Factores que regulan el desarrollo folicular

Folculos preantrales
El proceso de foliculognesis es el resultado de la interaccin entre
todos los componentes celulares que constituyen el folculo y en l
intervienen una multitud de factores producidos ya sea por el ovocito,
las clulas de la granulosa (CG) o las de la teca (CT), en distintos
momentos y bajo el influjo de diferentes factores autocrinos, paracrinos
o endocrinos (Tabla 1). No slo es la foliculognesis el resultado de
mltiples influencias, sino que es un proceso en el cual un mismo
elemento de regulacin puede participar de manera diferente,
dependiendo del estado de desarrollo, no nicamente del folculo en s,
sino tambin de otros folculos previamente desarrollados dentro del
ovario.
Tabla 1: Factores involucrados en el desarrollo folicular temprano
FACTOR ORIGEN

FUNCIN

Protena
ckit,

Migracin y proliferacin de clulas

germinales

BMP4
BMP8b

Clulas
somticas

y Ectodermo
Generacin de clulas germinales
extraembrionari
o

Conexina Ectodermo
Generacin de clulas germinales
43
extraembrionari
o
Figla o Fig Ovocito
a

Coordinacin de genes estructurales

que codifican la zona pelcida

BMP15

Diferenciacin y proliferacin celular

(granulosa)

Ovocito

GDF 9

Ovocito

Diferenciacin y proliferacin celular

(granulosa)

bFGF

Ovocito

Estimulacin
diferenciacin
granulosa

KL

Clulas
pregranulosa

Promocin de la transicin folculo

primordial-primario

LIF

Clulas
pregranulosa

Promocin de la transicin folculo

primordial-primario

Insulina

Endocrino

Promocin de la transicin folculo

primordial primario.

de
mitosis
a clulas de

y
la

Estimulacin de la esteroidognesis
en clulas de la granulosa y teca
AMH

Clulas de
granulosa

la Inhibicin del desarrollo

folculos primordiales

AhR

Clulas de
granulosa

la Regulacin del tamao de la poza

del ovocito

CTGF

Clulas de
granulosa

la Mantenimiento del fenotipo celular y

reclutamiento de la teca

Activina

Clulas de
granulosa

la Proliferacin celular y estimulacin

de la esteroidognesis (granulosa)

KGF

Clulas
teca

la Proliferacin celular y crecimiento

folicular

de

de

los

En consecuencia, en la recapitulacin que haremos a continuacin de los

principales factores que regulan la transicin entre los diferentes
estadios del folculo, no ser raro encontrar tanto elementos repetidos,
como otros que varan su participacin de acuerdo al estado del
desarrollo folicular.
Durante el desarrollo embrionario, para que se inicie la migracin y
proliferacin de las clulas germinales, los factores ms importantes
parecen ser el producto polipeptdico del gen ckit, un receptor de
protooncogn sintetizado por las clulas somticas, y las protenas
morfogenticas de hueso BMP4 y BMP8b, adems de la protena
conexina-43, todas ellas producidas por el ectodermo extraembrionario,
las cuales parecen ser esenciales para la generacin de las clulas
germinales, al menos en el ratn [Van Voorhis BJ. Encyclopedia of
Reproduction II: 376-38 (1999)].
I.- Transicin de folculo primordial a primario
Estudios recientes han demostrado que es necesario que el ovocito,
detenido en la fase de diploteno I, exprese cuanto menos un gen
llamado Figla o Fig a, que codifica un factor de transcripcin con
estructura tipo hlice-giro-hlice, para lograr completar exitosamente la
estructura de un folculo primario. Figla parece coordinar, a su vez, la
expresin de los genes estructurales que codifican algunos componentes
de la zona pelcida y de uno o ms factores que contribuyen a la
estructuracin de las clulas de la pregranulosa alrededor del ovocito
desnudo, ya sea como elementos quimiotcticos o como molculas de
adhesin.
Se ha demostrado la existencia de varios factores que influyen
directamente sobre la transicin de folculos primordiales a primarios,
entre los que se encuentran el ligando kit (KL), el factor inhibidor de la
leucemia (LIF), el factor de crecimiento bsico derivado de fibroblastos
(bFGF) y la insulina [Eppig. Reproduction 122: 829-838 (2001)].
Algunos factores, como el KL y el LIF producidos por las clulas de la
pregranulosa, promueven la transicin ms favorablemente en presencia
de la insulina, para la que aparentemente existen receptores presentes
en el ovocito, mientras que el bFGF es sintetizado por ste y acta sobre
las clulas de la pregranulosa, favoreciendo la supervivencia de los
folculos primarios, establecindose de esta forma un circuito de
retroalimentacin entre ambos tipos celulares [Kezele y cols. Mol. Cell.
Endocrinol. 192: 37-43 (2002)].

Otros factores pueden influir de manera indirecta sobre la transicin de

folculo primordial a primario a travs de las interacciones que se
establecen entre folculos en desarrollo provenientes de ciclos estrales o
menstruales anteriores y los folculos primordiales. Ejemplos de estos
factores son la hormona anti-Mlleriana (AMH), producida por las CG
plenamente diferenciadas, que acta inhibiendo el desarrollo de los
folculos primordiales, as como el receptor de hidrocarburos de tipo arilo
(AhR), que parece ser importante para regular el tamao de la poza de
ovocitos, si bien su mecanismo de accin es hasta ahora desconocido
[Markstrm y cols. Reproduction 123: 23-30 (2002)].
De acuerdo a lo anteriormente sealado, en las primeras fases del
desarrollo folicular no parece necesitarse la presencia de
gonadotropinas, ya que las seales de tipo paracrino entre el ovocito y
las clulas circundantes son las responsables directas del inicio de la
maduracin folicular.
II.- Transicin de folculo primario a secundario
Aunque los mecanismos necesarios para que los folculos prosigan su
desarrollo no se comprenden bien, el ovocito juega claramente un papel
clave en la maduracin folicular ms all de la etapa de folculo
primario, presumiblemente a travs de la produccin de diversos
factores implicados, principalmente, en la proliferacin de las CG ya
diferenciadas, as como en el reclutamiento posterior de las CT.
Algunos factores que se encuentran presentes en la transicin entre
estas fases del desarrollo folicular son el bFGF, el factor de crecimiento y
diferenciacin 9 (GDF9), la BMP15, el KL, el LIF, el factor de crecimiento
derivado del tejido conjuntivo (CTGF), las activinas y el factor de
crecimiento derivado de queratinocitos (KGF). Los tres primeros los
sintetiza el ovocito, mientras que KL, LIF, CTGF y las activinas los
producen las CG y el KGF las CT.
En esta etapa, el bFGF actuara inicialmente estimulando la mitosis y
posteriormente favoreciendo la diferenciacin final de la capa de CG que
rodea al ovocito [Nilsson y cols. Mol. Cell. Endocrinol. 175: 123-130
(2001)], una labor que parece ser reforzada tanto por el GDF9, como por
el BMP15, si bien el fenmeno parecera ser ms complejo de lo que
parece a simple vista [Findlay y cols. Mol. Cell. Endocrinol. 191: 35-42
(2002)].
Por otra parte, KL y LIF favoreceran ahora la supervivencia del ovocito y
su maduracin citoplasmtica, lo cual tendra como resultado la
estimulacin de su crecimiento y desarrollo, mientras que el CTGF
permitira el mantenimiento de los fenotipos celulares iniciales del

folculo primario y podra contribuir al proceso del reclutamiento de las

futuras CT, as como a su proliferacin [Harlow & Hillier. Mol. Cell.
Endocrinol. 187: 23-27 (2002)]. Finalmente, las activinas y el KGF, quiz
junto con el bFGF y concentraciones relativamente bajas de estradiol,
promoveran tambin el crecimiento y proliferacin de los folculos a
travs de mecanismos an no bien definidos.
Se ha propuesto un modelo que explicara la participacin de los
factores producidos tanto por los ovocitos como por las CG en la
promocin del crecimiento de los primeros, lo que les permitira alcanzar
un tamao definido claramente para cada especie en particular
[Richards. Endocrinology 142: 2184-2193 (2001)]. El KL producido por
las CG continuara estimulando tanto el crecimiento del ovocito como la
sntesis de sus productos reguladores, hasta que la concentracin de
estos ltimos (particularmente del GDF9), actuando a travs de procesos
de regulacin negativa, suprimiera la sntesis del primero, disminuyendo
o deteniendo el crecimiento del ovocito. Cabe sealar que, si bien este
modelo parecera funcionar en folculos preantrales, la presencia de
gonadotropinas podra alterar este equilibrio dinmico.
Como resultado de estos eventos, hacia el final de esta transicin, las
clulas del folculo comenzarn a expresar todas sus caractersticas
fenotpicas, que las prepararn para responder a los acontecimientos
finales del desarrollo folicular, ahora dependientes completamente de
las gonadotropinas circulantes.

Factores que regulan el desarrollo folicular II:

folculos Antrales
Las etapas finales del desarrollo folicular se encuentran reguladas por
factores de diversa naturaleza y origen los cuales, a travs de la
participacin de mltiples sistemas de sealizacin autocrina, paracrina
y endocrina, que involucran a todas las estirpes celulares que se
encuentran en el folculo, son capaces de llevarlo a travs de las etapas
de maduracin que culminan en la ovulacin y su posterior luteinizacin.
I. Transicin folculo secundario a terciario

A partir de esta etapa, el folculo requerir forzosamente del estmulo de

la hormona estimulante del folculo (FSH) para proseguir la proliferacin
de las clulas de la granulosa (CG) y establecer, en stas, una
produccin creciente de estrgenos. La accin inductiva de la FSH
permitir, posteriormente, facilitar la respuesta del folculo a la hormona
luteinizante (LH) y a otros factores extracelulares [Hillier. Mol. Cell.
Endocrinol. 179: 39-46 (2001)].
Algunos productos gnicos que aparecen en las CG presentes en los
folculos secundarios como resultado de su estimulacin por la FSH son,
entre otros, el complejo de la aromatasa, los receptores para FSH
(FSHR), LH (LHR) y estrgenos (ER), productos polipeptdicos de la
familia del factor de crecimiento y transformacin-b, tales como el GDF9,
las inhibinas y las activinas, as como la folistatina, una protena que une
a estas ltimas con una elevada afinidad [Knight & Glister. Reproduction
121: 503-512 (2001)], adems de los factores de crecimiento
semejantes a insulina (IGF)-I y -II y las protenas que lo unen (las IGFBP).
A travs de mecanismos an no comprendidos, que podran involucrar
diferencias en cuanto a la sensibilidad de cada folculo a la estimulacin
gonadotrpica as como su capacidad de produccin temprana de
estrgenos, se seleccionar uno o a lo sumo un pequeo nmero de
folculos (dominancia folicular) y podr continuar su desarrollo hasta
alcanzar la fase ovulatoria, mientras que los dems folculos (folculos
subordinados) detendrn su crecimiento y estarn destinados a sufrir
atresia.
Una vez que las CG hayan expresado los FSHR, su proliferacin y
diferenciacin estarn reguladas principalmente por esta gonadotropina,
pero dependern tambin de otros factores extrnsecos y de los factores
paracrinos producidos localmente, que pueden presentar acciones tanto
estimulatorias como inhibitorias. Cabe sealar que los mecanismos de
accin de varios de estos factores no se han dilucidado hasta ahora, por
lo que slo discutiremos a continuacin la participacin de algunos de
estos moduladores en el desarrollo folicular.
As, al inicio de la transicin folculo secundario-terciario, las activinas
participan en la estimulacin de la expresin de los FSHR y de la
aromatasa en las CG, inhibiendo a la vez la expresin de los LHR en las
CG y en las clulas de la teca (CT). Conforme las CG continan su
proliferacin y el folculo va completando la formacin de su antrum, las

concentraciones crecientes de estrgenos incrementarn la sntesis de

las inhibinas y la folistatina, por lo tanto disminuyendo las
concentraciones efectivas de activinas en el folculo.
Esta disminucin en la concentracin de activinas en el folculo antral
permitir la expresin de los LHR en las CG y en las CT, y el incremento
en la produccin de inhibinas promover la sntesis de novo de
andrgenos (principalmente androstendiona) y la expresin de los LHR
en las ltimas, adems de disparar la progresin meitica en el ovocito
detenido en diploteno I, y de regular la sntesis y secrecin hipofisiaria
de FSH a travs de mecanismos de retroalimentacin negativa [Findlay y
cols. Mol. Cell. Endocrinol. 191: 35-42 (2002)].
Diversas estirpes celulares foliculares parecen jugar un papel clave en el
establecimiento del patrn heterogneo de expresin que se observa en
las CG de folculos terciarios, ya que las CG murales, en contacto directo
con una lmina basal y alejadas del ovocito, sintetizarn el LHR,
mientras que las clulas del cmulo, en contacto con ste,
prcticamente no lo harn. Algunos mecanismos de regulacin que se
han propuesto para explicar este fenmeno incluyen la participacin del
GDF9 como un regulador negativo de la transcripcin de LHR en clulas
del cmulo, la intervencin del KL, el factor de crecimiento epidermal
(EGF) y algunos componentes de la matriz extracelular como promotores
de la expresin del LHR y de la proliferacin celular en las CG murales.
Por otra parte, la expresin plena del fenotipo de las CG parecera
contribuir a la regulacin funcional de las CT y, en consecuencia, al
mantenimiento de un adecuado funcionamiento del folculo. En este
sentido, se ha observado que la FSH estimula en las CG la produccin de
IGF-I, el cual incrementa, a su vez, la produccin tecal de andrgenos y,
finalmente, la sntesis de estrgenos por las mismas CG. Se ha
observado que las concentraciones bioactivas de IGF-I son mayores en
los folculos dominantes que en los subordinados lo que, al parecer,
reflejara los niveles de IGFBPs presentes en cada folculo y planteara
una posible explicacin de los factores que definen el potencial
esteroidognico de los folculos y el fenmeno de dominancia folicular en
el ovario [Richards, Endocrinology 142: 2184-2193 (2001)].
Finalmente, varios de los factores producidos localmente son
importantes para la supervivencia de los folculos antrales tempranos.
Estos factores pueden actuar sobre las CG (p. ej., esteroides), las CT (p.

ej. IGF-I) o del ovocito (p.ej., activinas), permitiendo al folculo dominante

pasar a folculo preovulatorio o de Graaf [Markstrm y cols.
Reproduction 123: 23-30 (2002)].
II. Transicin folculo terciario-folculo de graaf
La ovulacin se dispara con el pico preovulatorio de LH, el cual, a su vez,
se induce por la elevada concentracin circulante de estrgenos
producidos por el folculo preovulatorio. Este pico induce marcados
cambios en el folculo que incluyen tanto la reiniciacin de los procesos
de maduracin del ovocito como alteraciones funcionales en el complejo
ovocito-clulas del cmulo, modificaciones en la expresin gnica de las
CG que las llevarn hacia la luteinizacin y otros cambios que
provocarn la ruptura de la pared folicular.
El ovocito maduro secreta un factor que permite la expansin de las
clulas del cmulo (CEEF) que permite secretar cido hialurnico en
respuesta a la estimulacin por FSH. Al hidratarse genera espacios entre
las clulas que provocan la expansin del cmulo que precede al
proceso de ovulacin propiamente dicho. Algunos autores han sealado
que la expresin de la enzima hialuronano sintasa 2, responsable de la
sntesis de este glucosaminoglucano, parece depender de algunos
factores previamente identificados como productos de secrecin de los
ovocitos (p.ej., GDF9) [Eppig. Reproduction 122: 829-838 (2001)].
Los productos proinflamatorios sintetizados por las CG y detectados en
elevadas concentraciones en los folculos preovulatorios (p. ej.,
interleucinas [IL]-1b y -6, factor de necrosis tumoral [TNF]-a y
prostaglandinas [PG]) contribuyen a la disminucin de su produccin de
estrgenos hacia el final de la transicin a folculo de Graaf. Este cambio
en el patrn esteroidognico de las CG parece inducir, junto con la
aparicin del pico preovulatorio de LH, la expresin de las enzimas
remodeladoras de tejidos (metaloproteinasas de matriz [MMPs])
indispensables para el proceso de ovulacin [Rosenfeld y cols.
Reproduction 122: 215-226 (2001)].
Varios tipos de MMP participan en el proceso de ruptura folicular, entre
ellas, enzimas con capacidad de degradar colgeno, elastina,
proteoglucanos y otros elementos de matriz extracelular,que se
encuentran presentes en folculos preovulatorios de ovarios de rata y
cabra. El incremento periovulatorio en la actividad colagenoltica se

atribuye a aumentar la expresin de los mRNA de la colagenasa

intersticial y la colagenasa-3 en las CG de folculos de Graaf de rata y
bovino. Otras enzimas cuya expresin se induce en las CG son las
gelatinasas, que participan tambin en la degradacin de la membrana
basal que separa a las CG y a las CTI [Van Voorhis BJ. Encyclopedia of
Reproduction II: 376-389 (1999)].
La regulacin de la actividad de las MMP y de otras proteasas en el
folculo ocurre a travs de un mecanismo dependiente de activadores
especficos, los cuales controlan el paso de los zimgenos a las formas
catalticas. Un ejemplo de regulador positivo de la actividad de las MMP
es el activador de plasmingeno del tipo urocinasa (uPA), activador de
varias colagenasas y gelatinasas, producido por las clulas del cmulo.
La sntesis del uPA parece inhibirse por el ovocito durante la etapa de
folculo terciario, y esta inhibicin desaparece una vez que se ha
presentado el pico preovulatorio de LH.
Finalmente, se ha sugerido que el ovocito produce un factor antiluteinizante que previene la diferenciacin terminal de las CG,
manteniendo activa su sntesis de estrgenos en detrimento de su
produccin de progesterona. Este bloqueo biosinttico desaparece una
vez que se ha presentado el pico preovulatorio de LH, que parece hacer
resistentes las CG a la inhibicin de su diferenciacin. Por lo tanto, una
vez que el ovocito se ha liberado, las CG murales y las CT concluirn su
proceso de rediferenciacin para dar origen a las clulas lteas.