1- INTRODUO:

O termo cromatografia est fundamentado na migrao diferencial dos

componentes de uma mistura homognea em substncias orgnicas e inorgnicas, na
identificao dos componentes, e tambm para a purificao das substncias, tendo uma
diferena de afinidades entre elas fazendo uso da passagem das misturas entre duas
fases, uma estacionria (fixa) normalmente pode ser um lquido viscoso ou slido e a
outro fase nomeada como mvel, que se arrasta por um solvente pela causa do efeito
capilar da placa que pode ser lquida ou gasosa. A cromatografia ento, possibilita um
mtodo fsico qumico muito utilizado principalmente para essas separaes de
misturas.
A cromatografia se deve ao botnico russo, Michael Tswett que a utilizou pela primeira
vez em pesquisas sobre a clorofila. Com o objetivo de separar pigmentos de folhas e de
plantas ele utilizou uma coluna contendo muito carbonato de clcio (fase estacionria)
eluindo em ter de petrleo (fase eluente) a qual levou a separao dos componentes em
faixas coloridas. Este o principal motivo em que a tcnica conhecida como
cromatografia ( chrom = cor e graphia= escrita) escrita das cores.
A tecnologia vem avanando rapidamente, junto a ela est cromatografia que pode ser
utilizada por diferentes formas de classificao considerando algumas delas em
cromatografia em papel monodirecional ascendente, cromatografia em camada delgada,
cromatografia em coluna e cromatografia gs lquido, de acordo com essas quatro
classificaes de cromatografias citadas temos sobre elas que:
A cromatografia em papel monodirecional ascendente simples, econmica e muito til
na separao dos compostos polares, servindo para observar a fase estacionria dos
componentes em uma mistura que se verifica nos poros de uma folha de papel. Neste
caso a fase mvel se desloca atravs da faze estacionria tendo um contato com o
solvente para facilitar o meio, saturando-o com o eluente, assim a corrida das amostras
passa sobre as manchas e arrastando-as com velocidades diferentes, as cubas devendo
ser fechadas para permitir a saturao interna. Este mtodo feito somente com
pequenas quantidades de cada vez devido a sua facilidade experimental.
Ao ser retirado o papel da cuba se deve ento medir onde a amostra foi aplicada at a
linha de chegada da fase mvel devendo considerar tambm a fase estacionria para os
clculos do fator de reteno (Rf) que devero ser calculados. Estes clculos de Rfs
servem para a comparao qualitativa das misturas dos compostos medindo as
distncias que as substncias se deslocaram a partir do ponto de aplicao, do centro da
gravidade da mancha dividindo-o pela distncia percorrida da massa. Assim conclui-se
se a mancha se move ou no a partir dos clculos servindo para todos os tipos de
cromatografia.
Na cromatografia em camada delgada semelhante cromatografia do papel, nela
usada uma placa de vidro ou uma folha de plstico at mesmo metlica consistindo em
revestir a suspenso em p aderente em cima da placa a cerca de 1 mm a espessura esta

camada, ou seja, uma suspenso do adsorvente em gua adequada, sendo uma camada
fina por cima da placa, revestindo-a uniformemente com a ajuda de um espalhador, em
seguida deixa-se secar ao ar. As suspenses mais usadas nesse processo de formao das
cromatoplacas a slica (SiO2) e alumina (Al2O3) entre outros poucos usados,
selecionando a slica como um dos adsorvente mais verstil sendo a mais
universalmente encontrada. A ativao da slica ao final do processo ativa a 105C
a11C por 30 a 60 minutos
A vantagem dessa cromatografia em camada delgada a facilidade da execuo,
rapidez, maior trajeto da fase mvel, boa resoluo, manchas em geral menos difusas,
baixo custo e versatilidade, permitindo avaliar o grau de complexidade de cada mistura,
utilizando-o como processo de separao pela tcnica ascendente de substncia qumica
e revelada. A fase quimicamente ligada nela se prepara reagindo alguns grupos
hidroxlicos encontrados na superfcie.
Nesta tcnica de cromatografia em coluna se baseia na adsoro e solubilidade, na fase
lquida associada o slido devendo ser um material insolvel. A mistura para ser
separada acontece dentro de uma coluna de vidro aberta na sua parte superior e uma
torneira em sua parte inferior para a sada do lquido eludo colocando-a na coluna
vertical com o eluente menos polar. Dentro da coluna est a fase estacionria composto
por um slido sendo que a velocidade ou ordem das substncia depender ento da
polaridade. O resultado final da coluna depender da escolha de suporte e solvente
adequados em sua realizao pois, se o composto for mais atrado na fase estacionria
do que o solvente ele vaia arrastar mais lentamente ou se for um composto com maior
afinidade com o solvente ele arrastar mais rapidamente. Essa eluio feita para se
obter fraes contendo mistura de compostos ou compostos puros.
A cromatografia gs-lquido aplicvel a substncias volteis ou em substncias que se
transformam facilmente em volteis como uma camada fina em um suporte slido. Essa
cromatografia de gs lquido til para separar ons ou molculas dissolvidas em
solventes. Quanto menor forem as partculas do suporte, maior ser a presso necessria
para forar o gs atravs das colunas que normalmente hlio, hidrognio e nitrognio.
Possuindo vantagens de manusear amostras muito pequenas com maior eficincia
existindo vrias substncias a serem analisadas com diferentes graus de polarizao e
intervalos de temperatura.
Assim, na interpretao das tcnicas cromatogrficas em componentes nas misturas se
d pela fase mvel e estacionria por ter diferentes foras intermoleculares, sendo elas
inica, bipolar, apolar e especficos efeitos de afinidade da solubilidade existindo ento
grande variabilidade entre as fases.
O direcionamento deste trabalho se d por cromatografia em camada delgada (CCD)
utilizando a slica, podendo ela suportar uma ampla variedade de transformaes sob
condies muito altas. Nesse caso a tcnica de adsoro lquida slida se d pela
separao da diferena de afinidade dos componentes em fase estacionria.

Por fim, a fotoisomerizao cis e trans uma das propriedades do azobenzedo que
podem passar um para o outra com particularidade em onda de luz (ultravioleta). Por
isso, nesta prtica estudada tambm essas conformaes cis e trans, os momentos
dipolo na qual as propriedades so da isomerizao.

2- OBJETIVO:
Consiste em usar a tcnica de cromatografia em camada delgada para identificao
de uma mistura atravs da migrao.
3- MATERIAIS E MTODOS:
3.1- MATERIAIS UTILIZADOS:
- Tubos capilares
- Cromatoplaca
- Bquer de 10 mL
- Esptula
- Frascos de penicilina
- Cuba eluidora
- Papel de filtro
- Cmera ultravioleta
- Conta gotas
3.2- REAGENTES UTILIZADOS:
- Tolueno
- Acetona
- Iodo de sdio
- Benzidrol
- Benzofenona
- Azobenzeno
3.3- PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL:
4- RESULTADOE DISCUSSO:

Aps uma breve explicao sobre cromatografia e seus compostos foi iniciado o
procedimento da camada delgada tendo a cromatoplaca j preparada com a slica
(SiO2). A slica usada por que tem o poder de adsoro mais rpido em uma fase
estacionria que compatvel com todos os solventes orgnicos e gua e no sofre
variaes garantindo sua estabilidade. Sua fora mecnica alta e possui trocas
inicas sendo ela polar com grupos de hidroxila.
Em um bquer foi transferido uma pequena quantidade de azobenzeno (C12H10N2)
e com uma das extremidades do tubo capilar foi transferido em 1,0 cm de altura na
cromatoplaca pingado gota a gota cuidadosamente do lado direito com slica e
levada na cmara ultravioleta por 15 minutos.
Neste intervalo foi preparado a cuba colocando 1 cm de tolueno em seguida o papel
filtro aderido nas laterais tendo como auxlio o conta gotas para umedecer fixandoos na parede da cuba, assim a saturao e a aluio foi melhor para o procedimento.
Tampando-o para que no evaporasse porque o tolueno muito voltil.
Aps os 15 minutos da cromatoplaca na cmera de ultravioleta foi retirada para uma
segunda aplicao do azobenzeno do lado esquerdo da placa mas sem levar na
cmera ultravioleta, assim colocou-a na cuba j preparada e tampou sendo
observado a eluio. Em 1 momento a substncia utilizada do lado direito estava
mais rpida, com um tempo depois a substncia do lado esquerdo ultrapassou o
direito ficando em um determinado tempo os dois na mesma posio. Por causa das
diferenas de polaridades (?)
Foi retirada a placa do interior da cuba para a medio das posies atingidas, pois
foi observado que houve diferenas de posies das manchas na cromatoplaca desde
o ponto da aplicao at a finalizao. Essas medies so utilizadas para os
clculos dos Rfs. Como a seguir.
Rf = Distncia percorrida pela substncia/ Distncia percorrida pelo eluente