NDICE

Que es el
microscopio. 2
El microscopio
ptico 3

El microscopio ptico compuesto

3
El microscopio ptico de contraste de fases
4
El microscopio ptico de campo oscuro
. 4
El microscopio ptico de
fluorescencia. 4

El microscopio
electrnico 5

El microscopio electrnico de
transmisin. 6
El microscopio electrnico de
barrido 7

El microscopio
Qu Es El Microscopio?
Es un instrumento que sirve para ver objetos demasiados pequeos para ser vistos con
claridad por el ojo humano.
Aunque el hombre tenga el sentido de la vista, no pueden ver objetos correctamente
demasiados pequeos sin la ayuda de un microscopio.
Si tuviramos que dar una definicin de microscopio la ms correcta sera: "Instrumento
ptico que permite ver objetos aumentados".

1.- EL MICROSCOPIO PTICO

El microscopio ptico es un instrumento que sirve para aumentar el tamao de un objeto
a travs de un sistema de lentes. Puede conseguirse con este mtodo un aumento de
hasta 2000 veces.
Las partes de las que se compone un microscopio se pueden dividir en parte mecnica y
en parte ptica:
Parte mecnica:
Sistema de soporte:
Pie: Sirve de apoyo y para darle estabilidad al microscopio. En l est integrada la
fuente luminosa.
Brazo: Es una columna que parte del pie sirve para sujetar el tubo. Puede ser recto
o arqueado.
Tubo: Es una cmara oscura que est unida al brazo. En su parte inferior est el
revolver son los objetivos y en su parte superior los oculares.
3

Platina: Es una plataforma horizontal sobre la que se engancha con dos pinzas el
portaobjetos. Tiene en su zona central un orificio que permite el paso de la luz y un
sistema de cremallera manejado por dos tornillos que permiten el movimiento de la
muestra.
Revolver: Sujeta los objetivos y gira para permitir el cambio de objetivo. Sistema
de ajuste:
Tornillo macromtrico: Tornillo de enfoque que mueve la platina hacia arriba y
hacia abajo de forma brusca y poco precisa.
Tornillo micromtrico: Tornillo de enfoque que mueve la platina hacia arriba y
hacia abajo de forma lenta y muy precisa.

Parte ptica:
Fuente de iluminacin: Es una lmpara halgena que permite el encendido o el
apagado con un interruptor y cuya intensidad puede ser graduada. Puede tener en su
parte superior un anillo para permitir la colocacin de filtros que facilitan la
visualizacin.
Condensador: Es un sistema de lentes situado bajo la platina que permite concentrar
la luz de la fuente de iluminacin hacia la preparacin.
Diafragma iris: Est en el interior del condensador y sirve para limitar el haz de
rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados
(regula la luz y ajusta la apertura numrica).
Oculares: Estn colocados en la parte superior del tubo y su funcin es captar y
ampliar la imagen obtenida por los objetivos. Actualmente se suelen usar los
microscopios binoculares que tienen dos oculares unidos por un mecanismo que
permite ajustar la separacin interpupilar. Son normalmente de x10 y x12.
Objetivos: Estn colocados en la parte inferior del tubo insertados en el revolver y
obtienen la imagen real aumentada e invertida. Sobre su superficie est indicado su
aumento y su apertura numrica. Suelen llevar dibujado un anillo de color que indica
su aumento y suelen ser de x4 (rojo), x10 (amarillo), x40 (azul) y x100 (blanco).

1.1.- MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO:

Es el microscopio ms comn. Se utiliza para aumentar las imgenes de objetos que no
son visibles a simple vista. Su mtodo de iluminacin es luz visible y por lo tanto el
aumento es limitado; adems que tambin se usa para ver objetos transparentes o
cortados en lminas muy finas que la luz puede pasar a travs de ellos.

1.2.- EL MICROSCOPIO PTICO DE CONTRASTE DE

FASES
El microscopio de contraste de fases hace posible ver fcilmente pequeas clulas, incluso
sin teir. Las clulas tienen un ndice de refraccin distinto de su alrededor y esta
diferencia puede utilizarse para crear una imagen de mucho mayor contraste que la que
puede obtenerse con el microscopio ptico normal.

En este microscopio la fuente de luz es un cono hueco de

luz que pasa a travs de un diafragma anular al
condensador. En el objetivo un anillo de contraste de
fases desplaza la fase de luz que lo atraviesa en un
cuarto de longitud de onda. La luz que pasa retardada
atraviesa el anillo y el ojo la ve como luz blanca normal.
La luz que pasa a travs de una muestra con ndice de
refraccin diferente del ndice del medio es retardada y
tiene un recorrido ms largo, llegando al ocular fuera de
fase.
La microscopia de contraste de fases hace posible
observar clulas en estado vivo, ayudndonos as a evitar
la creacin de artefactos tales como los introducidos por la tincin.

1.3.- MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO:

En este microscopio los rayos de luz no penetran directamente en el objeto, si no que se
ilumina de forma oblicua, de esta forma el objeto iluminado dispersa la luz y se hace
visible contra el fondo oscuro. Se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes
y sin pigmentar, imposibles de ver con luz natural. Para lograr esto, el equipo cuenta con
un condensador que ilumina el objeto con una luz intensa pero de forma indirecta.

1.4.- MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA:

La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas sustancias de emitir luz propia
cuando inciden sobre ellas radiaciones energticas, es decir que el objeto es iluminado
con rayos de una determinada longitud de onda, las molculas la absorben y remiten luz
con una longitud de onda mayor; para una correcta observacin es necesario colocar
filtros apropiados debajo del condensador y encima de los objetivos.
Su fuente de iluminacin es una lmpara de mercurio o halgeno que emite la mayor
cantidad de luz UV en el lmite del espectro visible, sus objetivos son generalmente de
cuarzo y los filtros retienen la radiacin ultra violeta peligrosa para el ojo
Ya que las molculas con la propiedad de fluorescencia son escasas, este microscopio se
utiliza tambin para revelar fluorescencia agregada como en la deteccin de antgenos o
5

anticuerpos, o cuando se inyectan molculas fluorescentes en clulas para utilizarlas

como marcadores.

2.- EL MICROSCOPIO ELECTRNICO

Para estudiar la estructura interna de los microorganismos es esencial el uso del
microscopio electrnico. En este microscopio se utilizan electrones en vez de rayos de luz,
y como lentes funcionan unos electroimanes. Todo el sistema opera en el vaco. Cuando
los electrones pasan a travs de la preparacin algunos son difractados creando entonces
una imagen que se hace visible en una pantalla sensible a los electrones. La resolucin
obtenida con el microscopio electrnico es mucho mayor que la conseguida con el
microscopio ptico.
Con el microscopio electrnico es posible ver muchas sustancias incluso de tamao
molecular. Sin embargo, a causa de la naturaleza de este instrumento slo pueden
examinarse objetos muy delgados.
La microscopia electrnica es un arte altamente desarrollado y con esta tcnica somos
capaces de observar estructuras celulares que no pueden verse de ninguna otra manera.
La resolucin mucho mayor que puede obtenerse justifica el cuidado, el tiempo y el gasto
que representa la preparacin de micrografas electrnicas.

2.1.- El microscopio electrnico de transmisin,

Nos da informacin sobre la naturaleza y las propiedades de las superficies de los
substratos donde se encuentras las muestras slidas. La base de SEM se compone de un
haz de electrones generado por un can de electrones (ctodo) situado en la parte
superior de la columna y su haz viene atrado hacia el nodo, condensado por las lentes
colimadoras y se focaliza sobre la muestra a travs de lentes de objetivo. El haz de
electrones golpea la muestra, produciendo as unos electrones secundarios. Estos
electrones, producidos, vienen recogidos por un detector y convertidos en seales
elctricas y amplificadas. Las muestras que se suelen utilizar no tienen un grosos superior
a 50 nm.
Otras dos tcnicas muy importantes, utilizadas en el microscopio electrnico de
transmisin son el sombreado metlico y la criofractura, que se utilizan sobre todo en
muestras biolgicas.
Para el sombreado metlico la muestra, desecada, se expone a una corriente dirigida por
un metal pesado (platino, paladio, oro) produciendo as una imagen que revela su
estructura tridimensional del objeto.
En la criofractura la muestra biolgica se congela con nitrgeno lquido (-196C), luego se
fractura quedando expuestas varias superficies externas e internas de la muestra. La
superficie fracturada se sombrea con un metal pesado. Al final la muestra sombreada se
destruye por tratamiento qumico y la rplica es examinada. Estas dos tcnicas han
permitido estudiar la estructura de la membrana y de la pared celular

2.2.- Microscopio electrnico de barrido

La muestra es recubierta con una capa de metal delgado, y es barrida con electrones
enviados desde un can. Un detector mide la cantidad de electrones enviados que arroja
la intensidad de la zona de muestra, siendo capaz de mostrar figuras en tres dimensiones,
proyectados en una imagen de TV. Su resolucin est entre 3 y 20 m, dependiendo del
microscopio. Permite obtener imgenes de gran resolucin en materiales ptreos,
metlicos y orgnicos. La luz se sustituye por un haz de electrones, las lentes por
electroimanes y las muestras se hacen conductoras metalizando su superficie.

Otros tipos de microscopios electrnicos

Microscopio electrnico de barrido y transmisin combina los elementos de un SEM y un
TEM, y puede mostrar los tomos individuales de un objeto. El micro analizador de sonda
de electrones, un microscopio electrnico que cuenta con un analizador de espectro
de rayos X, puede analizar los rayos X de alta energa que produce el objeto al ser
bombardeado con electrones.
Dado que la identidad de los diferentes tomos y molculas de un material se puede
conocer utilizando sus emisiones de rayos X, los analizadores de sonda de electrones no
slo proporcionan una imagen ampliada de la muestra, como hace un microscopio
electrnico, sino que suministra tambin informacin sobre la composicin qumica del
material.