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DOCENTE
:
MSc. Muoz Vilchez, Guadalupe
ALUMNAS
:
CERVERA YAUCE katy
DAS DAVILA Dayani
HUANCAS MONTALVAL Mariela
JAVE ZAPATA Diana Raquel
PRADA CHONTO Mixi Lizbeth
TAFUR MUOZ Rebeca
VSQUEZ SUAREZ Nataly
CICLO
: 2011 I
INTRODUCCIN
OBJETIVOS
cidos nucleicos
Definicin
Composicin
Los cidos nucleicos estn formados por la condensacin de unidades
bsicas estructurales llamadas:
NUCLEOTIDOS
Unidos por enlace fosfodiester. Un nucletido est constituido por:
Nuclesido
La unin de una pentosa con una base nitrogenada forma
un nuclesido. El enlace se forma entre el carbono anomrico del azcar y
uno de los nitrgenos de la base nitrogenada. En la unin se forma una
molcula de agua. Este enlace recibe el nombre de
Enlace N-glucosdico. Si la pentosa es una ribosa, tenemos
un ribonuclesido. Estos tienen como bases nitrogenadas la adenina,
guanina, citosina y uracilo. Si la pentosa es un desoxirribosa, tenemos
un desoxirribonuclesido. Estos tienen como bases nitrogenadas la
adenina, citosina, guanina y timina. Se nombra aadiendo la terminacin osina, si derivan de una base prica, o -idina, se sta es pirimidnica, al
nombre de la base que lo forma: adenosina, guanina, citidina, timidina,
etc. Si la pentosa es la desoxirribosa se antepone el prefijo desoxi-; por
ejemplo, desoxiaguanosina, desoxicitidina, etc.
Los nucletidos se forma por la unin de un nuclesido con el cido
fosfrico, esta se produce mediante la esterificacin del azcar por el
cido fosfrico. Es una unin fosfoster entre un OH del cido fosfrico y
el OH situado en el carbono 5 del azcar, con formacin de una molcula
de agua. Segn el azcar sea la ribosa o la desoxirribosa,
tendremos ribonucletidos odesoxirribonucletidos.
La nomenclatura de los nucletidos es compleja. Los nucletidos se
nombran como el nuclesido del que proceden eliminando la a final y
aadiendo la terminacin monofosfato, por ejemplo, adenosin monofosfato
(AMP). Llevan el prefijo desoxi-, en el caso de estar formadas por la
pentosa desoxirribosa. (dAMP)
ABSORBANCIA A 260 nm
Por tanto, la absorbancia a 2.600 se puede utilizar como una medida del
estado fsico de la molcula de ADN. Las curvas de fusin tienen forma de S
observndose un aumento brusco de la absorbancia al llegar a una
temperatura determinada, la temperatura de fusin.
Tipo de Secuencia
N de repeticiones
N de nucletidos
A (SU)
5.700
B (SU)
7.530
C (SBNC)
3.720
D (SBNC)
4.350
E (SR)
200
500
F (SAR)
10.000
300
G (SAR)
1.000.000
200
Complejidad
22.300
Eco RI
Hae III
Endonucleasa
de restriccin
Bacteria de la que
procede
Eco RI
Escherichia coli
Eco RII
Escherichia coli
Hae III
Haemophilus aegyptus
Hin dII
Haemophilus influenzae
Hin dIII
Haemophilus influenzae
Hpa I
Haemophilus
parainfluenzae
Hpa II
Haemophilus
parainfluenzae
Ava I
Anabaena variabilis
Clasificacin
ADN
El ADN, cido desoxirribonucleico, o en ingls DNA, se define como un
biopolmero (compuesto qumico formado por unidades estructurales que se
repiten) que constituye el material gentico de las clulas. Est formado por
unidades que estn ordenadas segn una secuencia y es ah donde se
encuentra la informacin para la sntesis de protenas. Es el responsable del
cdigo gentico, que determina en gran medida las caractersticas de los
seres vivos al nacer.
La molcula de ADN est formada por dos cadenas formada por compuestos
qumicos llamados nucletidos. Existen cuatro tipos de nucletidos
diferenciados por sus bases nitrogenadas; adenina, timina, citosina y guanina.
Las cadenas forman una especie de cadena retorcida, lo que permite que el
ADN se pueda desenrollar y hacer una lectura de ste. Cada nucletido posee
una afinidad qumica con aquel que se encuentra en paralelo en la otra
cadena; adenina tiene afinidad con la timina, y la citosina con la guanina. Esta
afinidad qumica se ve empricamente con la unin de un enlace de hidrgeno.
Los nucletidos estn formados por un cido fosfrico, una desoxirribosa y
una base nitrogenada.
La estructura del ADN es tridimensional, por lo tanto posee tres niveles de
distintas caractersticas:
Estructura primaria:
Cadena de nucletidos encadenados seguidos por una secuencia. Aqu
se encuentra la informacin gentica de la clula
Estructura secundaria:
Doble hlice. Mecanismo de duplicacin del ADN. Complementos en
las bases nitrogenadas.
Estructura terciaria:
Almacenamiento del ADN en un volumen reducido. Esto vara
dependiendo la clula si es procarionte (disperso en el citoplasma) o
eucarionte (almacenado complejamente en el ncleo).
ESTRUCTURA
Existen cuatro bases: dos pricas denominadas adenina (A) y guanina (G) y
dos pirimidnicas denominadas citosina (C) y timina (T). Para formar el ADN,
se unen largas cadenas de estas bases mediante molculas de fosfato y
azcar. La estructura de doble hlice (ver figura) del ADN no fue descubierta
hasta 1953 por James Watson y Francis Crick (el artculo A Structure for
Deoxyribose Nucleic Acid fue publicado el 25 de abril, 1953) en Nature), que
dejaba claro el modo en que el ADN se poda "desenrollar" para que fuera
posible su lectura o copia. Una larga hebra de cido nucleico est enrollada
alrededor de otra hebra formando un par entrelazado. Dicha hlice mide 3,4
nm de paso de rosca y 2,37 nm de dimetro, y est formada, en cada vuelta,
por 10,4 pares de nucletidos enfrentados entre s por sus bases
nitrogenadas. El rasgo fundamental es que las bases de nucletidos de una
hebra "casan" con la especie de nucletidos de la otra, en el sentido de que la
adenina siempre casa con la timina (lo que se denomina A....T) y la guanina
siempre casa con la citosina (G...C). Este emparejamiento corresponde a la
observacin ya realizada por Chargaff (1905-2002) de que en todas las
muestras la cantidad de adenina es siempre la misma que la timina, como
ocurre con la guanina y la citosina, as se aseguran cantidades iguales. As
una pequea purina (adenina y guanina) est siempre emparejada con una
mayor pirimidina (timina y citosina), siendo de este modo uniforme la doble
hlice (no hay "bultos" ni "pellizcos"). La cantidad de purina (A+G) es siempre
igual a la cantidad de pirimidina (T+C). Se estima que el genoma humano
tiene alrededor de 3.000 millones de pares de bases. Dos unidades de medida
muy utilizadas son la kilo base (kb) que equivale a 1.000 pares de bases, y la
mega base (Mb) que equivale a un milln de pares de bases
El modelo de doble hlice permite explicar las propiedades que se esperan del
ADN:
Enlace de hidrgeno
La adhesin de las dos hebras de cido nucleico se debe a un tipo especial de
unin qumica conocido como puente de hidrgeno. Los puentes de hidrgeno
son uniones ms dbiles que los tpicos enlaces qumicos, esto significa que
las dos hebras de la hlice pueden separarse con facilidad, quedando
intactas.
A--T
C---G
Papel de la secuencia
En un gen, la secuencia de los nucletidos a lo largo de la cadena de ADN
define una protena que un organismo es capaz de sintetizar o "expresar" en
uno o varios momentos de su vida, usando la informacin de dicha secuencia.
La relacin entre la secuencia de nucletidos y la secuencia
de aminocidos de la protena es determinada por un mecanismo celular
de transcripcin, conocido de forma general como cdigo gentico.
En muchas especies de organismos, slo una pequea fraccin del total de la
secuencia del genoma codifica protenas. La funcin del resto es especulativa.
La secuencia tambin determina la susceptibilidad del ADN para
ser cortado por restriccin enzimtica, la quintaesencia de la ingeniera
gentica. La posicin en la que es secuenciada en un genoma individual
determina la huella de ADN. (Por completar)
ADN FSIL
El estudio del ADN fsil, se usa en paleo gentica, utiliza la reaccin en
cadena de la polimerasa PCR, permitiendo estudiar registros moleculares de
ADN que sean lo suficientemente antiguos, pudiendo realizar secuenciaciones
y estudiar su composicin. Los restos de ADN del fsil ms antiguo que se
conoce (que han podido ser recuperados y ledos) pertenecen a
losneanderthales no sobrepasando los 50.000 aos.
Uno de sus usos ha sido los anlisis comparativos de ADN que concluyen que
en nuestro genoma no hay herencia neandertal
ADN GIRASA
Una de las ADN topoisomerasas que acta durante la replicacin del ADN
para reducir la tensin molecular causada por el supe enrollamiento. La ADN
girasa produce cortes de doble cadena y despus los une.
La ADN girasa, como topoisomerasas, juega un papel muy importante en la
modulacin del estado topolgico del ADN, regulando la estructura supe
helicoidal del mismo.
ADN MITOCONDRIAL
En las clulas eucariotas la mayor parte del cdigo gentico est dentro del
ncleo celular, pero tambin hay orgnulos dentro del citoplasma que
contienen ADN, que es llamado mADN o ADN mitocondrial para diferenciarlo
del ADN nuclear.
El cdigo con el que las mitocondrias representan las protenas es parecido al
nuclear, pero no es igual, hay algunas diferencias.
ADN RECOMBINANTE
ADN recombinante: variedad de tcnicas que los bilogos moleculares utilizan
para manipular las molculas de ADN. El proceso consiste en tomar una
molcula de ADN de un organismo, sea un virus, planta o una bacteria y
llevarla al laboratorio para manipularla y ponerla de nuevo dentro de otro
organismo. Esto se puede hacer para estudiar la expresin de ungen e incluso
en algunos casos, para tratar una enfermedad gentica humana.
La molcula de ADN se abre como una cremallera por ruptura de los puentes
de hidrgeno entre las bases complementarias liberndose dos hebras y la
ADN polimerasa sintetiza la mitad complementaria aadiendo nucletidos que
se encuentran dispersos en el ncleo. De esta forma, cada nueva molcula es
idntica a la molcula de ADN inicial.
La replicacin empieza en puntos determinados: los orgenes de replicacin.
Las protenas iniciadoras reconocen secuencias de nucletidos especficas en
esos puntos y facilitan la fijacin de otras protenas que permitirn la
separacin de las dos hebras de ADN formndose una horquilla de
replicacin. Un gran nmero de enzimas y protenas intervienen en el
mecanismo molecular de la replicacin, formando el llamado complejo de
replicacin o replicona. Estas protenas y enzimas son homlogas en
eucariotas y arqueas, pero difieren en bacterias
Modo de operacin
En cada horquilla de replicacin, la ADN polimerasa y otras enzimas sintetizan
dos nuevas cadenas de ADN que son complementarias respecto a las 2
cadenas originales. Durante este proceso, la ADN polimerasa reconoce una
base nucleotdica no apareada de la cadena original y la combina con un
nucletido libre que tiene la base complementaria correcta. Luego, la ADN
polimerasa cataliza la formacin de nuevos enlaces covalentes que ligan el
fosfato del nucletido libre entrante con el azcar del nucletido previamente
agregado en la cadena hija en crecimiento. De esta forma, la ADN polimerasa
sintetiza el esqueleto de azcar-fosfato de la cadena hija.
Las ADN polimerasas tambin realizan otras funciones durante el proceso de
replicacin. Adems de participar en la elongacin, desempean una funcin
correctora y reparadora gracias a su actividad exonucleasa 3', que les confiere
la capacidad de degradar el ADN partiendo de un extremo de ste. Es
importante que existan estos mecanismos de correccin ya que de lo contrario
los errores producidos durante la copia del ADN daran lugar a mutaciones.
Punto de origen
Un origen de replicacin es el lugar del cromosoma donde se inicia la
replicacin de la cadena de ADN. Se trata, por lo tanto, de una determinada
secuencia de nucletidos a partir de la cual se desarrolla una horquilla de
replicacin que dar lugar a las dos cadenas idnticas de ADN resultantes.
En los organismos procariotas suele encontrarse un nico origen de
replicacin en su ADN, mientras que en los eucariotas se encuentran
normalmente mltiples orgenes en cada cromosoma, lo que permite una
velocidad razonable de replicacin de las largas cadenas de ADN de estos
organismos. Esta multiplicidad de orgenes en una cadena conforma las
denominadas burbujas de replicacin.
Caractersticas generales
En cada una de las molculas hijas se conserva una de las cadenas
originales, y por eso se dice que la replicacin del ADN es
semiconservadora. Hasta que finalmente se pudo demostrar que la
replicacin es semiconservadora, se consideraron tres posibles modelos
para el mecanismo de la replicacin
Etapas de la transcripcin
Pre iniciacin
que estabiliza el complejo TFII D-ADN; los factores TFII B y TFII E se unen al ADN
y el TFII F (una helicasa dependiente de ATP) y al final la ARN polimerasa.
Todo ello forma un complejo que se llama complejo de pre iniciacin cerrada.
Cuando la estructura se abre por mediacin del factor de transcripcin TF II H,
da comienzo la iniciacin.
Iniciacin
Primero, una Helicasa separa las hebras de ADN en estas denominadas cajas
TATA, ya que la adenina y timina poseen un doble enlace, mientras que la
citosina y guanina poseen uno triple. Posteriormente se unen las protenas de
transcripcin (TBP, TF2D, TF2B) permitiendo, de esta manera, el acceso de la
ARN polimerasa al molde de ADN de cadena simple, siendo esta la ultima en
posicionarse. Aunque la bsqueda del promotor por la ARN polimerasa es
muy rpida, la formacin de la burbuja de transcripcin o apertura del ADN y
la sntesis del cebador es muy lenta. La burbuja de transcripcin es una
apertura de ADN desnaturalizado de 18 pares de bases, donde empieza a
sintetizarse el ARN cebador a partir del nucletido nmero 10 del ADN molde
de la burbuja de transcripcin. La burbuja de transcripcin se llama complejo
abierto. La ARN polimerasa es una enzima formada por 5 subunidades: 2
subunidades , 1 subunidad , 1 subunidad ' y 1 subunidad que tiene
como funcin la unin de ribo nucletidos trifosfato. Cuando se forma el
complejo abierto, la ARN polimerasa comienza a unir ribonucletidos mediante
enlaces fosfodister, y una vez que se forma el primer enlace fosfodister,
acaba la etapa de iniciacin. Y comienza as comienza la siguiente etapa.
Elongacin
Terminacin
ARN
El ARN es un polmero de ribonucletidos uracilo, citosina, guanina y adenina,
organizado en una banda simple, como la mitad de una escalera con la misma
estructura del ADN: los laterales estn formados por los grupos fosfatos y
azcares de los cuales parte una base nitrogenada.
Para traducir de un idioma a otro se necesitan un diccionario y unas reglas
gramaticales; igualmente, para traducir el ADN a las protenas se necesita una
clave o cdigo gentico de equivalencia, que se denomina Cdigo Gentico.
No todos los genes que existen en una clula se expresan todo el tiempo. A lo
largo del desarrollo y dependiendo de las necesidades celulares, una veces se
expresan unos genes y otras veces otros del cual se origina.
El gen o los genes que se van a expresar se copian primero mediante un
proceso que se denomina transcripcin, y que consiste en que la secuencia
de nucletidos correspondiente al gen en cuestin se transcribe a una
molcula de ARN mensajero (ARNm), que se separa del ADN y viaja desde el
Biosntesis
La biosntesis de ARN est catalizada normalmente por la enzima ARN
polimerasa que usa una hebra de ADN como molde, proceso conocido con el
nombre de transcripcin. Por tanto, todos los ARN celulares provienen de
copias de genes presentes en el ADN.
La transcripcin comienza con el reconocimiento por parte de la enzima de un
promotor, una secuencia caracterstica de nucletidos en el ADN situada antes
del segmento que va a transcribirse; la doble hlice del ADN es abierta por la
actividad helicasa de la propia enzima. A continuacin, la ARN polimerasa
progresa a lo largo de la hebra de ADN en sentido 3' 5', sintetizando una
molcula complementaria de ARN; este proceso se conoce como elongacin,
y el crecimiento de la molcula de ARN se produce en sentido 5' 3'. La
secuencia de nucletidos del ADN determina tambin dnde acaba la sntesis
del ARN, gracias a que posee secuencias caractersticas que la ARN
polimerasa reconoce como seales de terminacin.18
Tras la transcripcin, la mayora de los ARN son modificados por enzimas. Por
ejemplo, al pre-ARN mensajero eucariota recin transcrito se le aade un
nucletido de guanina modificado (7-Metilguanosina) en el extremo 5' por
medio de un puente de trifosfato formando un enlace 5' 5' nico, tambin
conocido como "capucha" o "caperuza", y una larga secuencia de nucletidos
de adenina en el extremo 3' (cola poli-A); posteriormente se le eliminan los
intrones (segmentos no codificantes) en un proceso conocido como splicing.
En virus, hay tambin varias ARN polimerasas ARN-dependientes que usan
ARN como molde para la sntesis de nuevas molculas de ARN. Por ejemplo,
varios virus ARN, como el polio virus, usan este tipo de enzimas para replicar
su genoma.
Estructura
Tipos de ARN
El ARN mensajero (ARNm) es el tipo de ARN que lleva la informacin del ADN
a los ribosomas, el lugar de la sntesis de protenas. La secuencia de
nucletidos del ARNm determina la secuencia de aminocidos de la
protena.21 Por ello, el ARNm es denominado ARN codificante.
No obstante, muchos ARN no codifican protenas, y reciben el nombre de ARN
no codificantes; se originan a partir de genes propios (genes ARN), o son los
intrones rechazados durante el proceso de splicing. Son ARN no codificantes
el ARN de transferencia (ARNt) y el ARN ribosmico (ARNr), que son
elementos fundamentales en el proceso de traduccin, y diversos tipos de
ARN reguladores.22
Ciertos ARN no codificantes, denominados ribozimas, son capaces de
catalizar reacciones qumicas como cortar y unir otras molculas de ARN, 23 o
formar enlaces peptdicos entre aminocidos en el ribosoma durante la
sntesis de protenas.
ARN reguladores
Muchos tipos de ARN regulan la expresin gnica gracias a que son
complementarios de regiones especficas del ARNm o de genes del ADN. .
ARN mitocondrial
La mitocondrias tienen su propio aparato de sntesis proteica, que incluye
ARNr (en los ribosomas), ARNt y ARNm. Los ARN mitocondriales (ARNmt o
mtARN) representan el 4% del ARN celular total. Son transcritos por una ARN
polimerasa mitocondrial especfica
ARN mensajero
El ARN mensajero es el cido ribonucleico que contiene la informacin
gentica procedente del ADN para utilizarse en la sntesis de protenas, es
decir, determina el orden en que se unirn los aminocidos.
El ARN mensajero es un cido nucleico monocatenario, al contrario que el
ADN que es bicatenario.
Procesamiento del ARN mensajero en clulas eucariotas
Inicialmente el ARN se conoce como transcrito primario o ARN precursor (preARN), que en la mayora de los casos no se libera del complejo de
transcripcin en forma totalmente activa, sino que ha de sufrir modificaciones
antes de ejercer su funcin (procesamiento o maduracin del ARN). Entre
esas modificaciones se encuentran la eliminacin de fragmentos (splicing), la
adicin de otros no codificados en el DNA y la modificacin covalente de
ciertas bases nitrogenadas. Concretamente, el procesamiento del ARN en
eucariotas comprende diferentes fases:
Adicin al extremo 5' de la estructura denominada caperuza (o CAP, su
nombre en ingls) que es un nucletido modificado de guanina, la 7metilguanosina, que se aade al extremo 5' de la cadena del ARNm transcrito
primario (ubicado an en el ncleo celular). Esta caperuza es necesaria para
el proceso normal de traduccin del ARN y para mantener su estabilidad; esto
es crtico para el reconocimiento y el acceso apropiado del ribosoma.
Poliadenilacin: es la adicin al extremo 3' de una cola poli-A, una secuencia
larga de poliadenilato, es decir, un tramo de RNA cuyas bases son todas
adenina. Su adicin est mediada por una secuencia o seal de
poliadenilacin (AAUAAA), situada unos 20-30 nucletidos antes del extremo
3' original. Esta cola protege al ARNm frente a la degradacin, aumentando su
Hidrlisis bsica, catalizada por los iones OH- de una base fuerte
(Hidrxido sdico, por ejemplo). Es importante sealar que la hidrlisis
Bsica slo acta sobre la cadena del RNA, ya que el mecanismo de esta
Hidrlisis
total o parcial, en funcin de las condiciones. Con poca
Concentracin del catalizador (H' o OH-), a una temperatura inferior la
ptima o limitando el tiempo de incubacin se puede conseguir que la
Reaccin de hidrlisis no se realice en su totalidad, es decir que tan slo se
Rompan al azar algunos enlaces ster fosfrico, pero no todos.
El resultado de una hidrlisis parcial es una mezcla heterognea de
Fragmentos oligonucleotdicos, cuyo tamao responde a una curva de
Distribucin de Gauss y donde el tamao medio es funcin de la
Severidad de la reaccin.
c) Los mtodos enzimticos, que, como los anteriores, producen la rotura
De enlaces fosfodister de la cadena polinucleotdica mediante su hidrlisis,
Aunque en este caso
La reaccin est catalizada enzimticamente. A
Travs del control de las condiciones (unidades de la enzima, temperatura,
etc.) Puede conseguirse una hidrlisis total o parcial. Estos mtodos utilizan
Dos tipos de enzimas:
E ndonucleasas inespecficas(RNasas, DNasas), que rompen aleatoriamente los
puentes fosfato de la cadena. No presentan ninguna especificidad de sitio, aun que s
de sustrato. Las DNasas slo hidrolizan enlaces que implican a restos de desoxirribosa;
son dependientes del catin Mg2+ por lo que su accin resulta inhibida en presencia de
agentes quelantes de este tipo de cationes (EDTA, por ejemplo), lo que es explotado en
los procedimientos preparativos de DNA.
Las RNasas son especficas de cadenas de RNA; son enzimas muy activasy difciles de
desnaturalizar de manera irreversible, por lo que se convierten en un riesgo importante
en el aislamiento de RNA. Las nucleasas inespecficas, tanto unas como otras, son muy
tiles a la horade eliminar contaminaciones por alguna de estas dos macromolculas.
Endonucleasas de restriccin (E R), que rompen la doble hebra del DNA por
enlaces especficos. Son nicas en este tipo de accin y, por tanto, herramientas
insustituibles en el anlisis de DNA.
Los fragmentos que se consiguen tras la incubacin con alguna de estas enzimas son
fragmentos especficos (fragmentos de restriccin), resultado de la rotura del
DNA por sitios especficos.
SEPAR ACIN Y PURIFICACIN
Una vez superada la fase de rotura de estructuras, la molcula objetivo del
proceso se encontrar en una solucin/suspensin ms o menos compleja,
mezclada con una gran variedad de otras molculas. La segunda fase del mtodo de
preparacin, la ms complicada, supone el fraccionamiento de esa mezcla mediante
una o, generalmente, varias etapas en las que se hace uso de tcnicas bioqumicas
clsicas de separacin y purificacin. Estas tcnicas aprovechan generalmente el gran
tamao y la naturaleza cida y, por lo tanto, hidroflica de los cidos nucleicos para
lograr su separacin del resto de los componentes de esa mezcla. En su estado
natural, in vivo, las molculas de cidos nucleicos se encuentran asociadas a
protenas (en su mayora bsicas); este hecho, unido a la semejanza en cuanto a
tamao de ambos tipos de molculas(macromolculas) convierte a las protenas en
los contaminantes naturales de los cidos nucleicos. Un segundo acompaante
universal es el otro tipo de cido nucleico: ambos, DNA y RNA, presentan una
enorme semejanza estructural, lo que, en principio, hace difcil su separacin.
Algunas de las tcnicas bioqumicas empleadas son de uso muy general, como:
La sedimentacin; se utilizan distintas variantes de esta tcnica, aunque
destaca por la calidad de sus resultados la sedimentacin en gradientes de
sacarosa, glicerol o, sobre todo, de sales de cesio (cloruro, trifluoroacetato,
etc.); en este ltimo medio se pueden separar, en condiciones adecuadas, las
Molculas de protenas, el RNA, el DNA circular plasmdico y el DNA lineal
Cromosmico; en presencia de bromuro de etidio, las molculas de DNA
Intercalan ese catin entre sus bases nitrogenadas, lo que puede afectar a su
Topologa y a su densidad, permitiendo la separacin de las molculas
Plasmdicas, circulares y covalentemente cerradas