1 Practica Danisa

Alumna: Joshelyn Stefani Apaza Quispe
INGENIERA DANISSA PAREDES MUOZ
EVALUACION DE LA
CONCENTRACION
DE
LA
ENZIMASUTRATO EN LA
CINETICA
ENZIMATICA
Bioqumica de los Alimentos II
EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

ENZIMATICA
INTRODUCCION
La cintica enzimtica estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por
enzimas. Estos estudios proporcionan informacin directa acerca del
mecanismo de la reaccin cataltica y de la especifidad del enzima. La
velocidad de una reaccin catalizada por un enzima puede medirse con relativa
facilidad, ya que en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima.
La medida se realiza siempre en las condiciones ptimas de pH, temperatura, y
se utilizan concentraciones saturantes de sustrato. En estas condiciones, la
velocidad de reaccin observada es la velocidad mxima (Vmax). La velocidad
puede determinarse bien midiendo la aparicin de los productos o la
desaparicin de los reactivos.
Al seguir la velocidad de aparicin de producto (o de desaparicin del sustrato)
en funcin del tiempo se obtiene la llamada curva de avance de la reaccin, o
simplemente, la cintica de la reaccin. A medida que la reaccin transcurre, la
velocidad de acumulacin del producto va disminuyendo porque se va
consumiendo el sustrato de la reaccin.
MARCO TEORICO
Balance de Materia y Energa
Apaza Quispe Joshelyn Stefani

ENZIMATICA
La Vmax corresponde al valor mximo al que tiende la curva experimental, y la
KM corresponde a la concentracin de sustrato a la cual la velocidad de la
reaccin es la mitad de la Vmax.
ACTIVIDAD ENZIMTICA
Se define la unidad de actividad enzimtica (U) como la cantidad de enzima
que cataliza la conversin de 1 mol de sustrato en un minuto. La actividad
especfica es el nmero de unidades de enzima por miligramo de protena
(U/mg prot) o por mililitro de disolucin (U/ml).
Recientemente, el Sistema Internacional de unidades (SI) ha definido la unidad
de actividad enzimtica como la cantidad de enzima que transforma 1 mol de
sustrato por segundo. Las medidas de actividad enzimtica permiten calcular el
nmero de recambio del enzima, el nmero de reacciones elementales que
realiza el enzima por cada centro activo y por unidad de tiempo. El valor de
KM da idea de la afinidad del enzima por el sustrato: A menor KM, mayor
afinidad del enzima por el sustrato, y a mayor KM, menor afinidad.
El almidn es un polisacrido muy abundante en los vegetales en los cuales se
encuentra generalmente en forma de
pequeos grnulos microscpicos de
estructura cristalina. El grano de almidn est formado por
amilosa y amilopectina. La amilopectina
se encuentra en la parte exterior del
grano, es insoluble en agua y no da
coloracin con la solucin de lugol. La
amilosa se encuentra en la parte interna y
da coloracin violeta en presencia de
lugol. Por otro lado, la amilasa cataliza
la hidrlisis del almidn, glucgeno y
dextrinas superiores en molculas
cada vez ms pequeas, en un proceso progresivo dando como producto final
el disacrido maltosa. La amilasa es una mezcla de enzimas. En el hombre la
encontramos en la boca (amilasa salival) y en el intestino (amilasa
pancretica). La amilasa pancretica se considera idntica en su accin a la
amilasa salival. El pH ptimo para la amilasa salival es de 6.6. Cuando se
encuentra en medios con pH ms cidos o ms alcalinos, la actividad de la
enzima disminuye o se inhibe por completo. La presencia de sales tambin
modifica la actividad de esta enzima.
En esta prctica, el avance de la hidrlisis del almidn se demostrar siguiendo
la formacin del complejo con yodo el cual da una coloracin violeta con los
almidones. A medida que se va efectuado la hidrlisis, el color azul va
desapareciendo y aparece un color rojizo (eritrodextrinas) y posteriormente se

ENZIMATICA
observa una coloracin amarilla, debida nicamente a la solucin de yodo, lo
que demuestra que el almidn ha sido hidrolizado hasta maltosa.
dextrinas
Almidn
almidn
Soluble
superiores
+
molec. Maltosa
acrodextrinas
+
Maltosa
molec. Maltosa
LA CONSTANTE DE MICHAELIS (KM)

Nos indica la concentracin de sustrato a la cual la velocidad de reaccin es la
mitad de la velocidad mxima. Este parmetro es independiente de la
concentracin de enzima, y es caracterstico de cada enzima segn el sustrato
utilizado (si tiene varios). La Km tambin indica la afinidad que posee la enzima
por el sustrato, siendo sta mayor, cuanto menor es la Km. Cuanto menor sea
la Km menor ser la cantidad de sustrato necesaria para alcanzar la mitad de
la velocidad mxima, por lo que mayor ser la afinidad del enzima hacia ese
sustrato.
El trmino cintica enzimtica implica el estudio de la velocidad de una
reaccin catalizada por una enzima y los efectos que pueden tener varios
factores como los inhibidores. Uno de los principales estudios que se realizan
en una enzima es medir el efecto en la velocidad de la reaccin cuando se
modifican las concentraciones del sustrato de la enzima y se mantienen
constantes la concentracin de enzima, el pH, la fuerza inica del medio, la
temperatura, entre otros.
Curva de velocidad en funcin de la concentracin de sustrato. Tanto en una
reaccin catalizada por una enzima como en una reaccin qumica, se espera
que la velocidad de la reaccin de conversin de sustratos a productos, sea
directamente proporcional a la concentracin de los reactantes que participan
en la reaccin, es decir si se duplica la concentracin de cualquiera de los
sustratos la velocidad de la reaccin tambin se duplica. A una reaccin as se
denomina reaccin de segundo orden y se representa como una lnea recta con
pendiente positiva y diferente de cero. Pero en una reaccin que es catalizada
por una enzima, slo a concentraciones bajas del o los sustratos se obtiene una
reaccin de segundo orden. A concentraciones altas de sustrato la velocidad es
independiente de la concentracin de sustrato, debido a que no hay ms
enzima que lleve a cabo la reaccin. La reaccin a concentraciones altas de
sustrato se llama reaccin de orden cero y tambin se representa como una
lnea recta pero con pendiente casi igual a cero.
En resumen, en una reaccin catalizada por una enzima la variacin en la
concentracin del o los sustratos presenta diferentes rdenes de reaccin. Para

ENZIMATICA
un gran nmero de enzimas la grfica que se produce se puede describir
mediante la expresin matemtica de una hiprbola rectangular. Como en
cualquier expresin matemtica se expresan en ella la relacin entre las
variables junto a 1 o ms constantes.
El trabajo pionero de Michaelis y Menten y Bringgs y Haldane llev a describir
la ecuacin de la hiprbola rectangular, ahora conocida como ecuacin de
Michaelis-Menten, con ella es posible predecir el comportamiento de la enzima
en condiciones experimentales diferentes. Entonces, la ecuacin se describe
as:
Vm * S
S Km
Donde
V = Velocidad mxima, y K = Constante de Michaelis
m
M
S=concentracin de sustrato
V=velocidad inicial
El valor de Km de una enzima para un sustrato especfico es la concentracin
del sustrato a la cual la velocidad de la reaccin es la mitad de la velocidad
mxima. La Vmax es la velocidad
Una manera para obtener los valores de Km y Vmax de una enzima tambin
llamada parmetros cinticos de una enzima, es graficando los valores de
velocidad contra la concentracin de sustrato. Este mtodo tiene la desventaja
de que se grafica una curva y no una lnea recta por lo que la interpolacin es
difcil. Otra manera, es la de utilizar alguna de las expresiones matemticas
que producen una lnea recta como son la de Eadie-Hosftie, la de Hanes o la
ms popular la de Lineaweaver-Burk y que es la ecuacin que a
continuacin se muestra:
1
1
Km
V Vm Vm * S
Como se observa en el ejemplo anterior, las formas lineales de la ecuacin de
Michaelis-Menten son expresiones matemticas simples y aunque cada una

ENZIMATICA
tiene sus problemas de interpretacin son tiles para obtener los valores de
Km y Vmax.
INHIBICIN ENZIMTICA
Existen sustancias que pueden impedir que la enzima desarrolle su actividad
cataltica, ralentizando o paralizando la reaccin enzimtica. A estas sustancias
se las denomina inhibidores enzimticos. Teniendo en cuenta que las
reacciones qumicas en la clula estn catalizadas por enzimas, es fcil intuir el
papel de muchos inhibidores enzimticos que actan como frmacos,
antibiticos o conservantes; otros pueden ser txicos, potentes venenos. En la
inhibicin irreversible, el inhibidor se une al enzima de forma covalente y
permanente.

ENZIMATICA
PARTE EXPERIMENTAL
MATERIAL Y REACTIVOS
1 Fiola de 50 ml.
8 Fiolas de 25 ml.
24 tubos de ensayo
Gradilla
12 matraces de 25 cc
02 matraces de 50 cc
8 Pipetas de 1 cc
8 Pipetas de 0.5 cc
8 Pipetas de 2 cc
02 Pipetas de 5 cc
2 pipetas de 20 cc
Espectrofotmetro y cubetas
Tampn fosfato 0.1M pH 7.5
Disolucin de 0.2%I2-2%KI
Almidn
PREPARACIN DE LA SOLUCIN DE ALMIDN SOLUBLE:

Pesar 0.25 gr. de almidn. Dispersar el almidn sobre 25 ml de disolucin
tampn. Calentar Hasta ebullicin otros 25 ml de disolucin tampn Aadir la
disolucin sobre la disolucin en ebullicin y dejar hervir con agitacin durante
3 minutos A continuacin enfriar con agua hasta temperatura ambiente y
enrasar en fiola de 50 ml con agua destilada.
A. Preparacin de soluciones para la Curva Patrn
Verter en cada tubo de ensayo volmenes entre 0.25 y 2 ml de la
solucin de almidn 0.5% y mezclarlos con volmenes de solucin
tampn entre 4.75 y 3 ml segn la tabla N 1
Vol. soluc.
Almidn 0.5%
(ml)
Vol. Buffer
Concentraci
n
Absorbanci
a a 575 nm
0.25
4.75
0.025
0.070
0.5
4.5
0.050
0.106
0.75
4.25
0.075
0.126
1.0
4.0
0.10
0.176
Tubo
(ml)

ENZIMATICA
5
1.25
3.75
0.125
0.217
1.5
3.5
0.150
0.151
1.75
3.25
0.175
0.352
3.0
0.200
0.376
De cada tubo de ensayo extraer 0.5 ml de muestra y verterlos en una

fiola de 25 ml adicionar 20 ml de agua 0.5 ml de solucin de IK y enrazar
a 25 ml con agua destilada transcurridos 2 minutos medir la absorbancia
a 575 nm en el espectrofotmetro. La medida se realizara frente a un
blanco que nicamente contiene solucin de IK (0.5 ml) tampn 0.5ml y
agua destilada (24 ml)
B. Extraccin de la enzima
Enjuagarse la boca con agua verter aproximadamente 25 ml de agua
destilada tibia mantener el agua en la boca por aproximadamente 1
minutos depositar el extracto enzimtico sobre una gasa y filtrar.
Reservar en agua con hielo, Mezclar en un matraz 5 ml de enzima con 45
ml de agua destilada
C. Determinacin del efecto de la concentracin del sustrato en la
cintica enzimtica
Verter en cada tubo de ensayo volmenes entre 0. y 2 ml de la solucin
de almidn 0.5% y mezclarlos con volmenes de solucin tampn entre
2.5 ml y 4.5 ml segn la tabla N 2
Tubo
Soluci
n
Almid
n 0.5%
(ml)
1.6
1.2
0.8
0.4
Enzima
(ml)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Tampn
(ml)
2.5
2.9
3.3
3.7
4.1
4.5
C%
0.2
0.16
0.12
0.08
0.04
Tiempo
(min.)
0
Absorbancia a 575 nm
0.388
0.306
0.177
0.226
0.119
-0.002

ENZIMATICA
10
0.362
0.228
0.137
0.157
0.082
0.000
20
0.325
0.275
0.110
0.123
0.071
0.000
30
0.285
0.255
0.070
0.119
0.066
0.006
A continuacin se atempera a 37C durante 5 minutos y se aade 0.5 ml

de disolucin de enzima y se deja reaccionar el tiempo deseado. Al
tiempo 0, 10,20 y 30 minutos se extrae 0.5 ml de muestra y se vierte en
un matraz de 25 ml se introduce en agua hirviendo por un par de
minutos, se adiciona 20 ml de agua 0.5 ml de solucin de IK y enrazar a
25 ml con agua destilada (4 ml de agua destilada) medir la absorbancia
a 575 nm en el espectrofotmetro.
D. Determinacin del efecto de la concentracin de la enzima en la
cintica enzimtica
Verter en cada tubo de ensayo 2 ml de la solucin de almidn 0.5% y
mezclarlos con volmenes de solucin tampn entre 2.5 ml y 3.0 ml
segn la tabla N 2
Tubo
Soluci
n
Almid
n 0.5%
(ml)
Enzima
(ml)
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
Tampn
(ml)
2.5
2.6
2.7
2.8
2.9
3.0
C%
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
Tiempo
(min.)
Absorbancia a 575 nm
0.408
0.407
0.396
0.414
0.438
0.393
10
0.376
0.362
0.325
0.410
0.399
0.502
20
0.364
0.400
0.280
0.391
0.404
0.421
30
0.311
0.366
0.249
0.385
0.397
0.415
35
0.333
0.320
0.229
0.370
0.388
0.407

ENZIMATICA
40
0.296
0.341
0.209
0.348
0.380
0.413
A continuacin se atempera a 37C durante 5 minutos y se aade volmenes

de disolucin de enzima entre 0.5 y 0.1 y se deja reaccionar el tiempo deseado
Al tiempo 0, 10, 20, 30, 35 y 40 minutos se extrae 0.5 ml de muestra y se
vierte en un matraz de 25 ml se introduce en agua hirviendo por un par de
minutos, se adiciona 20 ml de agua 0.5 ml de solucin de IK y enrazar a 25 ml
con agua destilada medir la absorbancia a 575 nm en el espectrofotmetro.

ENZIMATICA
RESULTADOS
Determinar la relacin entre absorbancia y concentracin de almidn de

la parte A de la experimentacin
Concentracin de
almidn
Absorbancia a 575
nm
0.025
0.070
0.050
0.106
0.075
0.126
0.10
0.176
0.125
0.217
0.150
0.151
0.175
0.352
0.200
0.376
Realice una regresin lineal a los datos teniendo como x concentracin y

como y Absorbancia Cul es la pendiente? Cul es el intercepto?
Pendiente B= 1.848
Intercepto A= 5.20 *10-3
R2= 0.8185
Cul es la ecuacin?
Y =5.20 * 10-3 + 1.848*X ecuacin (A)
Relacione los datos de la parte C de la experimentacin:
Para la solucin con 0.2 % de almidn Convierta los valores de

absorbancia en concentracin por medio de la ecuacin (A)
Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.388
0.207
10
0.362
0.193

ENZIMATICA
20
0.325
0.173
30
0.285
0.151
Realice una regresin lineal a los datos teniendo como x tiempo y como
y Concentracin Cul es la pendiente? Cul es el intercepto?
Pendiente B= -1.88*10-3
Intercepto A= 0.2092
R2= 0.9905
Tenga en cuenta que la pendiente es la velocidad inicial de la solucin 1
(V0)

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.306
0.162
10
0.228
0.120
20
0.275
0.146
30
0.255
0.135
Intercepto A= 0.149
R2= 0.1604
(V0)

Tiempo
Absorbanc
Concentraci

ENZIMATICA
ia a 575
nm
0.177
0.092
10
0.137
0.071
20
0.110
0.056
30
0.070
0.035
R2= 0.9958
(V0)

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.226
0.119
10
0.157
0.082
20
0.123
0.063
30
0.119
0.061
Intercepto A = 0.1102
R2= 0.8587
(V0)

ENZIMATICA

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.119
0.061
10
0.082
0.041
20
0.071
0.035
30
0.066
0.032
R2= 0.8466
(V0)
Para la solucin con 0. % de almidn Convierta los valores de

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
-0.002
-3.89*10-3
10
0.000
-2.813
20
0.000
-2.813
30
0.006
4.32*10-4
Pendiente B= 1.2726*10-4
Intercepto A= -1.409
R2= 1.0245*10-6

ENZIMATICA
(V0)
Resuma las velocidades iniciales para las soluciones 1 2 3 4 5 y 6

Solucin
Concentraci
n de almidn
V0
0.2
-1.88*10-3
0.16
-5.5*10-4
0.12
-1.86*10-3
0.08
-1.93*10-3
0.04
-9.3*10-4
1.2726*104
Confeccionar una tabla con Vo, 1/Vo, [S] y 1/[S].

Concentracin
de almidn
(S)
1/(S)
V0
1/V0
0.2
1/0.2
-1.88*10-3
1/-1.88*10-3
0.16
1/0.16
-5.5*10-4
1/-5.5*10-4
0.12
1/0.12
-1.86*10-3
1/-1.86*10-3
0.08
1/0.08
-1.93*10-3
1/-1.93*10-3
0.04
1/0.04
-9.3*10-4
1/-9.3*10-4
1/0
1.2726*10-4
1/1.2726*104
Concentraci
n de almidn
(S)
1/(S)
V0
1/V0
0.2
-1.88*10-3
-531.9
0.16
6.2
-5.5*10-4
-1818.1
0.12
8.3
-1.86*10-3
-537.6
0.08
12.5
0.04
25
0
-1.93*10-3
-518.1
-9.3*10-4
-1075.2
1.2726*10-4
7857.9

ENZIMATICA
Determinar el efecto de la concentracin de sustrato en la velocidad

inicial
Determinar los parmetros de la ecuacin de Lineweaver-Burk a partir de

1/Vo vs 1/[S] Realice un regresin Lineal teniendo como x 1/S y y 1/ V 0
Pendiente=Km/Vmax= -225.3
Intercepto =1/Vmax= 2703.23
R2= 0.2899
Relacione los datos de la parte D de la experimentacin
Cul es la ecuacin?
Y =5.20 * 10-3 + 1.848*X ecuacin (A)
Para la solucin con 0.5 ml de enzima Convierta los valores de

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.408
0.217
10
0.376
0.200
20
0.364
0.194
30
0.311
0.165
35
0.333
0.177
40
0.296
0.157
y Concentracin Cual es la pendiente? Cul es el intercepto?

ENZIMATICA
Intercepto A= 0.216
R2= 0.910
(V0)

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.407
0.217
10
0.362
0.193
20
0.400
0.213
30
0.366
0.195
35
0.320
0.170
40
0.341
0.181
Intercepto A= 0.215
R2= 0.593
(V0)

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.396
0.211
10
0.325
0.173

ENZIMATICA
20
0.280
0.148
30
0.249
0.131
35
0.229
0.121
40
0.209
0.110
Intercepto A= 0.203
R2= 0.977
(V0)

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.414
0.221
10
0.410
0.219
20
0.391
0.208
30
0.385
0.205
35
0.370
0.197
40
0.348
0.185
Pendiente B= -8.357-10-4
Intercepto A= 0.224
R2= 0.9008
(V0)

ENZIMATICA

Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.438
0.234
10
0.399
0.213
20
0.404
0.215
30
0.397
0.212
35
0.388
0.207
40
0.380
0.202
Intercepto A= 0.228
R2= 0.796
(V0)
Para la solucin con 0.ml de enzima Convierta los valores de absorbancia

en concentracin por medio de la ecuacin (A)
Tiempo
Absorbanc
ia a 575
nm
Concentraci
n
0.393
0.209
10
0.502
0.268
20
0.421
0.225
30
0.415
0.221
35
0.407
0.217
40
0.413
0.220

ENZIMATICA
Intercepto A= 0.234
R2= 0.059
(V0)
Resuma las velocidades iniciales para las soluciones 1 2 3 4 5 y 6
Solucion
Concentracion de
enzima
V0
0.5
-1.406*10-3
0.4
-9.031*10-4
0.3
-2.408*10-3
0.2
-8.357-10-4
0.1
-6.336*10-4
-3.326*10-4
Determinar el efecto de la concentracin de la enzima en la velocidad

inicial

ENZIMATICA
DISCUSION
En este procedimiento solo queramos comprobar la absorbancia que

debera disminuir en los tiempos 0-10-20-30-35-40
Las complicaciones que tuvieron los tubos para hallar la absorbancia

pueden ser a una mala medicin de tampn o sol. de almidn o en el
momento de echar los 24 ml de agua destilada. O mal clculo de tiempo
ya sea cuando tenan que estar solo dos minutos a bao mara.
En el primer tubo empieza con 0.408 tiende a bajar y luego sube y volvi
a bajar en el caso del segundo tubo tiende a bajar, en el 3 tubo tambin
baja, en el 4 tubo bajo, en el 5 tubo bajo y en el ltimo tubo vemos y
debemos saber que no tuvo enzima alguna su comportamiento debio ser
constante a lo largo del tiempo y observamos que esto no sucedi
entonces debimos de estabilizarlo.
Ahora los tubos que tuvieron un mejor comportamiento fueron el 3 y 4

ya que en todos los casos tuvimos una tendencia clara.
Si es que analizamos los tubos 3 y 4 el tubo 3 tiene 0.3 de enzima y el

tubo 4 tiene menos enzima por ende es de esperar que el que tenga
mayor cantidad de enzima tenga una velocidad ms rpida.
En el caso del tubo 2 se sugiere eliminar el punto 0.4 a 0.41 ya que no

es constante.
En el tubo 1 si comparamos con todos los dems su velocidad debe ser

las ms alta ya que es la que tiene ms dosis de enzima.
Si comparamos el caso del tubo 6 aqu debimos tener una constante ya

que no hubo enzima.
CONCLUSIONES

ENZIMATICA
La velocidad se obtiene teniendo en cuenta La regresin del tiempo.
Todos los tubos han tenido la misma concentracin de almidn lo que ha

variado es la cantidad de almidn.
La absorbancia mide la cantidad de almidn con el lk en el momento de

agregar la amilasa va a comenzar a romper las unidades de almidn por
lo tanto vamos a tener menos de almidn, la absorbancia tiene que ir
disminuyendo en cada caso.
La ltima concentracin ya que no contiene enzima la concentracin de

almidn debera ser constante mantenerse igual.
En cada caso nosotros debemos tener una disminucin de almidn
La pendiente es negativa porque en cada una de las determinaciones

porque entre menos almidn mayor absorbancia va haber y es lgico
que sea una pendiente negativa
RESUMEN
Preparamos la solucin de almidn soluble:

ENZIMATICA
25 ml de disolucin tampn
Preparacin de soluciones para la Curva Patrn
Verter en cada tubo de ensayo volmenes entre 0.25 y 2 ml de la

solucin de almidn 0.5% y mezclarlos con volmenes de solucin
tampn entre 4.75 y 3 ml segn la tabla N 1
De cada tubo de ensayo extraer 0.5 ml de muestra y verterlos en una

fiola de 25 ml adicionar 20 ml de agua 0.5 ml de solucin de IK y enrazar
a 25 ml con agua destilada. Transcurridos 2 minutos medir la
absorbancia a 575 nm en el espectrofotmetro. La medida se realizara
frente a un blanco que nicamente contiene solucin de IK (0.5 ml)
tampn 0.5ml y agua destilada (24 ml)
Se lleva la muestra a bao maria por 2min tomando en cuenta el

cronometro ya sea en el tiempo q nos pide 0-5-10-15-20-25para medir la
absorbancia.
WEBGRAFIA
Cintica enzimtica - Wikipedia, la enciclopedia libre
www.concentracin de la enzima-sustrato en la cintica enzimtica
http://www.biorom.uma.es/contenido/UIB/Jmoldesarrollo/enzimas/

ENZIMATICA
ANEXOS

ENZIMATICA

ENZIMATICA

1 Practica Danisa

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Alumna: Joshelyn Stefani Apaza Quispe

INGENIERA DANISSA PAREDES MUOZ

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

LA CONSTANTE DE MICHAELIS (KM)

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Balance de Materia y Energa

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Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

PREPARACIN DE LA SOLUCIN DE ALMIDN SOLUBLE:

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

De cada tubo de ensayo extraer 0.5 ml de muestra y verterlos en una

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

A continuacin se atempera a 37C durante 5 minutos y se aade 0.5 ml

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

A continuacin se atempera a 37C durante 5 minutos y se aade volmenes

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Determinar la relacin entre absorbancia y concentracin de almidn de

Realice una regresin lineal a los datos teniendo como x concentracin y

Para la solucin con 0.2 % de almidn Convierta los valores de

Balance de Materia y Energa

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EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Para la solucin con 0.16 % de almidn Convierta los valores de

Para la solucin con 0.12 % de almidn Convierta los valores de

Balance de Materia y Energa

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Para la solucin con 0.08 % de almidn Convierta los valores de

Balance de Materia y Energa

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EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Para la solucin con 0.04 % de almidn Convierta los valores de

Para la solucin con 0. % de almidn Convierta los valores de

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Resuma las velocidades iniciales para las soluciones 1 2 3 4 5 y 6

Confeccionar una tabla con Vo, 1/Vo, [S] y 1/[S].

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Determinar el efecto de la concentracin de sustrato en la velocidad

Determinar los parmetros de la ecuacin de Lineweaver-Burk a partir de

Relacione los datos de la parte D de la experimentacin

Para la solucin con 0.5 ml de enzima Convierta los valores de

Balance de Materia y Energa

Apaza Quispe Joshelyn Stefani

EVALUACION DE LA CONCENTRACION DE LA ENZIMA-SUTRATO EN LA CINETICA

Para la solucin con 0.4 ml de enzima Convierta los valores de