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ISSN 1517-4559
Dezembro, 2012

77

Procedimentos de
Manuseio e de Colheita
do Sangue em Arraias
de gua Doce

ISSN 1517-4559
Dezembro, 2012
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria
Embrapa Amap
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

Documentos 77

Procedimentos de
Manuseio e de Colheita
do Sangue em Arraias
de gua Doce
Adriano Teixeira de Oliveira
Jefferson Raphael Gonzaga Lemos
Mrcio Quara Carvalho Santos
Maria Lcia Ges de Arajo
Marcos Tavares-Dias
Jaydione Luiz Marcon

Embrapa Amap
Macap, AP
2012

Embrapa Amap
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Rodrigo Yudi Fugimoto Embrapa Tabuleiros Costeiros
Reviso de texto: Elisabete da Silva Ramos
Normalizao bibliogrfica: Adelina do Socorro Serro Belm
Editorao eletrnica: Fbio Sian Martins
Foto da capa: Adriano Teixeira de Oliveira
1a. edio
Verso eletrnica (2012)

Todos os direitos reservados.

A reproduo no autorizada desta publicao, no todo ou em
parte, constitui violao dos direitos autorais (Lei n 9.610).
Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP)
Embrapa Amap
Oliveira, Adriano Teixeira de
Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias
de gua doce / Adriano Teixeira de Oliveira...[et al.]. Macap:
Embrapa Amap, 2012.
18 p. : il. -- (Documentos / Embrapa Amap ; ISSN 1517-4859,
77).
1. Peixe de gua doce. 2. Hematologia. 3. Anlise. 4. Processamento laboratorial. I. Oliveira, Adriano Teixeira de. II. Titulo. III.
Srie.
CDD 639.31

Embrapa 2012

Autores

Adriano Teixeira de Oliveira

Bilogo, Doutorando em Diversidade Biolgica,
Instituto Federal de Educao, Cincia e
Tecnologia (IFAM), Presidente Figueiredo, AM.
adriano.oliveira@ifam.edu.br
Jefferson Raphael Gonzaga Lemos
Bilogo, Mestre em Diversidade Biolgica,
Faculdade Metropolitana de Manaus (Fametro),
Manaus, AM. jefraphael@yahoo.com.br
Marcio Quara Carvalho Santos
Bilogo, Mestre em Diversidade Biolgica,
Universidade Federal do Amazonas (UFAM),
Manaus, AM. marcioquara@hotmail.com
Maria Lcia Ges de Arajo
Oceangrafa, Doutora em Diversidade Biolgica,
Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE).
mlpotamotrygon@gmail.com
Marcos Tavares-Dias
Bilogo, Doutor em Aquicultura de guas
Continentais, Pesquisador da Embrapa Amap,
Macap, AP, marcos.tavares@embrapa.br
Jaydione Luiz Marcon
Bilogo, Doutor em Biologia de gua Doce e
Pesca Interior, Universidade Federal do Amazonas
(UFAM), Manaus, AM. jlmarcon@ufam.edu.br

Agradecimentos

Este trabalho obteve licena (Nmero: 18.285/10) do Instituto Chico

Mendes de Conservao da Biodiversidade (ICMBio) e foi financiado
pela Fundao de Amparo Pesquisa do Estado do Amazonas/FAPEAM
(Processos: 2459/08 e 126/08) e Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico/CNPq (Processo: 408795/2006-9).

Apresentao

A aquariofilia um hobby praticado em todo o mundo, assim com

esse crescente aumento de demanda, o mercado de espcies ornamentais vem se expandindo, nos Estados Unidos e Europa. Neste
mercado, o Brasil um grande exportador, com predomnio marcante de espcies de gua doce provenientes em sua maioria da bacia
amaznica, principalmente do Estado do Amazonas, responsvel por
90% de toda a produo, incluindo as arraias pertencentes famlia
Potamotrygonidae.
A explorao das arraias vem ocorrendo h mais de 25 anos e os
procedimentos que envolvem as atividades de pesca at o transporte
para os exportadores em Manaus, so os mesmos praticados desde
o incio da atividade na regio, ou seja, ocorrem de forma artesanal
e rudimentar. As arraias potamotrigondeos vivem a maior parte do
tempo semienterradas na areia ou lama do fundo dos rios e lagos,
e possuem ferres na cauda, o que pode causar graves acidentes
durante sua captura e manuseio tambm para colheita de qualquer
material biolgico. Porm, h necessidade de cuidados para esses
procedimentos em arraias, principalmente para estudos fisiolgicos.
A Embrapa Amap, Instituto Federal de Educao, Cincia e
Tecnologia (Ifam) e a Universidade Federal do Amazonas (Ufam),
em parceria, disponibilizaram informaes sobre procedimentos corretos e seguros de manuseio de arraias de gua doce e tambm para

a padronizao de anlises sanguneas dessas espcies de animais,

na publicao tcnica Procedimentos de manuseio e de colheita
do sangue em arraias de gua doce, visando assim contribuir com
aqueles que coletam amostras biolgicas de arraias para fins de
estudos.

Silas Mochiutti

Chefe-Geral da Embrapa Amap

Sumrio

Introduo..........................................................................................9
Captura na natureza...................................................................... 10
Conteno para o manuseio
Colheita do sangue

...................................................... 11

....................................................................... 14

Consideraes finais..................................................................... 16
Referncias...................................................................................... 17

Procedimentos de Manuseio
e de Colheita do Sangue
em Arraias de gua Doce
Adriano Teixeira de Oliveira
Jefferson Raphael Gonzaga Lemos
Mrcio Quara Carvalho Santos
Maria Lcia Ges de Arajo
Marcos Tavares-Dias
Jaydione Luiz Marcon

Introduo
As arraias de gua doce pertencem famlia Potamotrygonidae e esto
inseridas no nico grupo de elasmobrnquios adaptados vida exclusiva em gua doce (COMPAGNO; COOK, 1995). Esses animais possuem
o corpo achatado dorso-ventralmente e cauda com at trs ferres
retrosserrilhados, que contm toxinas. Devido a essa caracterstica, os
potamotrigondeos causam grande temor aos banhistas e pescadores,
pois podem causar acidentes que provocam ferimentos graves e bastante dolorosos (GARRONE NETO; HADDAD-JUNIOR, 2009). Assim,
durante a manipulao desses animais para colheita de sangue em estudos hematolgicos, acidentes podem ocorrer na manipulao e captura
realizadas sem instrumentos de pesca apropriados e sem os devidos
cuidados (GARRONE-NETO; HADDAD-JUNIOR, 2010).
Em peixes telesteos os procedimentos bsicos para a colheita de
sangue j esto bem estabelecidos (ISHIKAWA et al., 2010; TAVARES-DIAS; MORAES, 2004), entretanto, em tubares a colheita de sangue
recomendada na regio dorsal, procedimento conhecido como puno
caudal (ARNOLD, 2005; RIJN; REINA, 2010; WALSH; LUER, 2004;
WILHELM-FILHO et al., 1992). Para as arraias marinhas a via mais
utilizada para colheita do sangue a puno cardaca (WALSH; LUER,

Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

2004; WILHELM-FILHO et al., 1992) e essa mesma via a recomendada para as arraias de gua doce (DUNCAN et al., 2009).
Com a finalidade de minimizar acidentes durante procedimentos de manipulao de arraias de gua doce e, principalmente, com a finalidade
de reduzir o manuseio estressante em arraias para a colheita sangunea
adequada e determinao de parmetros fisiolgicos, evitando assim
possveis alteraes nessas determinaes (ISHIKAWA et al., 2010), o
objetivo desse trabalho foi padronizar os procedimentos de manuseio e
colheita sangunea em arraias de gua doce.

Captura na natureza
Em ambiente natural, dependendo da finalidade, a captura de arraias geralmente realizada com diferentes instrumentos de pesca, tais como: o pu de mo (Figura 1), tambm conhecido como
rapich na Amaznia central; malhadeiras; espinhel; e arpo,
tambm conhecido como zagaia. Entretanto, para a determinao
dos parmetros hematolgicos em populao natural de qualquer
espcie de arraias de gua doce, recomenda-se o uso do pu de
mo, pois esse instrumento no causa ferimentos nos animais e

Foto: Adriano Teixeira de Oliveira

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Figura 1. Captura de arraias na natureza com o uso de pu

de mo.

Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

permite que eles sejam capturados rapidamente, minimizando o

efeito do estresse de captura, indesejvel para os estudos fisiolgicos, principalmente para determinao de valores sanguneos basais
de qualquer espcie de arraia.
Na Amaznia, as arraias coletadas da natureza com pu de mo so
mantidas em recipientes de caixa plstica (tipo-caapa) com capacidade
de at 30 litros de gua. Assim, nesses recipientes contendo 2-3 litros
de gua elas so mantidas e estocadas na densidade mdia de duas em
cada recipiente.

Conteno para o manuseio

Os ferres das arraias derivam de formas ancestrais que os utilizavam
para afugentar predadores e no para a captura de presas, reforando
o conceito de que arraias no so agressivas, utilizando seus ferres
apenas quando pisadas inadvertidamente ou manuseadas sem o devido
cuidado (GARRONE-NETO; HADDAD JUNIOR, 2009).
Diferentemente de peixes telesteos e algumas espcies de tubares e arraias marinhas, as arraias potamotrigondeos dulciaqucolas
possuem ferres com toxinas em suas caudas que podem provocar lceras que tm um perodo de cicatrizao de at trs meses
(GARRONE-NETO; HADDAD-JUNIOR, 2009). Esses acidentes causam dor intensa no local da ferroada, edema e extenso varivel de
sangramento (MAGALHES et al., 2006). Desta forma, em arraias
de gua doce, as prticas necessrias ao manuseio de colheita de
sangue requerem procedimentos de segurana para evitar a ocorrncia
desses graves acidentes ao manipulador.
Em alguns casos o uso de anestsicos indicado, entretanto, sabe-se que
essas substncias podem ocasionar alteraes hematolgicas como tem
sido relatado para algumas espcies de peixes telesteos (BOLASINA,
2006; INOUE et al., 2004; SUDAGARA et al., 2009; TAVARES-DIAS;
MORAES, 2004). Porm, para os potamotrigondeos no existe qualquer

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Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

estudo sobre os possveis efeitos de anestsicos em parmetros hematolgicos. Em arraias dulciaqucolas, o anestsico MS-222 (0,5 g/L) tem efeito
somente depois de cerca de 10-15 minutos, alm de ser uma substncia
txica para os animais. Assim, quando h necessidade da utilizao de
anestsicos para conteno dos animais, recomenda-se o uso de eugenol (Tabela 1), por 3-4 minutos. Em perodos inferiores a trs minutos, os
animais ainda possuem reflexos e batimentos do espirculo bem evidentes.
Em perodos superiores a quatro minutos, os batimentos do espirculo so
muito baixos e dificultam a colheita de sangue, por puno branquial, em
um curto perodo de tempo.
Tabela 1. Recomendaes quanto ao uso de seringas, agulhas e concentrao
do anestsico eugenol de acordo com a massa corporal de arraias coletadas
para colheita de sangue.
Peso (g)

Seringas

Agulhas

Eugenol (g/L)

1-50

1 mL

13 x 4 mm

0,2

51-10.000

3 mL

25 x 7 mm

0,2

Acima de 10.000

3 mL

1,20 x 40 mm

0,2

Como medida preventiva de acidentes, recomendado o uso da pina Foster para conteno mecnica dos animais, prendendo somente o ferro como mostrado na Figura 2. Alguns raros indivduos de
Potamotrygon motoro, uma espcie muito ativa, mesmo sob letargia
da anestesia, podem tentar desferir ferroadas no manipulador, mas
isso pode ser bloqueado pelo prprio peso da pina Foster, que pode
ser usada em procedimentos de manuseio dessas arraias de qualquer tamanho. Porm, um procedimento que no deve ser realizado
a imobilizao da cauda e do ferro simultaneamente sem o uso de
equipamentos adequados, pois podem ocorrer ferimentos causados pelo
ferro, bem como o rompimento da cauda e at mesmo a perda desse
membro, o qual exerce importante funo no equilbrio natatrio das
arraias e das atividades dependentes da natao, tais como: a caa, a
fuga e o acasalamento.

Foto: Adriano Teixeira de Oliveira

Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

Figura 2. Conteno mecnica do ferro de arraias com o

uso da pina Foster.

Foto: Adriano Teixeira de Oliveira

Para manusear as arraias, aps a conteno do ferro com pina Foster,

deve-se tambm utilizar luvas de couro resistentes, que permitam a mobilidade das mos. Porm, como as arraias de gua doce liberam muito muco
na superfcie do corpo, esse dificulta o manuseio desses animais, devido
reduo da aderncia entre as luvas e os animais. Assim, a utilizao de
um pano umedecido em gua para cobrir o ferro tambm auxilia bastante
nos procedimentos de manuseio correto de arraias (Figura 3).

Figura 3. Utilizao de pina Foster, pano e luva de couro

para manusear arraias com segurana para o animal e para
o manipulador.

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Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

Aps a conteno mecnica da arraia, essa deve ser mantida com a

regio ventral para cima e, em seguida, coloca-se um pano umedecido
sobre as suas brnquias, para evitar a sua mobilidade e diminuir ao mximo o seu estresse causado pelo manuseio fora da gua.

Colheita do sangue
Nas arraias de gua doce h trs locais que podem ser usados para
colheita sangunea: puno do vaso caudal, puno cardaca e puno
do vaso branquial. Recomenda-se utilizar seringas descartveis previamente umedecidas em anticoagulantes como o EDTA 10% ou heparina
5.000 UI (0,1 mL para cada 1 mL de sangue), sendo que o tamanho
dessas seringas depende da massa corprea dos animais coletados. Em
arraias de gua doce, para um maior sucesso na colheita de sangue,
necessrio o uso de seringa e agulha com tamanho compatvel massa
corporal dos animais coletados (Tabela 1).

Foto: Adriano Teixeira de Oliveira

A puno do vaso caudal (Figura 4A-B) tem procedimentos difceis de

executar, devido natureza rgida do membro e pouca vascularizao,
o que reduz a quantidade de sangue circulante na localidade quando
comparados aos outros locais de colheita do sangue. Alm disso, esse
o local onde se localiza o ferro desse grupo de elasmobrnquios dulciaqucolas, tornando assim esse procedimento de colheita sangunea
bastante perigoso para o manipulador.

Figura 4. (A) Local de puno caudal em arraias de gua doce. (B) Vaso caudal por onde
circula o sangue.

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Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

Foto: Adriano Teixeira de Oliveira

Na colheita de sangue por puno cardaca, a seringa deve estar inclinada em ngulo de aproximadamente 60o em relao ao corpo da arraia
(Figura 5A-B). Nesse mtodo, a confiabilidade da amostragem est
consignada ao enrijecimento perceptvel aps a perfurao do msculo
do corao, rgo que se localiza entre a primeira e a segunda fenda
branquial. Dentre os trs locais de colheita sangunea, a puno cardaca o procedimento mais invasivo para os animais. Assim, como
o corao o rgo vital responsvel pelo bombeamento do sangue,
a utilizao de anestsicos (Tabela 1) necessria para evitar o sofrimento dos animais. Porm, a colheita sangunea deve ser precisa, para
que no ocorra posteriormente necrose do miocrdio, que pode ser fatal
(ISHIKAWA et al., 2010). Alm disso, nessa localidade h um maior
risco de se retirar outros fluidos (corporais e linfa) e no o sangue desejado. Portanto, devido a todos os fatores anteriormente mencionados, a
escolha do local de colheita sangunea em arraias de gua doce depender, principalmente, do uso ou no de anestsicos e da habilidade do
manipulador.

Figura 5. (A) Local e posicionamento correto da seringa para a colheita sangunea por
puno cardaca em arraia de gua doce. (B) Cmara branquial aberta indicando a posio
do corao (seta azul).

A colheita sangunea por puno do vaso branquial deve ocorrer na

posio da terceira fenda branquial e com a seringa disposta em ngulo
de 90o (Figura 6). A perfurao com a agulha deve ir at a percepo

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Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

Foto: Adriano Teixeira de Oliveira

da coluna vertebral, em seguida um leve retorno com um pequeno

aumento da presso negativa no mbolo devem ser feitos. No se deve
exercer presso exagerada, pois pode ocorrer hemlise (ISHIKAWA
et al., 2010). A puno do vaso branquial o mtodo mais eficiente
para se colher o sangue de arraias de gua doce. Esse procedimento
o mais seguro contra as ferroadas dos animais e, alm disso, reduz as
chances de colheita de outros fluidos corporais indesejveis durante a
colheita do sangue. Portanto, esse o mtodo em que se obtm sangue com maior rapidez para a anlise e proporcionando menor estresse
aos animais.

Figura 6. (A) Colheita do sangue por puno do vaso branquial. (B) Detalhe do vaso branquial em arraias de gua doce, indicado pela agulha da seringa.

Consideraes finais
Devem ser considerados sempre os procedimentos mais seguros para
o manuseio adequado de arraias de gua doce durante a obteno de
amostras biolgicas, incluindo a colheita de sangue, evitando assim a
ocorrncia de acidentes graves com os ferres desses animais aquticos. Portanto, recomenda-se a colheita de sangue de arraias de gua
doce por puno do vaso branquial devido a maior segurana para o
manipulador, pela facilidade, preciso e rapidez nesse procedimento.
Alm disso, a puno do vaso branquial reduz o sofrimento dos animais, causado geralmente pelo estresse de manuseio e pela conteno
mecnica fora da gua.

Procedimentos de manuseio e de colheita do sangue em arraias de gua doce

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CGPE 10211