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*Angela BEJAR CAMAPAZA, Jhonny LPEZ CHAGUA, Xiomara RIVERA PUMA, Aleida
VASQUEZ CAYCHO
*Facultad de Farmacia y Bioqumica - Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima, Per
RESUMEN
Se realiz el proceso de conservacin de la especie santamara (Piper umbellatum L.), con la
finalidad de realizar ensayos fitoquimicos a la droga. La especie santamara (Piper umbellatum
L.) pas pon un proceso de secado, tamizado y almacenamiento; luego se realiz la extraccin
mediante el mtodo de digestin y maceracin. Finalmente se emplearon los extractos para el
anlisis fitoqumico de metabolitos
Palabras claves: santamara, Piper umbellatum L., estudio fitoqumico.
ABSTRAC
The process of conservation of species santamara (Piper umbellatum L.) was performed, in order
to perform the drug tests phytochemicals. The species santamara (Piper umbellatum L.) went put
a drying process, screening and storage; then extraction was performed by the method of digestion
and maceration. Finally phytochemical extracts for analysis of metabolites were used.
Key words: santamara, Piper umbellatum L., phytochemical analysis
INTRODUCCIN
Piperaceae es una de las familias ms ampliamente distribuidas de las plantas con flores. Se
compone de ms de 12 gneros que comprende alrededor de 1400 especies distribuidas en toda
la regin tropical y subtropical en ambos hemisferios.
La familia de las Piperaceae comprende especies leosas y herbceas de las regiones tropicales,
con hojas alternas, raramente verticiladas, con o sin estpulas. Las flores son hermafroditas, se
sitan en las axilas de las brcteas y se renen en inflorescencias en espiga dispuestas en el pice
de las ramas. El androceo tiene 2 estambres de filamento corto y el gineceo tiene 3 carpelos
soldados en un ovario unilocular que se prolonga en tres estigmas.1
Piper umbellatum L. es una planta presente en la naturaleza como arbusto o hierba leosa de 1 a
2,5 m de altura aproximadamente, con tallos numerosos, suculento, acanalado, formando una
mata densa, races en los nudos, races leosas principalmente; hojas alternas, casi circular a
reniformes, 5 a 40 cm x 5 a 40 cm, hoja de color verde oscuro por encima, por debajo de color
grisceo, de base profundamente cordadas, el pice cortamente acuminado a redondeadas,
mrgenes enteros o crenulado, pecolo de 6.5 a 30 cm de largo aproximadamente, dilatado;
inflorescencia de 5.5 a 15 cm de largo, de 2 a 8 juntas en falsas umbelas, pednculo de 3 a 12 cm
de largo, de 1 a 3 pednculos juntos, brcteas pedunculares estrechas, 6 a 8 mm de largo. Flores
pequeas; brcteas florales triangulares algo redondeadas de 0.5 a 0.8 mm de ancho y mrgenes
fimbriados.2
Piper umbellatum L. es ampliamente utilizado en la medicina tradicional para el tratamiento de
intoxicaciones, edemas, picaduras, filariasis, reumatismo, hemorroides, dismenorrea y dolores en
general. Las hojas tienen un sabor caracterstico y se utilizan como saborizante de ciertos platillos;
en algunas partes de Amrica Central, el jugo del follaje se unta sobre la piel para prevenir el
ataque de chinches. De otras regiones se reportan otros usos como repelente de insectos, tambin
tiene usos medicinales y sobre todo como antiinflamatorio.3
El objetivo de este trabajo es la determinacin de los diferentes compuestos qumicos que pueda
tener nuestra planta a estudiar la cual es la santamara (Piper umbellatum L.) a travs de un
estudio fitoqumico haciendo uso de diversos mtodos que sern explicados detalladamente en la
metodologa presente.
DESCRIPCIN BOTNICA DEL GNERO PIPER
1. Familia Piperaceae3
Las principales caractersticas de la familia Piperaceae son las de ser arbustos y trepadoras
leosas de hojas alternas, simples, a menudo con glndulas de aceites aromticos, en ocasiones
algo carnosas. Flores pequeas, bisexuales o unisexuales, dispuestas en espdices o espigas
opuestas a las hojas por lo general. Tienen 1-10 estambres y carecen de ptalos y spalos. Fruto
en baya carnosa indehiscente, con una sola semilla.
2. Descripcin botnica del gnero Piper 4
Son comnmente arbustos o rboles, aromticos, ms o menos leosos, a veces trepadores o subtrepadores con tallos elongados y usualmente con nudos engrosados, un solo prfilo lateral que
aparece usualmente en los nudos florgenos, frecuentemente con la forma de una cobertura
parecida a una tapa sobre el pice del vstago. Hojas alternas, pecioladas, simples, enteras o
lobuladas solo en la base, iguales en la base foliar o desiguales con un lado ms corto en el pecolo,
a veces peltada unidas al pecolo, variando en textura desde membranosas hasta gruesascoriceas, de superficie lisa, rugosa o vetricosa en el haz hasta alveolada en el envs, mostrando
a menudo, especialmente en el envs, puntos glandulares plidos u oscuros o conspicuamente
alados, ms o menos vaginados, en la base diminutos puntos translucidos. Pecolo con mrgenes
usualmente angostos o con trayecto hasta la base foliar.
3. Estudio fitoqumico de especies del gnero piper
Lignanos y Neolignanos. Los lignanos y neolignanos hacen parte de los metabolitos secundarios
representativos del gnero Piper. Se derivan de la ruta biosinttica del cido shikmico y
relacionados con la formacin de la lignina en las plantas. La diferencia entre lignanos y
neolignanos es que los primeros se constituyen por la unin de dos o ms unidades fenilpropnicas
a travs de los carbonos y de la cadena lateral, mientras que los neolignanos poseen estas
mismas unidades fenilpropnicas (C6-C3) provenientes de alil y/o propenilfenoles pero con una
unin distinta a y .En ambos casos es caracterstico que tanto los anillos aromticos como las
cadenas propnicas presenten funciones oxigenadas. Estas molculas se pueden encontrar en
cualquier parte de la planta desde las races o la corteza hasta las hojas, flores, frutos o semillas.
Son abundantes en las semillas de soya, aceitunas, algas secas, legumbres, cereales, verduras y
frutas. La importancia de este tipo de compuestos se debe a su accin sobre microorganismos,
plantas, animales y en el hombre en los aspectos ecolgico, farmacolgico, celular y molecular,
siendo de especial relevancia su actividad citotxica y antitumoral 5
Cromatografa de Capa Fina. Es una forma fcil, rpida y ampliamente utilizada para el anlisis
y aislamiento de compuestos. Se aplica la muestra sobre un soporte activado que recubre una
lmina de aluminio o plstica. La placa se eluye dentro de una cmara de elucin, que asciende a
lo largo de la placa por capilaridad, desplazando a los componentes de la mezcla a diferentes
velocidades lo que provoca su separacin, luego se seca completamente y se observan las manchas
separadas, con luz ultravioleta (UV) a diferentes longitudes de onda y tambin se emplean
reveladores especficos que reaccionan con los compuestos dando coloraciones caractersticas.
La relacin entre la distancia recorrida por un compuesto y por el disolvente desde el origen se
conoce como Rf el cual es un factor de cuantificacin.6
Compuestos fenlicos
La especie Piper peltatum L. o Pothomorphe peltata (L.) Miq. De esta especie se han aislado y
caracterizado un gran nmero de compuestos qumicos, como amidas, lignanos, neolignanos,
hidroquinonas, alcaloides, terpenos, compuestos oxigenados, y derivados del cido benzoico. La
funcin de los compuestos fenlicos aislados de plantas est asociada a su similitud estructural
con sustancias antioxidantes de origen sinttico. Las propiedades biolgicas y qumicas de las
plantas medicinales dependen de muchos factores, entre las cuales figuran las propiedades
edficas de la regin de cultivo, las condiciones del clima, fase vegetativa, entre otros, razn por
la cual es importante el estudio de la flora en diferentes sitios, pases y zonas geogrficas. 7
4. Taxonoma
santamaria ( Piper umbellatum L.) Reino: Plantae Familia: Piperaceae Divisin: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida Subclase: Magnollidae Orden: Piperales Especie: Piper umbellatum L.
Fuente: Conabio.gob 8
Descripcin Morfolgica
Es un arbusto de un metro de alto, con hojas anchas acorazonadas de 20 a 30 cm en la base abierta
y cordiforme. Las inflorescencias son como espigas carnosas y blandas, umbeladas al final de un
corto pednculo axilar con numerosas flores blanquecinas, estambres dos, estigmas tres, estilos
ausentes, recurvados. Frutos pequeos. Condicin Climtica Clima: clido y clido templado.
Temperatura (C): 12- 30. Precipitacin (mm): 1000 2000. Humedad atmosfrica (%): 80 95.
Hbitat Habita principalmente en bosques de tierras bajas y matorrales hmedos. En la Amazona
habita a una altitud de 1000 a 2000 msnm. Su rea de origen es del sur de Mxico a Sudamrica,
incluyendo las Antillas. Dentro de su distribucin secundaria se encuentra tambin en frica y
Asia y donde en las Islas Galpagos se considera invasiva.
Droga: Hojas Componentes qumicos: aceites esenciales, compuestos fenlicos, esteroides,
muclago, chavicina, pariparobina, jamborandina, piperatina, piperina.
Toxicidad: en dosis por encima de lo indicado puede causar nuseas, vmitos, calambres, diarrea,
aumento de temperatura, dolor de cabeza, temblores en las extremidades que puede progresar a
la parlisis, urticosas erupciones en la piel, aumento de la diuresis. Dosis mucho ms altas de lo
normal puede causar inflamacin y colecistica pielorenal, regiones de dolor, hepato-vesicular,
lumbar y de la vejiga, ematuria, la presencia de cristales de oxalato, urato, bilis y algunos restos
de clulas, sedimentos, y la resina en la orina 9,10
OBJETIVOS
1. Elaborar la extraccin de la especie santamara (Piper umbellatum L.) por el mtodo de
maceracin y digestin.
2. Identificar los metabolitos presentes en la especie santamara (Piper umbellatum L.)
3. Identificar y diferenciar los compuestos fennilcos presentes en la especie santamara
(Piper umbellatum L.)
MATERIALES Y METODOS 11
-
Droga recolectada
Estufa
Molino
Mortero y piln
Tamiz N 30
Papel kraft
Extracto fluido de droga
Hornilla elctrica
Materiales de vidrio
Bao Mara
Reactivos de precipitacin
Reactivos de identificacin
Papel indicador
Capilares
Placas cromatogrficas
Cuba cromatogrfica
Soluciones reveladoras
1. RECOLECCIN DE MUESTRAS
La muestra fue entregada en el laboratorio al grupo de trabajo.
Solo se adquiri las hojas y ramas secas de la panta
2. CONSERVACIN DE LA MUESTRA
MUESTRA
RECOLECTADA
Identificacin
Seleccin y
lavado
Secado
MUESTRA
PROCESADA
ALACENAMI
ENTO
Reduccin del
tamao de
partculas
Tamizado
FISICOQUMICOS
CUANTITATIVOS
GENERALES
FISICOQUMICOS
BOTNICOS
4.
MTODOS DE EXTRACCIN
MTODOS
Maceracin
PROCEDIMIENTO
Pesar 10 g de M.P. depositar en envase
con tapa y macerar con 90 ml de alcohol,
Extracto
+ gotas de
HCl 1 %
Alcaloides
- Prueba de la espuma
- Shinoda
Alcaloides
Flavonoides
REACCIN PROCEDIMIENTO
V gotas de extracto
Dragendorff acidificado + II gotas
de reactivo.
V gotas de extracto
Mayer
acidificado + II gotas
de reactivo.
Saponinas
Dragendorff
Mayer
Saponinas
Prueba de
espuma
Formacin de
capa de espuma
de 1cm
persistente por
10min.
Flavonoides
Virutas de
magnesio + gotas
de HCl
+ agua
destilada
Shinoda
0.5ml de extracto +
virutas de Mg + gotas
HCl cc.
Coloracin
rosada.
RESULTADOS
Precipitado
naranja
Precipitado
blanco
Monosacridos
Oligosacridos
Miel de abeja (reaccin de Selivanoff)
ENSAYO
MOLISH
(alfa naftol 2% +
H2SO4 cc)
0.5 ml de MP + 0.5
Coloracin verde azulada
ANTRONA
ml sol. Reactivo
(antrona 2% +
H2SO4 cc)
REACCIONES DE AZCARES REDUCTORES
0.5 ml de MP + 1 ml Precipitado rojo ladrillo
R. FEHLING
sol. A + 1 ml sol. B +
(CuSO4 + tartrato
calentar
Na y K + NaOH)
0.5 ml de MP + 1 ml Precipitado rojo ladrillo
R. BENEDICT
(citrato Na+ CuSO4 sol. reactivo +
calentar
+ NaCO3)
0.5 ml de MP + 1 ml Formacin de espejo de
R. TOLLENS
plata
(AgNO3 + NH4OH) sol. reactivo +
calentar
REACCIONES DE DIFERENCIACIN DE ALDOSAS Y CETOSAS
R. SELIVANOFF
(resorcina + HCl cc)
0.5 ml de MP + 1 ml
sol. reactivo +
calentar
0.5 ml de MP + 1 ml
R.
FENILHIDRAZINA sol. reactivo +
calentar
Formacin de ozasonas,
cristales de color amarillo
caractersticos
PROCEDIMIENTO
0.5 ml de MP + V gotas
de H2SO4
0.5 ml de MP + V gotas
de FeCl3
0.5 ml de MP + V gotas
de Fehling A y B + calor
0.5 ml de MP + V gotas
de NH4OH cc.
0.5 ml de MP + V gotas
de Vainilln clorhdrico
0.5 ml de MP + V gotas
de gelatina
RESULTADO
Coloracin roja
Coloracin
azul/verde
pp. rojo ladrillo
Coloracin pardo
rojiza
Coloracin azul
pp. blanco
PROCEDIMIENTO
0.5 ml de MP + gotas de
FeCl3
0.5 ml de MP + gotas de
K2Cr2O7 5%
0.5 ml de MP + gotas de
Pb(CH3COO)2
0.5 ml de MP + gotas de
Agua de cal
0.5 ml de MP + gotas de
KCN 5%
0.5 ml de MP + gotas de
Hipoclorito de sodio
0.5 ml de MP + gotas de
K4[Fe(CN)6] + NH4OH
0.5 ml de MP + gotas de
Gelatina
0.5 ml de MP + gotas de
KMnO4
0.5 ml de MP + gotas de
Alcaloide
RESULTADO
Coloracin
azul/verde
pp. pardo
pp. blanco
lechoso
pp. amarillo
plido
pp. amarillo
Coloracin
naranja
Coloracin rojiza
pp. blanco
pp. pardo
pp. lechoso
blanco
RESULTADOS
Molienda de Santa
mara
Tamizado de muestra
Extracto final
Digestin
Filtracin
Molish
TRITERPENOIDES Y
ESTEROIDES
Lieberman Burchard
COMPUESTOS
FENLICOS
GRUPOS AMINO
Y AMINOCIDOS
LIBRES
Antrona
FeCl3
Ninhidrina
GLUCSIDOS
FLAVONOIDES
ANTRONAS Y
ANTRANONAS
Saponinas
Borntrager
Rosenhein
METABOLITOS
CARBOHIDRATOS
COMPUESTOS
FENLICOS
REACCIN
Molish
Antrona
Cloruro frrico
Ninhidrina
GRUPOS AMINO Y
AMINOCIDOS
LIBRES
TRITERPENOIDES
Y ESTEROIDES
SAPONINAS
Lieberman
Burchard
Glucsidos
Shinoda
FLAVONOIDES
Borntrger
ANTRONAS Y
ANTRANONAS
ALCALOIDES
ANTOCIANINAS Y
CATEQUINAS
Dragendorff
Mayer
Rosenheim
Vainillina
GLUCSIDOS
TANINOS
Gelatina
RESPUESTA ESPERADA
Anillo violeta en la parte superior;
debajo un rosa ligero
Formacin de un derivado de
furano de color verde
Formacin de una coloracin roja,
azul, verde, o prpura
Aminoacidos y aminas primarias
dan un color violeta caracteristico.
La prolina da coloracin amarilla.
Aminas secundarias da una sal de
iminio, color amarillo-anaranjado.
Color Verde o verde azul debido a
la reaccin de grupo hidroxilo
Formacin de espuma
La reduccin del in flavilio da
color rosa a rojo escarlata. Todos
los flavonoides excepto las
chalconas, auronas e isoflavonas
dan positiva la reaccin.
Dependiendo de la estructura y los
sustituyentes de la quinona, el color
varia de naranja rojizo a morado
violeta. La reaccin se da slo con
las formas libres de antraquinona.
Precipitado color naranja -marrn
Precipitado color blanco crema
Leucoantocianidinas: rojo a
marrn. Antocianidinas: anaranjado
o rojo azuloso
Presencia de vainillina por
precipitado blanco a amarillo
plido. Como solucin de Cl3Fe
produce color azul.
Gelatina y precipitado
RESULTADOS DE IDENTIFICACIN
ENSAYOS PARA CARBOHIDRATOS
Positivo:
Formacin de un
Molish
anillo prpura
Antrona
Positivo:
Coloracin verdeazulada
RESULTADOS
+
+
+++
+
++
+
+
+++
++
+++
++
+++
FeCl3
Positivo:
Coloracin azulverde
Rx. Fehling
Positivo:
Precipitado rojo
ladrillo
NH4OH cc.
Positivo:
Coloracin pardo
rojiza
Negativo
Vainilln
clorhdrico
Negativo
Taninos
Positivo:
Precipitado blanco
Mayer
FeCl3
Positivo:
Precipitado pardo
K2Cr2O7
5%
Pb(CH3COO
)2
Positivo:
Precipitado blanco
lechoso
Negativo
Agua de cal
Negativo
KCN 5%
Hipoclorito
de sodio
Positivo:
Coloracin naranja
Negativo
K4[Fe(CN)6
] + NH4OH
Negativo
Gelatina
Positivo:
Precipitado pardo
KMnO4
Positivo:
Precipitado lechoso
blanco
Alcaloide
RESULTADOS DE CROMATOGRAFA
CROMATOGRAFA DE COMPUESTOS FENLICOS
St. = Esperidina pura
MP = extracto de santa mara
Fase mvil = acetato de etilo: metanol: agua (100:13.5:10)
Revelador = KOH reactivo luz UV
Medida del solvente = 4.5cm
Medida del St.= 1.6cm
Medida de la MP = 1.4cm
1.6
1.4
1.6
4.8
4.6
DISCUSIN
La especie vegetal santa mara Piper umbellatum L. muestran diferentes actividades
farmacolgicas, incluyendo, antibacteriano, anti-inflamatorio, analgsico, antioxidante,
citotxico, antimalrico, leishmania y tripanosomas.12
Para realizar la identificacin de metabolitos secundarios en la especie santa mara Piper
umbellatum L. se procedi a la recoleccin, conservacin, preparacin y extraccin.
Las hojas de la especie santa mara Piper umbellatum L. se obtuvieron semisecas, por lo que
se procedi a secar en la estufa de lecho esttico esttica a 40 C por una semana; el secado
favorece la conservacin de las drogas vegetales. La reduccin de la especie seca se realiz con
la finalidad de mejorar el proceso extractivo, debido a que los fragmentos ms pequeos (droga
pulverizada) favorecen la penetracin del solvente de extraccin. Luego de la pulverizacin se
tamizo para obtener partculas homogneas y evitar cualquier componente externo de la especie.
La extraccin de la especie santa mara Piper umbellatum L. se realiz por el mtodo de
maceracin; la maceracin permite una extraccin ms eficaz ya que el solvente de extraccin se
encuentra distribuido entre todas las partculas de la droga.
Con la extraccin de la droga se realiz la marcha fotoqumica preliminar y anlisis cualitativo
por reacciones qumicas coloreadas para la identificacin de metabolitos presenta en la especie
santa mara Piper umbellatum L.
La especie Piper umbellatum L. presento reacciones positivas para la identificacin de
carbohidratos, compuestos fenlicos, grupos amino y aminocidos libres, triterpenoides y
esteroides, saponinas, alcaloides, antocianinas y catequinas, glucsidos y taninos.
Segn la bibliografa (lvarez, 2010) estudios fitoqumicos de la especie Piper umbellatum L.
han demostrado la presencia de terpenos (que se encuentra principalmente en el aceite esencial),
alcaloides, flavonoides, esteroles y otras clases de metabolitos secundarios. La presencia de un
catecol, 4-nerolidilcatecol, que se considera la principal bioactividad del compuesto.12 Otros
estudio realizado a la especie Piper umbellatum L. indica la presencia de alcaloides, flavonoides,
antocianinas, taninos, compuestos voltiles (aceites) y la ausencia de saponinas.13
Comprobndose la presencia de compuestos fenlicos como flavonoides, taninos, antocianinas y
carbohidratos como alcaloides. Tales compuestos fenlicos le dan la caracterstica farmacolgica
de antioxidante, antibacteriana, anestsica entre otras.
La especie santa mara Piper umbellatum L. present reacciones positivas con mayor intensidad
en la identificacin de compuestos fenlicos. Por ello se realiz la identificacin cromatografica
de estos metabolitos. La cromatografa de compuestos fenlicos simples se llev a cabo con la
comparacin de Rf de la muestra de Piper umbellatum L. (Rf = 0.31) y un estndar (Rf = 0.36),
evidenciando la presencia de compuestos fenlicos al tener los Rf un valor cercano. En la
cromatografa de hetersidos flavonoides se realiz la comparacin de Piper umbellatum L. y
cuatro estndares: Quercetina (Rf = 0.96), Hesperidina (Rf = 0.33) y Rutina (Rf = 0.61); en la
muestra de Piper umbellatum L. se observ dos Rf (Rf = 0.96 - Rf = 0.62) indicndose la
presencia de Quercetina y Rutina en la especie santa mara Piper umbellatum L.
CONCLUSIONES
1. La maceracin es un mtodos de extraccin que permiten la separacin de los
constituyentes qumicos de la especie santamara (Piper umbellatum L.); el mtodo
de extraccin por maceracin es mucho ms eficaz que el de digestin debido a que
cuanto mayor es la relacin entre el lquido extractivo y la droga, ms favorable ser
el rendimiento.
2. Se identificaron los metabolitos presentes en la especie santamara (Piper umbellatum
L.) a travs reacciones qumicas. Se identificaron compuestos fenlicos simples,
taninos, triterpenoides y esteroides, glucsidos, carbohidratos, antocianinas, grupos
amino y aminocidos libres.
3. La identificacin de compuestos fenlicos se desarroll mediante ensayos qumicos
generales, especficos y cromatogrficos para la diferenciacin de estos.
REFERENCIA BIBLIOGRFICAS
(1) Tchoumbougnang F., Jazet Dongmo, P., Sameza, L., Fombotioh N., Wouatsa, A.,
Amvam, P., Menut, C. Comparative essential oils composition and insecticidal effect
of different tissues of Piper capense L., Piper guineense Schum. et Thonn., Piper
nigrum L. and Piper umbellatum L. grown in Cameroon. African Journal of
Biotechnology Vol. 8 (3), pp. 424-431, 4 February, 2009
(2) Carles M.F.B. Roersch. Piper umbellatum L.: A comparative cross-cultural analysis
of its medicinal uses and an ethnopharmacological evaluation. Journal of
Ethnopharmacology 131 (2010) 522537
(3) Turibio, T., Ngoupayo, J., Liu, J., Mitaine-Offer, A., Khan A., Nahar, S., Shaiq, M.,
Tchaleu B., Tsamo , E., Lacaille-Dubois, A., Bang Luu. Bioactive aristolactams from
Piper umbellatum L. Phytochemistry 69 (2008) 17261731
(4) Solis, P. N.; Olmedo, D.; Nakamura, N.; Caldern, A. I.; Hattori, M.; Gupta, P. M.
Pharm. Biol. 2005, 43, 378- 381.
(5) Puertas M, Gmez L. In vitro antioxidant capacity of fractions from Piper
peltatum L. leaves(Capacidad antioxidante in vitro de fracciones de hojas de Piper
peltatum L.). 2009. Rev Cubana Plant Med v.14 (2) Ciudad de la Habana.. ISSN 10284796
(6) Mostacero, Castillo, Meja, Gamarra, Charcape y Ramrez, Plantas Medicinales Del
Per 1ed. Trujillo: Editorial Asamblea Nacional de Rectores; 2011.
(7) De la Torre L., Alarcn D, Lars P, Salazar J.Enciclopedia de las plantas tiles del
Ecuador. Usos medicinales d elas plantas. Herbario QCA &HerbarioAAU. Quito:
Aarthus.
2008;
1:105114.
Disponible
en:
http://biologia.puce.edu.ec/natura.php?c=350
(8) Plantamed. Piper umbellatum L. CAPEBA. [cotado el 19 mmayo 2016] Disponible
en: http://www.plantamed.com.br/plantaservas/esp ecies/Piper_umbellatum.htm
(9) CONABIO. Piper umbellatum L. [Internet]. [Revisado 03 Mayo 2016]. Disponible en:
http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/
piperaceae/piperumbellatum/fichas/pagina1.ht
(10)Virinder S; Subhash J; Kirpal S; Rajni, J et al. Phytochemistry. Studies in Natural
Products Chemistry: Bioactive Natural Products. 2000. 24(5):215-267.
(11)Gorriti, Crdova, Jurado, Ortega y Retuerto, Manual de laboratorio de
Farmacognosia I, Lima Per: 2016