UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

Deteccin molecular de regiones oncognicas E6 y E7 de Virus del Papiloma

Humano mediante PCR en pacientes Papanicolau negativo del Instituto Regional
de Enfermedades Neoplsicas de La Libertad.

Biologa IV A
(Mesa N 02)

AUTOR: Br. Josu Ricardo Arteaga Nuez.

ASESOR: Blgo. Ms. C. Manuel Pesantes Vera

Curso: Biologa Celular y Molecular.

Alumnos:
-

Campos Loloy, Flix

Castillo Reyes, Kevin
Daz valos, Alejandra Paola
Daz Kong, Heydi
Escobar Cachi, Gnesis Elizabth
Espinoza Amaya, Carmen Brigitte
Snchez Otiniano, Lizeth
INTRODUCCION

Segn la Organizacin Mundial de la Salud (OMS), el cncer cervicouterino (CaCu) es

la segunda causa de mortalidad en mujeres a nivel mundial. Durante los ltimos 40 aos
en Canad, estados Unidos y otros pases la incidencia de CaCu se presenta con tasas
significativamente bajas. Por otra parte, en la mayora de los pases de Amrica Latina y
el Caribe, las tasas anuales se mantienen altas.
La incidencia de infeccin con tipos virales oncognicos, parece ser ms alta que que
aquella con tipos virales no oncognicos, dado que es originado por algunos genotipos
oncognicos del Virus del Papiloma Humano (VPH), motivo por el cual se le ha
considerado como una causa necesaria.
El CaCu es el resultado de la progresin de leves anomalas epiteliales llamadas
displasia o neoplasia intraepitelial cervical (NIC), frecuente en mujeres entre los 20 y 30
aos de edad, pasando por carcinoma in situ, entre los 25 y 35 aos, a carcinoma
invasivo en mujeres mayores de 40 aos. Las mujeres portadoras del ADN del VPH,
con 7 o ms embarazos, tienen un riesgo de padecer la enfermedad 4 veces ms que
mujeres nulparas o con menor nmero de hijos. Los tumores malignos del cuello
uterino en estadios tempranos son identificables por confirmacin histopatolgica.
Aproximadamente la mitad del total de las mujeres que desarrollan cncer del cuello
uterino invasivo mueren despus de los 5 aos de ser diagnosticadas.
En las ltimas dcadas, estudios epidemiolgicos y moleculares demuestran que el VPH
est implicado como agente causal en las primeras etapas de la carcinognesis cervical.
La mayora de hombres y mujeres adquirirn la infeccin durante su vida sexual activa.
Las infecciones genitales por el VPH son transmitidos principalmente por contacto
sexual.
Los papilomavirus estn agrupados en familias diferentes: los Polyomaviridae y los
Papillomaviridae. En la familia Papillomaviridae se ha establecido la existencia de 18
gneros. Los papilomavirus humanos se encuentran ubicados en los gneros Alfa
papillomavirus, Beta papillomavirus, Gama papillomavirus, Mu papillomavirus y
Nu papillomavirus.
En los Alfa papillomavirus se determin 15 especies, en las cuales la especie 7
comprende comprende el VPH 18 de alto riesgo. En la especie 9 se encuentra el VPH
16, tambin de alto riesgo, y tipos relacionados como VPH 31, 33, 52. La especie 10

contiene el VPH 6, VPH 11, siendo los tipos virales contenidos en esta especie aislada
en lesiones benignas.
Los VPHs poseen un alto grado de tropismo por las clulas epiteliales. Producen
infecciones tanto en piel como de mucosas, los virus que infectan las mucosas, se
dividen en genotipos de alto y bajo riesgo. Los de bajo riesgo (LR VPH) son el VPH 6
y 11, que producen verrugas benignas en el tracto genital.
Los VPH de alto riesgo (HR VPH) causan lesiones menos evidentes, y son
clasificados potencialmente oncognicos, ya que estn asociados con ms del 99% de
los canceres. El nmero de HR VPHs varan entre genotipos de VPH 16, 18, 31, 33,
35, 45, 51, 52, 56 y 58 los cuales conllevan constantemente un alto riesgo.
El VPH ha sido simplificado en el 85% del cncer del canal anal, 50% del cncer de
vulva, vagina y pene, 20% del cncer orofaringeo y 10% del cncer larngeo y
esofgico.
Los estudios realizados en VPH revelan que el genoma est constituido por 7200 8000
pb, con un tamao, de 45 55mm de dimetro y una cpside icosadrica compuesta por
72 capsmeros rodeando al genoma. El genoma se divide en tres regiones: una regin
temprana E (Early) la cual codifica para las protenas virales (E6 y E7), necesarias para
la replicacin del DNA viral, la regulacin de la transcripcin y la transformacin e
inmortalizacin celular, una regin Tarda L (Late), que codifica para protenas
estructurales de la cpside (L1 y L2), y una regin de control LCR (Long Control
Region), que contiene la secuencia de ADN que permiten el control de la replicacin y
de la expresin del genoma viral. Se detect la expresin de ms de veinte ARN
mensajeros (ARNm).
As mismo, los productos de genes E6 y E7 interaccionan con las protenas p53 y la
Retinoblastoma (pRb); se denominan oncogenes virales o genes transformantes.
La infeccin por VPH es inicialmente asintomtica, y la transmisin puede ocurrir antes
de que la expresin del virus se manifieste.
La severidad de traumas o erosiones epiteliales favorecen el crecimiento viral.
Los VPHs son altamente especficos de la especie a la que infectan, y presentan un
tropismo muy definido.

Los mecanismos de unin y entrada en la clula an son objeto de investigacin. La

integrina 6 fue la primera protena candidata como receptora para los VPHs. Esta
integrina se expresa fundamentalmente durante la curacin de heridas. La unin estara
mediada por los 15 ltimos aminocidos del extremo carboxi terminal de la protena
L1. Los VPHs entran en la clula por endocitosis mediante una va dependiente de
clatrina. La descapsidacin de la partcula tiene lugar en el endosoma, liberndose el
genoma y las protenas de la cpside en las vesculas endocticas. La protena L2 podra
potenciar la importancia del genoma viral hacia el ncleo.
Los genes E1 y E2 codifican para protenas que unen ADN y se expresan en clulas
basales y parabasales del epitelio. E2, es un factor de la transcripcin, que tiene la
capacidad de unirse a sitios de iniciacin de la replicacin, y junto a E1 reclutan las
protenas Hsp40 de la clula epidrmica para formar dos anillos alrededor del ADN
dando origen a la helicasa viral.
E1 constituye la enzima para reclutar a la ADN polimerasa del husped y a las protenas
de unin a ADN de cadena simple. A esto se suma la protena viral E2 para acoplarse al
ciclo celular del husped. Por otra parte los genes de expresin tarda, L1 y L2 son las
protenas que forman la cpside viral.
El mecanismo de accin de VPH de alto riesgo en el desarrollo de neoplasia cervical, se
explica principalmente por la accin de dos de sus oncoprotenas virales codificadas por
los genes E6 y E7. Estas tienen la capacidad de inmortalizar y transformar
queratinocitos, confirindoles un alto grado de inestabilidad cromosmica del genoma
de la clula husped.
Se considera que el proceso de integracin del genoma del VPH al genoma de la clula
husped es el evento fundamental en la progresin a cncer debido a la sobreexpresin
de las oncoprotenas E6 y E7 por la prdida de E2, protena implicada en su regulacin.
Los oncogenes E6 y E7 se expresan en forma constante en clulas cancerosas, el
bloqueo de la funcin de los genes E6 y E7 lleva a la re-versin del fenotipo maligno de
las clulas cancerosas, y estas oncoprotenas se unen e interactan respectivamente con
las protenas celulares p53 y pRb que son protenas reguladoras del ciclo celular.
El gen E6 es uno de los primeros genes que se expresan durante el ciclo viral y codifica
la oncoprotena E6, la cual est compuesta por 150 aminocidos con dos dominios de

dedos de zinc, caracterizados por la presencia de Cys X X Cys, cuya integridad es

esencial para su funcin y se encuentra distribuida tanto en el citoplasma como el
ncleo. Esta tiene la capacidad de unirse a un sin nmero de blancos celulares que se
muestran en la que le permite bloquear la apoptosis, regular la transcripcin, abatir la
diferenciacin celular y las interacciones clula clula, e incrementar la inestabilidad
cromosmica.
La primera capacidad de las E6 de VPH de alto riesgo fue la capacidad para formar
complejos con p53. Una propiedad no compartida con oncoprotenas E6 de bajo riesgo.
A travs de esta interaccin las protenas E6 de alto riesgo pueden bloquear la capacidad
de p53.
La oncoprotena E6 de alto riesgo promueve la degradacin dependiente de ubiquitina
de p53, y su posterior degradacin. En efecto, la vida media de p53 decae en clulas una
vez expresado el oncogn E6. La expresin de E7 de alto riesgo y sus agentes de pRb
pueden resultar en un incremento de los niveles de p53 dentro de las clulas que a su
vez activa transcripcionalmente la expresin de genes proappticos o genes como p21
que detiene el ciclo celular. E6 puede contrarrestar el incremento inducido por la
protena E7 en p53. E6 inhibe la apoptosis por vas independientes de p53.
La oncoprotena E7 es un polipptido de aproximadamente 100 aminocidos y presenta
tres dominios; CR1 donde se encuentra en el extremo amino terminal, CR2 el cual
contiene un motivo LXCXE donde se une la protena pRb y CR3 por medio del cual
forma dmeros va a un motivo de dedos de zinc.
Algunos estudios reportan que la protena E7 interactan con varias protenas
reguladoras del ciclo celular, especialmente en la transicin de la fase G1 a la fase S del
ciclo celular, entre estas protenas se encuentra la familia de protenas supresoras de
tumor de retinoblastoma (pRb).
E7 desregula el ciclo celular y conduce al incremento de la proliferacin celular,
inmortalizacin y finalmente transformacin.

MATERIAL Y METODOS
RESULTADOS
DISCUSION
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIGRAFICAS