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Puntaje por punto

0,5
0,5
3,0
4,0
4,0
3,0
Puntaje total
Descuento por formato
Nota

Puntaje asignado
0,5
0,5
2,5
2,5
2,5
2,5
11,0
0,0
5,0

Universidad de Santiago de Chile

Facultad de Qumica y Biologa
Pedagoga en qumica y Biologa
Laboratorio de Orgnica II
Doctora Roco Santander Meyer
2 Semestre 2015

Comentario [RS1]: Puntaje 0,5 de 0,5

ptos

Extraccin y caracterizacin de hidratos de carbono,

protena, y otros componentes de la leche
Prctico N 5

Nombres:
Profesores:
Fecha:

Carolina Aguilera Ramrez

Francisco Machuca Garca
Dra. Roco Santander Meyer
Dr. Javier Echeverra Morgado
27.12.2015

Comentario [RS2]: Puntaje 2,5de 3 ptos

Mtodos
Parte A:
Vaso precipitado vaco, limpio
y seco
Se aadieron 100mL de Leche
Se calent a 40C

Se adicionaron lentamente
2mL de cido actico al 50%
Se dej decantar
Se esper a que el sistema se
enfriara
Se trasvasij a un tubo falcon

Se obtuvo

Se centrifug la solucin

Fase soluble Suero

Fraccin insoluble
Se trat 3 veces con 15
mL de Diclorometano

Se guard para realizar el proceso

de separacin de la lactosa

Se obtiene

Componente A
(lquido)
Realizar tres veces
extraccin lquidoSe aadi sulfato
lquido con 15mL de
diclorometano de magnesio

Se filtr con
embudo provisto
de una mecha de
algodn

anhidro y dejar
secar por 20 min

Componente B
(slido)

Se agit y dej
decantar
Se repiti el
proceso 2 veces
ms

Se aadi 15 mL de Acetona

Se filtr a presin
reducida la acetona

Se sec el
residuo en el
desecador

Se evapor el
solvente obtenido en
el rotavapor

Se determin la masa

Se sec el slido en
el desecador

Se determin la masa

Figura 1: Esquema de la separacin de los componentes de la leche

Vaso de precipitado +
Fase slida (obtenida de la
centrifugacin)

Se aadieron15mL de Diclorometano
Se agit con una varilla de
agitacin
Se esper hasta separacin de
fases
Se repiti proceso 2 veces
ms

Se obtiene

Vaso de precipitado +
Componente A

Vaso precipitado +
Componente B

Figura 2: Esquema de la separacin de la grasa por medio de la adicin de

Diclorometano

Vaso de precipitado ms
Suero
Se disminuy el volumen de
la solucin hasta 1/3 de ella
calentndola en la placa
calefactora

Se aadi un volumen de
etanol que triplique el
volumen de la solucin

Se centrifug
Se obtiene

Fase Slida

Fase lquida

Se sec en desecador

Se trasvasij a matraz
de Erlenmeyer

Se rotul con los

datos de la muestra

Se determin la masa

Formacin de cristales
Se guard en el refrigerador
a 4C

Se lav con cantidad

necesaria de etanol

Se filtraron los
cristales
Se secalenvaco
estufa

Se determin la masa y
midi punto de fusin

Figura
lactosa.

3:

Esquema

para

la

separacin

(*) Todas las centrifugaciones fueron durante 5 minutos y a 6000 RPM

de

la

Parte B:
Tubo de
ensayo vaco, limpio
y seco

Tubo de
ensayo vaco, limpio
y seco
Se aadieron
0,100 g de gelatina

Se aadieron 0,100
g de Casena

Se midieron 2 mL
de agua y aadir
Se midieron 2 mL
de agua y aadieron
Se agit y observ
Se aadi 1 gota de
NaOH 2N y se agit

Se observ y anotaron
los resultados

Se agit y observ

Se aadi 1 gota de
NaOH 2N y se agit

Se observ y anotaron
los resultados

Figura 4: Esquema para la caracterizacin de protenas parte a.

Tubo de
ensayo vaco, limpio
y seco

Tubo de ensayo
vaco, limpio y seco
Se aadieron 0,100
g de Casena

Se aadieron 0,100
g de gelatina
Se aadi 1 mL de
HNO3 concentrado

Se agreg1 mL de
HNO3 concentrado

Se agit

Se agit
Se entibi brevemente
en un bao mara
Se entibi brevemente
en bao mara

Se observaron, registraron e
interpretaron los resultados

Se dej enfriar y
aadir NaOH 2N
hasta obtener un pH
bsico (superior a 7)

Se observaron, registraron e
interpretaron los resultados

Figura 5: Esquema para la caracterizacin de protenas parte b

Se dej enfriar y
aadir NaOH 2N
hasta obtener un pH
bsico (superior a 7)

Tubo de ensayo
vaco, limpio y seco

Tubo de ensayo
vaco, limpio y seco
Se aadrieron
0,100 g de Casena

Se aadieron
0,100 g de gelatina
Se agregaron 1
mL de agua
Se agregaron 1 mL
de agua

Se adicion una
gota de NaOH 4N

Se agregaron 20
gotas de solucin
de Cu+2 al 1%

Se adicion una
gota de NaOH
4N
Se agregaron 20
gotas de solucin
de Cu+2 al 1%

Se agit

Se observaron y
registraron los resultados

Se agit

Se observaron y
registraron los resultados

Figura 6: Esquema para la caracterizacin de protenas parte c

Tubo de ensayo
vaco, limpio y seco
Se agregaron 0,1 g del
azcar problema

Se midieron 2 mL de agua
destilada y se aadieron

Se agregaron 0,3 g de
clorhidrato de fenilhidracina
Se calent a bao mara
agitando ocasionalmente
el tubo para superar la
Se dej enfriar y se filtr a
presin reducida

Tubo de ensayo +
precipitado crudo

Se sec en estufa

Se purific por medio de

recristalizacin

Se midi el punto de fusin

Figura 7: Esquema para la caracterizacin de un azcar problema

Comentario [RS3]: Esto no lo hicieron!!!!

Matraz de Kitasato
vaco limpio y seco

Matraz Erlenmeyer
vaco limpio y seco
Agregar
precipitado crudo
Adicionar cantidad
necesaria de
solvente (solucin
saturada)

Matraz con solucin de

pp. saturada

Seleccionar
solvente adecuado
para la muestra*

Colocar embudo
Bchner y papel
filtro

Con formato: Color de fuente: Texto

1

Conectar bomba
de vaco

Encender la bomba
de vaco y
ambientar
Equipo
montado

Trasvasijar
cuidadosamente

Precipitado filtrado

Con formato: Color de fuente: Texto

1

Con formato: Color de fuente: Texto

1

Dejar secar los

cristales
Desconectar la
manguera
Apagar el equipo
Papel filtro con pp.
recristalizado

Figura 8: Esquema del procedimiento de recristalizacin.

(*) El solvente adecuado permite la disolucin del precipitado en fro

Con formato: Color de fuente: Texto

1

Comentario [RS4]: No lo hicieron!!!

Comentario [RS5]: Puntaje 2,5 de 4 ptos

Comentario [RS6]: Puntaje 2,5 de 4 ptos

Resultados y discusin
Durante la primera parte del prctico ocurrieron varios accidentes con la
muestra., Eel primero (menor) fue que al retirar la muestra de la centrfuga luego
de haber separado el suero de los slidos, el ayudante al sacar el tubo Ffalcon lo
golpe con la tapa de la centrfuga, lo que ocasion la suspensin de una pequea
parte del slido en el suero, y el segundo fue que al momento de conectar el
sistema de rotavapor con el baln de fondo redondo no haban pinzas para
asegurar el montaje, por lo que al comenzar la evaporacin el baln se solt y
cay en la fuente con agua, lo que provoc la prdida de la muestra de grasa, uno
de los factores determinantes para poder identificar el tipo de leche que se tena
(descremada, sin lactosa o entera).
El resto de la primera parte del prctico se llev a cabo con regularidad y una
mayor rigurosidad para poder obtener resultados ptimos.
fase
precipitado
suero

componentes
casena

masa obtenida (g)

8,13

grasa

no se pudo calcular

lactosa (y otros)

no se pudo calcular

protena

3,8

Figura 9: componentes obtenidos de la lecha MP1

Para la segunda parte del prctico se realiz la caracterizacin de las
protenas, ya que es sabido que las lecheras les agregan distintos componentes
para su sabor y dulzor, con esto se trat de caracterizar la muestra del hidrato de
carbono (suero) en esta parte se presentaron bastantes dificultades, puesto que
en primer lugar lo ideal es que el hidrato de carbono caracterstico de la leche
formara un precipitado relativamente cristalino, el que no se form y slo
obtuvimos un precipitados semi coloidal, ms denso que el suero en donde se
encontraba y era muy poco como para poder filtrarlo (por lo que no se pudo
determinar su masa) y hacer una posterior caracterizacin por mtodos qumicos,
pese a ello se llevo a cabo la extraccin de esta muestra mediante reiteradas
alcuotas con la pipeta Pasteur, con el fin de extraer la mayor cantidad de este
pseudoprecipitado que tena nuestra muestra. Con el fin de ir contrastando los
resultados obtenidos conversamos con grupos que presentaban muestras muy
similares en aspecto a la nuestra.

Comentario [JE7]: Esto es una tabla

El primer paso para saber que contena nuestra muestra fue aplicar el
ensayo de Barfoed (esto por que asumimos que nuestra muestra ya presentaba
hidratos de carbono), lo que nos indicar si estbamos en presencia de un mono o
disacrido, la muestra dio negativa (no se observ precipitado o cambio de color
alguno en la solucin), por lo que se asumi que estbamos en presencia de un
disacrido (idealmente lactosa). El paso siguiente fue aplicar hidrlisis e identificar
que unidades de hidratos de carbono tena nuestra muestra, para esto se hizo la
prueba con reactivo de fFehling, luego de mucho esperar no sucedi nada visible.
Llegar a una conclusin slida respecto a qu tipo de leche corresponda
nuestra MP1 es bastante difcil, primero porque al perder la cantidad de grasa (un
indicador bastante estimativo para saber quequ tipo de leche era) solo nos
quedaba averiguar si el producto contena o no lactosa y como segundo punto al
obtener muy poco precipitado no se puede asegurar que las pruebas negativas
hayan sido concluyentes o no sobre la presencia de algn monosacrido (incluso
posterior a la hidrlisis)., Eesto se debi principalmente a varios pequeos errores
procedimentales y quizs de material o incluso a un mal rotulado de nuestra
muestra problema ya que al final de la clase se nos indic que corresponda a
leche entera (por lo que en la identificacin de hidratos de carbono debi haber
dado positivo para fehlingFehling) y nosotros por nuestra comparaciones con otros
grupos llegamos a una vaga conclusin que podra tratarse de leche sin lactosa
por las caractersticas visibles que presentaba nuestra muestra.

Comentario [JE8]: Incorrecto. MP1

corresponde a leche entera

Universidad de Santiago de Chile

Facultad de Qumica y Biologa
Pedagoga en qumica y Biologa
Laboratorio de Orgnica II
Doctora Roco Santander Meyer
2 Semestre 2015

Comentario [RS9]: Puntaje 2,5 de 3 ptos

Referencias.
Derivados
lcteos,
componentes
de
la
leche
http://biblioteca.sena.edu.co/exlibris/aleph/u21_1/alephe/www_f_spa/icon/31496/p
df/b2_car2.pdf (consultado diciembre de 2015)
Composicin
leche
sin
lactosa
entera
Colun
http://www.colun.cl/productos/detalleProducto/46/leche-colun-sin-lactosa-entera1l#.VoCdivnhDtQ (consultado diciembre de 2015)
La composicin qumica de la leche http://vvalenciaudc.tripod.com/Laco.htm
(consultado diciembre de 2015)
Composicin
leche
entera
Ccolun
http://www.colun.cl/productos/detalleProducto/26/leche-colun-blanca-entera1l#.VoCeQ_nhDtQ (consultado diciembre de 2015)

Comentario [RS10]: Orden de aparicin

en el texto???