Universidad Nacional Abierta y Distancia

Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente

Laboratorio de Microbiologa
PREINFORME DE MICROBIOLOGIA

PRACTICA 1: Descripcin de la bioseguridad en el laboratorio

PRACTICA 2: Descripcin de los materiales de laboratorio de microbiologa,
boceto y una breve descripcin de cada uno.
PRACTICA 3 y 4: Datos y observaciones, fotografas y bocetos de lo
observado. Importancia y usos de los procedimientos realizados. Conceptos a
desarrollar: Inoculacin, aislamiento de microorganismos, tcnicas de siembra,
contaminacin de cultivos microbianos, recuento de microorganismos,
diluciones, tcnicas de tincin, bacterias grampositivas y gramnegativas, causa
de la diferencia de tincin gram, morfologa de las bacterias, estructuras
observadas
PRACTICA 5: Indicadores de contaminacin, norma agua potable en Colombia,
cmo se informan los resultados

PRESENTADO POR :
SHARON STEPHANIA ESTEBAN CORREA
CC.1.122.131.904 Acacias (Meta)

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y DISTANCIA

MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
16/04/2016

pg. 1

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Laboratorio de Microbiologa
PRACTICA 1 DESCRIPICION DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA

Los Laboratorios de microbiologa constituyen ambientes un alto de presentarse

enfermedades infecciosas por las personas que se encuentra realizando
actividades en estas zonas las labores en el laboratorio de microbiologa es
un trabajo duro , en donde el desempeo de cada uno de los integrantes
ante las prcticas, deben tener un conocimiento y en el manejo adecuado de
los materiales equipos e insumos de los laboratorios de microbiologa asi como
determinar su propia seguridad y a la de sus compaeros
Es primordial que antes de comenzar con las actividadades prcticas, en los
laboratorios todas las personas involucradas (estudiantes y profesores) tengan
conocimiento de que son las normas de seguridad a seguir en el laboratorio de
microbiologa manera tal, que se puedan realizar las prcticas de manera
segura, eficiente y confortable sin exponer al ms mnimo riesgo de accidentes
en el laboratorio de tal manera que no ponga en peligro a las personas
involucradas y al medio ambiente
Continuation se explicara
microbiologia

las normas de bioseguridad en el laboratorio de

NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

Entrar al laboratorio en forma ordenada, y dejar objectos personales en el lugar

que se les indique para tal fin.
Llevar puesta la bata de laboratorio ojala manga larga , zapatos cerrados, gorros
y el uso contante de gafas y guantes tipo ltex o vinilo
Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar
la sesin prctica.
Lavar las manos con agua y jabn antes de realizar las actividades
programadas, antes de salir del laboratorio y siempre despus de manejar
materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes..
No llevar en el laboratorio accesorios que podran ser fuente de contaminacin
(por ejemplo joyas).
No comer, beber, fumar, almacenar comida o utensilios, aplicarse cosmticos
ni ponerse o quitarse lentes de contacto en ningn rea del laboratorio.
Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar
las actividades indicadas en la prctica.
Mantener el rea de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos
personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la
realizacin del trabajo prctico.
Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero.
Nunca debe dejar ste desatendido.

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Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.),

limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la
actividad.
Reportar cualquier dao de los materiales al profesor.
.
Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de
material contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser
catalogado como menor.

A continuacin mencionaremos los pasos que se deben seguir en caso de que

ocurran los siguientes accidentes:

Derrame de material biolgico sobre elcuerpo:

Remover la ropa inmediatamente.
Lavar vigorosamente el rea expuesta con agua y jabn por un minuto.
Reportar el incidente al profesor.
Buscar atencin mdica si es necesario.
La ropa contaminada debe ser colocada en una solucin desinfectante
antes de ser lavada.

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PRACTICA 2: Descripcin de los materiales y equipos
microbiologa

Instrumento
1

Gradilla

Uso

Especificaciones

Mechero
Bunsen

Es
un instrumento u
utilizado en los
laboratorios para
calentar
o esterilizar mue
stras o qumico
os.

metal

3.

Pipetas

Utilizado
principalmente
para
calentar,
fundir, quemar,
y
calcinar
sustancias

Recipiente
resistente
fuego
fabricado
vidrio

Incubadora

Boceto

Herramienta
Madera,
Utilizada
Plstico
para dar soporte o metal
a los tubos de
ensayos o
Tubos
de
muestras.

4.

de laboratorio de

al
y
en

Se utiliza para Metal

facilitar
el
crecimiento de
los
microorganismos
a
una
temperatura
optima

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5.

Asas
siembra

de Se utilizan para Pueden

ser
sembrar
metlicas,
plsticas, curvas
y rectas.

Asa en argolla

Sirven para la alambre

siembra
por
estras
o
inaculaciones

Asa recta o en Sirve

para alambre
hilo
trasladar una sola
colonia a medios
de identificacin,
o sub-cultivo.

Asa
espatulada.

6.

Para
manipular
colonias duras y
tomar muestras

alambre

Asas acodadas Se utilizan para la

o Asas de extensin
de
Digralsky:
microorganismos
sobre la superficie
de un medio de
cultivo en placa
Petri
Placas Petri
Son
cajas plsticas
cilndricas que se
utilizan
como
recipientes
de
medio cultivo o
para el cultivo y
aislamiento de
microorganismos

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Goteros

8.

Pinzas

Vidrio
Se usa para
Trasvasar
pequeas
cantidades
de
lquido
vertindolo gota
a gota.

tub
o
de ensayo

Pinza
d
e
madera

Balanza

Son un tipo de Vidrio

sujecin
ajustable,
mediante la cual
se pueden
sujetar
diferentes
Objetos de vidrio
(embudos
de
laboratorio,
buretas...).
Esta
Madera
herramienta
Sirve para
sujetar los
tubos de
ensayos,
mientras estos
se calientan o
cuando se
trabaja
directamente
Con ellos.

Sirve para
medir la masa
de un cuerpo o
una sustancia
qumica.

metal

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Tubos de
ensayo

12

Microscopio Se utilizan para la

extensin de
microorganismos
sobre la superficie
de un medio de
cultivo en placa
Petri

Sirve para
contener
pequeas
muestras de
sustancias
liquidas o
solidas .

Metal

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Embudos

Es un
instrumento
empleado para
canalizar
Lquidos
y
materiales
gaseosos
granulares en
recipientes
con
bocas
angostas. Es
decir,
es
utilizado
para evitar el
derrame
del
lquido
al
moverlo
de
un envase a
otro.

Pieza cnica,
Su diseo ha
sido modificado
para adaptarse
a la
funcionalidad
concreta que
desempean

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DIAGRAMA PRACTICA 3
PARTE A

Metodo de siembra con

microorganismos aislado
(Bacterias)

Desinfectar el rea de
trabajo

Prender el mechero

Preparar el material de
trabajo

Abrir la caja de Petri y

seguir el esquema para el
aislamiento de bacterias

NO

No se puede tener
observar la siembra de la
bacteria

Se incuba
las
bacterias?

SI

. Incubar a 37 por 24
horas para bacterias

Terminado la siembra de bacteria

y hongos, marcar las cajas en el
borde de la base de la caja y
envolverla en papel vinipel

Se desifecta el
rea depg.
trabajo
9

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Mtodo de siembra
con microrganismos
aislados hongos)

DIAGRAMA PRACTICA 3
PARTE A

Desinfectar el rea de
trabajo

Prender el mechero

Preparar el material de
trabajo

tomar con el asa recta el

microorganismo y por
puncin sembrar en la caja
de Petri con medio PDA.

NO

No se puede tener
observar la siembra de la
bacteria

Se incuba
las
bacterias?

SI

Incubar 25 por 8 das para

hongos

Terminado la siembra de bacteria

y hongos, marcar las cajas en el
borde de la base de la caja y
envolverla en papel vinipel

Se desifecta el
rea de trabajo
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Mtodo de siembra muestra de

suelo o agua residual
DIAGRAMA PRACTICA 3
PARTE B
Pesar 10 gramos de la muestra

Mezclar la muestra con los 90 ml de solucin

salina o agua peptona da.

Realizar diluciones seriadas desde 10-1 hasta

10-6

Tomar las 6 cajas de Petri con agar y marcar 2

con dilucin 102, 2 cajas con dilucin 104, 2
cajas con dilucin 106

Sembrar por duplicado las diluciones 10-2 10-4 106

tomando 0,1 ml de cada dilucin por superficie

con ayuda del rastrillo homogenizar la micro gota

sobre la superficie del agar sin romperlo

Incubar por 24 horas a 37C y realizar el recuento.

Realizar los clculos donde se toman las

diluciones donde se encuentren entre 30 y 300
colonias para realizar el recuento

FIN

Sacar promedio y
aplicar la frmula:
Nmero de colonias x
Factor de dilucin x 10
(factor de correccin

El resultado es informado
en UFC (unidades
formadoras de colonia)/ g o
ml de la muestra
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PRACTICA 4: Diagrama de flujo del procedimiento a realizar. Incluye Parte A y Parte
B.
DIAGRAMA TINCION GRAM PARA BACTERIAS.

Procedimiento Tincin
graM para bacterias

DIAGRAMA PRACTICA 4
PARTE A

Tomar las colonias de bacterias que los estudiantes

sembraron anteriormente ( tcnicas de aislamiento)

realizar un frotis en una lmina portaobjetos,

colocando una gota de agua y con ayuda del asa
redonda homogenizar para expandir el frotis en la
lmina.

Dejar secar al aire libre la muestra, una vez se

encuentre seca, fijar al calor la muestra en el
mechero

Una vez se encuentra la muestra fijada se procede a

colocarle varias gotas de cristal violeta, dejando por un
minuto y luego lavar en el grifo

Colocar unas gotas de lugol, dejar por un minuto y

lava
z
Colocar una gota de alcohol acetona, dejar por 15
minutos

Colocar unas gotas de Fucsina de Gram, dejar por un

minuto, lavar y dejar secar la muestra

Agregar una gota de aceite de inmersin y observar

en el microscpio en el objetivo de 100x
FIN
Observar las morfologas ( bacilos, cocos,
Grampositivos, Gramnegativos)

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Tincin de Azul
de Lactofenol
para hongos

DIAGRAMA PRACTICA 4
PARTE B

Con una cinta o con las agujas de

diseccin un trozo del hongo (tomar
micelio, parte algodonosa)

Con una lmina portaobjetos colocar una

gota de azul de lactofeno

Tomo la
muestras con
agujas de
diseccin?

SI

NO

Utilizar la cinta transparente slo debe

colocarla sobre la gota sin necesidad de
laminilla cubreobjetos.

Ponerla en contacto sobre la gota

e ir desglosando las hifas,
colocarle una lmina portaobjetos

Llevar al microscopio y observar en el

objetivo de 40x

Observar las estructuras y

anotarlas para el informe

FIN

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PRACTICA 5: DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCEDIMIENTO A REALIZAR

Tcnicas aplicadas en
microbiologa ambiental.

DIAGRAMA PRACTICA 5

Tomar 100 ml de agua de la llave, la cual se

inocular con una asada de cultivo de E.
coli, agitar muy bien
Colocar la muestra en la parte superior de la
campana de filtracin

Con la ayuda de la jeringa realizar el vaco

para permitir el paso del agua de un lado al
otro.

Con unas pinzas estriles retirar la

membrana y colocarla sobre el agar
Chromocult

NO

SI

Incubar

Incubar por 24 horas a

37 c y observar el
nmero de colonias
con las caractersticas
tpicas de E. coli y
coliformes totales

No se podr tener registro de

colonias con las caractersticas
tpicas de E.coli

FIN
FIN

Consultar la
coloracin de Ecoli y
coliformes
pg.
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BIBLIOGRAFIA

Universidad de Alicante. Facultad de Ciencias. Manual de Supervivencia en el

Laboratorio [monografa en lnea]. Espaa: 1999 [acceso 7 de abril 2008].
Disponible
en;
http://www.ua.es/centros/ciencias/seguridad/hab_seg_lab_biol.htm
Alessandra Garcs (2008) Normas de seguridad en el laboratorio de
microbiologa
disponible
en
:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_no
rmas_de_bioseguridad.pdf
http://uni-biologia.blogspot.com.co/2011/01/materiales-basicos-usados-enel.html

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