UNIVERSIDADE FEDERAL DO OESTE DA BAHIA

Campus Edgard Santos

Farmcia 2016.1
Disciplina: Processos Bioqumicos I
Jonathas Pereira de Santana
Jonh Max de Moura Bezerra
Pedro Gabriel Miranda da Silva
Stnio Frailan de Souza

Relatrio de avaliao da velocidade da reao da catalase em diferentes

condies.

Barreiras - BA, Setembro de 2016

JONATHAS PEREIRA DE SANTANA

JONH MAX DE MOURA BEZERRA
PEDRO GABRIEL MIRANDA DA SILVA
STNIO FRAILAN DE SOUZA

Relatrio de avaliao da velocidade da reao da catalase em diferentes

condies.

Trabalho apresentado disciplina de

Processos Bioqumicos I, no III semestre
do curso de farmcia da Universidade
Federal

do Oeste da Bahia - Campus

Edgard Santos, com requisito parcial de

avaliao.
Profa. Rafael Simes.

Barreiras- Ba, Setembro de 2016

Sumrio
INTRODUO.................................................................................................................4
MATERIAIS E MTODOS..............................................................................................5
Reagentes.......................................................................................................................5
Meterias.........................................................................................................................5
Mtodos.........................................................................................................................5
RESULTADOS E DISCUSSES.....................................................................................7
CONCLUSO.................................................................................................................12
REFERNCIAS:.............................................................................................................13

INTRODUO

Enzimas so substancias orgnicas de natureza proteica com atividade cataltica.

As enzimas apresentam preferncia por seus substratos assim como para o tipo de
reao sobre esse substrato, controlando tambm as reaes reversveis e irreversveis.
Em geral os substratos de uma determinada reao empregam uma energia de
ativao, que simplificado pelo nvel de energia para reagir.
As enzimas vo catalisar suas reaes nas condies do ambiente celular. Estas
por sua vez so capazes de acelerar a velocidade das reaes dependendo do meio que
estejam expostas (no ambiente celular), ou seja, a ao enzimtica esta sujeita a uma
serie de fatores sendo os mais especficos a temperatura com variao entre 37C e pH
de 7,4 (sendo este valor referido ao plasma sanguneo).
A teoria de Michaelis e Menten sobre as reaes catalisadas por enzimas
considera a formao de reao reversvel atravs de um complexo (ES) sendo formado
pela enzima (E) e o substrato (S). Essa mesma teoria permite estabelecer a constante de
Michaelis e Menten, sendo o inverso dela a equao de Lineweaver-Burk.
Assim tm-se o principio estudado em laboratrio pela decomposio da gua
oxigenada em gua e oxignio, segundo a reao:
H2O2

catalise

H2O + O2

MATERIAIS E MTODOS

Reagentes

Soluo de perxido de hidrognio (H2O2) a 4%

gua de alface (300 ml)
Soluo de albumina
gua destilada

Meterias

Tubos de ensaios
Galerias
Pipetas
Peras
Bquer
Erlenmeyer

Mtodos
Preparou-se duas galeria com 6 tubos de ensaio cada, sendo estes numerados de 1
a 6 em cada galeria. No Experimento 1 em que avaliamos o efeito da concentrao da
enzima na velocidade da reao, foram colocados 1 ml perxido de oxignio (substrato),
6 gotas de albumina em cada um dos tubos e as seguintes quantidades de gua destilada
e gua de alface (enzima) nos respectivos tubos:
Tabela 1. Volume de gua destilada e Enzima (gua de alface) nos respectivos tubos.

Tubo
1
2
3
4
5
6

H2O Destilada (mL)

5,0
4,0
3,0
2,0
1,0
--

gua de Alface (mL)

-1,0
2,0
3,0
4,0
5,0

No experimento 2 que avaliamos o efeito da concentrao do substrato na

velocidade da rao, colocamos 6 gotas de albumina, 5 mL de gua de alface (enzima),
perxido de hidrognio (substrato) e gua destilada na seguinte quantidade em cada um
dos tubos:

Tabela 2. Quantidade de gua destilada e Substrato (perxido de hidrognio) nos respectivos tubos.

Tubo
1
2
3
4
5
6

H2O Destilada (mL)

2,0
1,6
1,2
0,8
0,4
--

H2O2 (mL)
-0,4
0,8
1,2
1,6
2,0

Em todos os tubos as substncias foram adicionada na seguindo a mesma ordem,

primeiro perxido de hidrognio (H2O2), exceto no tubo1 do experimento 5.2, em
seguida a gua destilada, exceto no tubo 6 dos dois experimentos e logo depois a
albumina e por ltimo gua de alface exceto no tubo 1 do experimento 5.1.
A gua de alface foi adicionada no tubo e em seguida homogeneizou os
reagentes do cada tubo por uma nica inverso com os tubos tampados. Esperamos um
intervalo de 1 minuto para adicionarmos a enzima no prximo tubo, passados 1 minuto
adicionou-se a gua de alface e homogeneizou o tubo seguinte, o mesmo foi feito para o
restante dos tubos em cada uma dos experimentos, sempre com um intervalo de 1
minuto entre a adio da gua de alface no prximo tubo.
Feito isto, aguardamos 10 minutos para que a reao acontecesse. A reao
decomposio do perxido de hidrognio pela catalase causa efervescncia gerando
uma coluna de espuma, essa coluna de espuma pode ser medida e usada para quantificar
a velocidade da reao. Ento medimos a altura da espuma em cada um dos tubos no
final dos 10 minutos e anotamos os resultados. Ambos os experimentos tivera como
finalidade avaliar a atividade da catalase no consumo do perxido de hidrognio,
relacionando as variveis da concentrao de enzima no experimento 1 e no
experimento 2 variando a concentrao do substrato.

RESULTADOS E DISCUSSES

Aps todo processo de preparao do procedimento experimental, adicionou-se

a catalase (gua de Alface) a mistura, e observou-se o resultado.

A velocidade da reao foi baseada na quantidade de espuma produzida em cada

tubo. Olhando-se para cada um destes pode-se observar que com a mesma quantidade
de substrato e variando somente a concentrao de enzima em cada um deles, tem-se
diretamente proporcional a maior quantidade de espuma medida que se aumenta a
concentrao da enzima, como podemos observar na tabela 3.
Tub

H2O2

gua Dest.

Albumina

gua de alface

ml

(ml)

(gota)

(ml)

1
2
3
4
5
6

1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

5,0
4,0
3,0
2,0
1,0
--

6
6
6
6
6
6

-1,0
2,0
3,0
4,0
5,0

Resultados
(mm de
espuma)
-4
8
9
9
12

Tabela 3 - Efeito da Concentrao da Enzima.

Assim temos que a quantidade de catalase aumenta a velocidade da reao at

que alcance da faixa tima de funcionamento da enzima. A quantidade de espuma
continua a ser produzia at que o substrato seja consumido, assim cessando a reao,
podemos observar essa esse comportamento o grfico 1 que foi construdo a partir da
tabela 3.

Grfico 1 - Efeito da concentrao de enzima na velocidade.

Concentrao
Enzima
15
Linear ()

f(x) = 2.17x - 0.6

R = 0.9

10

Linear ()

5
0
0

Assim como feito no procedimento acima, toda a observao feita por

determinado tempo. Mantendo-se a concentrao da enzima constante e variando de
maneira crescente a concentrao de substrato, tem-se um aumento da velocidade da
reao demonstrado na medida em espuma. Nota-se que atividade da enzima
proporcional sua concentrao de substrato no meio, o que define a atividade
especfica da catalase.
Tabela 4 - Efeito da concentrao de substrato na velocidade da reao.

Tubo

H2O2 ml

1
2
3
4
5
6

-0,4
0,8
1,2
1,6
2,0

gua Dest.
(ml)
2,0
1,6
1,2
0,8
0,4
--

Albumina (gota)
6
6
6
6
6
6

gua de

Resultados

alface (ml)
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0

(mm de espuma)
0
20
28
37
44
35

Essa atividade pode ser compreendida atravs do grfico 2, que demonstra a

concentrao do substrato em cada tudo e as respectivas velocidades

Grfico 2 - Efeito da concentrao do substrato.

Concentrao
Substrato
0.06
f(x) = 0.02x + 0.01
R = 0.83

0.05
0.04

Linear ()
Linear ()

0.03
0.02
0.01
0
0

0.5

1.5

2.5

Tabela 5 - Efeito da variao da temperatura na velocidade da reao.

Tubo

H2O2 ml

1
2
3
4
5

1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

gua
(ml)
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0

Dest.

Temperatura
Albumina (gota) (C)
6
6
6
6
6

0
37
45
60
100

gua

de

alface (ml)
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0

A variao de temperatura tambm mais um dos parmetros que influenciam

na velocidade de reao enzima- substrato. medida que se aumenta temperatura do
sistema, mantendo constante a concentrao de substrato e da enzima, tem-se o aumento
da velocidade at os 60C, aps essa temperatura cessa-se a reao.

A partir da tabela 5 foi gerado o seguinte grfico:

Resultados
(mm
espuma)
5
10
10
15
1

Grfico 3 - Efeito da temperatura.

Efeito da
Temperatura
16
14
12

f(x) = - 0x^2 + 0.33x + 4.32

R = 0.82

10

Polynomial ()

8
6
4
2
0
0

20

40

60

80

100

120

Tabela 6 - Efeito da variao do pH na velocidade da reao.

Tubo
1
2
3
4
5
6
7

H2O (Dest.)

Tampes

(ml)

(pH) | (mL) (gota)

(gota)

2,0
-----2,0

-4,0
6,0
7,0
8,0
10,0
--

------2

2,0
2,0
2,0
2,0
2,0

H2SO4

2
-------

NaOH

H2O de
Alface (mL)
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0

ALB.

H2O2

(gota)

(mL)

6
6
6
6
6
6
6

1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

Geralmente cada tipo de enzima, tem uma zona de pH na qual esta funciona de
forma a exercer sua funo mxima.
Na tabela tem-se a demonstrao da velocidade da reao de determinada
enzima, medida que o pH aumenta tendendo a basicidade.
Pode-se com esse experimento observar que alteraes como, alta concentrao
de substrato, enzimas, variaes de temperatura e mesmo de pH alteram
consideravelmente a velocidade da reao de enzimas.
10

Resultad
0,0
0,0
20,0
22,0
12
10
0,0

A partir da tabela foi gerado o seguinte grfico:

Grfico 4 - Efeito do pH.

Efeito do pH
25
20
15

Polynomial ()

f(x) = - 0.28x^2 + 4.23x - 1.22

R = 0.57

10
5
0
0

10

12

CONCLUSO
Concluindo o experimento, podemos observar o grande poder cataltico das
enzimas. Elas possuem a capacidade de aumentar a velocidade de uma reao sem
11

serem consumidas funcionando como catalisadores que necessitam de menos energia

para a reao. Alm disso, conseguimos entender os fatores que influenciam na
atividade enzimtica como, pH, concentrao de substrato e temperatura. Relacionar o
experimento com a teoria estudada em sala de aula foi o maior aprendizado que
conseguimos adquirir, pois a realizao prtica daquilo que vimos em sala possibilita
maior fixao do contedo e entusiasmo no processo de aprendizagem da disciplina de
Processos Bioqumicos I.

REFERNCIAS:
FIORUCCI,

Antonio

Rogrio;

SOARES,

Mrlon

Hebert

Flora

Barbosa;

12

CAVALHEIRO, der Tadeu Gomes; O Conceito de Soluo Tampo, Qumica Nova na

Escola, n 13, maio 2001

PERUZZO, Francisco Miragaia (Tito); CANTO, Eduardo Leite; Qumica na

Abordagem do Cotidiano, Ed. Moderna, vol.1, So Paulo/SP- 1998.

13