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1 MARCADORES

MOLECULARES: MEJORAMIENTO GENTICO DE LA

RESISTENCIA A ENFERMEDADES EN PLANTAS

Torres-Badajoz Sandra Guadalupe

Universidad de Guanajuato, Campus Celaya-Salvatierra

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1. Resumen
Los avances en tcnicas moleculares en las ltimas dcadas han permitido profundizar en

7las bases genticas de las resistencias, a la vez que han abierto nuevas preguntas. A travs de estas
8tcnicas se han obtenido gran cantidad de marcadores moleculares dispersos a lo largo de todo el
9genoma, se han construido mapas genticos de diversas especies hortcolas, y adems se han
10ubicado genes de resistencia a enfermedades, plagas, etc. En este trabajo se revisa el panorama de
11los estudios sobre mapeo gentico de genes de resistencia a enfermedades en plantas. La
12resistencia a enfermedades asistida por marcadores moleculares es una herramienta muy
13interesante para los planes de mejoramiento, ya que permite acelerar la seleccin y disminuir los
14costos en el manejo de grandes poblaciones de plantas. El objetivo de este ensayo es resumir los
15marcadores utilizados en el anlisis gentico y discutir el alcance de los mismos en el
16mejoramiento de especies vegetales.
17Palabras clave: Genes, marcadores moleculares, mejoramiento, plantas, resistencia.
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1. Abstract
Advances in molecular techniques in recent decades have deepened in the genetic basis of

20resistance, while have opened new questions. Through these techniques have been obtained many
21scattered throughout the genome molecular markers, genetic maps have been constructed of
22various vegetable species and also have resistance genes located diseases, pests, etc. In this work,
23the panorama of studies on genetic mapping of disease resistance genes in plants is reviewed.
24Disease resistance assisted by molecular markers is a very interesting tool improvement plans,
25and speeding up the selection and lower costs in managing large populations of plants. The aim
26of this paper is to summarize the markers used in genetic analysis and discuss their scope in
27improving plant species.
28Keywords: Genes, molecular markers, improvement, plant resistance.
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2. Introduccin

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A travs de la utilizacin de los principios genticos, en los ltimos aos se han logrado

31importantes avances en el mejoramiento gentico de diversas especies vegetales. Estos avances se

32basaron principalmente en la seleccin fenotpica de los mejores genotipos. Muchas de las
33complicaciones que se tienen en la seleccin de los caracteres fenotpicos, se pueden solucionar a
34travs de la identificacin directa de los genotipos mediante el uso de marcadores genticos. Los
35marcadores genticos representan diferencias genticas entre individuos o especies, generalmente
36actan como seales o marcas ya que se encuentran cerca de los genes de inters, la mayora no
37afecta el fenotipo de la caracterstica de inters ya que se encuentran cerca o ligados a los genes
38que controlan la caracterstica (Collard et al., 2005).
39

Gracias a los avances en la biologa molecular se han desarrollado mtodos de

40identificacin y caracterizacin basados en el uso de marcadores moleculares que superan, en la

41gran mayora de los casos, las limitaciones de los mtodos tradicionales (Azofeifa-Delgado,
422006).
432.1 Tipos de marcadores genticos
44

Actualmente, los marcadores genticos se utilizan investigacin vegetal bsica, en

45mejoramiento, caracterizacin y conservacin; etiquetado de genes; introgresin asistida de alelos

46favorables y proteccin de variedades comerciales (Henry, 2001).
472.1.1 Isoenzimas
48

Las isoenzimas consisten en molculas de protena diferencialmente cargadas, que

49tambin se pueden separar usando mtodos de electroforesis (Markert, 1959). Los marcadores
50bioqumicos han sido reemplazados en gran medida por otro tipo de marcadores genticos; sus
51principales desventajas son: 1) que detectan niveles menores de variacin y 2) que al ser
52productos de la expresin gnica se ven afectados modificaciones postranscripcionales o
53postransduccionales (Prez de la Vega 1997).
542.2 Tipos de marcadores de ADN
552.2.1 RFLP

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Basados en la longitud de los fragmentos de restriccin polimrficos (Botstein et al.,

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571980), segn Paterson (1996) el costo, la complejidad tcnica y la gran cantidad de ADN que se
58requiere pueden ser limitantes para el empleo de los RFLP como tcnica de diagnstico.
59 2.2.2 RAPD

DNA polimrfico amplificado al azar (Williams et al., 1990). La eficiencia de los

60

61marcadores RAPDs puede estar influenciada por varios factores, entre ellos: El nmero de ciclos
62de amplificacin, la cantidad de ADN inicial, la longitud del ADN, el iniciador y la temperatura
63(Phillips et al. 1995).
64AFLP

Fragmento amplificado polimorfismo de longitud (Blears et al., 1998). Valadez y Kahl

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66(2000) mencionan que los AFLPs surgen a partir de: A) Polimorfismos en los sitios de
67restriccin, en donde una secuencia especfica para el reconocimiento de una endonucleasa de
68restriccin, est presente o ausente. B) Polimorfismos en la longitud de la secuencia, donde el
69nmero de las secuencias repetidas arregladas en serie (tandem) tienen sitios variables. C)
70Cambios en los pares de bases de ADN no asociados con sitios de restriccin.
712.2.3 SSR

Marcadores de microsatlites (Giarrocco et al., 2007). Estos marcadores son ideales para

72

73el estudio de ligamiento gentico en plantas y el mapeo fsico, los estudios poblacionales y la
74identificacin de variedades (SIDTA 1999).

A continuacin se presenta una serie de ejemplos generales del uso de marcadores

75

76moleculares en especies vegetales.

Caracterstica
Nivel de

Isoenzimas

polimorfismo que

Bajo

RFLP

RAPD

AFLP

SSR

Medio

Medio

Medio
Codominante/

Alto

codominante

Codiminante

Dominante

Dominante

Codiminante

Multiloci

Multiloci

Multiloci

Multiloci

Multiloci

detecta
Usualmente
Dominancia
Nmero de loci
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Abundancia en el
genoma
Nmero de citas

Baja

Media

Muy alta

Alta

Media

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33

13

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77Tomado de Lowe et al. (2004)

782.3 Bases genticas de la resistencia a enfermedades

Lozano y Schawrts (1981) seala que desde hace algunos aos el desarrollo de variedades

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80resistentes ha sido reconocido como el medio de control de las enfermedades ms usual y

81econmico. El mejoramiento de la resistencia a las plagas y enfermedades es un aspecto especial
82del mejoramiento gentico y juega un papel importante en la produccin desde el punto de vista
83econmico, especialmente en pases tropicales donde las prdidas por estos conceptos son
84cuantiosas (De Armas, 1985).Van del Plank (1968) seala que la resistencia puede ser
85monognica (resistencia gobernada por un solo gen) y polignica (resistencia gobernada por ms
86genes.
87

Segn Van del Plank (1968) los trminos ms usados actualmente para definir la

88resistencia de las plantas a las enfermedades son: resistencia horizontal (R H) y vertical (RV). La
89resistencia vertical se refiere al lado vertical del grfico; esta resistencia se prueba mediante un
90anlisis de varianza en el cual existen interacciones diferenciales entre patotipos y patodemos, su
91carcter fundamental es que opera contra algunos patotipos verticales, pero no contra todos; La
92caracterstica epidemiolgica de la resistencia vertical es la reduccin aparente en el inculo
93inicial, lo cual trae como resultado que la epidemia se retrase. Este mismo autor define la
94resistencia horizontal como una resistencia de efectos parciales, que a pesar de ser efectiva contra
95todas las razas del patgeno, manifiesta dicha resistencia a travs de una reduccin cuantitativa
96de los ndices o porcentajes de infeccin, incubacin y reproduccin; tambin este tipo de
97resistencia a travs de un anlisis de varianza permite detectar diferencias significativas entre
98patotipos y patodemos.
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3. Discusin

1013.1 Mtodos de mejora para la resistencia a enfermedades: Aplicacin de la biologa molecular

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Diversos mtodos han sido utilizados para los trabajos de mejora gentica para la

103resistencia en plantas. Las investigaciones que se realizan en el campo de la gentica van

104dirigidas a la obtencin de una produccin superior, un valor nutritivo ms elevado, una mayor
105resistencia de las plantas al medio, a los agentes patgenos, conservando al mismo tiempo
106biodiversidad en las especies y protegiendo los recursos genticos. La contribucin de la gentica
107vegetal a estas investigaciones es esencial (Sasson, 1985).
108

El uso de marcadores moleculares proporciona varias ventajas respecto a la mejora clsica

109o seleccin masal, dada la independencia de estos marcadores respecto a las condiciones
110ambientales y el estado en que se encuentra la planta. Este fenmeno permite una seleccin
111temprana, disminuyendo los gastos del cultivo. La eficacia de esta estrategia depende de varios
112factores como el modo de la herencia del carcter de inters, el grado de asociacin entre el
113marcador empleado y el gen de inters (Francia, et al. 2005).
114

Segn Beckman (1988) un peldao superior en la escala evolutiva corresponde a los

115marcadores genticos y en especial a las tcnicas de polimorfismo de longitud de fragmentos de

116restriccin (RFLP) que brindan nuevas perspertivas para identificar y mapear genes tiles que
117posteriormente pueden ser incorporados en el genoma vegetal. Segn Staub and Thomas (1998)
118dentro de los marcadores ms efectivos para asistir la seleccin se encuentra el RFLP.
119

Los RAPDs pueden ser empleados con mltiples propsitos, uno de los ms importantes

120es el estudio de la identidad gentica ente especies estrechamente relacionadas o dentro de una
121misma especie, as como para el mapeo de genes. Sin duda alguna la mejora para la resistencia es
122un campo donde siempre se investigar y donde las investigaciones sern cada vez ms profundas
123siempre que se tengan en cuenta la utilizacin ms generalizada de tecnologas como la
124ingeniera gentica.
125

Las isoenzimas por su parte tienen limitaciones importantes para su aplicacin en este

126campo Tanksley (1993) menciona que el uso de las isoenzimas ha estado muy limitado por el
127escaso nmero de colorantes enzimticos disponibles y por la imposibilidad de contar con
128suficientes marcadores para cubrir todo un genoma.
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4. Conclusin

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El trabajo de mejoramiento gentico es un trabajo continuo y su objetivo fundamental es

131aportar a la produccin vegetal nuevas herramientas para ampliar el conocimiento y mejorar las
132investigaciones en las principales enfermedades en plantas. Estos ltimos aos se han logrado
133importantes avances en tcnicas de Biologa Molecular que han permitido analizar en
134profundidad el genoma de plantas y desarrollar mapas genticos con gran cantidad de marcadores
135muchos de estos sumamente tiles para el mejoramiento gentico de la resistencia en especies
136vegetales. Sin embargo an queda mucho por investigar en este campo, ya que en Mxico son
137pocas las variedades de las que se ha reportado informacin de marcadores moleculares para la
138resistencia a enfermedades.
139
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