentarlos a sueros anti-D, por lo que debe
recurrirse a mtodos indirectos para detectarlos. Las personas D positivas
deben considerarse Rh (D) positivas a todos los efectos. Tambin puede
hacerse la prueba antigobulina indirecta en un medio salino, como tambin en
baja fuerza inica.
Todas las sangres que den resultado negativo en la determinacin del antgeno
D por cualquier tcnica directa (placa, tubo, microplaca o gel) deben ser
confirmadas mediante una prueba de antiglobulina indirecta (investigacin del
D).
En caso de receptores de transfusin, cuando la urgencia no permita
entretenerse en la investigacin del D, puede prescindirse de esta
confirmacin, transfundiendo sangre Rh-negativa. De todas formas se
recomienda efectuarla siempre, aunque sea posteriormente.

Muestra: Suspensin de glbulos rojos al 5%.

Reactivos:
Reactivo anti D (Blend), compuesto por IgG e IgM.
Reactivo de Liss.
Reactivo de Coombs.

Procedimiento:
1. Realizo agrupamiento directo en placa de la muestra en estudio del
donante

B (O)

2. En caso de obtener un resultado negativo en anti D, realizar la tcnica

de D dbil y de cde, que se realiza de la siguiente manera:
3. Rotular dos tubos con D y cde respectivamente y numero de donante.
4. Agrego dos gotas de suspensin al 5% de glbulos rojos en cada tubo.
5. Al tubo rotulado como D, le realizo un lavado con solucin fisiolgica,
luego le agrego dos gotas de reactivo de Liss y dos gotas de reactivo
Anti D.
6. Al tubo rotulado como cde le agrego dos gotas de reactivo Anti cde.
7. Pongo a centrifugar ambos tubos a 2500 rpm durante 15 segundos. Leo
y registro. En caso de dar un resultado positivo termina tcnica aqu, de
lo contrario continuamos.
8. Incubo ambos tubos en bao trmico en 37 durante 10 minutos, luego
centrifugo a 2500 rpm, leo y registro. En caso de dar positivo las
tcnicas terminan aqu, de lo contrario la tcnica D continua.
9. Al tubo rotulado como D, le realizo tres lavados con solucin fisiolgica y
luego le agrego dos gotas de reactivo de Coombs.
10.Por ltimo, centrifugo a 2500 rpm, leo y registro.

Conclusin:
La presencia de aglutinacin en cualquiera de las lecturas (Li, 37, Coombs)
constituye un resultado positivo, esto quiere decir que el donante tiene una
expresin dbil del antgeno D en membrana del glbulo rojo.
EJ: Donante que no tiene expresin dbil del antgeno D.
N donante
349 D
349 cde

Li
(o)
(o)

37
(o)
(o)

Dibujo microscpico de los tubos:

D
Coombs

Li

37

Coombs
(o)
-

Cde

Li

37

Rotulado de bolsa de sangre:

En caso
dedbil
haber
dado negativa la tcnica de D dbil y cde]
En caso de haber dado positiva la tcnica
de D
y cde