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Prctica 1.

Identificacin de cromosomas sexuales


Equipo 5. Omar Alejandro Moreira Ruedas, Sandra Iveth Ramrez Talavera, Sofa Ruiz
Hernndez, Lilia Lizbeth Serna Contreras. 7 C. Horario: Lunes 13:00 16:00.
Laboratorio de Gentica, Unidad Acadmica de Ciencias Qumicas, Universidad
Autnoma de Zacatecas.
RESUMEN
Se describe la metodologa para la identificacin de cromosomas sexuales, estos se
analizaron a partir de diferentes muestras donadas por compaeros de ambos sexos,
para el caso de identificacin del cromosoma Y a partir de raz de cabello se utiliz una
tincin con acetorceina en cambio para la observacin de corpsculo de Barr se realiz
un frotis de clulas de mucosa oral y uno sanguneo, a estas muestras se les aplic
acetorceina y tincin de Wright respectivamente. Los resultados nos mostraron en los
campos observados el corpsculo como una estructura teida en forma de un pequeo
crculo en el ncleo el cual corresponda a cromosoma Y. En los resultados de la
observacin del corpsculo de Barr se identificaron en la periferia del ncleo de clulas
de la mucosa oral y en la periferia de neutrfilos.
Los cromosomas sexuales humanos X e
INTRODUCCIN

Y son morfolgicamente muy diferentes

La determinacin sexual en la especie

entre s. Su comportamiento en las

humana obedece a un esquema simple,

clulas somticas y en las germinales

donde el sexo femenino produce un solo

durante

tipo de clulas reproductoras o gametos:

caractersticas muy peculiares, dado que

los

sexo

los cromosomas X e Y solo se aparean

masculino produce dos tipos de gametos:

por un corto segmento, llamado la regin

los espermatozoides que llevan un

recombinante.

cromosoma X y los que llevan un

El cromosoma Y humano es pequeo su

cromosoma Y, en proporciones iguales;

longitud es el 2,15% del largo total del

al

este

conjunto haploide de cromosomas y

heterogametismo

contiene aproximadamente el 1% del

masculino produce cigotos de uno u otro

ADN de una clula diploide de humana,

sexo, con igual probabilidad.

es decir entre 50 y 60 Mb de ADN.

vulos,

producirse

mecanismo

mientras

la
de

que

el

fecundacin,

la

meiosis

presenta

En la parte eucromatica del cromosoma

el 50% expresar el otro alelo; entonces,

Y se han definido por lo menos 78 genes

en

y seudogenes, con 156 transcriptos en

producen las protenas codificadas por

total, algunos de los cuales son de gran

ambos alelos, aunque no dentro de la

importancia, empezando por el gen SRY

misma

o conmutador del sexo.

funcional significa que en las hembras las

En 1949 Murray Barr observ cuerpos

clulas no son idnticas con respecto a

condensados

tenan

la expresin de los genes del cromosoma

intensamente en los ncleos de las

X; las hembras son mosaicos para la

clulas

expresin de estos genes.

de

que

gatos

se

hembras.

Esta

las

hembras

clula.

heterocigticas

Esta

se

hemicigosidad

estructura oscura comenz a conocerse


MATERIAL Y MTODOS

como corpsculo de Barr. En 1961 Mary


Lyon propuso que el corpsculo de Barr

Reactivos

Materiales

era un cromosoma X inactivado y su


hiptesis se conoci como la hiptesis de

Lyon. Esta investigadora sugiri que


dentro de cada clula femenina uno de
los dos cromosomas X se inactivara al
azar. Si la clula contuviera ms de dos

Buffer de Wright
Aceite
de
inmersin
Alcohol
Acertorceina
Colorante
de
Wright
Acido actico

Portaobjetos
Cubreobjetos
abatelenguas
Lanceta
Algodn
Plancha
Microscopio
ptico

cromosomas X se inactivaran todos


menos uno. El nmero de corpsculos de

Identificacin del Corpsculo de Barr

Barr presentes en las clulas humanas

en clulas de la mucosa oral

con

diferentes

complementos

de

cromosomas sexuales. Como resultado


de la inactivacin del cromosoma X las
hembras

son

funcionalmente

hemicigticas a nivel celular para los


genes ligados a ese cromosoma. En las
hembras que son heterocigticas para un
locus ligado al X, aproximadamente el
50% de las clulas expresarn un alelo y

Para realizar la toma de muestra se


procede enjuagando la boca del donador
de

muestra,

con

ayuda

de

un

abatelenguas se realiza un raspado en la


mucosa interna de la mejilla. El primer
raspado es eliminado y se repite la toma
de muestra en la misma zona con el
extremo opuesto del abatelenguas. La
muestra

se

extiende

sobre

un
2

portaobjetos (previamente lavado con

portaobjetos. Se agrega 1 gota de

alcohol al 95% y secado) y se fija con

acetorcena sobre el bulbo piloso y se

calor. Se coloca una gota de acetorcena

calienta el portaobjetos durante 30

en el portaobjetos y se cubre con un

segundos a 60C en una plancha de

cubreobjetos. Se visualiza al microscopio

calentamiento. Se agrega una gota de

ptico a seco dbil para identificar el

cido actico al 50%, con ayuda de un

campo, posteriormente a inmersin.

bistur se separa la vaina del resto del

Identificacin del Corpsculo de Barr


en neutrfilos de un frotis sanguneo

cabello, con un papel filtro se quita el


exceso de cido actico. Se aaden 2
gotas de acetorcena y se coloca el

Para obtener la muestra se desinfecta

cubreobjetos. Se calienta la laminilla 5

con alcohol y se realiza una puncin con

minutos a 40C, con la goma de un lpiz

una lanceta en el dedo ndice de la mano.

se presiona suavemente la preparacin.

Se extrae una gota de sangre y se coloca


en un extremo de un portaobjetos

Notas:

(previamente lavado con alcohol al 95%).

La preparacin de la muestra se
realiz dos veces.

Con ayuda de otro portaobjetos se

realiza el frotis sanguneo y se deja

No se utiliz control negativo.

secar. Se tie con Wright durante 8


minutos, se coloca el buffer de Wright por
10 minutos. Se lava a chorro de agua y
se deja secar. Se observa al microscopio
ptico a seco dbil para identificar el
campo, posteriormente se visualiza a

RESULTADOS
En

la

prctica

Identificacin

de

cromosomas sexuales se busc el


cromosoma a partir de una muestra de
cabello proveniente de un compaero
varn, se localiz un cmulo de clulas

inmersin.

del folculo piloso en donde se observ el


Identificacin del cromosoma Y en
raz de cabello

corpsculo como una estructura teida


en forma de un pequeo crculo en el

portaobjetos

ncleo obteniendo los siguientes campos

(previamente lavado con alcohol al 95%

observados a partir de microscopia

y secado) con los datos de quien donar

ptica. En cuanto a la observacin del

la muestra, se coloca el cabello en el

corpsculo de Barr se analiz por medio

Se

identifica

un

de citologa en clulas de la mucosa oral


como en neutrfilos, una masa en el
ncleo de una coloracin mas intensa en
clulas de la mucosa oral y para el frotis
sanguneo realizado se vi la estructura
como un tambor en el nucleo.

Figura 3. Cromosoma Y, tincin con acertoceina

CONCLUSIN

Figura 1. Corpsculo de Barr en clula de la


mucosa oral, teido con acetorcena.

Figura 2. Corpsculo de Barr en neutrfilo,


teido con Wright

Se observ por medio de citologa el


corpsculo de Barr presente tanto en
clulas de la mucosa oral como en
neutrfilos, este se vea como una masa
en el ncleo de una coloracin mas
intensa en clulas de la mucosa oral y en
neutrfilos como un tambor en el nucleo.
En la observacin de cromosoma Y a
partir de raiz de cabello se identific una
masa de un color ms oscuro en el
interior del ncleo, su tamao era muy
pequeo eso se logr a partir de tecinas
de fijacin y el mtodo Schmidt con lo
cual los objetivos planteados se
comprobaron.
DISCUSIN
De acuerdo con la bibliografa consultada
el corpsculo de Barr puede ser visto
sobre la envoltura nuclear de las clulas
de las hembras. Comparando con los
resultados obtenidos, el corpsculo de
Barr se identific en la periferia del
ncleo de clulas de la mucosa oral y en
la periferia de neutrfilos. Por otro lado,
el cromosoma Y suele presentarse
bastante teido y situarse en la periferia
celular. De acuerdo con los resultados
obtenidos el cromosoma Y se identific
en la periferia nuclear en forma de un

punto teido en clulas de raz de


cabello.

Pierce B.A. 2009. Gentica un


enfoque conceptual. Editorial
Mdica Panamericana, 3
edicin, pp. 90,95.

Solari J. 201. Gentica


Humana: Fundamentos y
aplicaciones en medicina.
Editorial medica panamericana
4 Edicin, pp. 230-235.

REFERENCIAS

Scott G. F. 2005. Biologa del


desarrollo. Editorial Mdica
Panamericana, 7 edicin, pp.
135.

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