Manual de Practica Genetica Vegetal 2016

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE INGENIERIA AGRNOMA
MANUAL DE PRCTICAS
DE
GENTICA VEGETAL
DERECHOS RESERVADOS POR EL AUTOR
Mg. Blgo. Jess Ruiz Baca
NUEVO CHIMBOTE PER

2015
A Dios, a mis Padres, a nuestros seres queridos,

maestros, colegas, amigos y lectores investigadores en
general.
PRESENTACION
El contacto con nuestros alumnos, en el quehacer diario, nos permite asegurar el alto y positivo
valor que posee una orientacin escrita de las prcticas a realizar en el laboratorio; debido a que
ello ha permitido un notable avance en la realizacin de los trabajos prcticos, basados en un
previo conocimiento terico impartido a los alumnos, tanto de la finalidad de la prctica en s
misma, como de los materiales y mtodos a emplear.
El objetivo principal de esta obra, es la presentacin de una gua didctica para los estudiantes y
profesionales interesados en el rea de la Gentica Vegetal.
Se espera que el esfuerzo desplegado, cumpla su cometido en bien de una ptima formacin
profesional y una mejor comprensin del papel importante que cumple el estudio de la Gentica
Vegetal en el campo de la Ingeniera Agrnoma y la Biotecnologa. As mismo, se esperan las
valiosas sugerencias de colegas y estudiantes, que permitirn el perfeccionamiento de este
manual en ediciones futuras.
EL AUTOR
INDICE
UNIDAD I: BASES QUMICAS Y FISICAS DE LA HERENCIA. PRINCIPIOS
MENDELIANOS
Semana N1
Prctica: Pautas para presentacin de informes. Distribucin de parcelas y trabajos de aplicacin.
Semana N2
Prctica: Bsqueda y anlisis de la informacin gentica de plantas.
Semana N3
Prctica: Anlisis de Uso de marcadores moleculares para el mejoramiento gentico de plantas.
Semana N4
Prctica: Anlisis de mitosis y meiosis en plantas.
Semana N5
Prctica: Demostracin de las Leyes de Mendel.
UNIDAD II: EXTENSIONES Y MODIFICACIONES DEL MENDELISMO.
CARTOGRAFA GENETICA
Semana N7
Prctica: Interacciones gnicas. Epistasis. Resolucin de problemas.
Semana N8
Practica: Mendelismo Complejo. Incompatibilidad gametoftica y esporoftica.
Semana N9
Prctica: Ligamiento factorial o herencia de genes ligados
UNIDAD III: HERENCIA NO MENDELIANA. MUTACIONES Y POLIPLOIDIAS.

GENETICA CUANTITATIVA Y POBLACIONAL
Semana N11
Prctica: penetrancia y expresividad. Herencia polignica. Herencia citoplasmtica.
Semana N12
Prctica: Mutaciones cromosmicas. Anlisis de cariotipo en papa.
Semana N13
Prctica: Gentica de poblaciones.
Semana N14
Practica: Endogamia y heterosis. Resolucin de problemas.
Semana N15
Prctica: Gentica cuantitativa. Caracteres cuantitativos y cualitativos en maz. Resolucin de
problemas.
4
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
1.- Seguir las instrucciones y recomendaciones dadas por el docente para cada sesin prctica.
No manipule muestras, materiales, instrumentos o equipos por su cuenta.
2.- Procure ingresar al laboratorio a la hora sealada, con el guardapolvo puesto y con el
material de trabajo previamente solicitado.
3.- Al solicitar microscopios, materiales de vidrio u otros a la unidad tcnica debe revisar que
dichos objetos no estn deteriorados, quebrados o incompletos.
4.- Durante su permanencia en el laboratorio aproveche y use adecuadamente el tiempo,
materiales de trabajo, agua, corriente elctrica, mobiliario, espacio.
5.- Por su bienestar est prohibido fumar, comer o beber en el interior del laboratorio.
6.- No arroje desechos a los lavaderos ni al piso. Procure colocarlos en bolsas plsticas par que
sean descartadas una vez finalizada las prcticas.
7.- Cuando se trabaje con material infeccioso y patgeno (secreciones, exudados, cultivos
bacterianos, muestras virales, muestras sanguneas, parsitos, protozoarios) siga atentamente las
indicaciones de s profesor de mesa; realice su limpieza personal con jabn germicida, elimine el
material descartable, esterilice el material de vidrio e incinere las muestras biolgicas si es
necesario.
8.- Al calentar un tubo de ensayo, fiola o matraz con sustancias reactivas, cuidar de no dirigir
dichos recipientes hacia uno de sus pares sino hacia un espacio alejado de ellos.
9.- Sobre la mesa de trabajo de laboratorio debe tener solamente el material solicitado y libreta
de apuntes. Coloque las carteras, mochilas, libros y otros en el tablero de asistente debajo de la
mesa o en las mesas laterales.
10.- El estudiante de una mesa de trabajo por ningn motivo debe dirigirse a otra, salvo que lo
disponga su profesor.
11.- Durante el desarrollo de prcticas observe y grafique con detalle los diversos experimentos,
protocolos o vistas microscpicas; intercambie conceptos, ideas y punto de vista con sus pares y
profesor; y, analice la informacin terica sobre la prctica existente en libros, papers, folletos,
revistas, etc.
12.- Al trmino de la prctica, el estudiante debe devolver a la unidad tcnica del laboratorio el
material de laboratorio proporcionado; limpiar su mesa de trabajo, despojarse del guardapolvo; y
retirarse ordenadamente.
MEDIDAS GENERALES EN CASO DE ACCIDENTE

PLAN GENERAL DE EMERGENCIA:
Dar la alarma.
Ponerse a salvo.
Ayudar a las personas.
Luchar contra el fuego.
Avisar al responsable del departamento.
Evacuacin del edificio en caso necesario.
Avisar a ambulancias, bomberos.
FUEGO EN EL LABORATORIO:
Evacuar el laboratorio, por pequeo que sea el fuego, por la salida principal o por la salida de
emergencia, si la principal est bloqueada.
Avisar a todos los compaeros de trabajo sin que se extienda el pnico y conservando siempre la
calma.
Si el fuego es pequeo y localizado, apagarlo utilizando un extintor adecuado, arena o cubriendo
el fuego con un recipiente de tamao adecuado que lo ahogue.
Retirar los productos qumicos inflamables que estn cerca del fuego. No utilices nunca agua
para extinguir un fuego provocado por la inflamacin de un disolvente.
Para fuegos grandes aislar el fuego, utilizar los extintores adecuados, si el fuego no se puede
controlar rpidamente accionar la alarma de fuego, avisar al servicio de extincin de incendios y
evacuar el edificio.
FUEGO EN EL CUERPO:
Si se te incendia la ropa, pide inmediatamente ayuda.
Estrate en el suelo y rueda sobre ti mismo para apagar las llamas.
No corras ni intentes llegar a la ducha de seguridad si no est muy cerca de ti.
Es tu responsabilidad ayudar a alguien que se est quemando, cbrele con una manta antifuego,
condcele hasta la ducha de seguridad, si est cerca, hazle rodar por el suelo, no utilices nunca
un extintor sobre una persona.
Una vez apagado el fuego, mantn a la persona tendida, procurando que no coja frio y
proporcinale asistencia mdica.
QUEMADURAS:
Las pequeas quemaduras producidas por material caliente, baos, placas, etc., se trataran
lavando la zona afectada con agua fra durante 10-15 minutos.
Las quemaduras ms graves requieren atencin mdica inmediata.
No utilices cremas y pomadas en las quemaduras graves.
CORTES:
Los cortes producidos por la rotura de material de cristal son un riesgo comn en el laboratorio.
Las cortadas se tienen que lavar bien, con abundante agua corriente, durante 10 minutos como
mnimo.
Si la cortada es pequea y deja de sangrar en poco tiempo lvala con agua y jabn y tpala con
una venda.
Si la cortada es grande y no deja de sangrar, requiere de asistencia mdica inmediata.
DERRAME DE PRODUCTOS QUIMICOS SOBRE LA PIE:

Los productos qumicos que se hayan vertido sobre la piel han de ser lavados inmediatamente
con agua corriente abundante, como mnimo durante 10 minutos.
Las duchas de seguridad instaladas en los laboratorios sern utilizados en aquellos casos en que
la zona afectada del cuerpo sea grande y no sea suficiente el lavado en una pila.
Es necesario sacar toda la ropa contaminada de la persona afectada lo antes posible mientras este
bajo la ducha.
Recuerde que la rapidez en el lavado es muy importante para reducir la gravedad y la extensin
de la herida.
Proporcionar asistencia mdica a la persona afectada.
CORROSIONES EN LA PIEL POR ACIDOS Y ALCALIS:
Cuando ocurre una corrosin por cidos, corta lo ms rpido posible la ropa, lave con agua
abundante la zona afectada, neutralice la acidez con bicarbonato de sodio durante 15-20minutos,
sacar el exceso de pasta formada, seca y cubra la parte afectada con linimento oleo-calcreo o
parecido. Cuando se produce una corrosin por lcalis, lave la zona afectada abundante con agua
corriente y aclrala con una disolucin de cido actico al 1% seca cubre la zona afectada con
una pomada de cido tnico.
CORROSIONES EN LOS OJOS:
En este caso el tiempo es esencial (menos de 10 segundos), cuando antes se lace el ojo, menos
grave ser el dao producido.
Lava los dos ojos con agua corriente abundantemente durante 15 minutos como mnimo en una
ducha de ojos, y, si ni hay, con un frasco de lavar los ojos.
Es necesario mantener los ojos abiertos con la ayuda de los dedos para facilitar el lavado debajo
de los parpados.
Es necesario recibir asistencia mdica, por pequea que parezca la lesin.
INGESTION DE PRODUCTOS QUIMICOS:
Antes de cualquier actuacin pide asistencia mdica.
Si el paciente esta inconsciente, ponerlo en posicin lateral de seguridad, con la cabeza de lado y
estirarle la lengua hacia fuera.
Finis Origine Pendet

Solo de ti depende tu xito, como futuro Ingeniero Agrnomo
PRACTICA N 1
PAUTAS PARA PRESENTACIN DE INFORMES. DISTRIBUCIN DE
PARCELAS Y TRABAJOS DE APLICACIN.
NORMAS PARA EL ESTUDIANTE
REGLAS PARA EL TRABAJO EN LABORATORIO
1. Es obligatorio el uso de guardapolvo, para evitar contaminar su ropa de vestir durante el
periodo de clase prctica en laboratorio.
2. Se le asignara un microscopio para todo el curso, su responsabilidad consiste en mantener
en buen estado todo el equipo que se le asigna.
3. No saque del laboratorio, el equipo, medios o lminas que se le haya proporcionado.
4. Coloque los objetos, como libros, maletines y otras pertenencias personales en las zonas
especificadas por el profesor.
5. No coma, ni fume dentro del laboratorio.
6. Lvese cuidadosamente las manos con detergente y agua, antes de salir del laboratorio.
PROCEDIMIENTO EN EL LABORATORIO:
1. La clase de laboratorio debe iniciarse puntualmente. Al principio; el profesor dar una
explicacin oral previa. Adems dar las indicaciones generales, con el objetivo de que
su trabajo sea sencillo y eficiente.
2. Cada alumno debe leer la prctica correspondiente, lecturas complementarias y el
desarrollo de las pruebas de prctica, antes de llegar a clases.
3. Antes y despus de cada periodo de clase se deber limpiar las mesas de trabajo.
4. Al concluir la clase prctica, deje todas las instalaciones y el equipo de laboratorio en
forma ordenada.
5. Haga dibujos con lpiz N 2 o portaminas 0.5 B y siempre realice los ejercicios en la
secuencia sealada.
Cualidades de un dibujo con fines cientficos:
Objetivo y claridad. Consiste en representar los organismos tal como son en realidad y
con extrema nitidez, aun en el menor detalle.
Exactitud. Consiste en tener en cuenta la proporcin entre el objetivo y su representacin
grfica, y entre las diversas partes del mismo.
Trazos ntidos y firmes. Con ausencia de lneas suplementarias y de sombras.
Todas las estructuras deben llevar su llamada NOMINATIVA, la cual debe estar fuera del
dibujo, en forma ordenada y de fcil lectura.
El dibujo debe ir acompaado de una escala o del aumento en el que se observara al
microscopio. As, si el dibujo es del mismo tamao del objetivo, la escala se representara con la
letra A; por ejemplo, si el dibujo se observa al microscopio con un aumento de 40 x 10, se
representara as: 400 A.
A menos que el profesor indique otra cosa; cada prctica realizada se presenta a la semana
siguiente, antes de comenzar la siguiente clase prctica. Su manual de laboratorio constituye un
valioso registro, mantngalo al da, aplicando procedimientos que el profesor le haya asignado.
MATERIALES QUE EL ESTUDIANTE DEBE TENER EN CADA PRCTICA DE

LABORATORIO:
Guardapolvo blanco.
Manual de laboratorio.
Lpiz N. 2, o portamina0.5 B.
Borrador.
Laminas portaobjetos y laminillas cubreobjetos.
Una franela o tela nanz (25x25cm.)
Pinza de punta fina, estiletes, navajas nuevas, goteros largos.
Placa Petri.
Explicar: Pautas para presentacin de informes. Distribucin de parcelas y trabajos de

aplicacin.
Anexo: ficha de monitoreo de cultivo.
PRACTICA N 2
BSQUEDA Y ANLISIS DE LA INFORMACIN GENTICA DE
PLANTAS.
I. INTRODUCCION
Hasta hace 40 aos nuestras universidades tenan acceso a la informacin cientfica mediantes
libros que adquira de las empresas llamadas libreras y los artculos cientficos de
divulgacin los adquira por suscripcin a las revistas. Estas formas de trafico de informacin
era demasiado lenta, tanto asi que la formacin universitaria se haca tomando como
referencia solo algunos libros equivalentes al nmero de asignaturas del plan de estudio.
Actualmente el servicio de internet a revolucionado el criterio de acceso a la informacin
cientfica, rompiendo algunas frases como por ejemplo referencia bibliogrfica, pues el
prefijo biblio refiere a libro y este finalmente segn la real academia espaola se refiere al
conjunto de muchas hojas de papel u otro material semejante que, encuadernadas, forman un
volumen. El acceso a la informacin cientfica actualmente ya no est solo en los libros de
ndole fsico, tambin estn en su forma electrnica y que por lo tanto ya no podemos
llamarlos libros, los libros no son los nicos electrnicos hay revistas, pginas web y otras
que divulgan informacin cientfica, por lo tanto la frase referencia bibliogrfica por lo
menos podra ser cambiado a referencia cientfica para abarcar todas las formas que
divulgan informacin cientfica.
La produccin de conocimiento cientfico en gentica vegetal, consideramos que tienen
actualmente 3 caractersticas bsicas: el tiempo necesario para acceder a la informacin
cientfica ms reciente tiende a cero; su produccin y acceso es un negocio y por lo tanto
cualquiera puede acceder a ella; y finalmente su produccin se da en tan grandes cantidades y
de forma tan acelerada que una persona ya no alcanza a leer toda dicha informacin.
10
Dado que la actual formacin cientfica implica el acceso a cualquier forma de divulgacin de
informacin cientfica, consideramos de mucha importancia iniciar la asignatura abordando
dicho problema e identificando las pginas web que tienen respaldo cientfico.
II. CAPACIDADES
Busca adecuadamente las revistas cientficas de la asignatura y de su profesin.
Hace la cita u referencia cientfica de forma adecuada siguiendo el estilo VANCOUVER.
Selecciona, analiza y utiliza apropiadamente la informacin requerida.
III. MATERIAL Y EQUIPOS
Laptops o computadoras de mesa.
Buscadores de internet.
Revisas cientficas (Journals).
IV. PROCEDIMIENTO
Con la orientacin del docente procede a la bsqueda de informacin cientfica tales como
libros, revistas, pginas web u otras de inters para la asignatura y su profesin.
V. RESULTADOS
VI. DISCUSION
VII. CONCLUSION
VIII. CUESTIONARIO
1. -Presentar 5 PDF sobre temas de mejora gentica en una especie vegetal
2. -Explica cmo afectara en tu formacin profesional y vida profesional las tres (03)
caractersticas bsicas de la produccin de conocimiento cientfico en gentica vegetal.
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Base de datos Nature Publishing Group. Disponible en: [http://www.nature.com/].

Base de datos Cell Press. Disponible en: [http://www.cell.com/].
http://star.mit.edu/genetics/index.html?gclid=CJXoybHK28ACFehj7AodggcA1Q
http://jag.igr.poznan.pl/
http://www.journals.elsevier.com/journal-of-genetics-and-genomics/
http://www.ias.ac.in/jgenet/
http://escijournals.net/JPBG
http://journals.cambridge.org/action/displayJournal?jid=PGR
11
PRACTICA N 3
ANLISIS DE USO DE MARCADORES MOLECULARES PARA EL MEJORAMIENTO
GENTICO DE PLANTAS.
I. INTRODUCCION
1. Definicin
En la literatura se encuentran varias definiciones del trmino marcador molecular; CaetanoAnolles (1991) los define como segmentos de ADN que se consideran como marcas o puntos
de referencia para el anlisis del genoma. En 1996, Ferreira y Grattapaglia amplan el
concepto definiendo los marcadores moleculares como cualquier fenotipo molecular
originado de la expresin de un gen o un segmento especfico de ADN.
2. Caractersticas generales de los Marcadores Moleculares
A diferencia de los marcadores morfolgicos, los marcadores moleculares pueden ser
utilizados para la deteccin y caracterizacin de genotipos a partir de clulas o tejidos en
cualquier estadio fisiolgico, facilitndose as la aplicacin de mtodos tempranos de
seleccin y recombinacin de los individuos de inters para el mejorador gentico (Morell y
col., 1995).
Los marcadores morfolgicos son en su mayora dominantes o recesivos, sin embargo, la
expresin de los marcadores moleculares es codominante, pueden detectar un nivel de
polimorfismo elevado y tienen como ventajas adicionales su amplia distribucin a lo largo de
todo el genoma, su carcter heredable siguiendo el modelo de Mendel y los nulos o mnimos
eventos de pleiotropa y epistasia que tienen lugar, reduciendo junto a otros factores, la
interaccin genotipo-ambiente a su mnima expresin.
3. Tipos de Marcadores
Adems de los marcadores morfolgicos, se han descubierto otro tipo de marcadores
genticos como los isoenzimas en la dcada de los aos 70, y marcadores moleculares como
los RFLPs (restricted fragment length polymorphisms) en los aos 80, y los RAPDs (random
amplified polymorphic DNA) en los aos 90. Estos marcadores han permitido el confeccionar
mapas de ligamiento de alta densidad en el genoma.
Existen mapas de ligamiento con marcadores moleculares muy completos en varios cultivos
como eltomate, maz, trigo, cebada, soja, almendro, Brassica, etc. Estos marcadores con un
efecto neutro o al menos no adverso en la planta pueden ser una ayuda valiosa en la seleccin.
4. Clases de Marcadores Moleculares
Existen dos grandes clases de marcadores moleculares: los marcadores de postranscripcintraduccin, que son aquellos determinados por anlisis indirecto del DNA y los marcadores
del tipo pretranscripcin-traduccin, que han revolucionado la gentica vegetal a partir de la
introduccin de novedosas tecnologas que permiten el anlisis directo del DNA.
Marcadores moleculares del tipo postranscripcin-traduccin
Entre los marcadores moleculares del tipo postranscripcin-traduccin se encuentran las
isoenzimas; as se definen las mltiples formas moleculares de una misma enzima que existen
en una especie.
Brown y Moran, describen la tcnica isoenzimtica como el mejor mtodo corriente para
medir variaciones genticas cercanas al nivel del DNA, relativamente libres de efectos
ambientales y sobre un nmero de muestras manipulables.
12
La poca cantidad de tejido que se requiere para la elaboracin del ensayo, su relativamente
rpida ejecucin, el bajo costo del ensayo y la moderada facilidad para obtener y analizar
resultados, cuentan entre las principales ventajas de este marcador.
Los perfiles electroforticos se han empleado para varios sistemas enzimticos en la
clasificacin de especies y variedades, y han contribuido significativamente en diversos
aspectos del mejoramiento. Sin embargo, estos marcadores presentan algunas limitaciones en
particular cuando se requiere una cobertura ms amplia del genoma, debido a la escasa
disponibilidad de marcadores en el mismo y el bajo nmero de alelos por locus. Adems de
forma general, la especificidad de las formas isoenzimticas en algunos tejidos vegetales, la
influencia sobre la actividad enzimtica de las condiciones ambientales y los diferentes
estadios del desarrollo vegetal, cuentan entre sus desventajas.
Marcadores moleculares del tipo pretranscripcin-traduccin
Los marcadores moleculares de tipo ADN, son aquellos capaces de detectar el polimorfismo
gentico directamente a nivel de DNA. En este grupo se encuentran los RFLP (Fragmentos
Polimrficos de Restriccin), RAPD (DNA Polimrfico Amplificado al Azar), AFLP
(Polimorfismo de Longitud de Fragmentos Amplificados), entre otros y ocupan un peldao
superior en la escala evolutiva de los marcadores genticos, por las nuevas perspectivas que
brindan para identificar y mapear genes tiles, que pueden ser posteriormente incorporados y
expresados en el genoma vegetal (Ferreira y Grattapaglia, 1996).
RFLP (Restriction Fragment Lenght Polimorphic)
Se entiende por RFLP el polimorfismo de los fragmentos de restriccin, obtenidos por el corte
con una endonucleasa en la cadena doble del ADN, acoplado en el caso de ADN genmico
eucaritico, por hibridacin con sondas de secuencias homlogas de copia nica (Botstein y
col., 1980; Beckmann y Soller, 1986).
El empleo de los RFLP permite detectar variaciones producidas por procesos como las
deleciones, inserciones, o alteraciones en la secuencia diana de las endonucleasas de
restriccin (siendo esta su base gentica), tanto en poblaciones de la misma especie como
entre diferentes especies, lo cual resulta ventajoso atendiendo a que muy pocas variaciones
son expresadas en el fenotipo, mientras que muchas otras resultan silentes (Iglesias y Rojas,
1992).
De acuerdo con Beckmann y Soller (1986), se pueden distinguir dos campos principales de
aplicacin de los RFLP en el mejoramiento de las plantas. El primero est basado en la
utilizacin de los mismos como marcador gentico para determinar las relaciones genticas,
incluyendo aspectos esenciales como su uso en la identificacin de variedades, la proteccin
de los derechos del mejorador y las determinaciones de parentesco. La segunda rea de
aplicacin, est basada en el uso de stos como marcadores genticos para identificar y
mapear particularmente aquellos genes involucrados directamente en la determinacin de
caracteres cuantitativos, y el monitoreo de estos loci durante los programas de introgresin y
seleccin (Iglesias y Rojas, 1992).
RAPD (Ramdom amplified polymorphic DNA)
En 1990 dos grupos de investigadores desarrollaron prcticamente al unsono una tecnologa
basada en la tecnologa de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). En esencia la idea
consisti en utilizar un cebador corto y de secuencia arbitraria, que elimina la necesidad de
conocimiento previo de la secuencia. Estos dos grupos denominaron de forma diferente esta
tcnica: AP-PCR (Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction o reaccin de la polimerasa
con cebadores arbitrarios) y RAPD (Ramdom Amplified Polymorphic DNA o ADN
polimrfico amplificado al azar) desarrollada por Williams y colaboradores (1990).
13
Posteriormente Caetano-Anolles y colaboradores (1991) pusieron a punto otra variante que

denominaron DAF (DNA Finger Printing o amplificacin de huellas de DNA). Actualmente
se ha propuesto designar todas estas tecnologas como MAAP (Multiple Arbitrary Amplicon
Profiling).
La naturaleza molecular del polimorfismo RAPD no es enteramente conocida. Ferreira y
Grattapaglia (1996), basados en evidencias experimentales, sealan que diferencias de apenas
un par de bases (mutaciones puntuales) son suficientes para causar una no
complementariedad del cebador con el sitio de iniciacin y as impedir la amplificacin de
un segmento. Otras fuentes de polimorfismo pueden incluir delecciones o inserciones en los
sitios de iniciacin, que los coloque a una distancia superior a lo permisible y as impedir la
amplificacin de un segmento (Tingey y Del Tufo, 1993).
El polimorfismo gentico detectado con este marcador es binario lo que hace que la
naturaleza de la tcnica RAPD sea dominante, los individuos heterocigticos no pueden ser
diferenciadas directamente de los homocigticos, esta caracterstica constituye una de sus
principales limitaciones determinando un bajo contenido de informacin gentica por locus
(Williams y col., 1990). Sin embargo, las evidencias existentes, indican que los loci de los
marcadores RAPD estn distribuidos al azar a lo largo del genoma, lo que permite detectar
una gran cantidad de polimorfismo, incluso en regiones de DNA repetitivo (Rojas y col.,
1994).
AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism)
La tcnica del polimorfismo de longitud de fragmentos amplificados, se considera una tcnica
intermedia entre RFLP y RAPD, pues involucra una digestin del DNA con enzimas de
restriccin y la amplificacin de los fragmentos generados mediante un PCR especfico. Los
productos amplificados son usualmente separados sobre un gel de secuenciacin y pueden ser
revelados despus por radiografa o fluorescencia. El polimorfismo creado ser el resultado de
cambios en los sitios de corte de las endonucleasas y de la variacin en nmero y longitud del
amplicon seleccionado para la amplificacin de los distintos segmentos (Caetano-Anolles y
col., 1991).
Estos marcadores han encontrado un amplio uso en muchas aplicaciones de la biologa
molecular, especialmente en plantas, destacndose por la alta identificacin de genotipos y
evaluacin del germoplasma que permiten (Paterson y col., 1991).
5. Usos de los marcadores
Los marcadores moleculares se han utilizado o se pueden utilizar en los siguientes aspectos de
la mejora gentica de plantas:
(A) Estimacin de distancias genticas entre poblaciones, variedades, lneas puras e hbridos
(3). Esto permite: (i) la clasificacin taxonmica de ecotipos o muestras que acceden a los
Bancos de Germoplasma como un complemento de los datos morfolgicos que han sido
utilizados desde los tiempos de Linneaus; y (ii) la asignacin de lneas puras a grupos
heterticos con objeto de predecir el valor de los hbridos resultantes del cruce. Las distancias
genticas ms usadas son la modificada de Rogers (9) utilizada con poblaciones segregantes y
la de Nei-Li (7) utilizada con lneas puras e hbridos.
(B) Identificacin y distincin de variedades, lneas puras e hbridos para proteger los
derechos del obtentor vegetal en el Registro de Variedades Protegidas. Los marcadores de
DNA permiten una distincin ms precisa de genotipos que los "descriptores" morfolgicos
requeridos hoy da. Sin embargo estos marcadores moleculares no han sido todava adoptados
por los organismos oficiales encargados de la proteccin de variedades.
14
(C) Establecimiento de relaciones de parentesco o "pedigree" entre lneas o variedades para

realizar estudios genticos. El mtodo es similar al utilizado en las pruebas de paternidad y
parentesco en gentica humana.
(D) Localizacin e identificacin de genes cualitativos o mayores y tambin de genes con
efectos pequeos afectando a caracteres cuantitativos (los as llamados QTLs).
6. Aplicaciones prcticas de los Marcadores
Adems de la identificacin de genes mayores asociados a marcadores moleculares (1), se han
detectado QTLs en varios cultivos, por ejemplo en tomate, maz, soja, cebada, etc. Se han
identificado QTLs responsables del contenido de los slidos solubles del tomate en la
generacin de retrocruzamiento derivada del cruce entre dos lneas que diferan ampliamente
en el contenido de los slidos solubles (8 y 12). Tambin, varios QTLs del maz controlando
el rendimiento y otros caracteres agronmicos (altura de la planta, longitud de la espiga, etc.)
han sido identificados y localizados en las regiones cromosmicas del hbrido B73 x Mo17,
cultivado extensamente en todo el mundo (11). Otros QTLs responsables de la resistencia del
maz al gusano europeo del taladro del tallo (Ostrinia nubilalis) han sido detectados en
poblaciones segregantes. Otros muchos ejemplos podan citarse.
Las regiones cromosmicas portadoras de los QTLs identificados mediante los marcadores
son demasiado largas (5-30 cM) para aislar, clonar y manipular el DNA informativo del QTL
por s mismo. Por tanto la estrategia que se sugiere en la mejora de plantas es seleccionar
individuos portadores de marcadores con QTLs favorables y asistir o ayudar en la seleccin
cuando se empleen los mtodos convencionales de mejora; por ejemplo en la seleccin
genealgica, en la seleccin con base en "test-crosses", o en la seleccin en
retrocruzamientos, etc. El mtodo es sencillo, seguir la pista del gen marcador asociado al
QTL favorable a travs de las sucesivas generaciones de seleccin.
Este tipo de seleccin asistida se est usando ya hoy da en varios laboratorios de
Universidades, Centros Pblicos y Empresas privadas grandes, pero es presumible que en el
futuro pueda convertirse en un proceso rutinario en la mayora de los programas de mejora de
plantas, especialmente para el desarrollo de lneas puras y de hbridos.
LOS MICROSATLITES COMO MARCADORES MOLECULARES EN MAZ: Las
secuencias simples repetitivas (SSRs, simple sequence repeat) o microsatlites son secuencias
de ADN que consisten de dos a cinco unidades esenciales de nucletidos como AT, CTT y
ATGT las cuales estn arregladas en repeticiones en tndem. Estas pequeas secuencias
repetitivas de ADN, las cuales se extienden a lo largo del genoma de los eucariontes,
proporcionan las bases del sistema de marcadores genticos multiallicos y codominantes,
basados en la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). Las regiones a los flancos de los
microsatlites son generalmente conservadas entre los genotipos de la misma especie. Los
imprimadores para la PCR, correspondiente a las regiones en los flancos, son utilizados para
amplificar los fragmentos que contienen los SSR de ADN. La longitud del polimorfismo es
generada cuando los productos de la PCR de diferentes individuos varan en largo como
resultado de la variacin en el nmero de unidades repetidas en los SSRs (Cregan y Quigley,
1997).
Los microsatlites demostraron inicialmente, ser altamente abundantes y polimrficos en
humanos y otros eucariontes, bsicamente mamferos (Hamada et al., 1982). Las longitudes
de polimorfismos de alelos especficos son bien conocidas en maz. Si bien poco es sabido
sobre la funcin de los microsatlites dentro o cerca de los genes en las plantas, su
prevalencia, alto grado de variabilidad en el nmero de repeticiones y su herencia mendeliana
15
lo han convertido en un marcador muy til en el mapeo de genoma en maz y el resto de

plantas, as como un importante marcador para los estudios de mejoramiento, especialmente
la seleccin asistida por marcadores moleculares (Phelps y Buckner, 1995).Los microsatlites
han sido empleados para la construccin de mapas de ligamiento en varias especies incluidas
el maz (Cregan y Quigley, 1997). Se consideran los microsatlites como la segunda
generacin de marcadores moleculares. Los microsatlites son una fuente abundante de
marcadores, debido a que ellos son altamente polimrficos y pueden ser amplificados por
PCR. La secuencia resultante de microsatlites sigue una herencia simple mendeliana y ofrece
las ventajas de las secuencias etiquetadas, ya que puede reproducirse su amplificacin (Senior
y Heun, 1993).
Para los programas de mejoramiento asistido por marcadores, es esencial que la obtencin de
marcadores de ADN sea fcil (Gupta et al., 1994). Para estudiar la ocurrencia de
microsatlites y su herencia en maz, Senior y Heun, (1993), realizaron una bsqueda de ms
de 280 secuencias de maz de la GenBank. Con base en estas secuencias se determinaron
seis scuencias SSRs, las que fueron seleccionadas conforme a las secuencias flancos y con
base en las cuales se disearon los imprimadores en direccin 5 3 y 3 5, para lograr la
amplificacin de los microsatlites en PCR. Posteriormente evaluaron los imprimadores en 8
lneas mejoradas de maz y se encontraron polimorfismos para cada juego de imprimadores
que cayeron en el mbito de las expectativas de los autores, abundancia de microsatlites
trimricos dentro de las regiones codificantes (Senior y Heun, 1993).
Chin et al, (1996), realizaron una bsqueda de secuencias en las bases de datos GenBank y
EMBL. Encontraron un total de 576 secuencias, de las cuales 200 representaron potenciales
microsatlites. Las repeticiones encontradas variaron de dos a 6 nucletidos y repeticiones
imperfectas, donde las ms abundantes se encontraron en aquellas repeticiones de 2 a 5
nucletidos. Las tres ms abundantes clases de microsatlites encontradas fueron las
repeticiones de (AG/CT)n,(CCT/GGA)n, y (CCG/GGC)n, estas fueron probadas en 9 lneas
mejoradas de maz. De los 200 potenciales microsatlites 69 revelaron polimorfismos, donde
las repeticiones de dos, tres y cuatro nucletidos mostraron mayor nmero de loci
polimrficos.
La evaluacin de la diversidad gentica del maz se ha circunscrito en la mayora de casos a
probar diferencias genticas entre lneas mejoradas con potencial para el desarrollo de
materiales hbridos y poco se ha realizado en cuanto a evaluar la variabilidad gentica de
materiales silvestres o variedades indgenas de maz. Con el uso de microsatlites, Senior y
Jun (1993), en uno de los primeros trabajos en este rubro en maz, encontraron un promedio
de 3.5 SSRs polimrficos entre ocho lneas mejoradas de maz. La informacin contenida en
un marcador puede ser determinada por su habilidad de diferenciar entre individuos. En un
estudio de diversidad entre 12 lneas endocriadas de maz, se encontr que la heterocigocidad
de los marcadores de RFLP, en la evaluacin de 96 marcadores, fue de una proporcin de
0.58, comparada con microsatlites que van de 0.73 a 0.79, para secuencias diferentes de
dinucletidos (AG y AC). De acuerdo a este estudio, la informacin contenida en los SSRs,
como medida de heterocigocidad esperada, es una funcin del nmero de alelos y la
frecuencia de cada alelo en la poblacin bajo estudio (Taramino y Tingey, 1996).
La informacin sobre la diversidad del germoplama y las relaciones entre materiales lite de
mejoramiento, tiene un impacto significativo en el mejoramiento de plantas. Pejic et al.
(1998), encontraron que diversos mtodos distinguieron claramente a 33 lneas endocriadas de
maz, donde los microsatlites proveyeron del ms alto nivel de discriminacin entre
cualquier comparacin por pares de lneas endocriadas. En este trabajo se concluye que con
excepcin de los RAPDs (Random amplified Polimorphic DNA), Los RFLP, AFLP, Y SSR
16
proveen informacin consistente para la identificacin y evaluacin de pedigr de materiales

de maz. Los SSR y AFLP ofrecen mejores ventajas en virtud de su susceptibilidad a la
automatizacin y porque la tcnica de aplicacin es relativamente sencilla.
Phelps y Buckner, (1995), estudiaron la longitud de polimorfismos y su asociacin con la
repeticin de microsatlites dentro del gene Y1,el cual codifica para la enzima fitoena
sintetasa, una enzima que condensa dos molculas de geranil-geranil pirofosfato, en la
molcula de la fitoena durante la biosntesis de carotenoides en maz. Buscaban determinar si
el microsatlite CCA existe en otros alelos del gene Y1. Estudiaron la manifestacin del gene
y Encontraron que los polimorfismos para alelos especficos existen en la regin del gene Y1.
Encontraron que las secuencias para cada alelo estudiado contenan 5 y 11 repeticiones de
CCA.
Se encontr que en nueve feonotipos estudiados la repeticin estaba asociada al gen, pero no
se determin su relacin con la expresin del mismo. El teocinte Zea luxurians, pariente
silvestre del maz de origen guatemalteco, contiene cinco repeticiones de CCA y es probable
que contenga este comportamiento debido posibles introgresiones de genes desde el maz o
bien los microsatlites en maz son consecuencia de la evolucin o coevolucin con sus
parientes silvestres (Phelps y Buckner, 1995).
Estudios similares hechos por los mismos autores y Hall (1996), entre 7 teocintes y 3 lneas
endocriadas de maz, estudiaron al microsatlite CCAn as como la secuencia adyacente a
este microsatlites, exhiben un alto grado de variabilidad y puede ser til para la
diferenciacin entre especies o para establecer relaciones filogenticas.
Echeverrigaray et al., (1996), encontraron en un estudio de anlisis de fingerprinting para
evaluar la diversidad gentica entre lneas de maz. Mediante la hibridacin de ADN con
sondas que corresponden a SSRs, determinaron que mediante el uso de la sonda puede
determinarse en un dendrograma las proporciones de similaridad entre las diferentes lneas de
maz en estudio.
Uno de los principales problemas sobre los microsatlites es que es necesario conocer las
secuencias repetitivas y las secuencias en los flancos. Es necesario para esto entonces realizar
un arduo trabajo inicial de secuenciacin del genoma de la especie para establecer cules son
las secuencias repetitivas y cules son los flancos acompaantes para disear los
imprimadores y entonces aplicar la PCR y realizar ensayos para establecer la calidad de los
microsatlites. Para especies cercanas al maz como el sorgo (Sorghum bicolor), se trat de
resolver el problema al usar datos de bases de datos en donde se contienen las secuencias
genmicas del maz (Brown et al., 1996). Estos autores usaron 23 pares de imprimadores
generados por los microsatlites de maz de GENEBANK. Estos experimentos arrojaron
varios resultados:
1.
no hubo productos
2.
mltiples productos desde 20 hasta ms de 1000 pares de bases (bp).
3.
una discreta banda monomrfica
4.
una discreta banda polimrfica.
La bsqueda en bases de datos como nica estrategia para buscar microsatlites, en este caso,
es improbablemente suficiente para proveer un rendimiento adecuado de marcadores en
cualquier especie vegetal (Brown et al., 1996).
PERSPECTIVAS DE LOS MICROSATLITES
En la actualidad los microsatlites son considerados las ms poderosas fuentes de
polimorfismos. Es muy probable, si se resuelven los problemas de secuenciacin, que
17
terminen sustituyendo al resto de marcadores moleculares, al menos en las especies ms

estudiadas. Aunque an no se comprende completamente el papel de los microsatlites en los
procesos generales de herencia y expresin gnica, su uso como marcadores ha sido ya
manifestado y comprobado (Cregan y Quigley, 1997).
Por otro lado, una nueva generacin de marcadores est surgiendo, los polimorfismos de
nucletidos simples (Single nucleotide polymorphisms) SNPs (lase Snips), son
considerados como la ms comn forma de polimorfismos de ADN que puede ser hallado en
cualquier genoma. En cultivos como el maz, estos pueden ser usados para fingerprinting de
germoplasma, conversin de retrocuces asistidos por marcadores o para el mejoramiento
asistido por marcadores. Los SNPs son susceptibles de automatizacin y pueden ser
potencialmente usados para crear un mapa gentico de muy alta densidad. Algunos SNPs en
regiones codificantes pueden ser estar altamente relacionados con la alteracin de los
fenotipos (Bhattramakki, et al., 2000).
En la tcnica de los SNPs, la tcnica de los gene-chips, el ADN correspondiente a miles de
genes, es arreglado en pequeas matrices (chips), es entonces hibridizado con ADN copia,
previamente marcado, proveniente de un tejido seleccionado de antemano. La informacin es
leda por un dispositivo especial y puede ser descargado directamente a una computadora
donde es analizado (Montaldo, et al., 1998).
II. CAPACIDADES
Analiza el uso de marcadores moleculares para el mejoramiento gentico de plantas.
Laptops o computador de mesa.
Hojas bond y lapiceros
IV. PROCEDIMIENTO
Absolver las preguntas planteados de acuerdo a la teora recibida:
V. RESULTADOS
VI. DISCUSION
VII. CONCLUSION
VIII. CUESTIONARIO
Explique las aplicaciones de los marcadores moleculares en el mejoramiento gentico de

cultivos hortcolas
Explique las propiedades de los marcadores moleculares
Elaboracin de mapas genticos y bsqueda de marcadores moleculares ligados a genes de
inters agronmico
Marcadores ligados a genes de resistencia a enfermedades en cultivos hortcolas
18
Marcadores moleculares ligados a caracteres de herencia cuantitativa (QTL)
Ayala F (1986). Gentica Moderna. Ed. Latinoamericana. Nueva York. 984p.

Baldwin R (1983). Gentica Elemental. Primera edicin. Edit. Limusa. Mxico. 648p.
Cubero J (2003). Introduccin a la Mejora Gentica Vegetal. 2 Ed. Mundi-Prensa
Griffiths A, Miller J, Suzuki D, Lewotin R (2003). Gentica moderna. Sptima Edic. McGraw
Hill. 870p.
Jenkins C (1992). Gentica. Mc Graw-Hill Latinoamericana. Mxico. 568p.
Klug W, Cummings M, Spencer C (2001). Conceptos de Gentica. 5 Edicin. Prentice Hall.
856p.
Stansfield W (1998). Gentica. Mc Graw-Hill Latinoamericana. Mxico. 894p.
Strickberger M (1998). Gentica. 3 edicin. Editorial Omega S.A. Barcelona (Espaa). 869p.
19
PRCTICA N 4
ANLISIS DE MITOSIS Y MEIOSIS EN PLANTAS.
I. INTRODUCCION
La divisin celular consta de dos procesos fundamentales: la mitosis o divisin del ncleo y la
citocinesis o divisin del citoplasma. Ambos procesos son independientes pero deben ocurrir
de forma sincronizada. El resultado son dos clulas hijas con una dotacin cromosmica
idntica entre s y a la de la clula madre.
La mitosis es el mecanismo estable que tienen las clulas para distribuir de forma exacta la
informacin gentica entre las clulas hijas durante las divisiones celulares. Durante la mitosis
los cromosomas se reparten equitativamente, incluyndose una dotacin cromosmica
completa en cada clula hija. Para facilitar este reparto, los cromosomas se condensan
haciendo patente su morfologa. Esto hace que podamos conocer en ese momento cuntos
cromosomas tiene una especie, dnde se localiza el centrmero (o constriccin primaria), el
nmero de brazos cromosmicos que presentan o la existencia de constricciones secundarias y
satlites cromosmicos.
Cuando una clula no est dividindose se dice que est en interfase, lo que corresponde al
lapso de tiempo que transcurre entre dos mitosis sucesivas. Durante este periodo la cromatina
est descondensada y hay una gran actividad metablica porque es cuando la mayor parte de
los genes se expresan, aunque en cada tipo celular lo harn solo los necesarios para que
desarrolle su funcin especfica.
Un suceso importante de la interfase es la replicacin del ADN, que ocurre en el periodo
denominado S, tras la cual los cromosomas ya tienen dos rplicas idnticas denominadas
cromtidas hermanas. Esta fase S va precedida por el periodo G1 y seguida del periodo G2 en
los que hay crecimiento celular, actividad transcripcional y la clula se prepara para dividirse.
A continuacin se iniciara la mitosis.
Si despus de una mitosis la clula no va a dividirse de nuevo, se queda en lo que llamamos
fase G0. Una vez que se inicia, el proceso mittico transcurre de forma continua sin que haya
interrupciones, pero ocurren una serie de sucesos destacados que son clave para que el reparto
de la informacin gentica sea correcto y en los que nos basamos para distinguir de forma
arbitraria cuatro etapas:
1. Profase
2. Metafase
3. Anafase
4. Telofase
La cronologa y caractersticas de los sucesos clave mitticos que describiremos a
continuacin son comunes a la mayora de los organismos donde se ha estudiado. No
obstante, se han descrito excepciones en algunas especies afectando al momento en que se
inicia la condensacin cromosmica (hay especies en las que los cromosomas no se
condensan nunca), a la desaparicin de la membrana nuclear o, por ejemplo, al
establecimiento de la placa metafsica. La anafase parece ser la etapa ms conservada en los
diferentes organismos.
Profase
20
Durante este periodo la fibra de cromatina, que ha ido organizndose en plegamientos cada
vez ms complejos, aparece como cromosomas visibles que van condensndose
gradualmente. Hay 2n cromosomas en la clula y cada cromosoma consta de dos cromtidas
hermanas con igual informacin y morfologa. stas aparecen unidas a nivel del centrmero y
a lo largo de los brazos cromosmicos gracias a complejos proteicos. Al final de la profase se
desorganizan los nuclolos y desparece la membrana nuclear cuyos componentes quedan
dispersos en el ncleo.
Metafase
Los cromosomas se encuentran ahora libres en el citoplasma y los centrmeros de cada
cromosoma contactan con las fibras del huso, que se organizan en el centro organizador de
microtbulos (MTOC), formado por los centriolos, que actan como centro de atraccin de
los cromosomas hacia los polos, y la masa amorfa pericentriolar. La intervencin de las fibras
del huso y de otras protenas de movimiento cromosmico permite a los cromosomas
organizarse en la llamada placa metafsica. Cada cromtida hermana se orienta hacia un polo
distinto lo que garantiza el reparto de la informacin gentica de cada cromosoma a las dos
clulas hijas.
Ahora los cromosomas alcanzan su mximo grado de condensacin y su morfologa se hace
patente Por eso en esta fase es donde mejor se pueden estudiar todas las caractersticas
morfolgicas de los cromosomas, lo que ser de utilidad para, por ejemplo, identificar
homlogos y confeccionar un cariotipo o realizar estudios comparativos entre especies y
conocer la evolucin cariotpica ocurrida dentro de un taxn.
El centrmero es la constriccin primaria que aparece en todos los cromosomas y donde se
asocian los cinetocoros o estructura proteica a la que se unen las fibras de huso mittico. Su
posicin define el nmero de brazos de un cromosoma. Si est situado en un extremo del
cromosoma, ste tendr un solo brazo y si est en otra posicin veremos cromosomas con dos
brazos. El cinetocoro funciona a modo de un interfaz entre el centrmero y las fibras del
huso.
En algunos cromosomas aparecen constricciones secundarias, normalmente asociadas a la
regin organizadora nucleolar (NOR), donde se encuentran los genes para ARN ribosmico.
El fragmento de cromosoma que va desde la constriccin secundaria al telmero se denomina
satlite cromosmico. El telmero constituye el extremo cromosmico, por lo que hay uno en
cada brazo cromosmico y juega un papel fundamental en el mantenimiento de la integridad
del cromosoma.
Anafase
La anafase es, en general, la etapa ms corta de la mitosis Cada centrmero se divide en dos y
se desorganizan las protenas que mantenan unidas a las cromtidas hermanas, lo que les
permite segregar (migrar) a polos opuestos. En cada polo celular veremos un grupo de
cromosomas (2n) con una sola cromtida orientados hacia el polo correspondiente.
Telofase
Los cromosomas agrupados en cada polo comienzan a descondensarse y los nuclolos y la
membrana nuclear vuelven a organizarse a partir de material preexistente y de nueva sntesis.
La divisin celular se completa al final de esta etapa con la citocinesis, donde hay tambin un
reparto de los orgnulos y componentes citoplsmicos a las dos clulas hijas, aunque no se
realiza de forma tan precisa como durante la mitosis. El resultado final del proceso mittico
son dos clulas con 2n cromosomas.
La meiosis es un proceso que consta de dos divisiones celulares consecutivas sin que haya
replicacin del ADN entre ellas. Su funcin es diferente a la de la mitosis ya que al final del
proceso lo que se consigue es reducir el nmero cromosmico a la mitad, obteniendo gametos
21
haploides en los organismos con reproduccin sexual. La forma para conseguir esa reduccin
es que los cromosomas con el mismo tipo de informacin gentica u homlogos se apareen
primero para despus segregar a distintos polos celulares. Durante el apareamiento
cromosmico y la sinapsis ambos homlogos pueden recombinar, es decir, intercambiar
segmentos cromosmicos, generando nuevas combinaciones allicas en los cromosomas
resultantes. Las diferentes combinaciones posibles de cromosomas paternos y maternos que
puedan quedar incluidas en un gameto, como consecuencia de la segregacin de homlogos,
es otra fuente adicional de variabilidad gentica.
Las dos divisiones celulares de la que consta la meiosis se denominan meiosis I (reduccional)
y meiosis II (ecuacional). Como decamos, la meiosis I separa cromosomas homlogos y
combina informacin gentica y la segunda divisin reparte equitativamente las cromtidas
que se haban replicado en la interfase premeitica. En la meiosis tambin distinguimos cuatro
etapas en cada una de las dos divisiones: profase, metafase, anafase y telofase. Las
caractersticas de cada etapa son las siguientes:
MEIOSIS I
Profase I. Es una etapa larga y compleja donde suceden uno de los aspectos ms destacados
del proceso meitico: el sobrecruzamiento y la recombinacin. Se divide en cinco subetapas:
leptotene, cigotene, paquitene, diplotene y diacinesis. Leptotene. Se caracteriza por el inicio
de la condensacin de los cromosomas que aparecen como una maraa dentro del ncleo. En
este momento los cromosomas tienen dos cromtidas pero an no son visibles al microscopio.
Cigotene. Esta es la etapa donde ocurre el fenmeno de sinapsis o apareamiento cromosmico
en el que los cromosomas homlogos se asocian a lo largo de toda su longitud, lo que permite
que ms tarde puedan intercambiar segmentos cromosmicos (sobrecruzamiento) y
recombinar. Cada pareja de homlogos apareados constituye lo que se llama un bivalente, que
consta de cuatro cromtidas. Paquitene. El grado de condensacin cromosmica es mayor y
los bivalentes aparecen ms cortos y gruesos, permaneciendo los homlogos unidos a lo largo
de toda su longitud. En esta etapa ocurre el sobrecruzamiento y la recombinacin.
Diplotene. Sigue aumentando la condensacin de los bivalentes. Los cromosomas homlogos
comienzan a separarse a nivel del centrmero, quedando unidos por unos puntos de contacto
denominados quiasmas que son la manifestacin citogentica del sobrecruzamiento. Sin
embargo, las cromtidas hermanas de cada homlogo an permanecen unidas. El nmero de
quiasmas que se establece vara entre especies, poblaciones, individuos y tipo celular de que
se trate. El tamao del bivalente tambin determina el nmero de quiasmas que en l se
organizan. En la meiosis femenina de la especie humana, por ejemplo, se observan una media
de dos a tres quiasmas por bivalente siendo los cromosomas grandes los que muestran un
mayor nmero de quiasmas.
Diacinesis. Los bivalentes muestran ya un nivel muy alto de condensacin, apareciendo como
cuerpos gruesos. Los centrmeros de cada pareja de homlogos inician la coorientacin hacia
polos opuestos. Al final de la diacinesis, y por tanto, de la profase I, se desorganizan los
nucleolos y la membrana nuclear, al igual que ocurra en la profase mittica.
Metafase I. Los bivalentes exhiben su mximo grado de condensacin. Los centrmeros de
cada homlogo se unen a las fibras del huso reorganizndose en la placa metafsica. A
diferencia de la metafase mittica, sobre la placa ecuatorial se disponen parejas de
cromosomas apareados o bivalentes (n bivalentes) en lugar de cromosomas aislados (2n).
Anafase I. Se produce la migracin o segregacin de los cromosomas homlogos de cada
bivalente a polos opuestos. Este acontecimiento es de suma importancia ya que tiene como
consecuencia la reduccin del nmero cromosmico (n cromosomas en cada polo). Las
cromtidas hermanas de cada cromosoma permanecen todava unidas pero solo a nivel del
centrmero, a diferencia de la mitosis, donde los centrmeros se dividen y ambas cromtidas
se separan completamente y segregan en la anafase mittica.
22
Telofase I. Cuando finaliza la segregacin anafsica de los homlogos, stos se agrupan en

ambos polos celulares. Los cromosomas se descondensan y reaparecen los nuclolos y la
membrana nuclear. Finalmente se produce la citocinesis dando lugar a dos clulas hijas.
MEIOSIS II
La segunda divisin meitica es muy similar al proceso mittico pero hay una serie de
diferencias fundamentales. Cuando se inicia la meiosis II, los cromosomas ya estn replicados
y muestran dos cromtidas, por lo que en la interfase previa (o intercinesis) no hay replicacin
del ADN. Esta segunda divisin consta igualmente de cuatro etapas: profase II, metafase II,
anafase II y telofase II.
Profase II. Es una etapa de corta duracin donde aparecen n cromosomas con ambas
cromtidas divergentes, como si se repelieran y unidas nicamente por su centrmero, lo que
les da un aspecto de aspa.
Metafase II. Los n cromosomas se unen a las fibras del huso y se organizan en la placa
metafsica.
Anafase II. Cada centrmero se divide y las cromtidas hermanas segregan hacia polos
opuestos. En cada polo celular observaremos n cromosomas con una sola cromtida.
Telofase II. Finaliza la migracin de los n cromosomas con una sola cromtida y empiezan a
descondensarse. Aparecen de nuevo el nucleolo y la membrana nuclear. Se lleva a cabo la
citocinesis
Al final de todo el proceso meitico se obtienen cuatro clulas haploides, con n cromosomas.
La observacin de la meiosis que se realiza en esta prctica va a permitir observar fenmenos
genticos importantes:
Reduccin del nmero cromosmico durante la formacin de gametos haploides:
observacin de la segregacin de cromosomas homlogos en anafase I y cromtidas hermanas
en anafase II.
Generacin de variabilidad gentica durante la meiosis:
a) Combinacin al azar de cromosomas paternos y maternos: observacin de la segregacin
de cromosomas paternos y maternos para cada tipo cromosmico durante la anafase I.
b) Recombinacin gentica entre cromosomas homlogos: observacin de apareamiento y los
quiasmas entre cromosomas homlogos.
Resumen de los nmeros de cromosomas y de la cantidad de ADN que hay en cada etapa:
II. CAPACIDADES
Observar con tcnicas citogenticas evidencias de los fenmenos genticos como
replicacin del ADN y la cromatina: cromosomas con dos cromtidas.
Conservacin del material hereditario y constancia del nmero cromosmico:
segregacin de las cromtidas hermanas de cada cromosoma durante la anafase
Laptops o computador de mesa.
IV. PROCEDIMIENTO
4.1. OBSERVACIN DE LA MITOSIS
El material que necesitamos para poder estudiar la mitosis debe ser un tejido en divisin
celular activa. En animales se usa mdula sea de huesos largos, bazo, ciegos gstricos y
cultivos celulares como, por ejemplo, de linfocitos. En plantas se utiliza muy frecuentemente
el extremo apical de la raz (meristemo apical), pero pueden utilizarse otros materiales como
23
pices de hojas u ovarios de las flores. En esta prctica vamos a utilizar races de la especie
Scilla autumnalis.
Los bulbos de ambas especies se han mantenido en cultivo hidropnico con el fin de que
desarrollen races. Una vez obtenidas, se han cortado los extremos de las races y han sido
tratadas con colchicina al 0.005% durante 4h para impedir la formacin del huso mittico y
provocar as la acumulacin de clulas en metafase, donde veremos mejor la morfologa
cromosmica. La colchicina tiene el efecto aadido de condensar algo ms los cromosomas y
al no existir huso mittico es ms fcil visualizar clulas con los cromosomas bien separados.
Despus hay que fijar las races tratndolas con un fijador compuesto por una mezcla de
etanol y cido actico glacial en proporcin 3:1. Esto consigue coagular los contenidos
celulares para que retengan la forma, estructura y posicin. A las races de ajo se las somete
tambin a una hidrlisis en ClH 1N a 60C durante 5 min, para relajar la estructura del ADN y
facilitar la posterior tincin de los cromosomas con los colorantes bsicos (orcena, por
ejemplo) que reaccionan con los grupos aldehdos de los nucletidos, tiiendo as los
cromosomas.
Obtencin de las preparaciones
1. Colorear las races con orcena actica al 1% durante 30 min.
2. En un portaobjetos limpio, colocado sobre un papel de filtro, depositar una gota de orcena
del dimetro de un cigarrillo y sobre sta colocar una raiz.
3. Con la aguja enmangada y la lanceta se corta el extremo del pice, que se reconoce por
colorearse ms oscuro que el resto de la raiz y acabar en punta.
El meristemo se desprende fcilmente de la raiz, por lo que si hubiera dificultad en realizar
esta operacin, significara que no se trata del pice meristemtico.
4. Retirar el resto de la raz, dejando nicamente el pice sobre la gota de orcena. Con la base
de la aguja enmangada, se macerar hasta conseguir que se divida en varios trozos ms
pequeos.
5. Colocar sobre la gota de orcena un cubreobjetos limpio y desengrasado y proceder al
aplastamiento del material. Para ello, sujetar por un borde con un trozo de papel de filtro y
golpear suavemente con la punta de la aguja enmangada, haciendo que desaparezcan las
burbujas de aire que hayan quedado atrapadas y el exceso de colorante. Colocar un papel de
filtro sobre el cubreobjetos y con el dedo pulgar presionarlo, evitando que el cubreobjetos se
deslice respecto al portaobjetos.
Observacin cromosmica
Una vez que hemos obtenido la preparacin cromosmica la observamos al microscopio para
su estudio.
Las caractersticas propias de los tipos celulares que podris observar son las siguientes
Interfase (no es una fase de la mitosis):
Cromatina descondensada.
Nmero y tamao de los nucleolos.
Profase:
Inicio de condensacin cromosmica.
Los nucleolos.
Metafase:
Disposicin de los cromosomas en la placa metafsica.
Nmero de cromosomas y todos los detalles que se puedan identificar de la morfologa
cromosmica: centrmero, brazos cromosmicos, nmero de cromtidas, constricciones
secundarias y satlites.
A partir de una microfotografa de esta fase se puede estudiar el cariotipo de una especie (ver
ms adelante).
Anafase:
24
Orientacin de los centrmeros y los cromosomas hacia los polos celulares.

Migracin y segregacin de cromtidas hermanas.
Estructura simple (una sola cromtida) de los cromosomas.
Telofase:
Agrupacin compacta de los cromosomas en ambos polos celulares.
Inicio de descondensacin de los cromosomas.
Aparicin del tabique entre los dos ncleos recin formados.
Realizacin de un cariotipo
El conjunto de rasgos de los cromosomas en metafase, referidos a su nmero, tamao,
posicin del centrmero, nmero y posicin de parejas con constriccin secundaria es un dato
constante para todas las clulas normales de un individuo y de todos los individuos normales
de una especie.
A partir de una microfotografa donde los cromosomas aparezcan bien separados, se recortan
stos, emparejndolos por el tamao (en milmetros), por la posicin de los centrmeros y
constricciones secundarias. Sobre una cartulina se pegan los cromosomas de modo similar a la
observada en la Figura 4b, teniendo en cuenta las siguientes condiciones:
1. Los centrmeros irn colocados sobre una lnea horizontal.
2. Los brazos largos irn situados hacia la parte inferior de dicha lnea.
3. Las parejas cromosmicas sern ordenadas de mayor a menor tamao.
Obtencin de las preparaciones meiticas
El material necesario para el estudio de la meiosis son los tejidos donde tiene lugar la
produccin de los gametos masculinos y femeninos, que en animales son los testculos y los
ovarios, respectivamente. La produccin de vulos se realiza mediante el proceso de
ovognesis y la de espermatozoides a travs de la espermatognesis.
En plantas superiores el rgano reproductor es la flor, que puede contener tanto rganos
reproductores femeninos (gineceo) como masculinos (androceo) o existir flores
exclusivamente femeninas o masculinas, en pies de plantas diferentes (dioicas) o en el mismo
pie de planta (monoica). Los gametos masculinos o granos de polen (microsporas) se generan
en las anteras y los gametos femeninos u vulos (megasporas) en el ovario.
En esta prctica vamos a estudiar la espermatognesis en saltamontes ya que en stos los
ncleos muestran pocos cromosomas y de gran tamao, facilitando su estudio. Las
preparaciones cromosmicas se van hacer con testculos foliculares fijados de machos de
saltamontes. La obtencin del material necesario para las preparaciones requiere que
previamente hayamos anestesiado un macho con acetato de etilo y procedido a su diseccin
para la extraccin de la masa testicular donde se encuentran los folculos testiculares.
Posteriormente se fijan los testculos en etanol:cido actico en proporcin 3:1. Despus de
trascurrido un tiempo mnimo de una hora, el material est listo para su estudio.
La metodologa para la obtencin de preparaciones cromosmicas vara en funcin de las
caractersticas del material utilizado. Las preparaciones cromosmicas de folculos
testiculares se hacen por aplastamiento, siguiendo un procedimiento algo diferente al que
hemos utilizado para el estudio de la mitosis en plantas. En este caso el procedimiento que
debemos seguir es el siguiente:
1. Limpiar un portaobjetos desengrasado y colocar sobre papel de filtro.
2. Depositar en el centro del portaobjetos una gota pequea de orcena lactopropinica y
poner un folculo en ella.
25
3. Macerar el folculo golpendolo directamente con el extremo plano de un objeto metlico o

de plstico (un bolgrafo, una aguja enmangada, etc.).
4. Dejar caer un cubreobjetos sobre esa suspensin celular en orcena.
5. Eliminar las burbujas del aire que hayan podido quedar atrapadas sujetando el cubreobjetos
con papel de filtro, por uno de sus ngulos y ejerciendo una leve presin con la punta de la
aguja enmangada.
6. Realizar el aplastamiento del material colocando un papel de filtro sobre el cubreobjetos y
sujetando el portaobjetos con una mano y ejerciendo con el dedo pulgar de la otra mano una
fuerte presin sobre el cubreobjetos. Hay que procurar que el cubreobjetos no se deslice.
Observacin cromosmica
El alumno deber localizar, estudiar y realizar un dibujo interpretativo de las principales
etapas de la meiosis.
Los hechos ms significativos a observar en cada etapa son (Figuras 7 y 8):
Leptotene:
Aspecto enmaraado de los cromosomas
Los filamentos son simples.
Se observa un cuerpo intensamente teido: cromosoma X. Los machos son XO y las hembras
XX.
Cigotene:
Fibras ms cortas y menos enmaraadas.
Aspecto doble de los filamentos como consecuencia del apareamiento y la sinapsis de
cromosomas homlogos (bivalentes).
El cromosoma X (univalente) contina vindose ms teido y sin forma definida.
Paquitene:
Se puede contar el nmero de bivalentes.
Los filamentos son bastante ms gruesos.
El cromosoma X sigue muy contrado y suele estar doblado sobre s mismo.
Diplotene:
Los bivalentes son an ms cortos y ms gruesos.
Se observan los quiasmas o puntos de contacto entre homlogos.
El cromosoma X se estira durante esta etapa, pero sigue estando ms condensado que el resto.
Metafase I:
Los bivalentes estn condensados al mximo y por ello sus bordes o contorno es ntido. El
cromosoma X suele aparecer algo ms descondensado en esta etapa y se tie algo menos que
el resto de bivalentes.
Anafase I:
Los cromosomas homlogos de cada bivalente se ven migrando orientados hacia polos
opuestos.
El cromosoma X, al ser un univalente ir a uno de los polos.
Telofase I:
Los cromosomas se agrupan en los polos.
Los cromosomas estn ms descondensados.
Intercinesis
Profase II:
Nmero haploide de cromosomas.
Cromtidas divergentes con aspecto de aspa.
Metafase II:
Cromosomas ms condensados, ms cortos y mayor grosor. Cromtidas hermanas separadas
salvo en el centrmero.
Anafase II:
Separacin/migracin de cromtidas hermanas hacia cada polo.
26
Telofase II:
Se agrupan los cromosomas en los polos celulares y se empiezan a descondensar.
Para poder observar las distintas etapas de la meiosis en saltamontes hay que estudiar ms de
una preparacin cromosmica ya que dentro de los folculos testiculares existen unas
subunidades funcionales que son los cistos o conjunto de clulas que se encuentran en una
misma etapa meitica. Por esta razn, en una sola preparacin cromosmica podremos
observar nicamente 3 4 etapas diferentes.
V. RESULTADOS
27
28
VI. DISCUSION
VII. CONCLUSION
VIII. CUESTIONARIO
1. Cuntas clulas has visto de cada tipo?
2. Cmo conseguimos acumular metafases en las preparaciones?
3. El fijador se utiliza para relajar la estructura del ADN. Verdadero o falso?
4. Indica el nmero cromosmico de la especie estudiada
5. Cuantos tipos cromosmicos hay en el cariotipo de A. sativum en funcin de la posicin de
su centrmero?
6. Describir las diferencias entre la meiosis I y la meiosis II
7. Tienen los dos polos de la anafase I observadas el mismo nmero cromosmico? Y los
polos de la anafase II observadas?
8. Indicar el nmero de bivalentes que se pueden contar en una clula
9. Indicar el nmero de quiasmas que se observan en diploteno
10. Cmo distinguimos el cromosoma X de los autosomas?

Baldwin R (1983). Gentica Elemental. Primera edicin. Edit. Limusa. Mxico. 648p.
Griffiths A, Miller J, Suzuki D, Lewotin R (2003). Gentica moderna. Sptima Edic.
McGraw Hill. 870p.
Klug W, Cummings M, Spencer C (2001). Conceptos de Gentica. 5 Edicin. Prentice
Hall. 856p.
Strickberger M (1998). Gentica. 3 edicin. Editorial Omega S.A. Barcelona (Espaa).
869p.
29
PRACTICA N 5
DEMOSTRACION DE LAS LEYES DE MENDEL
I. INTRODUCCION
Gregor Mendel naci el 22 de julio de 1822 en Hyncice, Moravia, en la actualidad ubicada en
la Repblica Checa. Aunque los anlisis genticos lo preceden, las leyes de Mendel
conforman la base terica de nuestro conocimiento de la Gentica. Los experimentos que
realiz Mendel se diferencian de los de sus antecesores por la eleccin adecuada del material
de estudio y por su mtodo experimental.
El organismo de estudio elegido por Mendel fue la arveja comn Pisum sativum, fcil de
obtener de los vendedores de semillas de su tiempo, en una amplia gama de formas y colores
que a su vez eran fcilmente identificables y analizables. La flor de esta especie puede
autofecundarse. El proceso de polinizacin (la transferencia de polen de la antera al estigma)
ocurre en el caso de P. sativum antes de la apertura de la flor.
Para realizar sus cruzamientos Mendel debi abrir el pimpollo antes de la maduracin y retirar
las anteras para evitar la autopolinizacin. Luego poliniz artificialmente depositando en los
estigmas el polen recogido de las plantas elegidas como padre.
Mendel prob 34 variedades de arvejas y estudi sus caractersticas durante ocho aos. Eligi
siete caractersticas que se presentaban en dos formas, tal como altura de planta alta o baja, o
color de flor blanca o rosada.
En sus experimentos Mendel utiliz 28000 plantas de arvejas. La contribucin de Mendel fue
excepcional, sus innovaciones a la ciencia de la gentica fueron: 1. desarrollar lneas puras
(poblacin que da slo descendientes iguales para una determinada caracterstica) 2. Contar
sus resultados, establecer proporciones y realizar anlisis estadsticos.
II. CAPACIDADES
Adiestrarse en la resolucin y demostracin de problemas de gentica vegetal

Que el alumno realice cruzamientos simulados para comprobar los resultados estadsticos
de las leyes de Mendel
Laptops o computadoras de mesa.

IV. PROCEDIMIENTO
Resolver los problemas planteados de acuerdo a la teora recibida:
1. Calcule la probabilidad que de 5 descendientes, 2 sean de sexo masculino.
2. Calcule la probabilidad que del cruzamiento de dos heterocigotas (Bb) 2 de 6 hijos sean bb.
3. Calcule la probabilidad que al menos uno de los 7 descendientes del cruzamiento de dos
heterocigotas (Aa) sea aa.
30
4. Calcule la probabilidad que una progenie de 9 plantas obtenida del cruzamiento Aa x Aa,
tenga la siguiente proporcin genotpica: 2AA; 4Aa; 3Aa.
5. En una poblacin de maz se encuentra la siguiente proporcin genotpica para el locus que
gobierna el carcter planta enana:
0.81BrBr : 0.18 Brbr : 0.01 brbr
Cul es la probabilidad de que se produzcan plantas enanas si apareamos dos plantas
heterocigotas?
Calcule la probabilidad que del cruzamiento de dos plantas normales, tomadas al azar de la
poblacin descrita, se obtenga una planta enana.
6. Si Ud. cruza una lnea de ajonjol con cpsulas indehiscentes (idid) con una lnea
dehiscente y a partir de la generacin F2 se utiliza el procedimiento de una semilla por planta
para el avance generacional. Diga: Qu porcentaje de las lneas F4 en F5 seran heterogneas
para el carcter mencionado? Qu porcentaje de plantas en esas lneas heterogneas tendran
cpsulas indehiscentes?
7. Considere una poblacin con la siguiente proporcin genotpica:
Genotipos
A1A1 A1A2 A1A3 A2A2 A2A3 A3A3
Frecuencias 200
200
300 100
100 100
Calcule las frecuencias gnicas y el arreglo genotpico en la prxima generacin luego de
apareamientos aleatorios.
8. Para cada una de las cuatro poblaciones de maz que se dan a continuacin, calcule las
frecuencias gnicas. Cules seran las frecuencias genotpicas esperadas, si stas se someten
a libre polinizacin?
Nota: Suponga panmixia
BB
Bb
bb
Poblacin 1
300
200
0
Poblacin 2
0,16
0,48
0,36
Poblacin 3
25%
50%
25%
Poblacin 4
3/8
2/8
3/8
9. Cul de las poblaciones del problema anterior estaba en equilibrio Hardy-Weinberg? Para
llegar al equilibrio es necesario que p sea igual a q?
10. A partir de una poblacin de maz se toma una muestra representativa de plantas para
determinar cuntas tenan granos azucarados. De un total de 1000 plantas se detecta que 90
tenan semillas azucaradas. Cul sera la frecuencia genotpica para el locus que condiciona
este carcter, si esta poblacin se somete a apareamientos aleatorios en ausencia de: mutacin,
seleccin y contaminacin?
11. Qu valores debern tener las frecuencias gnicas (p y q) de los alelos B y b para la
frecuencia de heterocigotas en una poblacin en equilibrio sea mxima?
V. RESULTADOS
VI. DISCUSION
31
VII. CONCLUSION
VIII. CUESTIONARIO
1. Qu importancia tienen los trabajos de Mendel?
2. Con que organismos trabaj Mendel?
3. Investigue cules son los dos principios de probabilidad de importancia para la gentica
4. Sale exacta la proporcin 3:1 y 1:2:1? Por qu?
5. Analice el dibujo o Cuadro de Punnett donde se muestra la herencia de la forma de la
semilla de chcharo. Complete el Cuadro de Punnett, suponga que los progenitores son
Homocigotos para el carcter dominante y recesivo. Interprete el cuadro.

Baldwin R (1983). Gentica Elemental. Edit. Limusa. Mxico. 648p.
Griffiths A, Miller J, Suzuki D, Lewotin R (2003). Gentica moderna. 7a Edic. McGraw
Hill. 870p.
Jenkins C (1992) Gentica. Mc Graw-Hill Latinoamericana. Mxico. 568p.
Klug W, Cummings M, Spencer C (2001) Conceptos de Gentica. 5 Edic. Prentice Hall.
856p.
869p.
32

Klug W, Cummings M, Spencer C (2001). Conceptos de Gentica. 5 Edicin. Prentice
Hall. 856p.
869p.
http://www.google.com.mx/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=3&cad=rja&u
act=8&ved=0CCgQFjAC&url=http%3A%2F%2Fmscbioinformatics.uab.cat%2Fdiaposcu
rso%2Ftema16%2Ftema16.ppt&ei=5pmEVKSJEculNtbAgYAH&usg=AFQjCNFUv5xH
YpGMzKQYBDulepiYubNbYQ&bvm=bv.80642063,d.eXY
http://www.google.com.mx/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&cad=rja&u
act=8&ved=0CCIQFjAB&url=http%3A%2F%2Fuvigen.fcien.edu.uy%2Futem%2Fgencu
an%2FGen%25E9tica%2520cuantitativa.pdf&ei=5pmEVKSJEculNtbAgYAH&usg=AFQ
jCNFZC6ZcemzdwHZGbZhzvQyXSUs7Nw&bvm=bv.80642063,d.eXY
33
TERMINOLOGIA
Aberracin cromosmica: Cambio en la estructura o nmero de cromosomas, incluyendo

deficiencia, duplicacin, inversin, translocacin, aneuploida, poliploidia o cualquier otro respecto
al patrn normal.
Acervo gentico: Suma de toda la informacin gentica de una poblacin en un momento dado.
cido desoxirribonucleico: ADN Largo polmero de desoxirribonucleotidos. El ADN constituye el
material gentico de la mayora de los organismos y orgnulos que se conocen; normalmente se
encuentra formando una doble hlice.
cido nucleico: Macromolcula formada por nucletidos polimerizados, de la que existen dos formas
ADN y ARN. Los cidos nucleicos pueden ser lineales o circulares y de una sola o de doble hebra.
Adicin gnica: Adicin de una copia funcional de un gen al genoma de un organismo.
Adquirido: Desarrollado como respuesta al ambiente, no heredable, como un rasgo de carcter
(caracterstica adquirida) que resulta del efecto ambiental.
Adventicia: Estructura que se desarrolla fuera de su emplazamiento habitual.
Aflatoxinas: Grupo de compuestos txicos producidos por Aspergilhus flavus que al unirse al
ADN impiden su replicacion y transcripcin. Las aflatoxinas, localizadas en ciertos granos o
alimentos almacenados, pueden ocasionar lesiones hepticas.
Agrobacterium: Gnero bacteriano que incluye varias especies patgenas de plantas.
34
Alelos: Dos o ms formas diferentes de un gen. Los alelos ocupan una misma posicin en los
cromosomas homlogos y se separan uno de otro en la meiosis.
Alimentos biotecnolgicos: alimentos derivados total o parcialmente de cultivos genticamente
modificados, de plantas cultivadas que han sido modificadas mediante ingeniera gentica.
Aminocido: Molculas orgnicas que contienen nitrgeno en forma de -NH2 y grupo carboxilo COOH; unidos al mismo tomo de carbono. Son los "bloques estructurales" de las protenas.
Amplificacin de ADN: Multiplicacin repetida de una secuencia concreta de ADN tanto in vivo, en
un plsmido, como in vitro por medio de la reaccin en cadena de la polimerasa.
Arabidopsis: Gnero de plantas con flor de la familia de las crucferas A. thaliana se utiliza en
investigacin como planta modelo por el pequeo tamao de su genoma, ya totalmente secuenciado,
por su fcil manejo y por su corto tiempo de generacin.
ARN: Clase de cidos nucleicos caracterizados por la presencia de azcar ribosa y la pirimidina
uracilo. Hay varios tipos de ARN: ARNm (mensajero), ARNt (transferencia), ARNr (ribosmico).
Est conformado por nucletidos unidos covalentemente.
Arroz Dorado: Arroz obtenido por ingeniera gentica, que contiene en sus granos importantes
cantidades de beta caroteno (precursor de la vitamina A).
Banco de genes: Lugar donde se almacenan las colecciones de material gentico en forma de semillas,
tejidos o clulas reproductoras de plantas o animales.
Bio: Prefijo que se emplea para asociar a distintos trminos cientficos el concepto de "organismo
vivo".
Biodiversidad: Variabilidad entre organismos vivos de todas las procedencias, incluyendo entre otros,
los ecosistemas terrestres, marinos y los complejos ecolgicos de los cuales forman parte; incluye la
diversidad dentro de especies, entre especies y de ecosistemas.
Biotecnologa Moderna: 1) La aplicacin de tcnicas in vitro de cido nucleico, incluidos el cido
nucleico (ADN) recombinante y la inyeccin directa de cido nucleico en clulas u organelas.
2) La fusin de clulas ms all de la familia taxonmica que superan las barreras fisiolgicas
naturales de la reproduccin o de la recombinacin y que no sean tcnicas utilizadas en la
reproduccin y seleccin tradicional.
Biotecnologa:
Cualquier tcnica que utiliza organismos (o parte de ellos) para elaborar o modificar productos, para
mejorar plantas o animales, o para desarrollar microorganismos con propsitos especficos.
Can gnico: Un dispositivo que se utiliza para introducir ADN en clulas a travs del bombardeo
de tejidos con macropartculas de metal cubiertas con ADN.
Caracterizacin: Descripcin de las propiedades esenciales de un organismo o sistema.
Clula: Nivel bsico de organizacin estructural de los organismos complejos.
Cepa: Grupo de individuos derivados por ascendencia de un nico individuo dentro de una especie.
Cln: Una lnea de clulas surgidas todas de una misma clula nica por divisiones repetidas;
poblacin de individuos derivados por reproduccin asexual a partir de un solo antecesor. Tambin se
usa como verbo "clonar un gen", significa producir muchas copias de un gen por ciclos repetidos de
replicacin.
Conjunto de eventos equivalentes: Aquellos que han sido obtenidos por transformacin de una dada
especie vegetal con el mismo vector y la misma construccin gentica.
Construccin gentica: Fragmento de ADN que contiene un conjunto de elementos genticos que se
desea introducir utilizando tcnicas de biologa molecular en un organismo.
Copia nica: Gen o secuencia de ADN que aparece una sola vez en un genoma (haploide). Muchos de
los genes estructurales son de copia nica.
Cromosoma: Estructura gentica presente en las clulas con capacidad de autorreplicacin. Est
compuesto por una larga molcula de ADN, asociada a protenas, que lleva parte (o toda) la
informacin gentica de un organismo.
Cruzamiento: Apareamiento de dos individuos o poblaciones.
Cultivar: Trmino aceptado internacionalmente para designar una variedad de plantas cultivadas.
Debe poder distinguirse de otras variedades de su especie por determinadas caractersticas y retener
sus caracteres distintivos cuando se reproduce bajo condiciones especficas.
Cultivo genticamente modificado: Es una planta a la que se le ha agregado o modificado uno o ms
genes mediante tcnicas de ingeniera gentica.
35
Evento de transformacin: la insercin en el genoma vegetal en forma estable y conjunta, de uno o

ms genes que forman parte de una construccin definida.
Exn: Segmento de un gen eucariota que consiste en ADN que codifica para una secuencia.
Fenotipo: Aspecto observable de un individuo (con respecto a uno o ms caracteres) que refleja la
interaccin de su genotipo con un medio determinado.
Flujo gnico: Propagacin de genes de una poblacin a otra relacionada (generalmente) por migracin
lo que determina cambios en la frecuencia allica.
Gen: Unidad de herencia transmitida de generacin en generacin durante la reproduccin sexual o
asexual. El trmino se usa en relacin a la transmisin y herencia de caracteres especficos
identificables. El gen ms sencillo consta de un segmento de cido nucleico que codifica una protena
individual o ARN.
Gen de inters: El gen que confiere al OGM la caracterstica nueva.
Gen Marcador: El gen que permite la seleccin del OGM, diferencindolo de los organismos que no
han sido transformados.
Genoma: El conjunto de todos los genes de una especie.
Genoma Vegetal: Conjunto de los genomas nuclear y citoplasmticos.
Genoma: El conjunto de todos los genes de una especie.
Genotipo: La constitucin gentica de una sola clula o de un organismo con referencia a una sola
caractersticas o a un conjunto de caractersticas; la suma de todos los genes presentes en un
organismo.
Hibridoma: Lnea celular utilizada para la produccin de anticuerpos monoclonales; obtenida como
resultado de la fusin de linfocitos B secretantes de anticuerpos con clulas derivadas de un linfoma.
Ingeniera Gentica: Conjunto de herramientas de laboratorio que permiten aislar un gen de un
organismo (donante) e integrarlo en otro (receptor).
Inserto: Fragmento de ADN conteniendo el gen de inters, que se integra al genoma del organismo
receptor.
Intrn: Regin no codificante de un gen eucariota que es transcripta a la molcula de ARN, pero
luego es escindida por splicing del ARN, para dar origen al ARNm.
Lnea: Es la progenie estabilizada derivada de cada evento.
Locus: En gentica, la posicin de un gen en un cromosoma; para cualquier locus dado puede haber
varios alelos posibles.
Mutacin: Cualquier modificacin heredable en el ADN.
Nucletido: Molcula compuesta por un grupo fosfato, un azcar de cinco carbonos (ribosa o
desoxirribosa) y una base prica o pirimdica; los nucletidos son los bloques estructurales de los
cidos nucleicos.
Organismo genticamente modificado: Es un organismo al que se le ha agregado o modificado uno
o ms genes mediante tcnicas de ingeniera gentica.
Organismo transgnico: Organismo que ha incorporado de manera estable uno o ms genes de otro
organismo, y puede transferirlo a las generaciones sucesivas.
Organismo Vegetal Genticamente Modificado: Cualquier organismo vegetal que posea una
combinacin nueva de material gentico que se haya obtenido mediante la aplicacin de la
biotecnologa moderna.
PCR: Tcnica utilizada para amplificar regiones especficas de ADN mediante ciclos mltiples de
polimerizacin de ADN, cada uno seguido por un tratamiento rpido con calor para separar las
cadenas complementarias.
Plsmido: Porcin de ADN circular extracromosomal, con capacidad de autorreplicacin,
generalmente de origen bacteriano, que puede ser aislado, modificado y usado para transportar nuevo
material gentico a un organismo.
Promotor: Secuencia de nucletidos en el ADN a la cual se una la ARN polimerasa para comenzar la
transcripcin.
Protena: Polmero de aminocidos cuya secuencia y conformacin determinan sus propiedades y
funciones.
Proteoma: El conjunto de todas las protenas de una especie.
36
Recombinacin: Proceso mediante el cual se fragmentan los cromosomas o las molculas de ADN y
los fragmentos se unen formando nuevas combinaciones. La recombinacin natural ocurre en la clula
viva por medio del entrecruzamiento cromosmico durante la meiosis.
Secuencia codificante: Secuencia de ADN que contiene informacin para una secuencia de
nucletidos en el ARNm que ser traducido para dar origen a una protena.
Secuencia regulatoria: Secuencia de nucletidos, generalmente cercanas al extremo '5 de un gen y
cercanas al promotor, que regulan el gen, y por lo tanto determinan cundo y en qu tejidos ser
expresado.
Traduccin: Proceso por el cual la informacin gentica presente en una cadena de ARNm dirige la
secuencia de aminocidos durante la sntesis de una protena.
Transcripcin: Proceso por el cual la informacin gentica contenida en una cadena de ADN es
copiada en una secuencia complementaria por la ARN polimerasa.
Transcripcin reversa: Enzima presente en los retrovirus, que sintetiza ADN doble cadena a partir de
un molde de ARN simple cadena.
Transfeccin: Introduccin de una molcula de ADN forneo dentro de una clula eucaritica,
generalmente seguido por la expresin de uno o ms genes del ADN introducido.
Transformacin: Se denomina al proceso de introduccin del o los genes de inters en el organismo
receptor. El Cambio gentico producido por la incorporacin de ADN del medio externo a una clula.
Por clulas animales en cultivo, se refiere generalmente a la adquisicin de propiedades cancergenas
luego del tratamiento con un virus o un carcingeno.
Transformante: Organismo transgnico cuya constitucin gentica ha sido modificada por la
introduccin del ADN ajeno.
Transgen: Gen que ha sido transferido de un organismo a otro.
Transposn: Una porcin de ADN capaz de moverse de un lugar del genoma a otro.
Variedad Genticamente Modificada o transgnica: Se obtiene por cruza tradicional de la lnea GM
con lneas o variedades comerciales.
Vctor de clonado: Elemento gentico, generalmente barterifago o plsmido, utilizado para
transformar un fragmento de ADN a una clula receptora con el objetivo de clonar un gen.
Vctor: En biologa celular, es un agente (virus o plsmido) utilizado para transmitir material gentico
a una clula u organismo.
37
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
LIBROS
Baldwin R (1983). Gentica Elemental. Edit. Limusa. Mxico. 648p.
Griffiths A, Miller J, Suzuki D, Lewotin R (2003). Gentica moderna. 7 Edic. McGraw Hill.
870p.
Klug W, Cummings M, Spencer C (2001). Conceptos de Gentica. 5 Edicin. Prentice Hall.
856p.
Strickberger M (1998). Gentica. 3 edicin. Editorial Omega S.A. Barcelona (Espaa). 869p.
Watson J, Hopkins N, Roberts J (2004) Molecular Biology of the Gene. Pearson Education.
USA. 1189 p.
Burgos, G., E. Salas, W. Amoros, M. Auqui, L. Muoa, M. Kimura and M. Bonierbale. 2009.
Total and individual carotenoid profiles in Solanum phureja of cultivated potatoes: I.
Concentrations and relationships as determined by spectrophotometry and HPLC. Journal of Food
Composition and Analysis 22(6): 503-508.
Carputo, D. 2003. Cytological and breeding behavior of pentaploids derived from 3x 4x crosses
in potato. Theoretical and Applied Genetics 106(5): 883-888.
Chen, Q. and H. Li. 2005. An improved technique for high resolution mitotic chromosome studies
in Solanum. HortScience 40(1): 54-56.
Estrada, N. 1996. Los recursos genticos en el mejoramiento de la papa en los pases andinos. pp.
1-14. En: Papas colombianas con el mejor entorno ambiental. UNIPAPA-ICA-CORPOICA.
Comunicaciones y Asociados Ltda, Bogot. 272 p.
Ferrer, H., N. Alcorcs y J. Mndez. 2009. Asimetras cariotpicas observadas en dos especies de
Gossypium L. Acta Biologica Paranaense, Curitiba 38(3-4):179-186.
Garca, D., M. Gonzlez y O. Sam. 1996. Algunas caractersticas asociadas con la ploida en
papa. Cultivos Tropicales 17(1): 65-66.
Gavrilenko, T. 2007. Chapter 10: Potato cytogenetics. pp. 203-216. In: Vreugdenhil, D., J.
Bradshaw, C. Gebhardt, F. Govers, D. Mackerron, M. Taylor and H. Ross. (eds.). Potato biology
and biotechnology: advances and perspectives. First edition. Elsevier, UK. 823 p.
REVISTAS
Genetics
PlosGenetics
BMC Genetics
ENLACES DE INTERS
http://www.learner.org/interactives/dna/index.html
http://www.esp.org/
http://www.mendelweb.org/
http://publications.nigms.nih.gov/thenewgenetics/
http://www.pbs.org/wgbh/nova/baby/divi_flash.html
Base de datos Nature Publishing Group. Disponible en: [http://www.nature.com/].
Base de datos Cell Press. Disponible en: [http://www.cell.com/].
http://star.mit.edu/genetics/index.html?gclid=CJXoybHK28ACFehj7AodggcA1Q
http://jag.igr.poznan.pl/
http://www.journals.elsevier.com/journal-of-genetics-and-genomics/
http://www.ias.ac.in/jgenet/
http://escijournals.net/JPBG
http://journals.cambridge.org/action/displayJournal?jid=PGR
http://www.monsanto.com/global/ar/productos/pages/glosario.aspx
38
ANEXO
REGISTRO DE EVALUACIONES
Cultivo de:
Experimento N:..
Programa de estudio:
Nombre del rea experimental:....
Estacin experimental: Gentica Vegetal:...
Jefe de Practica:.......
Categora:.
Experimentadores:
Planta
Emergencia
# das a la
emergencia
Altura a
los
15
das
# de hojas a
los 15 das
rea foliar
promedio a
los 15 das
01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
39
# de das
a
la
floracin
rea foliar
promedio a
la floracin
#
de
vainas x
planta
#
promedio
granos x vaina
en la planta
W promedio
granos
x
planta

Manual de Practica Genetica Vegetal 2016

Caricato da

Informazioni sul documento

Copyright

Formati disponibili

Condividi questo documento

Condividi o incorpora il documento

Opzioni di condivisione

Hai trovato utile questo documento?

Questo contenuto è inappropriato?

Copyright:

Formati disponibili

Manual de Practica Genetica Vegetal 2016

Caricato da

Copyright:

Formati disponibili

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Mg. Blgo. Jess Ruiz Baca

NUEVO CHIMBOTE PER

A Dios, a mis Padres, a nuestros seres queridos,

UNIDAD III: HERENCIA NO MENDELIANA. MUTACIONES Y POLIPLOIDIAS.

MEDIDAS GENERALES EN CASO DE ACCIDENTE

DERRAME DE PRODUCTOS QUIMICOS SOBRE LA PIE:

Finis Origine Pendet

MATERIALES QUE EL ESTUDIANTE DEBE TENER EN CADA PRCTICA DE

Explicar: Pautas para presentacin de informes. Distribucin de parcelas y trabajos de

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Base de datos Nature Publishing Group. Disponible en: [http://www.nature.com/].

Posteriormente Caetano-Anolles y colaboradores (1991) pusieron a punto otra variante que

(C) Establecimiento de relaciones de parentesco o "pedigree" entre lneas o variedades para

lo han convertido en un marcador muy til en el mapeo de genoma en maz y el resto de

proveen informacin consistente para la identificacin y evaluacin de pedigr de materiales

terminen sustituyendo al resto de marcadores moleculares, al menos en las especies ms

Explique las aplicaciones de los marcadores moleculares en el mejoramiento gentico de

Marcadores moleculares ligados a caracteres de herencia cuantitativa (QTL)

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Ayala F (1986). Gentica Moderna. Ed. Latinoamericana. Nueva York. 984p.

Telofase I. Cuando finaliza la segregacin anafsica de los homlogos, stos se agrupan en

Orientacin de los centrmeros y los cromosomas hacia los polos celulares.

3. Macerar el folculo golpendolo directamente con el extremo plano de un objeto metlico o

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Ayala F (1986). Gentica Moderna. Ed. Latinoamericana. Nueva York. 984p.

Adiestrarse en la resolucin y demostracin de problemas de gentica vegetal

III. MATERIAL Y EQUIPOS

Laptops o computadoras de mesa.

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Ayala F (1986). Gentica Moderna. Ed. Latinoamericana. Nueva York. 984p.

Jenkins C (1992). Gentica. Mc Graw-Hill Latinoamericana. Mxico. 568p.

Aberracin cromosmica: Cambio en la estructura o nmero de cromosomas, incluyendo

Evento de transformacin: la insercin en el genoma vegetal en forma estable y conjunta, de uno o

Potrebbero piacerti anche