VALORES NORMALES DE LAS PRUEBAS DE LABORATORIO MS HABITUALES

Las primeras propuestas para la presentacin normalizada de los datos de laboratorio,

segn el Sistema Internacional de Unidades (unidades SI), fueron hechas en 1967 por la
Comisin de Qumica Clnica de la Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada
(IUPAC) y el Comit de Expertos sobre Cantidades y Unidades de la Federacin
Internacional de Qumica Clnica (IFCC). No fue hasta 1979 en que se elaboraron unas
recomendaciones definitivas que fueron apoyadas por el Comit Internacional para la
Normalizacin en Hematologa y por la Asociacin Mundial de Sociedades de Patologa,
as como por la Federacin Internacional de Qumica Clnica. La Organizacin Mundial de
la Salud recomend en 1977 la adopcin del SI de unidades por la comunidad cientfica,
especialmente por la comunidad mdica en todo el mundo. Este sistema internacional de
unidades se constituy durante la X Conferencia General de Pesas y Medidas, celebrada
en Pars en 1954. El mismo establece un conjunto de 7 unidades bsicas cuyos nombres
y smbolos se encuentran en la primera tabla. La existencia de valores superiores e
inferiores a la unidad fundamental ha hecho necesario expresar los resultados mediante
mltiplos y submltiplos, creando para ello unos prefijos que se colocan junto al smbolo
para expresar la unidad fundamental. En la segunda tabla aparecen referidos los prefijos,
as como su smbolo y el factor que los representan. La relacin de parmetros analticos
y pruebas funcionales usualmente empleados en clnica se resumen en diferentes
cuadros donde las unidades se expresan con el sistema convencional y SI.

ELISA

La tcnica ELISA (acrnimo del ingls Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay: ensayo

por inmunoabsorcin ligado a enzimas) es una tcnica de inmunoensayo en la cual un
antgeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzima capaz
de generar un producto detectable, como cambio de color o algn otro tipo; en ocasiones,
con el fin de reducir los costos del ensayo, nos encontramos con que existe un anticuerpo
primario que reconoce al antgeno y que a su vez es reconocido por un anticuerpo
secundario que lleva enlazado la enzima anteriormente mencionada. La aparicin de
colorantes permite medir indirectamente mediante espectrofotometra el antgeno en la
muestra.
Se usa en muchos laboratorios para determinar si un anticuerpo particular est presente
en la muestra de sangre de un paciente. Aunque el procedimiento es rutinario y sencillo,
involucra a un gran nmero de variables, tales como seleccin de reactivo, temperatura,
medicin de volumen y tiempo, que si no se ajustan correctamente, puede afectar los
pasos sucesivos y el resultado de la prueba.

Fases de un ensayo ELISA

Las cuatro fases de un ensayo ELISA son las siguientes:
1. Conjugacin del anticuerpo o del antgeno con una enzima (peroxidasa,
fosfatasa alcalina...). El anticuerpo conjugado a la enzima se emplea en los
ensayos directos e indirectos, sandwich, etc. El antgeno marcado se emplea en
ensayos de competicin de antgeno. Dicha unin anticuerpo-enzima o antgenoenzima ha de producirse durante un determinado perodo de tiempo en aras de
producir una solucin coloreada y que pueda ser valorada visualmente o
cuantificada por medio de un espectrofotmetro (normalmente a una longitud de
onda de 414 nm). Si no transcurre el tiempo adecuado para que se d la reaccin,
no se evidenciar ningn color, interpretndose este resultado como un falso
negativo y disminuyendo la sensibilidad de la tcnica.
2. Unin del antgeno (o del anticuerpo) a los pocillos. La unin de anticuerpos o
antgenos se realiza con facilidad a la superficie de plsticos tratados que tienen
gran afinidad por protenas. As, el procedimiento de recubrimiento de los pocillos
debe realizarse cuidadosamente. Si se usa mucho antgeno, se pueden obtener
falsos positivos. Por el contrario, si se usa poco antgeno, el exceso dar lugar a
una reaccin falsa negativa.
3. Formacin de una o ms capas de inmunocomplejos. En el caso del antgeno
unido a la placa, se puede detectar mediante un anticuerpo anti-antgeno marcado
(ELISA directo) o empleando un anticuerpo primario anti-antgeno y un secundario
anti-primario marcado (ELISA indirecto). Este segundo mtodo permite la
amplificacin de la seal al poderse unir uno o ms anticuerpos secundarios a cada
7

anticuerpo primario. En el caso del anticuerpo unido a la placa, se incuba con una
mezcla de antgeno y antgeno marcado. Se ensayan diferentes relaciones de
antgeno fro frente a una cantidad fija de antgeno marcado. Es el ensayo de
competicin del antgeno. En esta etapa es muy importante controlar los factores
tiempo y temperatura de incubacin para evitar la aparicin de falsos negativos. En
el caso del tiempo, si es inferior a 15 minutos, no ocurrir la interaccin antgenoanticuerpo y el color no ser evidente al final del ensayo, dando un falso negativo.
Por su parte, si la temperatura de incubacin es muy baja, la formacin del
complejo antgeno-anticuerpo tampoco se completar en el tiempo establecido,
mientras que si es muy alta, las protenas (antgeno y anticuerpo) se desnaturalizan
y, por tanto, disminuyen su capacidad para interaccionar, dando igualmente falsos
negativos.
4. Revelado de la reaccin enzimtica. Despus de un lavado para eliminar todas
las molculas marcadas no fijadas en forma de inmunocomplejos, se aade el
sustrato enzimtico en solucin. Se deja reaccionar y se lee la densidad ptica
mediante espectrofotometra.

INTERPRETACIN DE BK

Ausencia de BAAR en un mnimo de 100 campos

0 / negativa

1 BAAR en 100 campos

Paucibacilar

10 a 99 BAAR en 100 campos

1 a 10 BAAR por campo en un mnimo de 50 campos

++

10 BAAR por campo en un mnimo de 20 campos

+++

REACCIN DE WIDAL

La reaccin de Widal es un test basado en el principio de aglutinacin antgenoanticuerpo, donde se determina la presencia de anticuerpos contra el antgeno O y H de la
Salmonella typhi para el serodiagnstico de fiebre tifoidea, sin embargo debido a su falta
de especificidad, debe ser interpretado en el contexto clnico del paciente. Para considerar
7

el diagnstico de fiebre tifoidea con un titulo Anti-O y Anti-H aislado, se debe conocer su
prevalencia en una determinada comunidad, en trminos generales, se acepta ttulos antiO y anti-H 1: 160-200 y 1: 50-100 en zonas endmicas y no endmicas,
respectivamente.

PRUEBAS SEROLGICAS PARA BRUCELOSIS

Las pruebas de diagnstico serolgico a emplearse en los servicios de salud del Pas
sern las establecidas por el INS por estar estandarizados bajo las normas de la OMS.
Siendo las principales:

1. Prueba Tamiz

Constituido por:
a) Prueba de Rosa de Bengala
b) Prueba de Aglutinacin en Placa

Tiene la finalidad de detectar en forma rpida y simultnea las diferentes clases de

inmunoglobulinas que permiten diferenciar una infeccin de una reaccin cruzada.

Se utilizan dos antgenos:

1) Antgeno Rosa de Bengala
2) Antgeno en Placa

Prueba Rosa de Bengala: prueba rpida y cualitativa, detecta especficamente

anticuerpos de tipo IgG1 contra Brucella, permite descartar las reacciones cruzadas o
falsos positivos.

Prueba de aglutinacin en Placa: detecta anticuerpos de tipo IgG e IgM, es una prueba
que reacciona rpidamente al inicio de una infeccin, esta puede permanecer en forma
residual por mucho tiempo y puede dar reacciones cruzadas con otras bacterias
(Salmonella grupo N (serogrupo 0:30), Vibrio cholerae, Escherichia coli 0:157,
Yersinia enterocoltica 0:9, Francisella tularensis, Stenotrophomonas maltophilia y
otras bacterias).
La interpretacin del resultado de estas pruebas para el diagnstico es la siguiente:

Esta interpretacin es muy especfica en brucelosis aguda, siendo menor en otros tipos de
brucelosis. *Cuando la Prueba Tamiz es positiva se realizar la prueba
complementaria

2. Prueba complementaria

Constituido por:
a) Prueba de Aglutinacin en Tubo
b) Prueba del 2 Mercapto-etanol

Tienen la finalidad de complementar el diagnstico permitiendo mantener el seguimiento

de la respuesta inmune del paciente. Son pruebas cuantitativas que permite el
seguimiento, tanto en el estado infeccioso como durante el tratamiento, mediante la
evaluacin del ttulo inmunolgico. Las pruebas complementarias corroboran la prueba
tamiz y son cuantificables, permitiendo observar el descenso de las IgG, que indicara la
eficacia del tratamiento.

Prueba de aglutinacin en Tubo: Detecta anticuerpos IgM e IgG2, mediante la tcnica

de aglutinaciones seriadas de suero en tubos.

Prueba del 2-Mercaptoetanol: Prueba selectiva, detecta la presencia de anticuerpos

IgG, se basa en la degradacin de las IgM debido a la accin de compuestos que
contienen el radical tiol como el 2-mercaptoetanol. Se utiliza para el seguimiento de los
pacientes en tratamiento. Es til para detectar infecciones crnicas en los que la prueba
de aglutinacin en tubo puede tener un ttulo bajo, ya que el suero contendr
exclusivamente anticuerpos IgG.

La interpretacin del resultado de estas pruebas para el diagnstico ser como sigue:

La validacin de los resultados de las pruebas ser teniendo en cuenta los sueros
controles.

RPR

El RPR es una prueba diseada para detectar reagina en el suero de manera rpida, no
requiere inactivacin por calor La muestra se mezcla con una suspensin que posee
cardiolipina, lecitina y colesterol en partculas de carbn. Si la muestra es positiva se
observa pequeos grumos negros (floculacin). El resultado se reporta como reactivo o
no reactivo; todos aquellos reactivos deben ser diluidos seriadamente para realizar la
titulacin, y se reporta la dilucin ms alta que exhibe reaccin.

Los falsos negativos se pueden producir por errores tcnicos y los falsos positivos son los
mismos que para la prueba de VDRL.
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Se ha desarrollado variantes de esta prueba en las que la muestra puede ser plasma sin
que se pierda su sensibilidad y especificidad.

FACTOR REUMATOIDE

El factor reumatoide es un autoanticuerpo del tipo IgM producido contra la porcin Fc de

la inmunoglobulina G (Ig G). Los ttulos se encuentran elevados en ciertas enfermedades
reumticas y en algunas infecciones crnicas (tuberculosis, lepra, entre otras). Se
detectan valores elevados de Factor Reumatoide en el 80% de los pacientes con artritis
reumatoide y en menores concentraciones en los pacientes con infecciones crnicas,
enfermedades autoinmunes (lupus eritematoso diseminado o sndrome de Sjgren); y
enfermedades crnicas pulmonares, hepticas o renales.
Entre otras situaciones, destaca la indicacin se solicitar una determinacin de FR cuando
existen sospechas clnicas de artritis reumatoide, si bien es cierto que no es un test
especfico para esta enfermedad, por lo que el positivo no puede confirmar la artrtis
reumatoide, su negatividad nos obligara a replantear el diagnstico.

BIBLIOGRAFA
1. BALCELLS A. La clnica y el laboratorio. Barcelona, Masson, S.A. 22. a ed.
2. Normal reference Laboratory values. N Engl J Med