REPARACIN DEL DNA

BQ31. Dr Gonzlez Castao

El DNA est siendo continuamente daado (radicales libres de oxgeno, luz

ultravioleta, agentes qumicos txicos...)
Afortunadamente nuestras clulas tienen mecanismos de reparacin que evitan
los problemas; ocurre as en toda la escala filogentica (la levadura por ejemplo tiene
50 sistemas distintos implicados en la reparacin del DNA)
Si la reparacin conlleva la recuperacin del DNA la reparacin habr sido
efectiva; si no, pueden ocurrir dos cosas: que la clula muera o que se transforme en
clula tumoral. Por lo tanto la reparacin del DNA est ntimamente ligada al ciclo
celular.
ALTERACIONES EN EL DNA
1.- Deaminacin y depurinacin espontneas (CAUSA + FREQ): perdemos 10.000 purinas
y varios cientos de pirimidinas al da.

2.- formacin de dmeros de timina por la accin de la luz UV

3.- errores de replicacin e incorporacin de uracilos en lugar de timidina
4.- oxidacin de bases
5.- alquilacin de bases (metilacin)
Tambin hay alteraciones que rompen la estructura del DNA (los enlaces fosfodiester):
De una cadena: fcil reparacin: DNA ligasas.
De las 2 cadenas: Rads ionizantes y algunos fcos antitumorales: reparacin por
recombinacin homloga, utilizando el otro cromosoma, pero si se rompen los dos
cromosomas es imposible repararlo. Muchas veces es letal.
Alteracin de bases: por sobrecruzamiento de ambas cadenas. (Unin covalente de
cadenas por lo que no pueden separarse normalmente estn unidas por puentes de
hidrgeno (ph): necesita reparacin por recombinacin. Es un dao oxidativo q suele ser
muy extenso y conduce a la muerte celular.

El DNA sufre alteraciones a consecuencia de:

1.- Agentes qumicos y fsicos: externos e internos por radicales libres y agentes
alquilantes (actan en todas las fases):
- BER: reparacin por escisin de bases. Es bastante bueno y sencillo, pero su
problema es que va por bases; si la base no est daada no repara.
- NER: reparacin por escisin de nucletidos. (ms importante). Es un
sistema altamente conservado (tanto en secuencia como en funcin ) desde
las bacterias hasta los humanos. Es un sistema complejo.
2.- Errores durante la replicacin: estos errores se pueden:
- Eliminar por reparacin postreplicativa: MMR (reparacin del mal
apareamiento de bases). Fase S
- Reparacin por recombinacin.
DAOS POR RADIACIONES IONIZANTES
1.- DEAMINACIN Y DEPURINACION
- Se trata de un proceso fisiolgico
- Se pierden A y G
- Tambin grupos NH2 de C ( C pasa a U )
- Se crean por tanto sitios apurnicos / apirimidnicos
- La reparacin la lleva a cabo el sistema BER ( Base
Excision Repair o repacin por excisin de bases )

SISTEMA BER
Trabaja sobre bases daadas creando sitios apurnicos/apiridmicos.
Est formado por las siguientes enzimas:
1.- DNA glicosilasa: rompe el enlace glicosdico (ribosa-base) y libera la base
daada, dejando un sitio sin base
2.- AP endonucleasa: (AP significa apurnica/apirimidnica) rompe el enlace
fosfodiester del sitio apurnico o apirimidnico resultante de la accin de la glicosilasa:
corta en sitios AP/AP.
3.- Sistema de replicacin
Es un sistema universal, til para corregir pequeos defectos de una base.
No puede corregir daos por UV porque no reconoce el enlace covalente de los dmeros
de timina como bases extraas: sistema NER.
-

DAOS POR LUZ UV

La luz UV incide sobre el DNA y provoca que se forme
un ciclo butano entre dos T que estn prximas, y as
quedan unidas por un enlace.
La reparacin la lleva a cabo el sistema NER (Nucleotide
Excision Repair): corta el enlace fosfodister.
Tambin puede reparar otros daos de DNA a parte de la
T-T
Est presente en bacterias, levaduras y humanos.

SISTEMA NER
Primero debe buscar mediante protenas especficas las alteraciones de la doble hlice
del DNA: Scan DNA. Luego mediante una exicinucleasa (q es endonucleasa) corta la
hebra daada lejos 3 y 5 respecto al dao (aprox 25 nucletidos). Por ltimo entra el
sistema de reparacin y restaura a partir de la cadena contraria (sistema de replicacin).
E.COLI
HUMANO
Scan de DNA:

UvrA

Excinucleasa:

UvrB y UvrC

Desensamblaje:

UvrD

XPA
XPF/ERCC1
XPF/XPG
RCF

Sistema de replicacin
-

UvrA: tanto esta como las de humano son protenas que scanean el DNA para
detectar alteraciones. Para acordarse del nombre: fcil, en E.Coli son ABCD y
delante llevan las siglas recombinante ( de Ecoli ) sensible a luz UV. De hecho el
sistema se llama NER o UvrABCD.
XPA: ella es la que reconoce y XPF/ERCC1 le sirve de ayuda. XP viene, no por
Microsoft, sino por la enfermedad prototipo que origina su dficit: Xeroderma
Pigmetoso.

UvrD y RCF desamblan la excinucleasa para que entre el sistema de replicacin.

El objetivo es formar un complejo que encuentre el defecto y corte por delante de donde
se encuentra.
3.- ERRORES DE REPLICACIN
Son corregidos por el sistema MMR (miss match repair ): corrige errores de
apareamiento.
SISTEMA MMR
1.- Scanning de metilacin de bases: lo realizan:
Mut S : E.Coli
hMSH2- MSH6 : humano
hMSH2-MSH3: humano
Estas enzimas detectan errores de la cadena sintetizada de novo: comprueban si
la complementariedad de bases es correcta, pero no es Dios: slo detecta bases
metiladas y slo el DNA molde est metilado, el recin sintetizado no; por tanto sigue
al molde y si detecta alguna alteracin para.
Para recordar el nombre de las humanas: h de humano, MS de Mut S como
Ecoli y H de homlogo (homlogo humano de MutS).
2.- Sistema endonucleasa: (as, el sistema Mut fija y seala el lugar del fallo)
Mut L
Mut H (endonucleasa): corta

ECOLI

MLH1 PMS2
MED 1 (endonucleasa)

HUMANO

Los dficits genticos en la maquinaria de reparacin del DNA pueden conducir a una
mayor susceptibilidad al cncer, gentica o familiar. En algunos cnceres se produce un
fallo en la reparacin postreplicacin que lleva a cabo el sistema MMR, sobre todo en el
de colon: cncer de colon hereditario no poliposo (HNPCC), sd Lynch II.
IMPORTANTE!!!! Recordad que el DNA mitocondrial tambin se daa; es ms
susceptible que el nuclear (formacin de radicales libres de oxgeno en su interior).
Adems el dao aumenta exponencialmente con la edad. Algunas de las enfermedades
que tienen mayor incidencia en el adulto, tienen un componente de dao en el DNA
mitocondrial.
TRASTORNOS ASOCIADOS AL DFICIT DEL SISTEMA DE REPARACIN
(SISTEMA NER)
1.- XERODERMA PIGMENTOSO (XP)
- Cuadro caracterizado por la presencia de fotosensibilidad, aparicin de cnceres de
piel...
- Se produce una mutacin en todos los factores XP (que son protenas esenciales para
la reparacin del DNA como ya hemos visto) del sistema NER.
2.- SINDROME DE COCKAYNE (CS)

En la clnica aparece enanismo, senilidad precoz, sordera, hipersensibilidad a la luz

UV...
Se produce por una mutacin en CSA, CSB y XPG. Los dos primeros tienen que ver
con la puesta en marcha de la reparacin, que es la transcripcin. Nuestras clulas
generalmente no estn replicando DNA contin uamente, pero s transcribiendo;
quin mejor que la RNApolimerasa para detecar alteraciones? Por lo tanto si la
RNA poli encuentra cualquier alteracin llamar al sistema NER a travs de estas
dos protenas, CSA y CSB. Se conecta as la transcripcin con la reparacin: NER
tiene 2 familias, la reparadora y la que se da cuenta.
Dentro del NER algunas protenas son componentes del THF2 que es un factor de
transcripcin general.

3.- TRICOTIODISTROFIA (TTD)

- Retraso fsico y mental, deficiencia de azufre, pelo y uas quebradizas, tumores de
piel...
- Se produce por una mutacin en XPD, que es una protena implicada en el reconocimiento
del sitio de la lesin. A parte de este problema de reparacin existe un problema de transcripcin, ya
que afecta a un factor de transcripcin llamado TS ( termosensible ). A temperatura normal no ocurre
nada pero cuando aumenta la temperatura ( fiebre ) ocurren cosas desastrosas: se cae el pelo, las
uas...

TRANSTORNOS ASOCIADOS A DFICIT DE HELICASAS Y LIGASAS:

Son enfermedades en las que no existe la DNA helicasa, que es la encargada de abrir la
cadena de DNA para que acten los distintos sistemas de reparacin.
1.- SINDROME DE BLOOM
- Raro, judos Ashkenazi
- Enanismo, eritema telangiectasia, fotosensibilidad cutnea, aumento en la incidencia
de determinados cnceres ( carcinomas, leucemias, linfomas)
- Falta la DNA ligasa I y la DNA helicasa Q BLM: ( BLM: Bloom) se producen
mltiples alteraciones cromosmicas a consecuencia de ello ( reordenamiento, alteracin de la
transcripcin...) a nivel somtico.

2.- SINDROME DE WERNER

- Raro, japoneses.
- Envejecimiento prematuro (aterosclerosis, diabetes tipo 2, osteoporosis, cataratas...)
Predisposicin al cncer muy aumentada para cualquier tipo de tumor excepto para
los carcinomas !!!!!! ( diagnstico diferencial del Werner vs Bloom )
- Se produce por el dficit de la DNA helicasa Q WRN: ( WRN: Werner ) la maquinaria de
transcripcin necesita que alguien vaya desenroscando; a consecuencia de este dficit se producen
mltiples alteraciones cromosmicas

TRANSDUCCIN DE LA SEAL DE DAO

La reparacin del DNA requiere:
1.- DNA daado en una zona
2.- Sensor: detecta el dao
3.- Transductor: monta la maquinaria de amplificacin de seal del dao. Son
protein kinasas
4.- efector: ejecuta el stop del ciclo celular
5.- llegada del sistema de reparacin
6.- reparacin del dao: la clula contina con su ciclo normal
ATAXIA TELANGIECTASIA

Ataxia, telangiectasia, disfuncin del sistema inmune, tumores linforeticulares

Alteraciones cromosmicas ( traslocaciones)
Hipersensibilidad a radiaciones gamma y a drogas radiomimetizantes
Se produce por la alteracin en la ATM (ataxia-telang mutada), una
proteinkinasa que est en la ruta de sealizacin del dao del DNA
( transductor ) para la parada del ciclo celular: Falla el sensor, no el sistema de
reparacin.

FALLOS EN LA REPARACIN DE ROTURAS DE DOBLE CADENA (DSB)

Se hace por recombinacin homloga siempre. Este sistema de reparacin es menos
conocido.
Existen dos enfermedades relacionadas con su fallo:
1.- ANEMIA DE FANCONI
- Pancitopenia progresiva, baja estatura, dficit seo, hiper-hipo pigmentacin de la
piel, hipersensibilidad al oxgeno...
- Hipersensibilidad a agentes entrecruzadores (cross-linking) (usados en el
tratamiento contra el cncer: sustancias que anclan las dos cadenas de DNA con
enlaces covalentes; no se puede abrir, luego no se replica) que se usan en el
tratamiento de leucemias y tumores cutneos.
- Se produce la alteracin en el sistema de reparacin por recombinacin homloga.
Varios genes implicados (FANCABC): FANCA, FANCC, FANCD2, FANCE, FANCGF,
FANCCG y el BRCA1, este ltimo interacta con FANC2.
2.- CANCER DE MAMA Y OVARIO
- BRCA1 y BRCA2 estn implicados con el cncer de mama y ovario.
- Inicio precoz
- El sistema de reparacin por recombinacin homloga BRCA2 se asocia con Rad51,
que hace el montaje. BRCA1 se encarga del mecanismo sensor.
MECANISMO DE ACTIVACIN DE ATM/ATR:

CONCLUSIN: FALLOS EN LA REPARACIN Y PREDISPOSICIN A

CNCER

Tanto fallos en la sealizacin como en la reparacin puden dar lugar a cncer pues las
mutaciones en estos puntos predisponen a la malignidad celular.