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ASPECTOS GENERALES
Enzima + Sustrato
Complejo Enzima-Sustrato
Enzima + Productos
ASPECTOS GENERALES
Sustancia sobre la que acta la enzima
sustrato.
El sustrato se une a una regin concreta de la
enzima centro activo.
1. Sitio de unin Aminocidos que estn en
contacto directo con el sustrato
2. Sitio cataltico Aminocidos directamente
implicados en el mecanismo de la reaccin
Una vez formados los productos la enzima puede
comenzar un nuevo ciclo de reaccin
1.- La enzima y su
sustrato
ALTA
ESPECIFICIDAD
DE REACCIN
INTERACCIN
ESTEREO
ESPECFICA
CON SU
SUSTRATO
REGULACIN DE LA ACTIVIDAD
ENZIMTICA
Enzimas grupos qumicos ionizables (carboxilos COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las
cadenas laterales de sus aminocidos.
EFECTO DE LA TEMPERATURA
SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
INHIBIDORES ENZIMTICOS
ORGANOFOSFORADOS -/ ACETILICOLINESTERASA
Inhibidor Irreversible
Fluorofosfato
de diisopropilo (DFP)
Acetilcolina
Acetilcolinesterasa
Acetato + Colina
MODULACIN ALOSTRICA DE LA
ACTIVIDAD ENZIMTICA
MODULACIN ALOSTRICA DE LA
ACTIVIDAD ENZIMTICA
AB
AB+CD
EFECTO DE LA MODIFICACIN
COVALENTE SOBRE LA ACTIVIDAD
ENZIMTICA
ACTIVACIN PROTEOLTICA DE LA
ACTIVIDAD ENZIMTICA
Proenzimas o zimgenos:
Se sintetizan inicialmente
como protenas precursoras
sin actividad enzimtica, para
activarse ataque hidroltico
liberando uno o varios
pptidos.
El resto de la molcula
proteica adopta conformacin
y propiedades del enzima
activo.
ACTIVACIN PROTEOLTICA DE LA
ACTIVIDAD ENZIMTICA
ISOENZIMAS
ENZIMAS MULTIFUNCIONALES
ENZIMAS MULTIFUNCIONALES
Enzima con varias subunidades catalizadoras, cada
una cuenta con su sitio activo.
Regiones bien definidas, con actividad
independiente, que realizan una reaccin qumica
especifica.
Vas de reaccin:
NOMENCLATURA DE LAS
ENZIMAS
NOMBRES PARTICULARES
NOMENCLATURA DE LA
COMISIN ENZIMTICA
NOMENCLATURA DE LA
COMISIN ENZIMTICA
NOMBRE SISTEMTICO
El nombre consta de 3 partes:
* el sustrato preferente
* el tipo de reaccin realizado
* terminacin "asa
CLASIFICACIN DE LAS
ENZIMAS
En funcin de su accin cataltica
especfica:
Clase 1: OXIDORREDUCTASAS
Clase 2: TRANSFERASAS
Clase 3: HIDROLASAS
Clase 4: LIASAS
Clase 5: ISOMERASAS
Clase 6: LIGASAS
Clase 1: OXIDORREDUCTASAS
Clase 2: TRANSFERASAS
* Glucoquinasa
A + C-B
Clase 3: HIDROLASAS
* Lactasa
AH + B-OH
Clase 4: LIASAS
* Acetacetato descarboxilasa
Clase 5: ISOMERASA
Clase 6: LIGASAS
* Piruvato carboxilasa
A-B + XDP + Pi
MECANISMOS CATALTICOS
cido Base
Covalente
Electrosttica
Orientacin y aproximacin
Transicional
Por Iones metlicos
MECANISMOS CATALTICOS
MECANISMOS CATALTICOS
MECANISMOS CATALTICOS
Mecanismos:
*Enlace con S para orientarse adecuadamente.
*Redox con participacin del metal.
*Atraen cargas del S, neutralizndolo y
estabilizando la reaccin.
CINTICA ENZIMTICA
Cintica enzimtica
Modelo cintico de Michaelis-Menten
Clculo de la Km y la Vmax de un enzima
Actividad enzimtica
CINTICA ENZIMTICA
Estudia la velocidad de las reacciones
catalizadas por enzimas
Mecanismo de reaccin
y especificidad de la enzima.
ALTA ESPECIFICIDAD DE
REACCIN
INTERACCIN
ESTEREO ESPECFICA
CON EL SUSTRATO
CINTICA ENZIMTICA
CINTICA ENZIMTICA
CINTICA ENZIMTICA
Determinacin Cuantitativa de la
Cintica Enzimtica
1. La reaccin global
2. Procedimiento analtico para determinar el S que
desaparece o el P que aparece
3. S la E requiere Cofactores (ines o coenzimas)
Km = [S]
La Km es un parmetro de Actividad
Enzimtica
Km de algunas enzimas
ENZIMA
Catalasa
SUSTRATO
H2O2
Hexoquinasa
Anhidrasa carbnicoa
Quimotripsina
Km (mM)
25.0
ATP
0.4
D-Glucosa
0.05
D-Fructosa
1.5
HCO3-
9.0
Gliciltirosinilglicina
108.0
N-Benzoiltirosinamida
2.5
-Galactosidasa
D-Lactosa
4.0
Treonina deshidrogenasa
L-Treonina
5.0
ENZIMAS EN CLNICA
Anlisis de patologas en suero, saliva, lquido
cefaloraqudeo,
orina,
semen
detectan
alteraciones en diferentes rganos
Enzimas plasmticas
*Especficas: [mayor en suero]
*No especficas: Su funcin no es en plasma
-De secrecin: glndulas exocrinas (pncreas)
-Metabolismo intermediario:[alta] por necrosis
MARCADORES ENZIMTICOS
Diagnstico para actividad enzimtica especfica en
el organismo.
MARCADORES ENZIMTICOS EN
SUERO
Marcadores
hepticos:
Dao
hepatocelular,
obstruccin renal liberacin enzimtica a suero.
*[elevada] por alteracin celular heptica, cirrosis
-Alanino aminotransferasa
-Aspartato aminotransferasa
-Deshidrogenasa lctica
-Glutamiltransferasa
-Fosfatasa alcalina
-Glutatin sulfurotransferasa
MARCADORES ENZIMTICOS EN
SUERO
Marcadores pancreticos: descarta pancreatitis
aguda.
-Amilasa: Digestin de CH, 7 isoformas
-Lipasa: Rin y pncreas. [insuficiencia renal]
MARCADORES ENZIMTICOS EN
SUERO
Marcadores
musculares.
musculares:
Distrofias musculares,
hipotiroidismo, HM.
Valora
transtornos
afecciones
metablicos,
MARCADORES ENZIMTICOS EN
SUERO
Marcadores renales: Dao renal temprano.
- Glutatin-s-transferasa: Enzimas detoxificantes.
Rin, hgado, pulmn, glndulas suprarenales,
testculos, placenta, eritrocitos.
Marcadores tumorales: Detectar cncer.
-Deshidrogenasa lctica
-Fosfatasa alcalina