Historia de la PCR

El desarrollo de la (PCR) ha sido a menudo comparado con el

desarrollo de Internet.
-Ambas invenciones han surgido en los ltimos 20 aos hasta
el punto donde es difcil imaginar la vida sin ellos.
-Ambos han crecido mucho ms all de los confines de su
diseo simple original y han creado oportunidades
inimaginables antes de su invencin.
-Ambos tambin han engendrado un nuevo vocabulario y
conocimientos de profesionales
en ese vocabulario.
Los orgenes de la PCR tal como la conocemos hoy, surgi de
la investigacin llevada a cabo a principios de 1980 en Cetus
Corporation, en California.
En la primavera de 1983, Kary Mullis tuvo la idea original para
la PCR mientras se diriga por la Carretera 128 de San
Francisco.
Fue galardonado con el Premio Nobel de 1993, por su
invencin de la PCR.
El concepto original para la PCR era una mezcla de varios
componentes que ya existan:
La sntesis de los tramos cortos de ADN de una sola hebra
(oligonucletidos) y el uso de stos para dirigir la sntesis de
nuevas copias de ADN.
Esto utilizando ADN polimerasas las cuales eran herramientas
ya estndar en el repertorio de los bilogos moleculares de la
poca.
Esta tcnica permite multiplicar ("amplificar" es, en realidad,
el trmino que se ha impuesto) pequeas cantidades de ADN
entre cientos de miles y millones de veces. El tramo destinado
a reproducirse puede tener desde cincuenta hasta ms de dos

mil nucletidos de longitud. El segmento de ADN que sirve de

molde no requiere estar necesariamente en estado puro, sino
que puede ser parte de mezclas complejas.
Cuando el proceso era manual, la tcnica de PCR era lenta y
requera de trabajo intensivo. Por lo tanto, los cientficos de
Cetus comenzaron a buscar las maneras de automatizar el
proceso y aunque Mullis es ampliamente acreditado con la
invencin original de PCR, la exitosa aplicacin de la PCR
requiri un considerable desarrollo por sus colegas en Cetus
Corp.
Originalmente la tcnica PCR hizo uso, en un principio, de
ADN polimerasa de la bacteria Escherichia coli. Aunque esta
enzima ha sido una valiosa herramienta para una amplia
gama de aplicaciones, tena desventajas distintas en PCR.
Esta enzima resultaba desactivada debido a la alta
temperatura requerida para desnaturalizar la doble cadena
del ADN, por lo cual deba agregarse enzima fresca al
comenzar el tercer paso de cada ciclo.
La solucin fue encontrada cuando la bacteria Thermophilus
aquaticus fue aislada de aguas termales, donde sobrevivi y
prolifer a temperaturas extremadamente altas y rindi una
ADN polimerasa que no era inactivada rpidamente en las
temperaturas altas.
La purificacin de la polimerasa de Taq dio lugar a la
necesidad de una mquina que realizara un ciclo ms
rpidamente entre diversas temperaturas.
En 1985, Cetus se asoci con la corporacin Perkin-Elmer e
introdujo la DNA Termal Cycler. De esta manera es posible
mezclar todos los componentes de la PCR al comenzar el
primer ciclo y la reaccin en cadena puede llevarse a cabo
mediante equipos automatizados que realizarn los ciclos
trmicos programados.
En 1989, Cetus anunci un acuerdo de colaborar con HoffmanLa Roche en el
desarrollo y la comercializacin de productos de diagnstico in
vitro y de
servicios basados en tecnologa de PCR.

En 1990, los cientficos alcanzan la primera amplificacin y

deteccin simultnea de las secuencias especficas de DNA
usando un colorante fluorescente, poniendo el fundamento
para la PCR en tiempo real o PCR "cintico" (pruebas TaqMan).
En 1991 Hoffmann-La Roche Inc. adquiere los derechos y las
patentes mundiales de la PCR.
La PCR ha sido desarrollada en reas tan diversas como
investigacin forense criminal, ciencia de los alimentos,
estudios en el campo ecolgico y diagnsticos de medicina.
Una de las caractersticas distintivas de PCR es, sin duda, su
extraordinaria versatilidad. Esa versatilidad es su
'aplicabilidad' a muchas situaciones diferentes. PCR es una
herramienta que tiene el poder de crear nuevas situaciones
para su uso y las necesarias para utilizar.
Los enormes avances en nuestra comprensin del genoma
humano (y de muchas otras especies), no hubiera sido
posible, si no fuera por lo adaptable que es la PCR.