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CVE 221

Histoembriologa

Gua de Laboratorio Histoembriologa

Ao 2011
Autores: Makarena Morales A.
Nora Araya S.
Alejandra Gonzlez G.

Temario
-Introduccin: Microscopa bsica, generalidades de los tejidos.
-Conceptos claves.
-Actividad preliminar.

Histoembriologa
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Objetivos:
- Reforzar los conceptos claves asociados a la histoembriologa
- Reforzar las materias pasadas en ctedra con actividades complementarias, utilizando
muestras de histologa y embriologa.

Instrucciones:
- La gua de laboratorio cuentan con una introduccin general al tema.
- Las actividades de laboratorio son complementarias a los contenidos de ctedra.
- En el laboratorio trabaja cada alumno de forma individual, para ello debe utilizar su gua
de laboratorio.
- La actividad prctica, consta de una introduccin al tema a tratar por parte del profesor a
cargo e instrucciones generales y especificas en base a las necesidades de cada laboratorio,
utilizando placas histolgicas.

Cada alumno debe cumplir las normas generales de laboratorio que se detallan a
continuacin:
Las actividades de laboratorio son obligatorias.
La asistencia al laboratorio ser de 100%, el incumplimiento ser causal de reprobacin.
Se justificar solo una inasistencia en situaciones especiales (El plazo mximo de entrega
al docente de laboratorio ser de 5 das hbiles posterior a la falta).
Cada alumno debe asistir a la seccin correspondiente, no se aceptarn los cambios de
grupo
El uso del delantal blanco es obligatorio.

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No se permitirn retrasos, de existir casos justificados se aceptar como mximo 10


minutos, transcurrido este tiempo el alumno se considerar ausente.
Ser de responsabilidad de cada alumno el cuidado de las muestras.
La ruptura de los preparados ser sancionado con la nota (1 punto de su nota de control).
Queda estrictamente prohibido el uso de celulares y de equipos musicales durante el
desarrollo del paso prctico.

Sistema de Evaluacin:

El laboratorio tiene una ponderacin del 30% del curso, los controles corresponden a un
15%, el otro 15% al examen de laboratorio.
Se realizaran 6 controles de laboratorio.
El primero corresponde a una disertacin del tema a tratar en el laboratorio (se
realizar de 2 personas donde explicarn una de las muestras histolgicas de la actividad
prctica que corresponda, donde se explique en un power point u otro material visual las
estructuras ms importantes, fisiologa del rgano, origen embrionario y ubicacin
anatmica, tendr una duracin mxima de 5 minutos).
5 controles cortos en base a 2 muestras (duracin de 10 minutos), de los cuales se
eliminaran 2. El corresponden al
El control 1, corresponde al promedio de los tres controles cortos
La nota de disertacin corresponde al control 2.
El examen final, contempla identificacin de muestras y estructuras ms iportantes
y preguntas de desarrollo corto, esta nota se incluye en el control 3 y 4.
No se realizaran controles recuperativos. La falta a una evaluacin, ser calificada con
nota mnima (1,0).

tem
Laboratorio
Ctedra 1
Ctedra 2
Ctedra 3
Examen
Total

Ponderacin
30%
15%
15%
15%
25%
100%

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INTRODUCCIN
La histologa es la ciencia que estudia los tejidos bsicos que constituyen el cuerpo, el cual
esta formado por cuatro tejidos bsicos que son: tejido epitelial, tejidos con matriz
extracelular, tejido muscular y tejido nervioso. Estos tejidos se caracterizan por tener
su origen en las hojas primitivas del embrin: ectodermo, mesodermo y endodermo. Los
tejidos difieren unos de otros en tamao y forma de sus clulas, como tambin en el tipo y
material existente entre ellas, adems de las funciones especficas que realizan.
La embriologa es la ciencia que estudia el proceso de desarrollo de los organismos, desde la
fecundacin hasta el nacimiento. Sin duda que es un proceso fisiolgico fascinante, puesto que
los rganos no solo son complejos, sino que muchos de ellos comienzan a funcionar aun cuando
no han cumplido su desarrollo.
Ambas disciplinas son la base y complemento de otras asignaturas de la malla curricular de un
profesional medico veterinario, como fisiologa animal, fisiopatologa, patologa especial,
patologa clnica entre muchas otras.

Conceptos claves laboratorio 1:


1.-Poder de resolucin: corresponde a la capacidad de un microscopio para discriminar
detalles muy finos o distinguir puntos muy cercanos entre s.
2.-Portaobjeto: lmina rectangular de vidrio en que se colocan los objetos que se han de
examinar microscpicamente.
3.-Cubreobjeto: lmina delgada de vidrio, con que se cubren las preparaciones
microscpicas para su proteccin. Existen diferentes medidas dependiendo del tamao de la
muestra a cubrir.

Diseo experimental y actividades


Materiales
1. Un microscopio por alumno
2. Muestras histolgicas para cada alumno
Objetivo
1. Reforzar los conceptos de microscopa ptica bsica y la funcin de cada uno de los
elementos que lo componen.
2. Reforzar el manejo del microscopio.
3. Analizar las caractersticas generales de los preparados.

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I. Manejo y uso del microscopio.


Observe la lmina del microscopio ptico que se encuentra en su gua de trabajo.
Identifique y reconozca los componentes del microscopio en su instrumento de trabajo
ubicado en el mesn.
Proceda a manipular su microscopio siguiendo las instrucciones de la gua. Es fundamental
que la manipulacin de este delicado instrumento se realice con el mximo cuidado. Se
recomienda a los alumnos ajustarse estrictamente a las indicaciones. Sintese
cmodamente frente al microscopio.

Mientras observa, una mano maneja el tornillo macromtrico y la otra los tornillos del

carro. Observe con ambos ojos abiertos, para ello ajuste la distancia entre los oculares.

El revlver se mueve siempre de menor a mayor objetivo en sentido contrario a los

punteros del reloj.

Coloque el condensador en su posicin ms baja, a fondo en el soporte.

Deje el diafragma completamente abierto. Encienda la lmpara.


Coloque el portaobjeto con la preparacin a observar centrada en la platina; corrobore

que el cubreobjeto est hacia arriba. Fije la preparacin con las pinzas.

Comience enfocando siempre con el menor aumento correspondiente al objetivo lupa

(4x).

Gire el tornillo macromtrico y suba la platina hasta que llegue al tope y el objetivo quede

ubicado a unos centmetros de la platina.

Observe por el ocular y ver el campo visual uniforme.

Observe por el ocular y gire el tornillo macromtrico, alejando lentamente el objetivo de la

preparacin hasta obtener una imagen ms o menos ntida.

Afine el enfoque y logre mayor nitidez con el tornillo micromtrico.

Pase al aumento siguiente girando el revlver hasta escuchar un clic que indica que el

objetivo se encuentra centrado. Para enfocar ahora, solo debe utilizar el tornillo
micromtrico.

Trabaje solo hasta el objetivo mayor (40x). El uso del objetivo de inmersin (100x) ser

indicado solamente por su profesor puesto que requiere la aplicacin de aceite de


inmersin.

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La tcnica histolgica comprende la preparacin de los tejidos para su estudio


microscpico, para ellos se han desarrollado diversos procesos con el fin de poder
estudiarlos de manera tal que se asemejen a su estado natural en vivo.
Las etapas incluidas son: fijacin, deshidratacin, aclaracin, inclusin, corte, montaje y
tincin.
1. Fijacin: Es el proceso que permite la preservacin de los tejidos, estos al extraerlos del
organismo y privarlos de irrigacin comienza a alterarse y destruirse. Este proceso es
conocido como autlisis y ocurre en todo los tejidos del organismo posterior a la muerte, la
velocidad con que ocurre es proporcional a la actividad metablica propia de cada tejido.
Los agente fijadores ms usados en microcopia de luz son: la formalina diluida al 10% o el
alcohol absoluto.
2. Deshidratacin: Gran parte del tejido estn constituidos por agua, que debe ser
eliminada para ello se utilizan baos graduales y ascendentes de alcohol.
3. Aclaramiento: Consiste en reemplazar el alcohol por xilol o benzol, solvente orgnico
que es miscible con la parafina fundida (paso siguiente). El proceso se conoce con este
nombre debido a que el tejido se torna transparente, adems le proporciona cierta rigidez.
4. Inclusin: Esta etapa consiste en la impregnacin profunda del tejido con parafina
liquida, la que infiltra todo los espacios celulares dando una consistencia dura al tejido,
posteriormente el tejido se lleva en un receptculo pequeo, se recubre con parafina
fundida y se deja endurecer hasta formar un bloque de parafina.
5. Corte o Seccin del tejido: Los bloques de parafina (con el tejido incluido en su
interior) sern cortados mediante un micrtomo, instrumento que permite realizar cortes
finos 5 a 6 micrones de espesor, grosor adecuado para visualizar estructuras y
componentes mediante un microscopio luz.
6. Montaje: Consiste en poner los finos cortes de tejido sobre un portaobjeto de vidrio al
que previamente se ha adicionado un adhesivo.
7. Tincin: Consiste en teir los tejidos con el fin de poder reconocer y estudiar sus
constituyentes, la tincin corriente es la tcnica ms utilizada para microscopia ptica.
sta utiliza dos colorantes hidrosolubles (Hematoxilina y Eosina), la Hematoxilina es
colorante bsico de color morado azuloso, con gran afinidad a los constituyentes cidos
presentes principalmente en el ncleo de la clula, cido desoxirribonucleico (DNA) y cido
ribonucleico (RNA), permitiendo visualizarlos al microscopio de color morado azuloso, en
cambio la eosina es un colorante cido que tie de color rosado las regiones bsicas del
citoplasma y las fibras colgenas.
Segn su afinidad por los colorantes los tejidos son clasificados como basfilos o
basoflicos, aquellos que se tien con hematoxilina y acidfilos aquellos que se tien con
eosina.

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Epitelios de Revestimiento y Glandular

E. de Rev. Pluriestratificado

E. de Rev. Monoestratificado Cilndrico

E. de Rev. Monoestratificado Plano

E. de Rev. Pseudoestratificado

E. Glandular Endocrino y Exocrino (mucoso y seroso)

a.-Observe el esquema y reconozca:


- Las clulas epiteliales.
- Los cilios.
- La membrana basal.
- Las clulas caliciformes.

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b.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras histolgicas observadas en el
esquema:

a.-Observe el esquema y reconozca:


- Epitelio de revestimiento.
- La membrana basal.
- Estratos

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b.- Observe el preparado: Reconozca y dibuje las principales estructuras histolgicas sealadas en el
esquema.

a.- Observe el preparado y reconozca:


- Las clulas que conforman el epitelio glandular
- La membrana basal.

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b.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras histolgicas observadas en la
muestra.

a.- Observe el preparado y reconozca:


- Las clulas que conforman el epitelio glandular
- La membrana basal.
- Excretmero y adenmero

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b.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras histolgicas observadas en la
muestra.

TEJIDOS CONECTIVOS PROPIAMENTE DICHOS


Estos son: mesenquimatico, aereolar laxo, denso irregular, denso regular y tejido adiposo.

Cuadro 1. Diferencias entre algunos tejidos conectivos.


Celularidad

Cantidad de
fibras *

Grosor de las fibras

+++

TC Areolar laxo **

++++

++

TC Denso irregular
**

++

+++

++++

++++

++++

TC Mesenquimal

TC Denso regular

* Observable
** Existen tipos de tejido conectivo intermedio que no encajan exactamente en
la descripcin de estos dos tejidos conectivos.

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Tejido conect. Laxo

T. conect. Denso regular (tendn)

T. Cartilaginoso

T. Oseo

T. reticular (org. linfoide)

Cel. Plasmticas

T. conect. Denso irregular

Fibras elsticas (arteria)

Cel. Cebadas

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Cel. Mesenquimticas

T. adiposo

Cel. Fibroblastos

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Ncleos de fibroblastos (rodeados por fibras de colgeno)

Tejido oseo esponjoso

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Tejido oseo compacto

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Cartlago Hialino

Cartlago Elastico

Fibro cartlago

a.-Observe el esquema y reconozca:


- Tejido conectivo
- Papilas del corion
- Membrana basal

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b.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras histolgicas observadas en el
esquema

a.-Observe el esquema y reconozca:


- Tejido conectivo.
- Recuerde el epitelio de revestimiento de la traquea.
- La membrana basal.

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b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas en el esquema:

a.-Observe el esquema y reconozca:


- Condroblastos
- Condrocitos
- Zonas de osificacin
- Tipos de osificacin que se presentan en un hueso largo.

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b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas en el esquema:

a.-Observe el esquema y reconozca:


- Clulas mesenquimticas
- Clulas seas
- Vasos sanguneos

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b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas en el esquema:

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SANGRE

Frotis sanguneos en mamfero

Frotis de caiman (sangre perifrica mostrando


algunos leucocitos. En el centro se observa un eosinfilo
(flecha vaca))

L. Granulocitos

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L. Agranulocitos

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TIPOS DE FIBRAS MUSCULARES

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Fibras musculares esquelticas (corte transversal y longitudinal)

Fibras musculares liso (corte longitudinal)

Fibras musculares cardiacas (estriaciones transversales y discos interescalares)

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a.-Observe el esquema y reconozca:


- La morfologa de las fibras musculares lisa en corte transversal y longitudinal.
- Sarcolema
- Sarcoplasma
- Ncleo

b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas en el esquema:

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a.-Observe el esquema y reconozca:


- La morfologa de las fibras musculares cardiacas en corte transversal y longitudinal.
- Sarcolema
- Sarcoplasma
- Disco intercalares

b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas en el esquema:

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a.-Observe el esquema y reconozca:


- Las fibras musculares en corte transversal.
- Fibras musculares en corte longitudinal.
- Sarcolema
- Sarcoplasma
- Estriaciones trasversales.

b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas en el esquema:

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RGANOS REPRODUCTORES EN HEMBRAS Y MACHOS

1.- Cordn espermtico


2.- Epiddimo
3.- Parnquima testicular

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a.-Observe el esquema y reconozca los diferentes estados de desarrollo folicular


- Corteza ovrica.
- Mdula.
- Folculos en distintos estados.
- Cuerpo lteo

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b.- Observe el preparado: Reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
sealadas en el esquema.

a.- Observe el esquema y reconozca:


- Tbulos seminferos.
- Clulas de la lnea germinativa.
- Clulas de Sertoli
- Clulas de Leydig.
- Tnica albugnea.

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b.- Observe el preparado: Reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
sealadas en el esquema.

a.- Observe el esquema comenzando con el menor aumento, reconozca estructuras que forman el
tero.
- Endometrio
- Miometrio
- Perimetrio
- Glndulas endometriales
- Vasos sanguneos

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b.- Observe el preparado: Reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
sealadas en el esquema.

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TIPOS DE NEURONAS

Cerebelo

1.2.3.4.-

Capa molecular
Capa de celula de Purkinje
Capa granulosa
Sustancia blanca

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Medula Espinal

1.- sustancia blanca


2.- Sustancia gris

1.- Neuronas motoras


2.- Microglias
3.- Astroglias
4.- Oligodendrocitos
5.- Vaso sanguineo

Nervio

1.- Epineuro
2.- Perineuro
3.- Fascculo de fibras nerviosas

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1.- Fibra mielnica


2.- Mielina
3.- Axn

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a.-Observe el esquema de corteza cerebral y reconozca:


- Neuronas
- Neuroglias
- Prolongaciones neuronales

b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas.

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a.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas.
- Neuronas
- Neuroglias
- Prolongaciones neuronales

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SISTEMA NERVIOSO CENTRAL

Fig. 1a. (Estadio 1).Vista dorsal y Fig. 1b. Vista ventral de una gstrula tarda de 13 das de gestacin. Placa neural
(P); surco neural (flecha larga), somito (cabeza de flecha) y esbozo del amnios (flechas cortas).

Fig. 2a. (Estadio 2) Vista dorsal, Fig. 2b. Vista ventral y Fig. 2c. Vista lateral de un embrin somtico de 15 das de
gestacin. Proceso frontonasal (f); asa cardiaca (C); neuroporos anterior y posterior (flechas); amnios (cabezas de
flechas).

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Fig. 3a. (Estadio 3). Vista ventral y Fig. 3b. Vista lateral
de un embrin somtico de 16 das de gestacin. Proceso
frontonasal (f); amnios en el punto de cierre (cabeza de flecha).

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a.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras observadas en la muestra.

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a.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras observadas en la muestra.

Embrin de 24 horas

Embrin de 48 horas

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SISTEMA RESPIRATORIO

Bronquio

Bronquiolo

Alveolo

a.-Observe el esquema de la trquea y reconozca:


- Mucosa.
- Sub-mucosa.
- Adventicia.

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b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas.

a.-Observe el esquema de pulmn y reconozca:


- Parnquima
- Estroma
- Bronquios, bronquiolos
- Alveolos, sacos alveolares

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b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas.

SISTEMA CARDIOVASCULAR

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Los arcos branquiales (o


farngeos) estn localizados
alrededor de vasos sanguneos
que se originan en el corazn en
desarrollo (en rojo).

Si se secciona la prominencia frontonasal por la linea


demarcada se puede observar la relacin entre el corazn (en
rojo), los arcos articos (en lila) con los arcos branquiales (en
verde), los cuales rodean la farnge (en azul) y contienen los
vasos conocidos como arcos articos.

Izquierda: Arteria pequea. Derecha: Vnula.


Los dos vasos tienen aproximadamente el
mismo calibre pero diferente grosor de su pared.

Izquierda: Vnula; Derecha: Arteria.

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a= linftico, b= vnula; c= arteriola.

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Linfonodo

1.2.3.4.5.6.-

zona cortical
z. medular
ndulo linftico
centro germinativo
cordones linfticos
seno medular

1.- cordn linftico


2.- seno medular

Timo - Lbulo Tmico

1.2.3.4.-

zona cortical
z. medular
corpsculo de Hassall
Tabique de tej. conectivo

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1 y 2 Corpsculos de Hassal en Zona Medular

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Bazo

1.2.3.4.5.6.7.-

Pulpa roja esplnica


Pulpa blanca esplnica
Sinusoides esplnicos
Cordones de Bilroth
Arteria central
Ndulo del folculo Linftico
Centro germinativo

1.- Arteria central


2.- Centro germinativo de Flemming
3.- Ndulo del folculo Linftico

1.- Cordones de Bilroth


2.- Sinusoides esplnicos

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a.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras observadas en la muestra.

Embrin de 24 horas

Embrin de 48 horas

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a.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras observadas en la muestra.

a.-Observe el esquema de arteria y vena:


- Reconozca:
- Tnica intima
- Tnica media
- Tnica adventicia

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b.- Observe el preparado, reconozca y dibuje las principales estructuras observadas en las muestra.

a.-Observe el esquema y reconozca:


- Capsula ydula
- Linfocitos
- Linfoblastos
- Linfondulos
.

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b.- Observe el preparado, reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras histolgicas
observadas

SISTEMA DIGESTIVO

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Las flechas sealan el mesodermo esplacnico (en rojo). El intestino, revestido


internamente por el endodermo (en amarillo).

Regin fndica del estmago de un perro.

Ploro de un gato.

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Las clulas prpura corresponden a las


clulas de chief (secretan pepsinogeno). Las
clulas parietales son las grandes y rosadas, las
cuales secretan acido clorhdrico.

Omaso de un bovino.

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Rumen (papilas ruminales).

Retculo. Las flechas indican las fibras musculares.

Intestino delgado de rata, a la izquierda el pncreas.

Vellosidades intestinales (microscopa electrnica).

3
4

5
1.2.3.4.5.-

Vena
Conducto
Arteriola
Vena central
Tejido Conectivo

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Hepatocitos y sinusoides hepticos. La flecha seala


una vena central.

La flecha seala los Canalculos biliares.

a.- Observe la muestra fetal reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras observadas:

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a.-Observe el esquema de estomago poligstrico reconozca las siguientes estructuras:


- La capa mucosa.
- La capa submucosa.
- La capa muscular.
- La capa serosa.

b.- Observe el preparado de estmago monogstricos y poligstrico reconozca las principales


estructuras.

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a.-Observe el esquema de Hgado y reconozca las siguientes estructuras:


- Lobulillo heptico
- Triada portal
- Ramas de la arteria heptica
- Ramas de la vena porta
- Ramas del conducto biliar

b.- Observe el preparado y reconozca las principales estructuras.

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a.-Observe el esquema de intestino delgado reconozca las siguientes estructuras:


- La capa mucosa.
- La capa submucosa.
- La capa muscular.
- La capa serosa.

b.- Observe el preparado de intestino delgado y grueso, reconozca las principales estructuras
observadas

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SISTEMA URINARIO

En su mayora, los componentes del aparato urogenital se derivan del mesodermo intermedio.

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El borde en cepillo de los tbulos proximales tiene afinidad


por los reactivos usados en la coloracin de PAS (flechas).

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tincin de plata resalta las basales de los tbulos y


nos permite delinear muy bien los contornos. El
prominente citoplasma eosinoflico de los tbulos
proximales contrasta con el citoplasma ms claro y
menos abundante de los tbulos distales (asteriscos)

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a.- Observe la muestra fetal reconozca, dibuje y nombre las principales estructuras observadas:

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a.-Observe el esquema de rin, reconozca las siguientes estructuras:


- Cpsula, corteza, mdula
- Tbulo contorneado proximal y distal
- Asa de Henle

b.- Observe el preparado de rin, reconozca las principales estructuras observadas

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a.-Observe el esquema de vejiga urinaria, reconozca las siguientes estructuras:


- Epitelio de revestimiento
- Tejido muscular

b.- Observe el preparado de vejiga, reconozca las principales estructuras observadas

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BIBLIOGRAFA
- FAWCETT. W.; 1987 Tratado de Histologa. Editorial Interamericana McGraw Hill Madrid. Espaa 11 edicin.
- CORMACK, D.; 2001. Histologa de Ham. Editorial Harla. 9 edicin. Mxico.
Mxico.
- GATNER, L. P.; HIATT, J. L. 2002. Texto y Atlas de Histologa. Editorial McGrawHill Interamericana. 2 Edicin. Mxico.
- MENA, L. M. Compendio de Embriologa.
- MOORE, L. K.; PERSAUD, T. V. N. 1995. Embriologa Bsica. Editorial. Nueva editorial
Panamericana. 4 edicin. Atlanta. Mxico.

BIBLIOGRAFIA WEB

http://www.ehd.org/resources_bpd_illustrated.php?language=84&page=6
JUAN NGEL P. R.; y col. Atlas Histolgico interactivo, UNIVERSIDAD DE JAN
DPTO. DE BIOLOGA EXPERIMENTAL, REA DE BIOLOGA CELULAR.
http://virtual.ujaen.es/atlas/

http://www.google.cl/imgres?imgurl=http://www.scielo.cl/fbpe/img/ijmorphol/v25n3/img0
2-06-09.jpg&imgrefurl=http://www.scielo.cl/scielo.php%3Fpid%3DS071795022007000300002%26script%3Dsci_arttext&usg=__NwEdY9Dj0K5t9jlGOfz9H3l_Ux8
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